實(shí)驗(yàn)一生化實(shí)驗(yàn)基本操作(移液管、離心機(jī)-分光光度計(jì)的使用)

實(shí)驗(yàn)一生化實(shí)驗(yàn)基本操作移液管、離心機(jī)，分光光度計(jì)的使用實(shí)驗(yàn)室規(guī)則

穿實(shí)驗(yàn)服儀器使用的安全實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生自己的實(shí)驗(yàn)器材的保管與賠償實(shí)驗(yàn)要求認(rèn)真做實(shí)驗(yàn)認(rèn)真寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)與考試目的熟悉并掌握移液管、離心機(jī)、比色儀的使用一、吸量管的使用選用原則：應(yīng)選用取液量最接近的刻度吸管使用：中指和拇指拿住吸管上端，食指置吸管上端旁；用橡皮球吸液體至刻度上，眼睛看著液面上升；吸完后用食指頂住吸管頂端；吸管保持垂直，尖端與試劑瓶接觸，用食指控制液體下降至所需體積的刻度處，液體凹面、刻度和視線應(yīng)在同一水平面上；吸管移入準(zhǔn)備接受溶液的盛器中，放開食指，使液體自動(dòng)流出二、離心機(jī)的使用裝液將待離心的液體置于玻璃離心管（刻度離心管）或短試管中。平衡兩只裝有待離心液體的離心管分別放入兩個(gè)完整的并且配備了橡皮軟墊的離心套管之中，置天平兩側(cè)配平，用滴管在較輕一側(cè)離心管和套管之間加水，直到平衡。放置檢查離心機(jī)，機(jī)內(nèi)應(yīng)無異物和無用的套管，并且運(yùn)轉(zhuǎn)平穩(wěn)。將已配平的兩管對(duì)稱地放入離心機(jī)的離心孔內(nèi)，做好標(biāo)記，蓋好上蓋，開啟電源。離心順時(shí)針慢慢旋動(dòng)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)鈕，增加離心機(jī)轉(zhuǎn)速。當(dāng)離心機(jī)轉(zhuǎn)速達(dá)到要求時(shí)，記錄離心時(shí)間。停止到達(dá)離心時(shí)間后，逐漸減速并切斷電源。當(dāng)離心機(jī)停止轉(zhuǎn)動(dòng)后，取出離心管和離心套管，倒去離心套管內(nèi)的平衡用水，倒置于干燥處晾干。操作練習(xí)

取1滴血漿放入小試管

，加入10滴10%三氯醋酸。觀察現(xiàn)象。離心3000r/min5minutes。

觀察離心后的現(xiàn)象。三、分光光度法一切物質(zhì)都會(huì)對(duì)某些波長(zhǎng)的光進(jìn)行選擇性的吸收，有色溶液之所以呈現(xiàn)不同顏色，就是由于這種對(duì)光的選擇性吸收所致。物質(zhì)的吸收光譜與它們本身的分子結(jié)構(gòu)有關(guān)，不同物質(zhì)由于其分子結(jié)構(gòu)不同，對(duì)不同波長(zhǎng)光線的吸收能力也不同。每種物質(zhì)都具有特異的吸收光譜，在一定條件下，其吸收程度與該物質(zhì)濃度成正比，因此可以利用各種物質(zhì)不同的吸收光譜及其強(qiáng)度，對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性和定量的分析。Lambert定律lgI0/I=K1LBeer定律lgI0/I=K2CLambert-Beer定律lgI0/I=KCL令A(yù)=lgI0/I則A=-lgT=KCLT為透光度；A為吸光度；K為消光系數(shù)Fingure1.Themainelementsofspectrometer分光光度計(jì)的使用開機(jī)，預(yù)熱20分鐘。調(diào)波長(zhǎng)。調(diào)零：T=0，T=100，A=0。測(cè)A。1.721型分光光度計(jì)2.722spectrometer(digitalspectrometer)練習(xí)操作

根據(jù)4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)濃度的硫酸鈷溶液，使用分光光度計(jì)（波長(zhǎng)500nm）獲得未知濃度硫酸鈷溶液的濃度。0.5%、1.0%、1.5%、2.0%

直接計(jì)算法：

C樣=A樣/A標(biāo)*C標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法：濃度為X軸，吸光度為Y軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上獲得未知濃度CoSO4的濃度。結(jié)果管號(hào)空白管1234未知Abs

00722型分光光度計(jì)

λ=500nm制作人：日期：CoSO4(%)ACoSO4溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線？結(jié)果計(jì)算法結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)曲線法結(jié)果判斷題1.離心不用平衡，感覺差不多就行了（×）2.用分光光度計(jì)測(cè)量時(shí)吸收值越大，該物質(zhì)濃度越?。ā粒?.離心時(shí)速度為0時(shí)即可打開蓋子（×）單選題1.每種物質(zhì)都具有特異的吸收光譜，在一定條件下，其吸收程度與該物質(zhì)濃度成A比A.正B.反C.沒關(guān)系2.吸量管選用原則B：A.選用最大刻度的吸管B.應(yīng)選用取液量最接近的