2025年人教版高考生物一輪復習講義：微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用（含答案及解析）

第十單元課時練57微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用

一、選擇題

1.（2024?重慶高三聯(lián)考）熔噴布的主要成分是聚丙烯，會對環(huán)境造成污染。某科研小組從土壤

中分離到一種能分解聚丙烯的細菌。下列說法正確的是（）

A.配制固體培養(yǎng)基時，需要在無菌的環(huán)境中進行

B.制備培養(yǎng)基時需要先將培養(yǎng)基的pH調(diào)節(jié)至中性或弱堿性

C.從土壤中分離能分解聚丙烯的細菌，可采用平板劃線法進行分離與計數(shù)

D.純化培養(yǎng)時，在培養(yǎng)皿皿蓋做標記后倒置在恒溫培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)

2.（2023?淮安高三模擬）如圖為實驗室中酵母菌純培養(yǎng)過程的部分操作步驟，下列說法正確的

是（）

A.微生物的純培養(yǎng)物就是指不含代謝廢物的微生物培養(yǎng)物

B.步驟①中，用手觸摸估計培養(yǎng)基冷卻至室溫后開始倒平板

C.步驟①使用的培養(yǎng)基制備過程是先調(diào)pH再滅菌

D.③到④過程中，每次劃線后都需要灼燒接種環(huán)并蘸取菌液

3.（2021?山東，14）解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪

酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{色。將不能直接吸收脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇

溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍色，乙菌菌落周圍不變色，下列說法錯誤的是

（）

A.甲菌屬于解脂菌

B.實驗中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源

C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進行對比

D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力

4.（2023?山東，15）平板接種常用在微生物培養(yǎng)中。下列說法正確的是（）

A.不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)

B.平板涂布時涂布器使用前必須進行消毒

C.接種后未長出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄

D.利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成版酶的微生物

5.（2024?咸陽高三調(diào)研）為加速我國北方冬春季秸稈原位還田的腐化過程，研究人員以凍牛糞

為材料篩選出耐低溫（10℃）的纖維素降解菌。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.選用凍牛糞為材料與其富含纖維素及含耐低溫微生物有關(guān)

B.初篩菌種前，要利用固體培養(yǎng)基在37℃條件下擴大培養(yǎng)目標菌種

C.用于篩選的培養(yǎng)基是加入剛果紅染料的牛肉膏蛋白膝培養(yǎng)基

D.應(yīng)選擇菌落直徑與周圍透明圈直徑比值大的菌落進行純化

6.（2024?湖北宜荊荊恩四市高三聯(lián)考）營養(yǎng)缺陷型菌株是突變后某些酶被破壞，導致代謝過程

中某些合成反應(yīng)不能進行的菌株。如圖是科研人員利用影印法（用無菌絨布輕蓋在已長好菌落

的原培養(yǎng)基上，然后不轉(zhuǎn)動任何角度，“復印”至新的培養(yǎng)基上）初檢某種氨基酸缺陷型菌株

的過程。下列相關(guān)說法錯誤的是（）

滅菌的絲絨布

揭起絲絨布

A.①過程接種方法為稀釋涂布平板法，接種后的培養(yǎng)皿不能立即進行倒置培養(yǎng)

B.進行②過程的順序是先將絲絨布“復印”至完全培養(yǎng)基上，再“復印”至基本培養(yǎng)基上

C.氨基酸缺陷型菌株應(yīng)從基本培養(yǎng)基上沒有、完全培養(yǎng)基上對應(yīng)位置有的菌落中挑選

D.統(tǒng)計菌落種類和數(shù)量時要每隔一定時間觀察統(tǒng)計一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定為止

7.（2024?長春高三調(diào)研）研究人員擬從土壤樣品中分離出高效降解甲醇的酵母菌并進行大量培

養(yǎng)，操作流程如下。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

①稱量土樣②梯度稀釋

③平板澆注分離④劃線純化⑤擴大培養(yǎng)

A.為保證無菌操作，接種環(huán)使用前必須灼燒滅菌

B.平板澆注分離法適宜于厭氧型或兼性厭氧型的微生物的分離和計數(shù)

C.挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落，分別測定酵母菌細胞中甲醇的含量

D.為了獲得甲醇耐受酵母菌，可通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度來實現(xiàn)

8.（2024?武漢高三檢測）空氣細菌總數(shù)測定主要有自然沉降法和撞擊法。自然沉降法是讓空氣

中的細菌自然降至瓊脂平板表面，撞擊法是將一定量空氣以較高的流速噴射撞擊到瓊脂平板

上，空氣中的細菌即留滯在瓊脂表面。關(guān)于自然沉降法和撞擊法，下列分析錯誤的是（）

A.用于檢測空氣中細菌總數(shù)時都需對不同方位和高度的空氣進行采樣

B.撞擊法對潔凈空氣中細菌總數(shù)的測定比自然沉降法更準確

C.兩種方法均可使用無選擇性的牛肉膏蛋白腺培養(yǎng)基

D.用兩種方法取樣后在瓊脂平板上形成的菌落均為單菌落

9.為篩選出可高效抑制番茄枯萎病菌（一類真菌）的土壤芽抱桿菌菌株，科研人員從土壤中采

集、分離、篩選芽抱桿菌菌株作為待測菌株，并采用平板對峙培養(yǎng)法觀察各待測菌株的抑菌

能力。如圖為研究過程示意圖，下列敘述錯誤的是（）

1mL1mL1mL1mL1mL

的②待測芽

運絲狗桿菌］

就挑選菌株

跡無嬴無嬴牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基

菌落邊緣挑取.移至空白牛肉膏

蛋白豚培養(yǎng)基平」

直徑6mm的菌塊

番茄枯萎病菌板中央培養(yǎng)

