實驗室生物安全管理程序

實驗室生物安全管理程序醫(yī)學實驗室的特殊環(huán)境通常會造成一定程度的生物污染，包括對實驗室內工作人員和環(huán)境的污染，這些污染通常主要由處理污染性物質時的操作不當造成。針對實驗室生物污染，采取適當?shù)纳锇踩雷o是十分必要的。醫(yī)學實驗室生物安全防護是指實驗室工作人員所處理的實驗對象含有致病的微生物的其毒素時，通過在實驗室設計建造，個體防護裝置，嚴格遵從標準化的工作及操作程序和規(guī)程等方面采取綜合措施，確保實驗室工作人員不受實驗對象侵染，確保周圍環(huán)境不受其污染。醫(yī)學實驗室生物安全防護的內容包括：安全設備、個體防護裝置和措施（一級防護），嚴格的管理制度和標準化的操作及規(guī)程。1、目的，有效地針對科室進行全面的生物安全管理，確保工作人員的安全。2、范圍適用于科室各專業(yè)實驗室。注（1）、本實驗室除HIV初篩實驗室為二級生物實驗室外，其他實驗室均為一級生物實驗室。（2）本科室成立了生物安全小組，由7人組成。3、職責3.1、科主任負責任命生物安全小組，指導，規(guī)范其工作。3.2、生物安全小組組長負責安全小組日常工作的安排。3.3、生物安全小組負責科室安全的具體工作。4、工作程序4.1、生物安全小組組成4.1.1、科主任指定安全小組組長4.1.2、經(jīng)年度考核，從科室成員中選拔具有高度責任心和實驗室知識的技術骨干，由科主任命為生物安全小組安全成員。由7人組成。安全小組成員任期一年，任期中出現(xiàn)特殊情況科主任可對之罷免。4.2、實驗室生物安全的維護和檢查4.2.1、生物安全小組制定針對安全操作和安全裝備的檢查方案，至少每年檢查一次。4.2.2、生物安全小組建立安全清單，為回顧性檢查提供資料并進行記錄，形成《安全記錄》。4.2.3、對危險品、危險區(qū)進行鑒定并加以標識。4.2.4、實驗室應按規(guī)定及時報告所有的事件和潛在的危險因素。4.2.5、安全小組應定期對工作人員進行安全培訓教育，并對各種緊急情況下應急措施進行培訓。4.2.6、若發(fā)生職業(yè)暴露應及時報告科主任和生物安全小組人員。4.3、警告標記和標簽的建立。4.3.1、對不同危險程度的實驗工作區(qū)進行標識。4.3.2、對高度危險區(qū)域要張貼危險公告。4.3.3、裝存危險物質的容器必須貼上標簽，其內容應詳細。5、安全操作規(guī)程5.1、一級生物安全防護實驗室5.1.1、在實驗室工作區(qū)禁止吸煙5.1.2、禁止在實驗室放置食物、飲料及類似的存在有潛在的從手到口的接觸途徑的其他物質。禁止用實驗室的冰箱（柜）儲存食物。5.1.3、處理腐蝕性或毒性物質時必須做好防護工作。應使用安全鏡、面罩或其他的眼睛和面部防護用品。5.1.4、在實驗室工作區(qū)，病區(qū)應穿白大衣或隔離衣，服裝應符合實驗室設備的要求。5.1.5、應穿著舒適，防滑并能保護整個腳面的鞋子。5.1.6、在實驗工作區(qū)頭發(fā)不可下垂，避免與污染物質接觸或影響實驗操作，有此類危險的植物應避免帶入工作區(qū)。不可留長胡須。5.1.7、由實驗工作區(qū)進入非污染區(qū)要洗手，接觸污染物后要立即洗手。5.1.8、實驗室禁止堆積過多的垃圾，至少應每日清理一次。5.1.9、禁止在實驗工作區(qū)存放個人物品。5.1.10、在實驗室指定清潔區(qū)和非清潔區(qū)，非本室工作人員禁止進入工作區(qū)。5.1.11、從移液器吸取液體、禁止口吸。5.1.12、按照實驗室安全規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產生。5.1.13、每天至少消毒一次工作臺面，活性物質濺出后要隨時消毒。5.1.14、所有培養(yǎng)物，廢棄物在運出實驗室之前必須進行滅活，高壓滅活。需運出實驗室滅活的物品必須放在專用密閉容器內。5.1.15、生活垃圾和醫(yī)用垃圾一定要分開裝放。5.2、二級生物安全防護實驗室

