耳聾基因檢測

遺傳性耳聾基因檢測耳聾概況1目錄常見的致聾基因及位點

2耳聾基因診斷的方法

4耳聾篩查的意義32780萬80萬3.5萬6%根據(jù)第二次全國殘疾人抽樣調(diào)查報告，我國聽力語言殘疾者多達(dá)2780萬，居各類殘疾之首。我國每年新增3.5萬先天性聾兒，其中90%的聾兒出生于聽力正常、沒有耳聾家族史的家庭。在聽力語言殘疾人群中，0～6歲聽力障礙兒童有80萬，每年新增遲發(fā)性、藥物性耳聾患兒3~5萬。我國正常人群中耳聾基因的攜帶率高達(dá)6%，大部分非綜合癥性耳聾由GJB2、GJB3、SLC26A4、12SrRNA等基因的突變引起。耳聾概況14耳聾非綜合征型耳聾（70%）遺傳因素(約60%)常染色體隱性（80%）環(huán)境因素（約40%）綜合征型耳聾（30%）Alport綜合征Pendred綜合征Waardenburg綜合征BOR綜合征Usher綜合征細(xì)菌感染病毒感染耳毒性藥物聲損傷……常染色體顯性（15%）X連鎖遺傳（1%~3%）線粒體遺傳（＜1%）耳聾致病因素耳聾概況12003年起，首次全國性大規(guī)模聾病分子流行病學(xué)調(diào)查研究國內(nèi)現(xiàn)狀按統(tǒng)一的調(diào)查方式收集了10880例耳聾患者DNA樣本，覆蓋了28個省市地區(qū)20余個民族，對其進(jìn)行常見耳聾遺傳病因的流行病學(xué)調(diào)查。全國性聾病分子流行病調(diào)查結(jié)果GJB2、SLC26A4和mtDNA12SrRNA突變是導(dǎo)致中國大部分非綜合征性遺傳性耳聾的三個最常見的致病基因；GJB2、SLC26A4和mtDNA12SrRNA突變在非綜合征耳聾人群中所占比例分別約為21%、14.5%和4.4%；GJB2與SLC26A4相關(guān)耳聾主要表現(xiàn)為常染色體隱性遺傳非綜合征性耳聾，mtDNA12SrRNA突變攜帶者表現(xiàn)為對氨基糖甙類藥物敏感，遵循母系遺傳方式。耳聾概況1常見的致聾基因及位點

2GJB212rRNAGJB3常見致聾基因SLC26A4遺傳性耳聾特點遺傳性耳聾突變位點具有明顯的種族差異中國人群大部分遺傳性耳聾由4個基因的突變所引起：

GJB2基因：先天性非綜合性耳聾；GJB3基因：后天高頻感音神經(jīng)性耳聾；SLC26A4基因：先天或遲發(fā)性耳聾，大前庭水管綜合征；12SrRNA基因：氨基糖苷類藥物性耳聾。常見的致聾基因及位點

2GJB2基因特點第一個發(fā)現(xiàn)的非綜合征性耳聾基因遵循常染色體隱性遺傳模式在不同人群均具有顯著的高發(fā)病率臨床表現(xiàn)：絕大多數(shù)為先天性重度、極重度耳聾常染色體隱性遺傳GJB2基因編碼縫隙連接蛋白Cx-26，負(fù)責(zé)細(xì)胞間信號介導(dǎo)和離子傳遞，突變的GJB2基因可能導(dǎo)致連接蛋白異常，進(jìn)而影響細(xì)胞間隙的連接功能，引起內(nèi)耳鉀離子回收障礙而致耳聾，Cx-26對維護(hù)耳蝸的正常功能非常重要。常見的致聾基因及位點

2常染色體顯性遺傳GJB3基因特點

GJB3基因是我國本土克隆的第一個遺傳疾病基因臨床癥狀主要與GJB3突變基因的外顯度有關(guān)，表現(xiàn)為正常聽力、輕度耳聾、中度耳聾、重度耳聾及極重度耳聾等遵循常染色體顯性遺傳模式

后天高頻耳聾的常見突變基因

缺乏系統(tǒng)的流行病學(xué)統(tǒng)計數(shù)據(jù)常見的致聾基因及位點

2SLC26A4基因特點常染色體隱性遺傳SLC26A4基因又稱PDS基因，編碼的Pendrin蛋白主要由疏水性氨基酸組成，參與碘/氯離子的轉(zhuǎn)運。Pendrin蛋白發(fā)生異常即可影響細(xì)胞內(nèi)外陰離子的轉(zhuǎn)運，從而影響聲音傳遞而導(dǎo)致聽力損失。遵循常染色體隱性遺傳模式，多表現(xiàn)為散發(fā)SLC26A4基因突變與大前庭水管綜合征和Pendred綜合征有密切關(guān)系臨床表現(xiàn)：多在學(xué)齡前發(fā)病，呈進(jìn)行性或波動性聽力下降，多為重度以上感音神經(jīng)性聾常見的致聾基因及位點

