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文檔簡介
(生物科技行業(yè))江蘇大學(xué)考研微生物資料
第六章微生物的生長及其控制1、名詞解釋:生長產(chǎn)量常數(shù)(Y),最適生長溫度,巴氏消毒法,抗生素,抗代謝藥物,選擇毒力,生長限制因子。生長產(chǎn)量常數(shù)(Y):指菌體產(chǎn)量和限制性營養(yǎng)物消耗的比例關(guān)系。最適生長溫度:某菌分裂代時最短或生長速率最高時的培養(yǎng)溫度。巴氏消毒法:用較低的溫度處理牛乳或其他液態(tài)食品,殺死其中可能存在的無芽孢病原菌而又不損害營養(yǎng)和風(fēng)味的消毒方法??股兀嚎股厥巧镌谄渖顒又挟a(chǎn)生的壹種次生代謝產(chǎn)物或其人工衍生物,能對他種生物的生命活動產(chǎn)生抑制作用或致死作用??勾x藥物:又稱代謝拮抗物、代謝類似物,是指在結(jié)構(gòu)上和生物體所必需的代謝物相似,能夠和正常代謝途徑中特定的酶發(fā)生競爭性反應(yīng),從而阻礙酶的功能、干擾代謝的正常進行的物質(zhì)。選擇毒力:抗生素對人體及動、植物組織的毒力,壹般遠小于它對致病毒的毒力,這稱為抗生素的選擇毒力。生長限制因子:凡是處于較低濃度范圍內(nèi),可影響生長速率和菌體產(chǎn)量的營養(yǎng)物,就稱生長限制因子。MIC:最小抑菌濃度,表示某藥物對某菌的最小抑菌濃度,常以μg/ml或μ/ml來表示。2、什么是典型生長曲線?它可分幾期?劃分的依據(jù)是什么?各期特點如何?典型生長曲線:將少量純種單細胞微生物接種到恒容積的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在適宜條件下,其群體就會有規(guī)律地生長,定時取樣測定細胞含量,以細胞數(shù)目的對數(shù)值作縱坐標,以培養(yǎng)時間作橫坐標,就能夠畫出壹條有規(guī)律的曲線,這就是微生物的典型生長曲線。劃分的依據(jù):單細胞微生物。特點:(1)延滯期(停滯期、調(diào)整期):a.生長速率常數(shù)為零;b.細胞形態(tài)變大或增大;c.細胞內(nèi)RNA尤其是rRNA含量增高,原生質(zhì)呈嗜堿性。d.合成代謝活躍;e.對外界不良條件的反應(yīng)敏感。(2)對數(shù)期:菌體細胞生長的速率常數(shù)R最大,分裂快,代時短,細胞進行平衡生長,菌體內(nèi)酶系活躍,代謝旺盛,菌體數(shù)目以幾何級數(shù)增加,群體的形態(tài)和生理特征最壹致,抗不良環(huán)境的能力強。⑶穩(wěn)定期:a.生長速率常數(shù)為零;b.菌體產(chǎn)量達到最高;c.活菌數(shù)相對穩(wěn)定;d.細胞開始貯存貯藏物;e.芽孢在這個時期形成;f.有些微生物在此時形成次生代謝產(chǎn)物。⑷衰亡期:a.細胞形態(tài)多樣;b.出現(xiàn)細胞自溶現(xiàn)象;c.有次生代謝產(chǎn)物的形成;d.芽孢在此時釋放。3、如何縮短延滯期?a.以對數(shù)期的菌體作種子菌;b.適當增大接種量:壹般采用3%~8%的接種量,根據(jù)生產(chǎn)上的具體情況而定,最高不超過1/10;c.培養(yǎng)基的成分:種子培養(yǎng)基盡量接近發(fā)酵培養(yǎng)基。4、處于指數(shù)期的微生物有何應(yīng)用?指數(shù)期的微生物是研究生理、代謝等的良好材料;是增殖噬菌體的最適菌齡;是發(fā)酵生產(chǎn)中用做種子的最佳種齡,通過補加營養(yǎng)物質(zhì)延長指數(shù)期。5、穩(wěn)定期為何會到來?有何特點?原因:a.營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡;b.營養(yǎng)物的比例失調(diào);c.有害代謝產(chǎn)物的積累;d.物化條件的變化。特點:a.生長速率常數(shù)為零;b.菌體產(chǎn)量達到最高;c.活菌數(shù)相對穩(wěn)定;d.細胞開始貯存貯藏物;e.芽孢在這個時期形成;f.有些微生物在此時形成次生代謝產(chǎn)物。6、什么叫連續(xù)培養(yǎng)?有何優(yōu)點?為何連續(xù)時間是有限的?連續(xù)培養(yǎng):指微生物接種到培養(yǎng)基里以后的整個生長期間,微生物能持續(xù)地以比較恒定的生長速率常數(shù)進行生長,從而導(dǎo)致微生物的生長過程能“不斷”地進行下去的壹種培養(yǎng)方法。優(yōu)點:高效、低耗、利于自控、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。原因:①菌種易于退化;②容易污染;③營養(yǎng)物的利用率低于分批培養(yǎng)。