我科二級生物安全實驗室為HIV初篩實驗室。5.2.1、與5.1.1~5.1.15相同5.2.2、實驗室入口貼有生物危險標志，內部顯著位置須貼上有關的生物危險信息，注明危險因子，生物安全級別，負責人姓名。5.2.3、禁止非工作人員進入實驗室，或必須經(jīng)實驗室負責人同意后方可進入。5.2.4、工作人員應接受必需的免疫接種和檢測（如乙型肝炎疫苗、卡介苗），建立工作人員的健康檔案。5.2.5、必要時收集從事危險性工作人員的基本血清留底，并根據(jù)需要定期收集血清樣本，應有檢測報告，如有問題及時處理。5.2.6、將生物安全程序納入標準操作規(guī)范或生物安全手冊，由實驗室負責人專門保管，工作人員在進入實驗室之前要閱讀規(guī)范并按照規(guī)范要求操作。5.2.7、工作人員要接受有關的潛在危險知識的培訓，掌握預防職業(yè)暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓。5.2.8、盡可能使用塑料器材代替玻璃器材。5.2.9、應用一次性注射器，用過的針頭禁止折彎，剪斷，折斷，重新蓋帽，從注射器取下，禁止用手直接操作。用過的針頭、注射器必須直接分開放入放穿透的容器中，消毒浸泡。由醫(yī)院專門負責部門人員進行處理。5.2.10、禁止用手處理破碎的玻璃器具，裝有污染針，利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須消毒。5.2.11、實驗設備在運出修理或維護前必須進行消毒。5.2.12、人員暴露感染性物質時，及時向科主任或安全管理小組人員匯報，并記錄事故經(jīng)過和處理方案。6、記錄《安全記錄》6.1、實驗室工作人員健康檔案記錄6.2、實驗室消毒記錄6.3、實驗室廢棄物處理記錄。附錄1生物安全術語與定義1、生物安全：避免危險因子造成實驗人員暴露，向實驗室外擴散并導致危害的綜合措施。2、生物因子：一切微生物和生物活性物質。3、病原體：可使人、動物或植物致病的生物因子。4、危害廢棄物：有潛在的生物危險、可燃、腐蝕、有毒、放射和起破壞作用的對人、環(huán)境有害的一切廢棄物。5、氣溶膠：懸浮于氣體介質中的粒徑一般為0.001-100微米的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對穩(wěn)定的分散體系。6、一級屏障：是操作者和被操作對象之間的隔離，也稱一級隔離。如生物安全帽、手套、口罩、眼鏡、個體防護裝備等。7、二級屏障：是生物安全實驗室和外部環(huán)境的隔離，也稱二級隔離。8、生物安全實驗室：通過防護屏障，達到生物安全要求的生物實驗室和動物實驗室。附錄2

微生物危害程度分級1、危害等級1（低個體危害，低群體危害）：不會導致健康工作者和動物致病的細菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。2、危害等級2

（中等個體危害，有限群體危害）：能引起人或動物發(fā)病，但一般情況下對健康工作者，群體，家畜或環(huán)境不會引起嚴重危害的病原體。實驗室感染不導致嚴重致病，具備有效治療和預防措施，并且傳播風險有限。3危害等級3

（高個體危害，低群體危害）：能引起人類或動物嚴重疾病，或造成嚴重經(jīng)濟損失，但通常不能因偶然接觸而在個體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲藥治療的病原體。4危害等級4

（高個體危害、高群體危害）：能引起人類或動物非常嚴重的疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或因偶然接觸在人與人，或動物與人，或人與動物，或動物與動物之間傳播的病原體。血常規(guī)質控：混勻次數(shù)對質控結果的影響一般商品化血常規(guī)質控以血漿為基礎，加入人紅細胞、模擬白細胞以及血小板。往往操作人員只注重了質控品的有效期，沒有注意過混勻次數(shù)對于血常規(guī)質控穩(wěn)定性的影響。混勻次數(shù)過少會導致細胞無法均勻分布，混勻次數(shù)過多又會導致細胞破壞，尤其是紅細胞，影響質控品的穩(wěn)定性。按照說明書規(guī)定，我們要求每次血常規(guī)質控于室溫靜置10~15分鐘，輕柔顛倒質控品8～10次。為了探討混勻次數(shù)對血常規(guī)質控品穩(wěn)定性的影響，我們使用同一批次的血常規(guī)質控品，分別顛倒混勻10次、20次、30次、40次，連續(xù)檢測5天，比較CV值的大小。案例經(jīng)過保證每日室內質控在控后，取同批號實驗用血常規(guī)現(xiàn)質控品，于室溫靜置10～15分鐘。雙手掌心相對，質控品瓶蓋向上，將質控品豎直向上夾于掌心。來回搓動雙手，讓質控品在雙手間豎直滾動。持續(xù)

20～30秒，顛倒質控品8～10次，上述整個過程切勿震蕩。實驗共分為4組，分別重復上述過程1次、2次、3次、4次即混勻10次、20次、30次、40次。連續(xù)檢測5天，觀察每組各項參數(shù)CV的大小，結果見表1。發(fā)現(xiàn)其中WBCRBC以及PLT的CV增高明顯，見圖1。同時，我們也發(fā)現(xiàn)各項參數(shù)的值也會隨著混勻次數(shù)的增加發(fā)生改變，我們以第一組的檢測值為基準，計算另外幾個分組與第一組的偏差，結果見表2。案例分析血常規(guī)質控品由于工藝的特殊性，其基質為人血漿，加入人紅細胞、模擬白細胞以及血小板，隨著混勻次數(shù)過多會導致細胞發(fā)生破壞，當混勻次數(shù)超過每次40下，白細胞、紅細胞以及血小板的檢測值明顯降低，這三項參數(shù)的變異系數(shù)

CV也隨之增加。實驗室常規(guī)操作使用血常規(guī)質控品，往往注重的都是質控品的有效期，忽視混勻次數(shù)，血常規(guī)質控無法分裝，同一支質控品在有效期