考點(diǎn)47動(dòng)物細(xì)胞工程（講義）

考點(diǎn)47動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)概念：從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。原理：細(xì)胞增殖地位：動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)培養(yǎng)條件營(yíng)養(yǎng)①已知成分：將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（糖類、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等）按其種類和所需量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基，稱為合成培養(yǎng)基。②未知成分：使用合成培養(yǎng)基時(shí)，通常需加入血清等一些天然成分。③物理性質(zhì)：培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞一般使用液體培養(yǎng)基，也稱為培養(yǎng)液。無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境①對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理；②在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作；③還需要定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。溫度、pH和滲透壓①適宜的溫度：哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多以36.5±0.5℃為宜。②適宜的pH：多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。③適宜的滲透壓：維持適宜滲透壓的目的維持細(xì)胞正常的形態(tài)和功能。氣體環(huán)境①組成：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2。②氣體作用：a.O2：O2是細(xì)胞代謝所必需的；b.CO2：CO2的主要作用維持培養(yǎng)液的pH。過(guò)程①原代培養(yǎng)：將分瓶之前的細(xì)胞培養(yǎng)，即動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。②傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖一定時(shí)間后，由于空間不足或密度過(guò)大導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)枯竭，影響細(xì)胞的生長(zhǎng)，因此需要重新用胰蛋白酶等處理，進(jìn)行分瓶擴(kuò)大培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)；③細(xì)胞貼壁：大多數(shù)體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長(zhǎng)增殖，這類細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞貼壁；④接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞通常會(huì)停止分裂增殖。干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用分布：干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。分類：干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等①胚胎干細(xì)胞（簡(jiǎn)稱ES細(xì)胞）a.分布：存在于早期胚胎中b.特點(diǎn)：具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能。②成體干細(xì)胞a.分布：存在于成體組織或器官內(nèi)中b.類別：包括骨髓中的造血干細(xì)胞、神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)干細(xì)胞、睪丸中的精原干細(xì)胞等。c.特點(diǎn)：一般認(rèn)為，成體干細(xì)胞具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。干細(xì)胞的應(yīng)用①原理：干細(xì)胞有著自我更新能力及分化潛能的干細(xì)胞，與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)等密切相關(guān)。②應(yīng)用：a.造血干細(xì)胞：治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病。b.神經(jīng)干細(xì)胞：治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病（如帕金森病、阿爾茨海默病等）。c.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）：可治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血癥，在治療阿爾茲海默病、心血管疾病等領(lǐng)域。動(dòng)物細(xì)胞融合概念：使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。結(jié)果：形成的雜交細(xì)胞具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息。原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性。誘導(dǎo)融合的常用方法：電融合法、聚乙二醇PEG融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法。融合實(shí)質(zhì)及完成的標(biāo)志：細(xì)胞核的融合。意義：突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。應(yīng)用①細(xì)胞融合技術(shù)已經(jīng)成為研究培育生物新品種、細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫和腫瘤等的重要手段。②利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù)，為制造單克隆抗體開辟了新途徑。單克隆抗體及其應(yīng)用基本原理一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。細(xì)胞融合技術(shù)產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞可以保持親代雙方的特性。篩選雜交瘤細(xì)胞，體外培養(yǎng)大量增殖，以獲得所需抗體。