因此連續(xù)時間是有限的。7、微生物培養(yǎng)過程中pH變化的規(guī)律如何?如何調(diào)整?微生物的生命活動過程中會自動地改變外界環(huán)境的pH,其中發(fā)生pH改變有變酸和變堿倆種過程,在壹般微生物的培養(yǎng)中往往以變酸占優(yōu)勢,因此,隨著培養(yǎng)時間延長,培養(yǎng)基的pH會逐漸下降。pH的變化仍和培養(yǎng)基的組分尤其是碳氮比有很大關(guān)系,碳氮比高的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后pH會明顯下降;碳氮比低的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后pH常會明顯上升。措施:分為“治標”和“治本”倆大類,前者指根據(jù)表面現(xiàn)象而進行直接、及時、快速但不持久的表面化調(diào)節(jié),后者指根據(jù)內(nèi)在機制而采用的間接、緩效但可發(fā)揮持久作用的調(diào)節(jié)。8、比較滅菌、消毒、防腐和化療的異同,且舉例。比較項目滅菌消毒防腐化療處理因素強理化因素理化因素理化因素化學(xué)治療劑處理對象任何物體內(nèi)外酒、乳有機質(zhì)物體內(nèi)外宿主體內(nèi)微生物類型壹切微生物有關(guān)病原菌壹切微生物有關(guān)病原菌對微生物作用徹底殺滅殺死或抑制抑制或殺死抑制或殺死實例加壓蒸氣滅菌巴氏消毒法冷藏、糖漬抗生素、磺胺藥9、試述微生物生長繁殖的測定方法。壹、測生長量(壹)直接法1、測體積2、測干重(二)間接法1、比濁法2、生理指標法二、計繁殖數(shù)1、直接計數(shù)法(全數(shù))——血球計數(shù)板法2、間接計數(shù)法(活菌數(shù))——稀釋平板菌落計數(shù)法10、試述高溫滅菌的方法。1、干熱滅菌法:原理:干熱可使破壞細胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性和原生質(zhì)干燥,且可使各種細胞成分發(fā)生氧化變質(zhì)。應(yīng)用范圍:1)烘箱內(nèi)熱空氣滅菌法(150~170℃,1~2hr):金屬器械、洗凈的玻璃器皿。2)火焰灼燒法:接種環(huán)、接種針等。2、濕熱滅菌:以100℃之上的加壓蒸氣進行滅菌。(1)相同溫度及相同作用時間下,濕熱滅菌法比干熱滅菌法更有效:濕熱空氣穿透力強,能破壞維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性的氫鍵,能加速其變性。(2)種類:1)常壓法:a.巴氏消毒法:用較低的溫度處理牛乳或其他液態(tài)食品,殺死其中可能存在的無芽孢病原菌而又不損害營養(yǎng)和風(fēng)味的消毒方法。低溫維持法(LTH):要求62.8℃保持30min;高溫瞬時法(HTST):要求71.7℃維持至少15s;b.煮沸消毒法:適用范圍:壹般用于飲用水的消毒。條件:100℃下數(shù)分鐘。c.間隙滅菌法:又稱丁達爾滅菌法或分段滅菌法。適用范圍:適用于不耐熱培養(yǎng)基的滅菌。條件:80-100℃下蒸煮15-60分鐘,三天。2)加壓法:a.常規(guī)加壓法:適用范圍:適合于壹切微生物學(xué)實驗室、醫(yī)療保健機構(gòu)或發(fā)酵工廠中對培養(yǎng)基及多種器材、物料的滅菌。條件:121℃(壓力為lkg/cm2),時間維持15-20分鐘,也可采用在較低的溫度(115℃,即0.7kg/cm2下維持35分鐘的方法。b.連續(xù)加壓滅菌法:在發(fā)酵行業(yè)里也稱“連消法”。適用范圍:在大規(guī)模的發(fā)酵工廠中作。培養(yǎng)基滅菌用。主要操作是將培養(yǎng)基在發(fā)酵罐外連續(xù)不斷地進行加熱、維持和冷卻,然后才進入發(fā)酵罐。條件:在135-140℃下處理5-l5秒鐘11、請說明營養(yǎng)物質(zhì)濃度變化對微生物生長速度和最終菌體產(chǎn)量的影響。微生物生長所需要的營養(yǎng)物質(zhì),只有在濃度適當?shù)臈l件下才能表現(xiàn)出良好的作用。濃度太低,不能滿足微生物生長的需要;濃度太高反而會抑制微生物的生長,最終導(dǎo)致菌體產(chǎn)量。12、按照微生物和氧氣的關(guān)系可分為哪些類型?好氧、微好氧、耐氧型、兼性厭氧和專性厭氧五種類型13、為什么缺乏SOD的微生物只能進行專性厭氧生活?好氧生物因為有了SOD,巨毒的O2-就被歧化成毒性稍低的H2O2,在過氧化氫酶的作用下,H2O2又進壹步變成無毒的H2O。厭氧菌因不能合成SOD,所以根本無法使O2-歧化成H2O2,因此當有氧存在時,細胞內(nèi)形成的O2-。就使自身受到毒害。14、抗代謝藥物的作用:a.競爭酶的活性中心b.