212SrRNA基因特點線粒體母系遺傳線粒體突變遵循母系遺傳模式臨床表現(xiàn)為藥物性耳聾對正常聽力攜帶者進(jìn)行正確用藥指導(dǎo)可以預(yù)防耳聾

12SrRNA突變位點位于高度保守的小核糖體亞基氨?！猼RNA結(jié)合區(qū)域，是氨基糖苷類抗生素重要的識別區(qū)域。氨基糖苷類抗生素攻擊12SrRNA突變攜帶者的耳蝸細(xì)胞中的線粒體，從而對這些細(xì)胞形成組織特異性的損傷，最終導(dǎo)致耳聾的發(fā)生。常見的致聾基因及位點

2GJB3臨床表現(xiàn)與GJB3突變基因的外顯度有關(guān)，為正常聽力到極重度耳聾等不同癥狀后天需佩戴高頻助聽器進(jìn)行聽力補(bǔ)償GJB2純合突變或復(fù)合雜合突變表現(xiàn)為先天性重度或極重度雙側(cè)對稱性感音神經(jīng)性聾預(yù)示良好的人工耳蝸植入的治療效果12SrRNA

氨基糖苷類藥物引起的感音神經(jīng)性耳聾避免使用耳毒性藥物，并對其母系成員具有預(yù)防作用SLC26A4先天或后天中度以上感音神經(jīng)性耳聾，臨床主要表現(xiàn)為大前庭水管綜合征指導(dǎo)并明確患兒的日常行為及注意事項遺傳性耳聾的防治耳聾篩查的意義3家庭耳聾篩查社會醫(yī)院節(jié)省財政開支提高出生缺陷防治水平推進(jìn)計生、衛(wèi)生服務(wù)水平開展耳聾基因的流行病學(xué)調(diào)查提高遲發(fā)性和藥物性耳聾個體的診斷效率，減少醫(yī)院漏檢率婚育指導(dǎo)，實現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早干預(yù)，避免“因聾致啞”耳聾基因檢測的意義耳聾篩查的意義3孕前篩查產(chǎn)前篩查新生兒篩查聽障診治耳聾基因檢測的應(yīng)用耳聾篩查的意義3衛(wèi)生部2009年2月發(fā)布《新生兒疾病篩查管理辦法》（衛(wèi)生部令第64號），明確新生兒聽力篩查為全國新生兒三大疾病篩查之一。隨著新生兒聽力篩查工作的廣泛開展和臨床經(jīng)驗的積累，逐漸發(fā)現(xiàn)在新生兒聽力篩查中存在局限或缺陷，使得在普遍的新生兒聽力篩查中聯(lián)合耳聾基因篩查成為可能。衛(wèi)生部2010年12月頒布《新生兒聽力篩查技術(shù)規(guī)范（2010版）》修訂版，旨在全國范圍內(nèi)全面系統(tǒng)的開展新生兒聽力篩查。新生兒聽力篩查政策耳聾篩查的意義3新生兒篩查方案耳聾篩查的意義3物理聽力篩查耳聾基因篩查

通過未通過通過52834例(90.47%)3056例(5.24%)未通過2248例(3.85%)259例(0.44%)天津新生兒聯(lián)合篩查數(shù)據(jù)結(jié)論：天津58397例新生兒篩查的結(jié)果表明，僅通過新生兒物理聽力篩查，新生兒遲發(fā)性耳聾的漏檢率高達(dá)5.24%。數(shù)據(jù)來源：韓冰,中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院,2013耳聾篩查的意義3天津新生兒耳聾基因篩查未通過數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)來源：韓冰,中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院,2013（例數(shù)）（基因）8.89%91.11%4.02%95.98%6.59%93.41%5.50%94.50%結(jié)論：天津58397例新生兒篩查的結(jié)果表明，僅通過物理聽力篩查，不同基因型的漏檢率均超過90%以上。耳聾篩查的意義3北京耳聾出生缺陷防控效果3000例孕婦基因篩查（耳聾基因突變攜帶者160例，5.3%）夫婦同為GJB2攜帶者3對夫婦同為SLC26A4攜帶者3對后代耳聾風(fēng)險25%86例孕婦配偶進(jìn)行耳聾基因檢測MtDNA12SrRNA攜帶者6例（0.2%）GJB2攜帶者105例（3.5%）SLC26A4攜帶者49例（1.6%）4對夫婦進(jìn)行產(chǎn)前診斷1例胎兒確診為遺傳性耳聾，家庭選擇引產(chǎn)包括胎兒在內(nèi)的所有母系成員均為攜帶者，須終生絕對禁止使用氨基糖苷類抗生素，可有效避免耳聾的發(fā)生12個家庭具有生育遺傳性耳聾后代的風(fēng)險數(shù)據(jù)來源：韓明昱等,中華耳科學(xué)雜志,2011耳聾篩查的意義3耳聾基因篩查是降低耳聾出生缺陷的最有效的手段

