2025年人教版高考生物一輪復(fù)習(xí)講義：微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用（含答案及解析）

第十單元課時(shí)練57微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用

一、選擇題

1.（2024?重慶高三聯(lián)考）熔噴布的主要成分是聚丙烯，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。某科研小組從土壤

中分離到一種能分解聚丙烯的細(xì)菌。下列說法正確的是（）

A.配制固體培養(yǎng)基時(shí)，需要在無菌的環(huán)境中進(jìn)行

B.制備培養(yǎng)基時(shí)需要先將培養(yǎng)基的pH調(diào)節(jié)至中性或弱堿性

C.從土壤中分離能分解聚丙烯的細(xì)菌，可采用平板劃線法進(jìn)行分離與計(jì)數(shù)

D.純化培養(yǎng)時(shí)，在培養(yǎng)皿皿蓋做標(biāo)記后倒置在恒溫培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)

2.（2023?淮安高三模擬）如圖為實(shí)驗(yàn)室中酵母菌純培養(yǎng)過程的部分操作步驟，下列說法正確的

是（）

A.微生物的純培養(yǎng)物就是指不含代謝廢物的微生物培養(yǎng)物

B.步驟①中，用手觸摸估計(jì)培養(yǎng)基冷卻至室溫后開始倒平板

C.步驟①使用的培養(yǎng)基制備過程是先調(diào)pH再滅菌

D.③到④過程中，每次劃線后都需要灼燒接種環(huán)并蘸取菌液

3.（2021?山東，14）解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪

酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇

溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色，乙菌菌落周圍不變色，下列說法錯(cuò)誤的是

（）

A.甲菌屬于解脂菌

B.實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源

C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比

D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力

4.（2023?山東，15）平板接種常用在微生物培養(yǎng)中。下列說法正確的是（）

A.不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)

B.平板涂布時(shí)涂布器使用前必須進(jìn)行消毒

C.接種后未長(zhǎng)出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄

D.利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成版酶的微生物

5.（2024?咸陽高三調(diào)研）為加速我國(guó)北方冬春季秸稈原位還田的腐化過程，研究人員以凍牛糞

為材料篩選出耐低溫（10℃）的纖維素降解菌。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.選用凍牛糞為材料與其富含纖維素及含耐低溫微生物有關(guān)

B.初篩菌種前，要利用固體培養(yǎng)基在37℃條件下擴(kuò)大培養(yǎng)目標(biāo)菌種

C.用于篩選的培養(yǎng)基是加入剛果紅染料的牛肉膏蛋白膝培養(yǎng)基

D.應(yīng)選擇菌落直徑與周圍透明圈直徑比值大的菌落進(jìn)行純化

6.（2024?湖北宜荊荊恩四市高三聯(lián)考）營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株是突變后某些酶被破壞，導(dǎo)致代謝過程

中某些合成反應(yīng)不能進(jìn)行的菌株。如圖是科研人員利用影印法（用無菌絨布輕蓋在已長(zhǎng)好菌落

的原培養(yǎng)基上，然后不轉(zhuǎn)動(dòng)任何角度，“復(fù)印”至新的培養(yǎng)基上）初檢某種氨基酸缺陷型菌株

的過程。下列相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）

滅菌的絲絨布

揭起絲絨布

A.①過程接種方法為稀釋涂布平板法，接種后的培養(yǎng)皿不能立即進(jìn)行倒置培養(yǎng)

B.進(jìn)行②過程的順序是先將絲絨布“復(fù)印”至完全培養(yǎng)基上，再“復(fù)印”至基本培養(yǎng)基上

C.氨基酸缺陷型菌株應(yīng)從基本培養(yǎng)基上沒有、完全培養(yǎng)基上對(duì)應(yīng)位置有的菌落中挑選

D.統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量時(shí)要每隔一定時(shí)間觀察統(tǒng)計(jì)一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定為止

7.（2024?長(zhǎng)春高三調(diào)研）研究人員擬從土壤樣品中分離出高效降解甲醇的酵母菌并進(jìn)行大量培

養(yǎng)，操作流程如下。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

①稱量土樣②梯度稀釋

③平板澆注分離④劃線純化⑤擴(kuò)大培養(yǎng)