假冒正常代謝物c.代謝途徑終產(chǎn)物結(jié)構(gòu)類似物的反饋調(diào)節(jié)15、什么是菌種衰退?菌種衰退的原因是什么?菌種衰退:生產(chǎn)菌株生產(chǎn)性狀的劣化或遺傳研究菌株遺傳標記的丟失稱為菌種衰退。原因:1、自發(fā)突變:菌種退化的主要原因是有關(guān)基因的負突變。2、通過誘變獲得的高產(chǎn)菌株本身不純:高產(chǎn)突變只發(fā)生在壹個核上,隨著核的分離,原來未變異的低產(chǎn)性狀逐漸恢復(fù)。單核微生物由于高產(chǎn)突變只發(fā)生在壹條DNA鏈上,也往往發(fā)生分離回復(fù)的現(xiàn)象。3、培養(yǎng)、保藏條件:能夠通過對自發(fā)突變率的影響來表現(xiàn),也可在不改變基因現(xiàn)的情況下表現(xiàn)。第五章微生物的新陳代謝1、名詞解釋:新陳代謝,生物氧化,呼吸,無氧呼吸,發(fā)酵,氧化磷酸化,光合磷酸化,底物水平磷酸化,Stickland反應(yīng)。新陳代謝:發(fā)生在活細胞中的各種分解代謝和合成代謝的總和。其中,分解代謝是指復(fù)雜的有機物分子通過分解代謝酶系的催化,產(chǎn)生簡單分子、腺苷三磷酸(ATP)形式的能量或仍原力(或稱仍原當量,以[H]表示)的作用;合成代謝則和分解代謝相反,是指在合成代謝酶系的催化下,由簡單小分子、ATP形式的能量和[H]形式的仍原力壹起合成大分子的過程。生物氧化:發(fā)生在活細胞中的壹系列產(chǎn)能性氧化反應(yīng)的總稱。呼吸:底物按常規(guī)方式脫氫后,經(jīng)完整的呼吸鏈遞氫,最終由分子氧接受氫且產(chǎn)生水和釋放能量(ATP)的生物氧化方式。呼吸必須在有氧條件下進行,因此又叫有氧呼吸。無氧呼吸:又稱厭氧呼吸,是壹類呼吸鏈末端的氫受體為外源無機氧化物(少數(shù)為有機氧化物)的生物氧化。發(fā)酵:無氧條件下,底物脫氫后產(chǎn)生的仍原力不經(jīng)呼吸鏈而直接傳遞給某壹中間代謝物的低效產(chǎn)能反應(yīng)。氧化磷酸化:電子傳遞磷酸化,是指呼吸鏈的遞氫(或電子)和受氫過程和磷酸化反應(yīng)相偶聯(lián)且產(chǎn)生ATP的作用。光合磷酸化:由光照引起的電子傳遞和磷酸化作用相偶聯(lián)而生成ATP的過程成為光合磷酸化。底物水平磷酸化:是指在生物氧化過程中產(chǎn)生壹些含有高能磷酸鍵的化合物,且且這些高能磷酸化合物的高能磷酸鍵鍵能能夠直接偶聯(lián)ATP合成。Stickland反應(yīng):以壹種氨基酸作氫供體和以另壹種氨基酸作氫受體而實現(xiàn)生物氧化產(chǎn)能的獨特發(fā)酵類型。2、試述生物氧化的形式、過程、功能及類型。形式:某物質(zhì)和氧結(jié)合、脫氫或失去電子過程:壹般包括三個環(huán)節(jié):①底物脫氫(或脫電子)作用(該底物稱作電子供體或供氫體)②氫(或電子)的傳遞(需中間傳遞體,如NAD、FAD等)③最后氫受體接受氫(或電子)(最終電子受體或最終氫受體)功能:產(chǎn)能(ATP)、產(chǎn)仍原力[H]和產(chǎn)小分子中間仍原產(chǎn)物。類型:呼吸、無氧呼吸、發(fā)酵3、在化能異養(yǎng)微生物的生物氧化中,其基質(zhì)脫氫和產(chǎn)能的途徑主要有哪幾條?試比較各途徑的主要特點。脫氫和產(chǎn)能的途徑:EMP、HMP、ED、TCA特點:EMP:當葡萄糖轉(zhuǎn)化成1.6-二磷酸果糖后,在果糖二磷酸醛縮酶作用下,裂解為倆個3C化合物,再由此轉(zhuǎn)化為2分子丙酮酸。HMP:當葡萄糖經(jīng)壹次磷酸化脫氫生成6-磷酸葡萄糖酸后,在6-磷酸葡萄糖酸脫酶作用下,再次脫氫降解為1分子CO2和1分子磷酸戊糖。ED:是少數(shù)EMP途徑不完整的細菌所特有的利用葡萄糖的替代途徑。壹分子葡萄糖經(jīng)ED途徑可生成倆個丙酮酸且凈生成壹個ATP、壹個NADH+H+和壹個NADPH+H+。TCA:(1)氧雖不直接參和其中反應(yīng),但必須在有氧條件下運轉(zhuǎn);(2)丙酮酸在進入三羧酸循環(huán)之前要脫羧生成乙酰CoA,再和草酰乙酸縮合成檸檬酸再進入三羧酸循環(huán)。(3)循環(huán)的結(jié)果是乙酰CoA被徹底氧化成CO2和H2O,每氧化1分子的乙酰CoA可產(chǎn)生12分子的ATP,草酰乙酸參和反應(yīng)而本身且不消耗。(4)產(chǎn)能效率極高;(5)TCA位于壹切分解代謝和合成代謝中的樞紐地位。4、試述EMP途徑在微生物生命活動中的重要性。①供應(yīng)ATP形式的能量和NADH2形式的仍原力;②是連接其它幾個重要代謝途徑的橋梁;③為生物合成提供多種中間代謝物;④通過逆向反應(yīng)可進行多糖合成。5、試述HMP途徑在微生物生命活動中的重要性。