制備過(guò)程突出優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備。實(shí)際應(yīng)用：（1）作為診斷試劑；①多種疾病的診斷②病原體的鑒定③其他類型診斷。（2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物：與藥物結(jié)合，制成抗體藥物偶聯(lián)物（ADC），殺傷癌細(xì)胞；ADC通常由抗體、接頭和藥物三部分組成。動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物概念：將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。原理：動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。哺乳動(dòng)物核移植分類（1）胚胎細(xì)胞核移植：動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，表現(xiàn)全能性相對(duì)容易。（2）體細(xì)胞核移植：動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，表現(xiàn)全能性十分困難。非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物體細(xì)胞核移植的困難原因（1）供體細(xì)胞的細(xì)胞核在去核卵母細(xì)胞中不能完全恢復(fù)其分化前的功能狀態(tài)，這導(dǎo)致了胚胎發(fā)育率低。（2）對(duì)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物胚胎進(jìn)行操作的技術(shù)尚不完善。體細(xì)胞核移植的過(guò)程去核方法：顯微操作法（普遍使用）。也可以使用梯度離心、紫外線短時(shí)間照射、化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒(méi)有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下去核或使DNA變性。MⅡ中期的核是紡錘體染色體復(fù)合物。體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景及存在的問(wèn)題應(yīng)用前景畜牧生產(chǎn)加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。保護(hù)瀕危動(dòng)物有望增加瀕危物種的存活數(shù)量。醫(yī)藥衛(wèi)生轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物可以作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白。治療人類疾?、俎D(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物的細(xì)胞、組織或器官可以作為異種移植的供體；②以患者作為供體培育的人核移植胚胎干細(xì)胞，經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)分化能形成相應(yīng)的細(xì)胞、組織或器官，將它們移植給患者時(shí)可以避免免疫排斥反應(yīng)?？蒲孝傺芯靠寺?dòng)物可使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過(guò)程；②克隆一批遺傳背景相同的動(dòng)物，可以通過(guò)它們之間的對(duì)比來(lái)分析致病基因；③克隆特定疾病模型的動(dòng)物，還能為研究該疾病機(jī)制和開發(fā)相應(yīng)的藥物提供幫助；存在的問(wèn)題①成功率非常低；②各個(gè)技術(shù)環(huán)節(jié)有待進(jìn)一步改進(jìn)；③絕大多數(shù)克隆動(dòng)物存在健康問(wèn)題，表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷?？挤?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與動(dòng)物體細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中有關(guān)操作的分析培養(yǎng)動(dòng)物肝臟細(xì)胞時(shí)切成小薄片的原因：有利于肝臟細(xì)胞充分吸收氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)選用幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的原因：幼齡動(dòng)物組織或胚胎的細(xì)胞分化程度低，增殖能力強(qiáng)，更易于培養(yǎng)。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中兩次用到胰蛋白酶的作用：第1次是將剪碎的組織分散成單個(gè)細(xì)胞；第2次是將貼壁細(xì)胞分散開來(lái)，進(jìn)行傳代培養(yǎng)。核移植時(shí)選用去核卵（母）細(xì)胞的原因：卵（母）細(xì)胞比較大，易操作；卵（母）細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)豐富，含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。正常動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)：懸浮生長(zhǎng)（少數(shù)）、貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與動(dòng)物體細(xì)胞核移植的比較動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物體細(xì)胞核移植原理細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞核的全能性過(guò)程結(jié)果相同分化程度的細(xì)胞群細(xì)胞核基因控制的性狀與供體相同，細(xì)胞質(zhì)基因控制的性狀與提供卵母細(xì)胞的母牛相同關(guān)鍵環(huán)節(jié)細(xì)胞增殖（分裂）、細(xì)胞癌變細(xì)胞分化應(yīng)用①生產(chǎn)生物制品；②用于基因工程；③檢測(cè)有毒物質(zhì)①加速良種繁育；②保護(hù)瀕危物種；③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白；④提供克隆器官、組織等（2023春?石家莊期末）實(shí)驗(yàn)人員對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的動(dòng)物細(xì)胞增殖情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，其變化曲線如圖所示，圖中B、D兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選后繼續(xù)培養(yǎng)。