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DB41DB41/T1615—2018白酶活力檢測技術(shù)規(guī)程2018-06-19發(fā)布2018-09-19實施河南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1GB/T6682—2008分析實驗室GB/T9721—2006化學(xué)試劑分子吸收分光光度法GBT23874—2009飼料添加劑GB/T28715—2012飼料添加劑酸性、中性蛋白酶活NY/T912—2004飼料添加劑纖維在37℃,pH值為5.5,每分鐘從濃度為0.8%的羧甲基纖維素鈉溶液中水解產(chǎn)生1mmol葡萄糖所在40℃,相應(yīng)pH值(中性蛋白酶pH值=7.5,酸性蛋白酶pH值=3,堿性蛋白酶pH值=13)1min在室溫(25℃~30℃),pH值為5(0.08mol/L醋酸鈉緩沖液)條件下,每秒鐘氧化1mmol的2磁力攪拌器:溫度范圍5℃~200℃;冰箱:0℃~20℃.5.2羧甲基纖維素酶(CMC)測定試5.4.1碳酸鈉溶液(Na2CO3)05.4.2三氯乙酸(CCI3·COOH)5.4.6乳酸緩沖液3稱取無水乙酸鈉8.2g,加入冰乙酸0.85mL,加水溶解,定容至1000mL。用乙酸溶液或乙酸鈉溶4000119228337446555按照表2配制不同濃度的ABTS標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,以空白標(biāo)準(zhǔn)樣為對照調(diào)零,于波長420nm處測定001234565光光度計波長275nm處,分別測定樣品空白管和樣品管中酶液的12√√3√√45√√6√√78√√9√√√√U=(A-A0)×K×4/10×N×T……………(1)U——蛋白酶活力,酶活單位(U/g)或(U/mLA——為吸光度值;K——為吸光常數(shù),當(dāng)吸光度值為1時的酪氨酸的量=103.8;4——反應(yīng)體積,單位mL;N——稀釋倍數(shù);10——反應(yīng)時間,單位mimT——換算系數(shù),中性、堿性蛋白酶與福林法的轉(zhuǎn)換系數(shù)0.5,酸性蛋白酶系數(shù)0.77。6待測培養(yǎng)液用緩沖液稀釋10~50倍,測定光光度計波長420nm處,分別測定樣品空白管和樣品管中酶液的12345U=(A-A0)/MT×1000×D×60…………(2)U——漆酶活力單位,酶活單位(U/g)或(U/mLA——粗酶液的吸光度值;1000——mmol與umol的換算系數(shù),1mmol=1000umol;D——
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