新生兒篩查耳聾基因，耳聾早發(fā)現(xiàn)早診斷早干預(yù)

產(chǎn)前篩查耳聾基因，有效評估生育聾兒風(fēng)險

高危人群篩查耳聾基因，顯著降低后代耳聾風(fēng)險耳聾篩查的意義3耳聾基因診斷的方法

4芯片法熒光探針法ARMS-PCR法測序法飛行時間質(zhì)譜法熔解曲線法耳聾基因檢測常用方法比較方法主要設(shè)備檢測時間所需步驟特點DNA測序法PCR儀，測序儀＞10H核酸提取、PCR，電泳、純化、測序金標(biāo)準(zhǔn)，操作繁瑣，需要專門培訓(xùn)，結(jié)果判讀復(fù)雜限制性內(nèi)切酶法PCR儀，電泳儀約4H核酸提取、PCR、酶切、電泳檢出率低，特異性差，操作復(fù)雜，需要跑電泳，易污染ARMS-PCR法基因芯片法PCR儀，雜交儀，掃描儀約5H核酸提取、PCR，雜交、洗滌、掃描通量高，較復(fù)雜，熔解曲線法熒光PCR儀約4H核酸提取、PCR根據(jù)峰圖判斷結(jié)果，非特異性擴(kuò)增易產(chǎn)生假陽性飛行時間質(zhì)譜法PCR儀，質(zhì)譜儀＞10H核酸提取、PCR、純化、打質(zhì)譜操作復(fù)雜繁瑣，對使用者要求較高熒光PCR法熒光PCR儀約3H核酸提取、PCR操作簡單，實時監(jiān)控，據(jù)擴(kuò)增曲線判讀，通量低測序技術(shù)金標(biāo)準(zhǔn)！耳聾基因診斷的方法

4PCR-RFLP分型技術(shù)

耳聾基因診斷的方法

4TaqMan探針分型技術(shù)

耳聾基因診斷的方法

4

MultiplexSNaPshot分型技術(shù)

耳聾基因診斷的方法

4電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOFMS）分型技術(shù)

耳聾基因診斷的方法

4HRM技術(shù)耳聾基因診斷的方法

4等位基因特異PCR技術(shù)耳聾基因診斷的方法

4公司產(chǎn)品名稱檢測位點檢測方法優(yōu)缺點博奧九項遺傳性耳聾相關(guān)基因檢測試劑盒GJB2:35delG、176-191del16、235delC、299-300delAT；GJB3：538C>T；

SLC26A4：IVS7-2A>G、2168A>G；

12SrRNA：1494C>T、1555A>G；微陣列芯片法檢測位點少（9個）專用儀器價格高耗時長十五項遺傳性耳聾相關(guān)基因檢測試劑盒GJB2:35delG、176-191del16、235delC、299-300delAT；GJB3：538C>T；

SLC26A4：IVS7-2A>G、1174A>T、1226G>A、1229C>T、1975G>C、2027T>A、2168A>G、IVS15+5G>A；

12SrRNA：1494C>T、1555A>G；微陣列芯片法檢測位點（15個）專用儀器價格高耗時長凱普耳聾易感基因檢測試劑盒GJB2:35delG、176-191del16、235delC、299-300delAT；GJB3：538C>T；

SLC26A4：IVS7-2A>G、2168A>G；

12SrRNA：1494C>T、1555A>G；PCR-導(dǎo)流雜交法檢測位點少（9個）市場上的耳聾產(chǎn)品耳聾基因診斷的方法

4公司產(chǎn)品名稱檢測位點檢測方法優(yōu)缺點中生北控四項耳聾基因檢測試劑盒GJB2:235delC；

SLC26A4：IVS7-2A>G；

12SrRNA：1494C>T、1555A>G；ARMS-PCR法檢測位點少（4個）濟(jì)南英盛先天性耳聾基因檢測試劑盒GJB2:512insAACG、176-191del16bp、235delC、299-300delAT；熒光PCR法檢測位點（10個）通量低藥物性耳聾基因檢測試劑盒12SrRNA：1494C>T、1555A>G；耳聾基因GJB2235delC檢測試劑盒GJB2:235delC；PDS基因突變檢測試劑盒SLC26A4：IVS7-2A>G、1174A>T、、1229C>T、2168A>G；廈門致善遺傳性耳聾基因檢測試劑盒GJB2:35delG、167delT、176-191del16、235delC、299-300delAT；GJB3：538C>T、547G>A；

SLC26A4：IVS7-2A>G、1174A>T、1226G>A、1229C>T、1975G>C、2027T>A、2168A>G、IVS15+5G>A、2162C>T、749T>C、754T>C；

12SrRNA：1494C>T、1555A>G；

熒光PCR熔解曲線法檢測位點多（20個）儀器要求較高市場上的耳聾產(chǎn)品耳聾基因診斷的方法

4公司產(chǎn)品名稱檢測位點檢測方法優(yōu)缺點華大醫(yī)學(xué)耳聾基因檢測GJB2:35delG、167delT、176-191del1