A.為保證無菌操作，接種環(huán)使用前必須灼燒滅菌

B.平板澆注分離法適宜于厭氧型或兼性厭氧型的微生物的分離和計(jì)數(shù)

C.挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落，分別測(cè)定酵母菌細(xì)胞中甲醇的含量

D.為了獲得甲醇耐受酵母菌，可通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度來實(shí)現(xiàn)

8.（2024?武漢高三檢測(cè)）空氣細(xì)菌總數(shù)測(cè)定主要有自然沉降法和撞擊法。自然沉降法是讓空氣

中的細(xì)菌自然降至瓊脂平板表面，撞擊法是將一定量空氣以較高的流速噴射撞擊到瓊脂平板

上，空氣中的細(xì)菌即留滯在瓊脂表面。關(guān)于自然沉降法和撞擊法，下列分析錯(cuò)誤的是（）

A.用于檢測(cè)空氣中細(xì)菌總數(shù)時(shí)都需對(duì)不同方位和高度的空氣進(jìn)行采樣

B.撞擊法對(duì)潔凈空氣中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定比自然沉降法更準(zhǔn)確

C.兩種方法均可使用無選擇性的牛肉膏蛋白腺培養(yǎng)基

D.用兩種方法取樣后在瓊脂平板上形成的菌落均為單菌落

9.為篩選出可高效抑制番茄枯萎病菌（一類真菌）的土壤芽抱桿菌菌株，科研人員從土壤中采

集、分離、篩選芽抱桿菌菌株作為待測(cè)菌株，并采用平板對(duì)峙培養(yǎng)法觀察各待測(cè)菌株的抑菌

能力。如圖為研究過程示意圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（）

1mL1mL1mL1mL1mL

的②待測(cè)芽

運(yùn)絲狗桿菌］

就挑選菌株

跡無嬴無嬴牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基

菌落邊緣挑取.移至空白牛肉膏

蛋白豚培養(yǎng)基平」

直徑6mm的菌塊

番茄枯萎病菌板中央培養(yǎng)

在距培養(yǎng)皿中心2cm處劃線接種待

測(cè)菌株，28tt黑暗培養(yǎng)、觀察是否《對(duì)峙

出現(xiàn)抑菌帶

A.過程①常利用移液器取0.1mL菌液涂布平板

B.過程②可根據(jù)芽泡桿菌菌落的形態(tài)、顏色進(jìn)行挑選

C.若甲、乙、丙三個(gè)平板的平均菌落數(shù)為12個(gè)，則10g土樣中芽抱桿菌約有1.2X109個(gè)

D.實(shí)驗(yàn)篩選出的菌株仍需進(jìn)行大田種植試驗(yàn)以檢測(cè)防治效果

二、非選擇題

10.大熊貓是我國(guó)特有的珍稀野生動(dòng)物，每只成年大熊貓每日進(jìn)食竹子量可達(dá)12?38kg。大

熊貓可利用竹子中8%的纖維素和27%的半纖維素。研究人員從大熊貓糞便和土壤中篩選纖

維素分解菌。請(qǐng)回答下列問題：

（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即Ci酶、Cx酶和葡萄糖甘酶。

為篩選纖維素分解菌，將大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液接種至以為唯一碳源的固體

培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，該培養(yǎng)基從功能上分類屬于培養(yǎng)基。

（2）配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理，目的是

檢測(cè)固體培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是

(3)為高效降解農(nóng)業(yè)秸稈廢棄物，研究人員利用從土壤中篩選獲得的3株纖維素分解菌，在

37℃條件下進(jìn)行玉米秸稈降解實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如表所示。在該條件下纖維素酶活力最高的是菌株

,理由是

菌株秸稈總重(g)秸稈殘重(g)秸稈失重(％)纖維素降解率(％)

A2.001.5124.5016.14

B2.001.5323.5014.92

C2.001.4229.0023.32

11.(2024?南京鬲三調(diào)研)生物興趣小組試圖探究牛和山羊的瘤胃中的微生物對(duì)尿素是否有分

解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如表所示,

實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示。請(qǐng)分析回答問題:

瘤胃中液體

(一

i

粵Q

S

三Z

E

三m

l

妥

倍數(shù)

為

稀釋

.、

一］每個(gè)培余基均

|取0」mL涂布

、含尿素面養(yǎng)基

KH2P。41.4g

Na2HPO42.lg

MgSO4-7H2O0.2g

葡萄糖10g

尿素1g

瓊脂15g

溶解后蒸儲(chǔ)水定容到1000mL

(1)本實(shí)驗(yàn)所使用的培養(yǎng)基按功能來分應(yīng)為培養(yǎng)基，原理是

(2)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2P04和Na2HPO4,其作用有

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

(3)實(shí)驗(yàn)是否需要振蕩培養(yǎng)來提高溶氧量：(填“是”或“否”)，原因是

轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。

(4)若在稀釋倍數(shù)為105的三個(gè)培養(yǎng)基中，菌落數(shù)分別是156、174、183,則每克內(nèi)容物中尿

素分解菌的數(shù)目為個(gè)。

(5)為證明分離得到的細(xì)菌是否可以分解尿素，可在培養(yǎng)基中加入指示劑，看指示劑

是否O

(6)為進(jìn)一步確定取自瘤胃中液體的適當(dāng)稀釋倍數(shù)，將接種的培養(yǎng)皿放置在37。。恒溫培養(yǎng)箱

中培養(yǎng)24?48h,觀察并統(tǒng)計(jì)具有紅色環(huán)帶的菌落數(shù)，結(jié)果見表，其中合理的稀釋倍數(shù)為

稀釋倍數(shù)103104105106107

菌落數(shù)>5003672483618

12.菌落總數(shù)可作為判定食品被污染程度的標(biāo)志，也可以用于觀察細(xì)菌在食品中繁殖的動(dòng)態(tài)，

以便對(duì)送檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)估提供證據(jù)。下圖是某樣品培養(yǎng)簡(jiǎn)化流程圖，請(qǐng)分析回答下列

問題：

(1)該營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配制過程中，其基本步驟包括按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確計(jì)算、稱量、溶化、

調(diào)節(jié)pH、法滅菌等。然后將培養(yǎng)基放入47℃水浴鍋保溫，選擇此溫

度的理由是.

⑵實(shí)驗(yàn)過程中須將樣品剪碎并使用均質(zhì)器10000rmirTi處理1min,其目的是

0從水浴鍋取出營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基倒平板適量，稍冷卻

后移液0.2mL樣品于培養(yǎng)皿進(jìn)行涂布，涂布時(shí)可,使涂布更均勻。

(3)本實(shí)驗(yàn)用菌落計(jì)數(shù)的原理是基于,運(yùn)用這種方法統(tǒng)

計(jì)的結(jié)果往往較實(shí)際值偏。具體培養(yǎng)結(jié)果如下表。選取菌落數(shù)30?300的培養(yǎng)皿作

為菌落總數(shù)的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)只有一個(gè)稀釋濃度的平均菌落數(shù)符合此范圍，以該培養(yǎng)皿菌落數(shù)

義稀釋倍數(shù)報(bào)告。當(dāng)有兩個(gè)濃度菌落值在30?300之間，報(bào)告結(jié)果由二者菌落數(shù)比值決定，

若比值不大于2,則取平均數(shù)，且菌落數(shù)大于100取兩位有效數(shù)字，兩位之后的數(shù)值四舍五

入；若比值大于2,則報(bào)告稀釋度較低(稀釋次數(shù)越多，稀釋度越高)的培養(yǎng)皿菌落數(shù)。請(qǐng)?zhí)顚?/p>

例次3中“？”處的菌落總數(shù)為。

不同稀釋度平均菌落數(shù)兩稀釋度菌菌落總數(shù)

例次

10-110-210—3落數(shù)之比/[CFU/mL(g)]

1136516420一16400

22760295461.638000

32890271602.2?

