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文檔簡介
凱氏定氮法的測定原理食品中蛋白質的測定第一法凱氏定氮法（包括自動凱氏定氮儀法）第二法分光光度法第三法燃燒法第一法凱氏定氮法一、實驗原理
樣品與濃硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質分解，樣品中的有機氮轉化為氨與硫酸結合成硫酸銨。
用H3BO3吸收后，再以標準HCl溶液滴定。根據標準酸消耗量可計算出蛋白質的含量。消化蒸餾吸收滴定然后加堿蒸餾，使氨蒸出。二、實驗步驟1、消化
2NH2（CH2）2COOH+13H2SO4（NH4）2SO4+6CO2+12SO2+16H2O
要用濃硫酸（98%）（脫水性、氧化性）（1）總反應式：（2）消化分解條件a加硫酸鉀作為增溫劑，純硫酸沸點340℃可以提高至400℃以上。也可加入硫酸鈉，氯化鉀等提高沸點，但效果不如硫酸鉀。b加硫酸銅作為催化劑。還可以作消化終點指示劑、做蒸餾時堿性指示劑。c加氧化劑如雙氧水、次氯酸鉀等加速有機物氧化速度。2、蒸餾與吸收
2NaOH＋(NH4)2SO4＝2NH3↑
＋Na2SO4
＋2H2O（觀察：若所加堿量不足，分解液呈藍色不生成氫氧化銅沉淀，需再增加氫氧化鈉用量）2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O吸收蒸餾綠色紫紅色3、滴定(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3
綠色終點pH為5（紫灰）4、說明消化時不要用強火，應保持和緩沸騰，以免粘貼在凱氏瓶內壁上消化不完全。樣品中若含脂肪較多時，消化過程中易產生大量泡沫，在開始消化時應用小火加熱，并時時搖動；或者加入少量辛醇或液體石蠟或硅油消泡劑，并同時注意控制熱源強度。當樣品消化液不易澄清透明時，可將凱氏燒瓶冷卻，加入30％過氧化氫2～3mL后再繼續(xù)加熱消化。一般消化至呈透明后，繼續(xù)消化30分鐘即可，消化液呈藍色或淺綠色，但含鐵量多時，
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