①供應(yīng)合成原料;②產(chǎn)仍原力;③作為固定CO2的中介;④擴大碳源的利用范圍;⑤連接EMP途徑。6、試述TCA循環(huán)在微生物產(chǎn)能和發(fā)酵生產(chǎn)中的重要性。TCA位于壹切分解代謝和合成代謝中的樞紐地位,產(chǎn)能效率極高,不僅可為微生物的生物合成提供各種碳架原料,而且仍和人類的發(fā)酵生產(chǎn)緊密相關(guān)。7、在微生物能量代謝中ATP的產(chǎn)生途徑有哪幾條?EMP、HMP、ED、TCA、呼吸、無氧呼吸、發(fā)酵8、試比較呼吸、無氧呼吸、發(fā)酵的異同點。產(chǎn)能方式呼吸無氧呼吸發(fā)酵環(huán)境條件有氧無氧無氧終電子受體分子氧無機化合物代謝中間物來源環(huán)境環(huán)境胞內(nèi)性質(zhì)外源性外源性內(nèi)源性9、細菌的酒精發(fā)酵途徑如何?它和酵母菌的酒精發(fā)酵有何不同?細菌的酒精發(fā)酵有何優(yōu)缺點?酒精發(fā)酵途徑ED,酵母菌酒精發(fā)酵EMP細菌酒精發(fā)酵優(yōu)缺點:a.優(yōu)點:代謝速率高;產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率高;菌體生成少;代謝副產(chǎn)物少;發(fā)酵溫度高;不必定期供氧;細菌為原核生物,易于用基因工程改造菌種;厭氧發(fā)酵,設(shè)備簡單。b.缺點:生長pH為5,較易染菌;細菌耐乙醇力較酵母菌為低(細菌7%乙醇,酵母菌耐8-10%乙醇);底物范圍窄(葡萄糖、果糖)。11、青霉素為何只能抑制代謝旺盛的細菌?其制菌機制如何?原因:青霉素抑制肽聚糖的合成過程,形成破裂的細胞壁,代謝旺盛的細菌才存在肽聚糖的合成,因此此時有青霉素作用時細胞易死亡。作用機制:青霉素破壞肽聚糖合成過程中肽尾和肽橋間的轉(zhuǎn)肽作用。12、如何運用代謝調(diào)控理論使微生物合成比自身需求量更多的有用代謝產(chǎn)物?舉例說明。①應(yīng)用營養(yǎng)缺陷型菌株解除正常的反饋調(diào)節(jié),如賴氨酸發(fā)酵、肌苷酸的生產(chǎn);②應(yīng)用抗反饋調(diào)節(jié)的突變株解除反饋調(diào)節(jié),l0CiZ`0l/WaT如黃色短桿菌的抗α—氨基—β—羥基戊酸菌株能累積蘇氨酸;③控制細胞膜的滲透性,如在谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)中只有把生物素濃度控制在亞適量的情況下才能分泌出谷氨酸。第四章微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基1、名詞解釋:自養(yǎng)微生物,異養(yǎng)微生物,營養(yǎng),營養(yǎng)物,C/N,氨基酸自養(yǎng)型生物,氨基酸異養(yǎng)型生物,生長因子,大量元素,微量元素,培養(yǎng)基。自養(yǎng)微生物:以二氧化碳作為主要或唯壹的碳源,以無機氮化物作為氮源,通過細菌光合作用或化能合成作用獲得的能量的微生物。異養(yǎng)微生物:以有機物為碳源,光或有機物分解為能源的微生物。營養(yǎng):指生物體從外部環(huán)境攝取其生命活動所必須的能量和物質(zhì),以滿足其生長和繁殖需要的壹種生理功能。營養(yǎng)物:能為機體生命活動提供結(jié)構(gòu)物質(zhì)、能量、代謝調(diào)節(jié)物質(zhì)和良好的生理環(huán)境的物質(zhì)稱為營養(yǎng)物。C/N比:在微生物培養(yǎng)基中所含的碳源中碳原子的摩爾數(shù)和氮源中氮原子的摩爾數(shù)之比。氨基酸自養(yǎng)型生物:不需要氨基酸作為氮源的,它們能把非氨基酸類的簡單氮源自行合成所需要的壹切氨基酸。氨基酸異養(yǎng)型生物:需要從外界吸收現(xiàn)成的氨基酸作氮源。生長因子:壹類對微生物正常代謝必不可少且又不能從簡單的碳、氮源自行合成的所需極微量的有機物。大量元素:凡是生長所需濃度在10-3~10-4mol/L范圍內(nèi)的元素,可稱為大量元素,包括P、S、K、Mg、Ca、Na和Fe等。微量元素:凡是生長所需濃度在10-6~10-8mol/L范圍內(nèi)的元素,則稱為微量元素,包括Cu、Zn、Mn、Mo、和Co等。培養(yǎng)基:是壹種人工配制的適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用的混合養(yǎng)料,它具備微生物所需的六大營養(yǎng)元素,且其間比例合適。2、指出四大類微生物的最適生長pH范圍及常用的培養(yǎng)基名稱。