(4)利用鮮奶進(jìn)行工業(yè)生產(chǎn)酸奶時(shí)，不能使用污染的鮮奶為原料，否則會(huì)使乳酸菌生長(zhǎng)

受到限制；利用法可以除去鮮奶中的白細(xì)胞、雜菌和其他肉眼可見的異物，取其上

清液用于發(fā)酵制酸奶。

(5)密封良好的泡菜壇內(nèi)有時(shí)會(huì)長(zhǎng)一層白膜，這些白膜是(填“乳酸菌”或“酵母

菌”)繁殖產(chǎn)生的。在泡菜腌制過程中壇、蔬菜等均未進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，而在發(fā)酵過程中一般不

會(huì)出現(xiàn)其他雜菌大量繁殖，其原因是(填序號(hào))。

①發(fā)酵的原料中缺乏雜菌生長(zhǎng)需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

②發(fā)酵過程的溫度不適合雜菌的生長(zhǎng)

③乳酸菌產(chǎn)生較多乳酸，許多好氧菌被殺死

④在自然界中乳酸菌占優(yōu)勢(shì)

課時(shí)練57微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用

1.B

2.C［由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物，A錯(cuò)誤；步驟①中，用手觸摸估

計(jì)培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，開始倒平板，B錯(cuò)誤；③到④過程中，每次劃線后對(duì)接種環(huán)進(jìn)

行灼燒處理，是為了殺死接種環(huán)上殘留的菌種，使劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃

線的末端，不需要重新蘸取菌液，D錯(cuò)誤。］

3.B［乙菌菌落周圍沒有出現(xiàn)深藍(lán)色，說明乙菌不能產(chǎn)生脂肪酶，不能利用脂肪為其供能，

但乙菌可以在培養(yǎng)基上生存，說明該培養(yǎng)基不是以脂肪為唯一碳源，B錯(cuò)誤。］

4.D［不含氮源的平板可用于固氮菌的培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；平板涂布時(shí)涂布器使用前必須先浸

在酒精中，然后在火焰上灼燒滅菌，這種操作屬于滅菌，B錯(cuò)誤；使用后的培養(yǎng)基即使未長(zhǎng)

出菌落也要在丟棄前進(jìn)行滅菌處理，不能直接丟棄，以免污染環(huán)境，C錯(cuò)誤；麻酶可以催化

尿素分解，在以尿素為唯一氮源的平板上，能合成瞬酶的微生物可以分解尿素進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖，

D正確。］

5.A

6.B［進(jìn)行②過程培養(yǎng)時(shí)，為了防止將完全培養(yǎng)基中特定營(yíng)養(yǎng)成分帶入基本培養(yǎng)基，應(yīng)先將

絲絨布“復(fù)印”至基本培養(yǎng)基上，再“復(fù)印”至完全培養(yǎng)基上，B錯(cuò)誤。］

7.C［挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落，分別測(cè)定培養(yǎng)液中甲醇的含量，C錯(cuò)誤。］

8.D［由于上述兩種方法都是對(duì)空氣中細(xì)菌總數(shù)進(jìn)行測(cè)定，在瓊脂平板上形成的菌落有多

種，不一定都是單菌落，D錯(cuò)誤。］

9.C［若甲、乙、丙三個(gè)平板的平均菌落數(shù)為12個(gè)，平均菌落數(shù)是12個(gè)不符合30?300

的菌落計(jì)數(shù)要求，C錯(cuò)誤。］

10.（1）纖維素選擇（2）殺死培養(yǎng)基中的所有微生物（微生物和芽抱、抱子）不接種培養(yǎng)（或

空白培養(yǎng)）（3）C接種C菌株后秸稈失重最多，纖維素降解率最大

解析（1）在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物

則不能生長(zhǎng)。為篩選纖維素分解菌，將大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液接種至以纖維素為唯一碳

源的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；培養(yǎng)基從功能上分類可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，故該培

養(yǎng)基從功能上分類屬于選擇培養(yǎng)基。（2）為檢測(cè)滅菌效果可對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行空白培養(yǎng)，即將未接

種的培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，若在適宜條件下培養(yǎng)基中無菌落出現(xiàn)，說明培養(yǎng)基

滅菌徹底，否則說明培養(yǎng)基滅菌不徹底。（3）測(cè)定酶活力時(shí)可以用單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中反

應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的生成量來表示。由表格可知，在適宜的條件下，C菌株在相同的溫度