在距培養(yǎng)皿中心2cm處劃線接種待

測菌株，28tt黑暗培養(yǎng)、觀察是否《對峙

出現(xiàn)抑菌帶

A.過程①常利用移液器取0.1mL菌液涂布平板

B.過程②可根據(jù)芽泡桿菌菌落的形態(tài)、顏色進行挑選

C.若甲、乙、丙三個平板的平均菌落數(shù)為12個，則10g土樣中芽抱桿菌約有1.2X109個

D.實驗篩選出的菌株仍需進行大田種植試驗以檢測防治效果

二、非選擇題

10.大熊貓是我國特有的珍稀野生動物，每只成年大熊貓每日進食竹子量可達12?38kg。大

熊貓可利用竹子中8%的纖維素和27%的半纖維素。研究人員從大熊貓糞便和土壤中篩選纖

維素分解菌。請回答下列問題：

（1）纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分，即Ci酶、Cx酶和葡萄糖甘酶。

為篩選纖維素分解菌，將大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液接種至以為唯一碳源的固體

培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，該培養(yǎng)基從功能上分類屬于培養(yǎng)基。

（2）配制的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理，目的是

檢測固體培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是

(3)為高效降解農(nóng)業(yè)秸稈廢棄物，研究人員利用從土壤中篩選獲得的3株纖維素分解菌，在

37℃條件下進行玉米秸稈降解實驗，結(jié)果如表所示。在該條件下纖維素酶活力最高的是菌株

,理由是

菌株秸稈總重(g)秸稈殘重(g)秸稈失重(％)纖維素降解率(％)

A2.001.5124.5016.14

B2.001.5323.5014.92

C2.001.4229.0023.32

11.(2024?南京鬲三調(diào)研)生物興趣小組試圖探究牛和山羊的瘤胃中的微生物對尿素是否有分

解作用，設(shè)計了以下實驗，并成功篩選到能降解尿素的細菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如表所示,

實驗步驟如圖所示。請分析回答問題:

瘤胃中液體

(一

i

粵Q

S

三Z

E

三m

l

妥

倍數(shù)

為

稀釋

.、

一］每個培余基均

|取0」mL涂布

、含尿素面養(yǎng)基

KH2P。41.4g

Na2HPO42.lg

MgSO4-7H2O0.2g

葡萄糖10g

尿素1g

瓊脂15g

溶解后蒸儲水定容到1000mL

(1)本實驗所使用的培養(yǎng)基按功能來分應(yīng)為培養(yǎng)基，原理是

(2)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2P04和Na2HPO4,其作用有

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

(3)實驗是否需要振蕩培養(yǎng)來提高溶氧量：(填“是”或“否”)，原因是

轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，常采用法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。

(4)若在稀釋倍數(shù)為105的三個培養(yǎng)基中，菌落數(shù)分別是156、174、183,則每克內(nèi)容物中尿

素分解菌的數(shù)目為個。

(5)為證明分離得到的細菌是否可以分解尿素，可在培養(yǎng)基中加入指示劑，看指示劑

是否O

(6)為進一步確定取自瘤胃中液體的適當稀釋倍數(shù)，將接種的培養(yǎng)皿放置在37。。恒溫培養(yǎng)箱

中培養(yǎng)24?48h,觀察并統(tǒng)計具有紅色環(huán)帶的菌落數(shù)，結(jié)果見表，其中合理的稀釋倍數(shù)為

稀釋倍數(shù)103104105106107

菌落數(shù)>5003672483618

12.菌落總數(shù)可作為判定食品被污染程度的標志，也可以用于觀察細菌在食品中繁殖的動態(tài)，

以便對送檢樣品進行衛(wèi)生學評估提供證據(jù)。下圖是某樣品培養(yǎng)簡化流程圖，請分析回答下列

問題：

(1)該營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配制過程中，其基本步驟包括按照培養(yǎng)基配方準確計算、稱量、溶化、

調(diào)節(jié)pH、法滅菌等。然后將培養(yǎng)基放入47℃水浴鍋保溫，選擇此溫

度的理由是.