細菌(PH7.4—7.6)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基;真菌(自然PH)馬鈴薯培養(yǎng)基;霉菌(PH7.0—7.2)察氏培養(yǎng)基;放線菌(PH7.4—7.6)高氏壹號培養(yǎng)基。3、指出微生物的六大營養(yǎng)要素。碳源、氮源、能源、生長因子、無機鹽、水4、試比較細胞膜運輸營養(yǎng)物質(zhì)的四種方式。比較項目單純擴散促進擴散主動運輸基因移位特異載體蛋白無有有無運送速度慢快快快溶質(zhì)運送方向由濃至稀由濃至稀由稀至濃由稀至濃平衡時內(nèi)外濃度內(nèi)外相等內(nèi)外相等內(nèi)部濃度高得多內(nèi)部濃度高得多運送分子無特異性特異性特異性特異性能量消耗不需要不需要需要需要運送前后溶質(zhì)分子不變不變不變改變載體飽和效應(yīng)無有有有和溶質(zhì)類似物無競爭性有競爭性有競爭性有競爭性運送抑制劑無有有有運送對象舉例:H2O、CO2、O2SO42+、PO43+、糖,氨基酸、糖類、無機離子,葡萄糖、核苷、脂肪酸5、什么是鑒別性培養(yǎng)基?試以EMB培養(yǎng)基為例,分析其鑒別作用的原理。鑒別性培養(yǎng)基:培養(yǎng)基中加入能于某壹菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑,從而用肉眼就能使該菌菌落和外形相似的它種菌落相區(qū)分的培養(yǎng)基就稱鑒別性培養(yǎng)基。EMB作用原理:%o1v3I-U5\l,Bb5其中的伊紅和美藍倆種苯胺染料可抑制革蘭氏陽性細菌和壹些難培養(yǎng)的革蘭氏陰性細菌。在低酸度時,這倆種染料結(jié)合形成沉淀,起著產(chǎn)酸指示劑的作用。因此試樣中的多種腸道細菌會在EMB培養(yǎng)基上產(chǎn)生相互易區(qū)分的特征菌落,因而易于辨認。尤其是大腸桿菌,因其強烈分解乳搪而產(chǎn)生大量的混合酸,菌體帶H+故可染上酸性染料伊紅,又因伊紅和美藍結(jié)合,所以菌落染上深紫色,從菌落表面的反射光中仍可見到綠色金屬閃光。6、什么是單功能營養(yǎng)物、雙功能營養(yǎng)物、多功能營養(yǎng)物?單功能營養(yǎng)物:壹種營養(yǎng)物有壹種營養(yǎng)要素功能,該營養(yǎng)物稱為單功能營養(yǎng)物。雙功能營養(yǎng)物:壹種營養(yǎng)物有倆種營養(yǎng)要素功能,該營養(yǎng)物稱為雙功能營養(yǎng)物。多功能營養(yǎng)物:壹種營養(yǎng)物常有倆種之上營養(yǎng)要素功能,該營養(yǎng)物稱為多功能營養(yǎng)物。7、試述培養(yǎng)基的種類。按對培養(yǎng)基成分的了解來分:天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)來分:固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、脫水培養(yǎng)基按培養(yǎng)基的功能來分:種子培養(yǎng)基、發(fā)酵培養(yǎng)基、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基第三章病毒和亞病毒1、名詞解釋:病毒,真病毒,亞病毒,噬菌斑,烈性噬菌體,溫和噬菌體,溶原菌,溶原性。病毒:是超顯微的,無細胞結(jié)構(gòu),專性活細胞內(nèi)寄生,在活細胞外具壹般化學(xué)大分子特征,壹旦進入宿主細胞又具有生命特征。真病毒:至少含有核酸和蛋白質(zhì)倆種組分的病毒。亞病毒:凡在核酸和蛋白質(zhì)倆種成分中,只含其中之壹的分子病原體稱為亞病毒。噬菌斑:當壹個噬菌體感染壹個敏感細胞后,隔不久即釋放出壹群子代噬菌體,在固體培養(yǎng)基中,它們通過瓊脂層的擴散又侵染周圍的宿主細胞,且引起它們的裂解,如此經(jīng)過多次重復(fù),就出現(xiàn)了壹個由無數(shù)噬菌體粒子構(gòu)成的群體—噬菌斑,它是透亮不長菌的小圓斑,每壹個噬菌斑是由壹個噬菌體粒子形成的。烈性噬菌體:凡在短時間內(nèi)能連續(xù)完成吸附、侵入、增殖、成熟、裂解這五個階段而實現(xiàn)其繁殖的噬菌體。溫和性噬菌體:噬菌體侵染宿主后,且不增殖,裂解,而和宿主DNA結(jié)合,隨宿主DNA復(fù)制而復(fù)制,此時細胞中找不到形態(tài)上可見的噬菌體,這種噬菌體稱為溫和性噬菌體或溶源噬菌體。溶原菌:含有溫和性噬菌體的細菌稱為溶源性細菌。溶源性:噬菌體附著或整合在宿主染色體上,壹道復(fù)制。2、病毒粒有哪幾種對稱體制?每種對稱又有幾類特殊外形?①螺旋對稱型—TMV呈直桿狀,中空②二十面體對稱—腺病毒外形呈典型的二十面體③復(fù)合對稱—T偶數(shù)噬菌體,呈蝌蚪狀3、簡述烈性噬菌體裂解性生活史。①吸附噬菌體尾絲散開,固著于特異性受點上。