實驗一生化實驗基本操作(移液管、離心機(jī)-分光光度計的使用)

實驗一生化實驗基本操作移液管、離心機(jī)，分光光度計的使用實驗室規(guī)則

穿實驗服儀器使用的安全實驗室衛(wèi)生自己的實驗器材的保管與賠償實驗要求認(rèn)真做實驗認(rèn)真寫實驗報告實驗與考試目的熟悉并掌握移液管、離心機(jī)、比色儀的使用一、吸量管的使用選用原則：應(yīng)選用取液量最接近的刻度吸管使用：中指和拇指拿住吸管上端，食指置吸管上端旁；用橡皮球吸液體至刻度上，眼睛看著液面上升；吸完后用食指頂住吸管頂端；吸管保持垂直，尖端與試劑瓶接觸，用食指控制液體下降至所需體積的刻度處，液體凹面、刻度和視線應(yīng)在同一水平面上；吸管移入準(zhǔn)備接受溶液的盛器中，放開食指，使液體自動流出二、離心機(jī)的使用裝液將待離心的液體置于玻璃離心管（刻度離心管）或短試管中。平衡兩只裝有待離心液體的離心管分別放入兩個完整的并且配備了橡皮軟墊的離心套管之中，置天平兩側(cè)配平，用滴管在較輕一側(cè)離心管和套管之間加水，直到平衡。放置檢查離心機(jī)，機(jī)內(nèi)應(yīng)無異物和無用的套管，并且運轉(zhuǎn)平穩(wěn)。將已配平的兩管對稱地放入離心機(jī)的離心孔內(nèi)，做好標(biāo)記，蓋好上蓋，開啟電源。離心順時針慢慢旋動轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)鈕，增加離心機(jī)轉(zhuǎn)速。當(dāng)離心機(jī)轉(zhuǎn)速達(dá)到要求時，記錄離心時間。停止到達(dá)離心時間后，逐漸減速并切斷電源。當(dāng)離心機(jī)停止轉(zhuǎn)動后，取出離心管和離心套管，倒去離心套管內(nèi)的平衡用水，倒置于干燥處晾干。操作練習(xí)

取1滴血漿放入小試管

，加入10滴10%三氯醋酸。觀察現(xiàn)象。離心3000r/min5minutes。

觀察離心后的現(xiàn)象。三、分光光度法一切物質(zhì)都會對某些波長的光進(jìn)行選擇性的吸收，有色溶液之所以呈現(xiàn)不同顏色，就是由于這種對光的選擇性吸收所致。物質(zhì)的吸收光譜與它們本身的分子結(jié)構(gòu)有關(guān)，不同物質(zhì)由于其分子結(jié)構(gòu)不同，對不同波長光線的吸收能力也不同。每種物質(zhì)都具有特異的吸收光譜，在一定條件下，其吸收程度與該物質(zhì)濃度成正比，因此可以利用各種物質(zhì)不同的吸收光譜及其強(qiáng)度，對不同物質(zhì)進(jìn)行定性和定量的分析。Lambert定律lgI0/I=K1LBeer定律lgI0/I=K2CLambert-Beer定律lgI0/I=KCL令A(yù)=lgI0/I則A=-lgT=KCLT為透光度；A為吸光度；K為消光系數(shù)Fingure1.Themainelementsofspectrometer分光光度計的使用開機(jī)，預(yù)熱20分鐘。調(diào)波長。調(diào)零：T=0，T=100，A=0。測A。1.721型分光光度計2.722spectrometer(digitalspectrometer)練習(xí)操作

根據(jù)4個標(biāo)準(zhǔn)濃度的硫酸鈷溶液，使用分光光度計（波長500nm）獲得未知濃度硫酸鈷溶液的濃度。0.5%、1.0%、1.5%、2.0%

直接計算法：

C樣=A樣/A標(biāo)*C標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法：濃度為X軸，吸光度為Y軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上獲得未知濃度CoSO4的濃度。結(jié)果管號空白管1234未知Abs

00722型分光光度計

λ=500nm制作人：日期：CoSO4(%)ACoSO4溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線？結(jié)果計算法結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)曲線法結(jié)果判斷題1.離心不用平衡，感覺差不多就行了（×）2.用分光光度計測量時吸收值越大，該物質(zhì)濃度越?。ā粒?.離心時速度為0時即可打開蓋子（×）單選題1.每種物質(zhì)都具有特異的吸收光譜，在一定條件下，其吸收程度與該物質(zhì)濃度成A比A.正B.反C.沒關(guān)系2.吸量管選用原則B：A.選用最大刻度的吸管B.應(yīng)選用取液量最接近的