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文檔簡介

交叉配血2交叉配血的定義

交叉配血試驗也稱配合性試驗,使病人,獻血者血液之間沒有可測到的不相配合的抗原、抗體成分,試驗應(yīng)在37℃下進行。在配血的任何步驟中均不產(chǎn)生溶血或凝集的獻血者的血液才能輸注給病人。3

交叉配血的目的交叉配血試驗是輸血前必要的步驟,主要是檢查受血者血清中有無能破壞供血者紅細胞的抗體。主要目的是為了防止輸血后產(chǎn)生溶血性反應(yīng)。盡可能確保任何一個病人,在輸了供血者的血之后不會引起有害反應(yīng),并且使紅細胞在輸注后能保持最長的存活時間。

交叉配血標本要求交叉配血標本一般選用EDTA抗凝血標本,也可以是血清標本,但鑒于交叉配血需要患者紅細胞,臨床多選用EDTA抗凝血標本;標本凝塊、溶血、嚴重脂血、標本被細菌污染等應(yīng)為不合格標本應(yīng)拒收。

交叉配血試驗的內(nèi)容主側(cè)配血用患者血清與供者紅細胞進行試驗次測配血

供血者血清與患者紅細胞進行試驗患者供血者主側(cè)次側(cè)56

交叉配血的“交叉”含義

交叉配血的要求主側(cè)配血要求:

不可以有凝集或溶血現(xiàn)象。次測配血要求:

供血者血清加受血者紅細胞在允許范圍內(nèi),可以有凝集現(xiàn)象,但不可以有溶血。凝集不凝集7★特殊說明:輸血不一定要主次側(cè)都相合,主側(cè)不合在有些病種、病情下也可以輸血,嚴格按照相應(yīng)的配血原則即可。8常見交叉配血試驗方法鹽水介質(zhì)配血聚凝胺配血抗人球蛋白檢測卡配血生理鹽水法生理鹽水法

鹽水介質(zhì)中紅細胞上的抗原決定簇與相應(yīng)抗體分子上的抗原結(jié)合位點結(jié)合,交叉連接形成肉眼可見的凝集塊。鹽水介質(zhì)凝集試驗用于IgM抗體的檢出。

鹽水介質(zhì)配血方法患者獻血者主側(cè)次側(cè)離心看結(jié)果陽性陰性112%-5%紅細胞懸液聚凝胺試驗13聚凝胺試驗原理凝聚胺法首先利用低離子介質(zhì)降低溶液的離子強度,減少紅細胞周圍的陽離子云,促進血清(漿)中的抗體與紅細胞相應(yīng)抗原結(jié)合。再加入帶高價陽離子多聚物-凝聚胺溶液,中和紅細胞表面的負電荷,縮短細胞間距,形成可逆的非特異性聚集,并使IgG型抗體直接凝集紅細胞。最后加入懸浮液具有中和凝聚胺陽離子的作用,使正常的紅細胞非特異性凝集散開,試驗結(jié)果為陰性;但如果紅細胞被相應(yīng)的抗體致敏,則凝集不散開,試驗結(jié)果為陽性。操作步驟

1.取試管兩支,標明主側(cè)次側(cè),主側(cè)管加受血者血清(血漿)2滴,和供血者3~5%紅細胞懸液1滴,次側(cè)管反之。2.各加低離子溶液0.65ml,混合均勻后,再各加凝聚胺溶液溶液2滴,并混合均勻。3.用離心機3400轉(zhuǎn)/min離心10秒,然后把上清液倒掉,不要瀝干,讓管底殘留約0.1ml液體。4.輕輕搖動試管,目測紅細胞有無凝集,如無凝集,則必須重做。聚凝胺試驗5.最后加入懸浮液2滴,輕輕轉(zhuǎn)搖動試管混勻并同時觀察結(jié)果。6.結(jié)果判定:如果在60秒內(nèi)凝集散開,代表是由凝聚胺引起的非特異性聚集,配血結(jié)果相合;如凝集不散開,則為紅細胞抗原抗體結(jié)合的特異性反應(yīng),配血結(jié)果不相合。如反應(yīng)可疑,可進一步倒在玻片上用顯微鏡觀察。凝聚胺配血方法患者獻血者主側(cè)次側(cè)混合均勻凝聚胺主次側(cè)均加低離子溶液混勻后再加凝聚胺混勻16凝聚胺配血方法離心凝聚胺引起紅細胞非特異性凝集陽性陰性懸浮液主次側(cè)均加懸浮液看結(jié)果17抗人球蛋白檢測卡19抗人球蛋白檢測卡(微柱凝膠法)檢驗原理