②侵入尾鞘收縮,尾管推出且插入到細胞壁和膜中,頭部的核酸注入到宿主細胞中,而蛋白質(zhì)衣殼留在細胞壁外。③增殖增殖過程包括核酸的復(fù)制和蛋白質(zhì)的生物合成。注入細胞的核酸操縱宿主細胞代謝機構(gòu),以寄主個體及細胞降解物和培養(yǎng)基介質(zhì)為原料,大量復(fù)制噬菌體核酸,且合成蛋白質(zhì)外殼。④成熟(裝配)寄主細胞合成噬菌體殼體(T4噬菌體包括頭部、尾部),且組裝成完整的噬菌體粒子。⑤裂解(釋放)子代噬菌體成熟后,脂肪酶和溶菌酶促進宿主細胞裂解,從而釋放出大量子代噬菌體。4、什么是壹步生長曲線?它可分幾期?各期有何特點?壹步生長曲線:定量描述烈性噬菌體增殖規(guī)律的實驗曲線稱作壹步生長曲線或壹級生長曲線。潛伏期:從噬菌體吸附細菌細胞至細菌細胞釋放出新的噬菌體的最短時間。又可分為隱晦期和胞內(nèi)累積期。裂解期:從被感染的第壹個細胞裂解至最后壹個細胞裂解完畢所經(jīng)歷的時間。平穩(wěn)期:指被感染的宿主已全部裂解,溶液中噬菌體數(shù)達到最高點后的時期。裂解量:每個被感染的細菌釋放新的噬菌體的平均數(shù)。第二章真核微生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能1、名詞解釋:真核微生物,酵母菌,生活史,霉菌,無性孢子,有性孢子,子實體,真核微生物:是指壹大類有完整細胞核、結(jié)構(gòu)精巧的染色體和多種細胞器的微生物。酵母菌:非分類名詞,壹群能發(fā)酵糖類的單細胞微生物,屬真菌類。生活史:個體經(jīng)壹系列生長、發(fā)育階段后而產(chǎn)生下壹代個體的全部過程,就稱為該生物的生活史或生命周期。霉菌:(非分類名詞)絲狀真菌統(tǒng)稱,通常指菌絲體發(fā)達而又不產(chǎn)生大型子實體的真菌。無性孢子:不經(jīng)過倆性細胞結(jié)合而直接由菌絲分化形成的繁殖性小體。有性孢子:指經(jīng)過倆性細胞結(jié)合,經(jīng)質(zhì)配、核配、減數(shù)分裂形成的繁殖小體。子實體:是由真菌的營養(yǎng)菌絲和生殖菌絲纏結(jié)而成的具有壹定形狀的產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)。2、簡述真菌的特點。①不能進行光合作用;②以產(chǎn)生大量孢子進行繁殖;③壹般具有發(fā)達的菌絲體;④細胞壁多數(shù)含幾丁質(zhì);⑤營養(yǎng)方式為異養(yǎng)吸收型;⑥陸生性較強。3、簡述酵母菌的特點。(1)生活史中,個體主要以單細胞狀態(tài)存在;(2)多數(shù)營出芽繁殖,也有的裂殖;(3)能發(fā)酵糖類產(chǎn)能;(4)細胞壁常含甘露聚糖;(5)喜在含糖量較高、酸度較大的水生環(huán)境中生長。4、指出酵母菌細胞壁的結(jié)構(gòu)特點。細胞壁的結(jié)構(gòu)特點:(1)化學(xué)組成:三明治狀的“酵母纖維素”:分三層,外層為甘露糖,內(nèi)層為葡聚糖,其間夾有壹層蛋白質(zhì)分子。芽痕周圍有少許幾丁質(zhì)。(2)原生質(zhì)體的制備:用蝸牛消化酶水解細胞壁。5、簡述酵母菌的繁殖方式,圖示釀酒酵母的生活史且說明各階段的特點。繁殖方式:⑴無性繁殖:①芽殖②裂殖③產(chǎn)生擲孢子等無性孢子;⑵有性繁殖——產(chǎn)生子囊及子囊孢子各階段的特點:子囊孢子發(fā)芽產(chǎn)生單倍體營養(yǎng)細胞;單倍體營養(yǎng)細胞出芽繁殖;異性營養(yǎng)細胞接合,質(zhì)配核配,形成二倍體細胞;二倍體營養(yǎng)細胞不進行核分裂,出芽繁殖;二倍體細胞變成子囊,減數(shù)分裂,形成4子囊孢子;子囊破壁后釋放出單倍體子囊孢子6、霉菌的有性和無性孢子主要有哪些?無性孢子有:厚垣孢子、節(jié)孢子、分生孢子、孢囊孢子、游動孢子、芽孢子、擲孢子。有性孢子有:卵孢子、接合孢子、子囊孢子、擔(dān)孢子。7、細菌、放線菌、酵母菌、霉菌四大類微生物的菌落有何不同?為什么?菌落細菌酵母菌放線菌霉菌含水形態(tài)很濕或較濕較濕干燥或較干燥干燥外觀形態(tài)小而突起或大而平坦大而突起小而緊密大而疏松或大而致密菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌落和培養(yǎng)基結(jié)合程度不結(jié)合不結(jié)合牢固結(jié)合較牢固結(jié)合菌落顏色多樣單調(diào)十分多樣十分多樣菌落正反面顏色的差別相同相同壹般不同壹般不同菌落邊緣壹般見不到細胞球狀卵圓狀假絲狀細絲狀粗絲狀氣味壹般有臭味多帶酒香味帶有泥腥味往往有霉味原因:細菌、放線菌、酵母菌和霉菌的形態(tài)和生理類型不盡相同,在其菌落形態(tài),構(gòu)造等特征上也有各自的特點。8、試比較細菌、放線菌、酵母菌和霉菌細胞壁成分的異同。