⑵實驗過程中須將樣品剪碎并使用均質(zhì)器10000rmirTi處理1min,其目的是

0從水浴鍋取出營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基倒平板適量，稍冷卻

后移液0.2mL樣品于培養(yǎng)皿進行涂布，涂布時可,使涂布更均勻。

(3)本實驗用菌落計數(shù)的原理是基于,運用這種方法統(tǒng)

計的結(jié)果往往較實際值偏。具體培養(yǎng)結(jié)果如下表。選取菌落數(shù)30?300的培養(yǎng)皿作

為菌落總數(shù)的測定標準。當只有一個稀釋濃度的平均菌落數(shù)符合此范圍，以該培養(yǎng)皿菌落數(shù)

義稀釋倍數(shù)報告。當有兩個濃度菌落值在30?300之間，報告結(jié)果由二者菌落數(shù)比值決定，

若比值不大于2,則取平均數(shù)，且菌落數(shù)大于100取兩位有效數(shù)字，兩位之后的數(shù)值四舍五

入；若比值大于2,則報告稀釋度較低(稀釋次數(shù)越多，稀釋度越高)的培養(yǎng)皿菌落數(shù)。請?zhí)顚?/p>

例次3中“？”處的菌落總數(shù)為。

不同稀釋度平均菌落數(shù)兩稀釋度菌菌落總數(shù)

例次

10-110-210—3落數(shù)之比/[CFU/mL(g)]

1136516420一16400

22760295461.638000

32890271602.2?

(4)利用鮮奶進行工業(yè)生產(chǎn)酸奶時，不能使用污染的鮮奶為原料，否則會使乳酸菌生長

受到限制；利用法可以除去鮮奶中的白細胞、雜菌和其他肉眼可見的異物，取其上

清液用于發(fā)酵制酸奶。

(5)密封良好的泡菜壇內(nèi)有時會長一層白膜，這些白膜是(填“乳酸菌”或“酵母

菌”)繁殖產(chǎn)生的。在泡菜腌制過程中壇、蔬菜等均未進行嚴格滅菌，而在發(fā)酵過程中一般不

會出現(xiàn)其他雜菌大量繁殖，其原因是(填序號)。

①發(fā)酵的原料中缺乏雜菌生長需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)

②發(fā)酵過程的溫度不適合雜菌的生長

③乳酸菌產(chǎn)生較多乳酸，許多好氧菌被殺死

④在自然界中乳酸菌占優(yōu)勢

課時練57微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用

1.B

2.C［由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物，A錯誤；步驟①中，用手觸摸估

計培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，開始倒平板，B錯誤；③到④過程中，每次劃線后對接種環(huán)進

行灼燒處理，是為了殺死接種環(huán)上殘留的菌種，使劃線時接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃

線的末端，不需要重新蘸取菌液，D錯誤。］

3.B［乙菌菌落周圍沒有出現(xiàn)深藍色，說明乙菌不能產(chǎn)生脂肪酶，不能利用脂肪為其供能，

但乙菌可以在培養(yǎng)基上生存，說明該培養(yǎng)基不是以脂肪為唯一碳源，B錯誤。］

4.D［不含氮源的平板可用于固氮菌的培養(yǎng)，A錯誤；平板涂布時涂布器使用前必須先浸

在酒精中，然后在火焰上灼燒滅菌，這種操作屬于滅菌，B錯誤；使用后的培養(yǎng)基即使未長

出菌落也要在丟棄前進行滅菌處理，不能直接丟棄，以免污染環(huán)境，C錯誤；麻酶可以催化

尿素分解，在以尿素為唯一氮源的平板上，能合成瞬酶的微生物可以分解尿素進行生長繁殖，

D正確。］

5.A

6.B［進行②過程培養(yǎng)時，為了防止將完全培養(yǎng)基中特定營養(yǎng)成分帶入基本培養(yǎng)基，應(yīng)先將

絲絨布“復印”至基本培養(yǎng)基上，再“復印”至完全培養(yǎng)基上，B錯誤。］

7.C［挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落，分別測定培養(yǎng)液中甲醇的含量，C錯誤。］

8.D［由于上述兩種方法都是對空氣中細菌總數(shù)進行測定，在瓊脂平板上形成的菌落有多

種，不一定都是單菌落，D錯誤。］

9.C［若甲、乙、丙三個平板的平均菌落數(shù)為12個，平均菌落數(shù)是12個不符合30?300

的菌落計數(shù)要求，C錯誤。］

10.（1）纖維素選擇（2）殺死培養(yǎng)基中的所有微生物（微生物和芽抱、抱子）不接種培養(yǎng)（或

空白培養(yǎng)）（3）C接種C菌株后秸稈失重最多，纖維素降解率最大

解析（1）在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物

則不能生長。為篩選纖維素分解菌，將大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液接種至以纖維素為唯一碳

源的固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)；培養(yǎng)基從功能上分類可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，故該培

養(yǎng)基從功能上分類屬于選擇培養(yǎng)基。（2）為檢測滅菌效果可對培養(yǎng)基進行空白培養(yǎng)，即將未接

種的培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一段時間，若在適宜條件下培養(yǎng)基中無菌落出現(xiàn)，說明培養(yǎng)基

滅菌徹底，否則說明培養(yǎng)基滅菌不徹底。（3）測定酶活力時可以用單位時間內(nèi)、單位體積中反

應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的生成量來表示。由表格可知，在適宜的條件下，C菌株在相同的溫度