抗人球蛋白檢測卡利用微柱凝膠卡中的微管來代替?zhèn)鹘y(tǒng)意義上血型血清學(xué)試驗用的試管,采用凝膠作為微柱凝膠卡的填充物,利用凝膠間縫隙只允許游離紅細胞通過的特性,將生物化學(xué)的凝膠過濾技術(shù)、離心技術(shù)和血型血清學(xué)的抗原抗體特異性反應(yīng)結(jié)合在一起,專供血型血清學(xué)試驗使用。將紅細胞和抗血清加在凝膠上部反應(yīng),離心后觀察。凝集的紅細胞,被阻擋在凝膠的上部或中央,判斷凝集反應(yīng)陽性;游離的紅細胞,可通過凝膠間隙而沉積在凝膠的底部,判斷凝集反應(yīng)陰性。抗人球蛋白檢測卡—交叉配血操作示意圖201%受血者紅細胞稀釋10ul壓積紅細胞+1ml低離子介質(zhì)受血者全血供血者全血1%供血者紅細胞受血者全血供血者全血25ul血漿50ul25ul血漿50ul抗人球蛋白檢測卡——交叉配血操作示意圖21離心判讀孵育陽性:表示受(供)血者血漿或血清中含供(受)血者紅細胞血型抗原相應(yīng)的抗體(IgG或IgM),供受血者不相容;陰性:表示供受血者相容。孵育器離心機檢測卡凝集強度示意圖及結(jié)果判斷表224+3+2+1+±dcpPHH-

陽性4+表示RBC絕大部分凝聚于凝膠表層。3+表示RBC多數(shù)凝聚于凝膠表層,少數(shù)RBC凝集顆粒懸浮于近膠表層。2+表示部分RBC沉積于膠底,部分RBC凝集顆粒懸浮于凝膠中。1+表示RBC多數(shù)沉積于膠底,可見少數(shù)RBC凝集顆粒懸浮于凝膠中。±表示RBC絕大多數(shù)沉積于膠底,極少數(shù)RBC凝集顆粒懸浮于近膠底。dcp表示混合凝集外觀,部分紅細胞凝集顆粒集結(jié)于凝膠表層,部分紅細胞沉于膠底。PH表示部分溶血,凝膠管中液體呈清澈透明紅色,凝膠中有殘留紅細胞。H表示完全溶血,凝膠管中液體呈清澈透明紅色,凝膠中無紅細胞。陰性—表示RBC全部沉積于膠底。

結(jié)果判斷表幾種交叉配血方法的比較方法優(yōu)點缺點鹽水法操作方便,費用低廉

只能檢出不相配合完全抗體,不能檢出不相配合的不完全抗體聚凝胺法方便、應(yīng)用最廣,實用于急診

對罕見不規(guī)則抗體抗K敏感性低,且肝素對其有影響,易引起假陰性??谷饲虻鞍讬z測卡(微柱凝膠法)國際安全輸血檢查的推薦方法,靈敏度高、重復(fù)性好、特異性好、檢測結(jié)果可較長時間保存費用高24配血注意事項在抗體篩查或交叉配血試驗時出現(xiàn)弱凝集時,一定要考慮是否有臨床意義,有時一些簡單的方法可解決問題。如將試管放入37℃水浴數(shù)分鐘,凝集消散,則很可能該抗體為無臨床意義抗體;對有妊娠史(包括流產(chǎn))、輸血史或有過器官移植的病例輸用血液時,受血者血清抗體篩查、交叉配血等檢查一定要進行不完全抗體的檢測;25配血注意事項日常工作中,交叉配血,包括ABO血型正反定型、RHD血型定型、受血者血清中不規(guī)則抗體檢測最好使用兩種方法進行平行檢測,結(jié)果均符合才能發(fā)出報告;尤其,在交叉配血時,鹽水法、聚凝胺法或微柱凝膠法,一起使

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