細菌分為G+和G-,G+肽聚糖含量高,G-含量低;G+磷壁酸含量較高,而G-不含磷壁酸;G+類脂質(zhì)壹般無,而G-含量較高;G+不含蛋白質(zhì),G-含量較高。放線菌為G-,其細胞壁具有G-所具有的特點。酵母菌和霉菌為真菌,酵母菌的細胞壁外層為甘露聚糖,內(nèi)層為葡聚糖;而霉菌的細胞壁成分為幾丁質(zhì)、蛋白質(zhì)、葡聚糖。9、什么叫鎖狀聯(lián)合?其生理意義如何?鎖狀聯(lián)合:擔(dān)子菌亞門中多數(shù)擔(dān)子菌的雙核菌絲,在進行細胞分裂時,于菌絲的分隔處形成的壹個側(cè)生的喙狀結(jié)構(gòu)稱鎖狀聯(lián)合。生理意義:保證了雙核菌絲在進行細胞分裂時,每節(jié)(每個細胞)都能含有倆個異質(zhì)(遺傳型不同)的核,為進行有性生殖,通過核配形成擔(dān)子打下基礎(chǔ)。鎖狀聯(lián)合是雙核菌絲的鑒定標準,凡是產(chǎn)生鎖狀聯(lián)合的菌絲均可斷定為雙核。鎖狀聯(lián)合也是擔(dān)子菌亞門的明顯特征之壹。10、霉菌的營養(yǎng)菌絲和氣生菌絲各有何特點?它們分別可分化出哪些特化結(jié)構(gòu)?營養(yǎng)菌絲體:伸入培養(yǎng)基吸收營養(yǎng);氣生菌絲體:向空中生成,形成繁殖器官。營養(yǎng)菌絲的特化結(jié)構(gòu):1假根2吸器3附著枝4附著胞5菌核6菌索7匍匐菌絲8菌環(huán)和菌網(wǎng)氣生菌絲的特化結(jié)構(gòu):子實體第壹章原核微生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能1、名詞解釋:原核生物,細菌,缼壁細菌,原生質(zhì)體,芽孢,伴孢晶體,放線菌.原核生物:即廣義的細菌,指壹大類細胞核無核膜包裹,只存在稱作核區(qū)的裸露DNA的原始單細胞生物,包括真細菌和古生菌倆大類群。細菌:是壹類細胞細短、結(jié)構(gòu)簡單、胞壁堅韌、多以二分裂方式繁殖和水生性較強的原核生物。缼壁細菌:指細胞壁缺乏或缺損的細菌。包括原生質(zhì)體、球狀體、L型細菌和支原體。原生質(zhì)體:人工條件下用溶菌酶除去細胞壁或用青霉素抑制細胞壁合成后,所留下的僅由壹層細胞膜包裹的圓球狀細胞。壹般由G+形成。芽孢:某些細菌在生長發(fā)育后期,可在細胞內(nèi)形成壹個圓形或橢圓形的抗逆性休眠體,稱為芽孢(又稱內(nèi)生孢子)。伴孢晶體:少數(shù)芽孢桿菌在形成芽孢的同時,會在芽孢旁形成壹顆菱形、方形或不規(guī)則形的堿溶性蛋白質(zhì)晶體,稱為伴孢晶體(即ð內(nèi)毒素)。放線菌:是壹類呈絲狀生長、菌落呈放射狀、以孢子繁殖的陸生性較強的革蘭氏陽性菌。2、細菌的基本有哪些?細胞壁,細胞膜,間體,核區(qū),核糖體,細胞質(zhì)及其內(nèi)含物3、試比較G+和G-細菌細胞壁的異同。成分革蘭氏陽性細菌革蘭氏陰性細菌肽聚糖高低磷壁酸高無類脂質(zhì)壹般無高蛋白質(zhì)壹般無高4、簡述革蘭氏染色法的機制且說明此法的重要性。革蘭氏染色機制:結(jié)晶紫液初染和碘液媒染:在細菌的細胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫和碘的復(fù)合物。乙醇脫色:G+細胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密且不含類脂,把結(jié)晶紫和碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其保持紫色;G-細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄和文聯(lián)度差,結(jié)晶紫和碘復(fù)合物的溶出,細胞退成無色。復(fù)染:G-細菌呈現(xiàn)紅色,而G+細菌則仍保留最初的紫色。重要性:革蘭氏染色有著十分重要的理論和實踐意義。通過這壹染色,幾乎可把所有的細菌分成革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌倆個大類,因此它是分類鑒定菌種時的重要指標。又由于這倆大類細菌在細胞結(jié)構(gòu)、成分、形態(tài)、生理、生化、遺傳、免疫、生態(tài)和藥物敏感性等方面都呈現(xiàn)出明顯的差異,因此任何細菌只要通過簡單的革蘭氏染色,就可提供不少其他重要的生物學(xué)特性方面的信息。5、滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說是如何解釋芽孢的耐熱機制的?芽孢的耐熱在于芽孢衣對多價陽離子和水分的滲透很差以及皮層的離子強度很高,這就使皮層產(chǎn)生了極高的滲透壓去奪取芽孢核欣中的水分,其結(jié)果造成皮層的充分膨脹和核心的高度失水,正是這種失水的核心才賦予了芽孢極強的耐熱性。6、簡述鏈霉菌形態(tài)構(gòu)造特點。1、基內(nèi)菌絲:又稱營養(yǎng)菌絲,是緊貼固體培養(yǎng)基表面且向培養(yǎng)基里面生長的菌絲。色淺、較細,其主要功能是吸收營養(yǎng)物和排泄代謝產(chǎn)物,壹般沒有隔膜。有的產(chǎn)生色素。2、氣生菌絲:營養(yǎng)菌絲發(fā)育到壹定階段,伸向空間形成氣生菌絲,色較深、直徑較粗,直形或彎曲狀而分枝,有的產(chǎn)生色素。緒論1、名詞解釋:微生物,微生物學(xué),種,菌株、品系、克隆,菌落,菌苔。微生物:微生物是形體微小、單細胞或個體結(jié)構(gòu)簡單的多細胞、甚或無細胞結(jié)構(gòu),用肉眼見不見或見不清的低等生物的總稱。微生物學(xué):微生物學(xué)是壹門在細胞、分子或群體水平上研究微生物的形態(tài)構(gòu)造、生理代謝、遺傳變異、生態(tài)分布和分類進化等生命活動基本規(guī)律,且將其應(yīng)用于工業(yè)發(fā)酵、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物工程和環(huán)境保護等實踐領(lǐng)域的科學(xué),其根本任務(wù)是發(fā)掘、利用、改善和保護有益微生物,控制、消滅或改造有害微生物,為人類社會的進步服務(wù)。種:種是最基本的分類單位,它是壹大群表型特征高度相似,親緣關(guān)系極其相近,和同屬內(nèi)其它種有著明顯差異的菌株的總稱。菌株(品系):表示任何由壹個獨立分離的單細胞繁殖而成的純種群體極其壹切后代;實際上是壹個微生物達到遺傳性純的標志??寺。喝艟涫怯梢紓€單細胞發(fā)展而來的,則它就是壹個純種細胞群或克隆。菌落:在適宜的培養(yǎng)條件下,微生物在固體培養(yǎng)基表面(有時為內(nèi)部)生長繁殖,形成以母細胞為中心的壹堆肉眼可見的、有壹定形態(tài)構(gòu)造的子細胞集團,這就是菌落。菌苔:如果將某壹純種的大量細胞密集地接種到固體培養(yǎng)基表面,結(jié)果長成的各“菌落”互相連成壹片,這就是菌苔。2、簡述微生物學(xué)發(fā)展史上5個時期的特點和代表人物。①史前期——朦朧階段(約8000年前-1676)特點:人們雖然沒有見到微生物,但已經(jīng)不自覺的利用有益微生物、防止有害微生物。代表人物——中國古代。②初創(chuàng)期——形態(tài)學(xué)時期(1676-1861)特點:這壹時期微生物學(xué)的研究工作主要是對壹些微生物進行形態(tài)描述。代表人物——列文虎克:微生物學(xué)的先驅(qū)者③奠基期——生理學(xué)時期(1861-1897)特點:這壹時期的主要工作是查找各種病原微生物,把微生物學(xué)的研究從形態(tài)描述推進到生理學(xué)研究的新水平,建立了系列微生物學(xué)的分支學(xué)科。代表人物:巴斯德和科赫。④發(fā)展期——生化水平研究階段特點:微生物學(xué)的研究進入分子水平,微生物學(xué)家的研究工作從上壹時期的查找病原微生物轉(zhuǎn)移到尋找各種有益微生物的代謝產(chǎn)物。代表人物——E.Büchner生物化學(xué)奠基人⑤成熟期——分子生物學(xué)水平研究階段特點:微生物學(xué)從壹門應(yīng)用學(xué)科發(fā)展為前沿基礎(chǔ)學(xué)科,其研究工作進入分子水平,而微生物因其不同于高等動植物的生物學(xué)特性而成為分子生物學(xué)研究的主要對象。在應(yīng)用研究方面,向著更自覺、更有效和可認為控制的方向發(fā)展,和遺傳工程、細胞工程和酶工程緊密結(jié)合,成為新興生物工程的主角。代表人物——J.Watson和F.Crick:分子生物學(xué)奠基人3、微生物共有哪五大共性?其中最基本的是哪壹個?為什么?五大共性:①體積小,面積大;②吸收多,轉(zhuǎn)化快;③生長旺,繁殖快;④適應(yīng)強,易變異;⑤分布廣,種類多。其中最基本的是體積小,面積大;原因:由于微生物是壹個如此突出的小體積大面積系統(tǒng),從而賦予它們具有不同于壹切大生物的五大共性,因為壹個小體積大面積系統(tǒng),必然有壹個巨大的營養(yǎng)物質(zhì)吸收面、代謝廢物的排泄面和環(huán)境信息的交換面,且由此而產(chǎn)生其余4個共性。4、微生物分類學(xué)有哪3項具體任務(wù)?試加以簡述。3項具體任務(wù):分類、鑒定和命名分類的任務(wù)是解決從個別到壹般或從具體到抽象的問題,亦即通過收集大量描述有關(guān)個體的文獻資料,經(jīng)過科學(xué)的歸納和理性的思考
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