下列敘述錯(cuò)誤的（）A．O點(diǎn)時(shí)可將動(dòng)物胚胎組織用機(jī)械的方法處理，細(xì)胞分散制成懸液 B．細(xì)胞懸液進(jìn)行原代培養(yǎng)，其增殖情況如OA段所示 C．出現(xiàn)AB和CD段的原因是所有細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)并發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象 D．D點(diǎn)時(shí)的細(xì)胞用蛋白酶處理、篩選、分瓶可繼續(xù)傳代培養(yǎng)【分析】1、據(jù)圖分析，OA段的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，BC段的培養(yǎng)為傳代培養(yǎng)。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）、剪碎、用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞、制成細(xì)胞懸液、轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)、貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。3、細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制?！窘獯稹拷猓篈、O點(diǎn)時(shí)可將動(dòng)物胚胎組織用機(jī)械的方法處理，將組織分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，A正確；B、OA段的增殖代數(shù)在10代以內(nèi)，因此為原代培養(yǎng)，B正確；C、當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制，AB段和CD段細(xì)胞幾乎生長(zhǎng)停滯，可能發(fā)生了接觸抑制現(xiàn)象，C正確；D、D點(diǎn)后的細(xì)胞能無(wú)限增殖，細(xì)胞核型已發(fā)生改變，具備了癌細(xì)胞的特性，不再傳代培養(yǎng)，目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型，D錯(cuò)誤。故選：D?！军c(diǎn)評(píng)】本題主要考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力，能夠運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，對(duì)生物學(xué)問(wèn)題作出準(zhǔn)確的判斷，難度適中。（2023春?承德期末）科學(xué)家通過(guò)體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），iPS細(xì)胞可分化為各種組織細(xì)胞，目前運(yùn)用iPS細(xì)胞治療阿爾茨海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究，取得了新的進(jìn)展。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．iPS細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞的分化潛能是有差別的 B．iPS細(xì)胞需要培養(yǎng)在含有95%O2和5%CO2的培養(yǎng)箱中 C．成纖維細(xì)胞和用小分子化合物誘導(dǎo)形成的iPS細(xì)胞所攜帶的遺傳信息相同 D．取自身細(xì)胞形成的iPS細(xì)胞來(lái)治療心血管疾病可避免免疫排斥反應(yīng)【分析】胚胎干細(xì)胞：（1）來(lái)源：哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES細(xì)胞，來(lái)源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來(lái)。（2）特點(diǎn)：具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯，在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造?！窘獯稹拷猓篈、iPS細(xì)胞的分化潛能大于神經(jīng)干細(xì)胞，A正確；B、iPS細(xì)胞需要培養(yǎng)在含有95%空氣和5%CO2的培養(yǎng)箱中，B錯(cuò)誤；C、用小分子化合物誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞并沒(méi)有改變遺傳信息，分化的本質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，C正確；D、取自身細(xì)胞形成的iPS細(xì)胞表面抗原相同，用于治療心血管疾病可避免免疫排斥反應(yīng)，D正確。故選：B。【點(diǎn)評(píng)】本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎干細(xì)胞、ips細(xì)胞的應(yīng)用，要求學(xué)生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的具體過(guò)程，掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件及該技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。（2023春?南陽(yáng)月考）2017年，某國(guó)批準(zhǔn)了首例使用細(xì)胞核移植技術(shù)培育“三親嬰兒”的申請(qǐng)。其培育過(guò)程可選用如圖技術(shù)路線。據(jù)圖分析，下列敘述不正確的是（）A．“三親嬰兒”的出生屬于有性生殖 B．“三親嬰兒”同時(shí)擁有父親、母親及卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者的部分基因 C．使用該技術(shù)母親細(xì)胞質(zhì)中的致病基因不會(huì)傳遞給后代 D．該技術(shù)可避免母親的色盲基因傳遞給后代【分析】動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。原理是動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性，克隆動(dòng)物的遺傳物質(zhì)來(lái)自雙親，其核遺傳物質(zhì)來(lái)自供核生物，而細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自提供細(xì)胞質(zhì)的生物?！窘獯稹拷猓篈、由圖可知，“三親嬰兒”的培育需要采用體外受精技術(shù)，屬于有性生殖，A正確；B、圖中“三親嬰兒”是經(jīng)過(guò)核移植和體外受精產(chǎn)生的，其細(xì)胞核基因一半來(lái)自父親，一半來(lái)自母親，細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者，故“三親嬰兒”同時(shí)擁有父親、母親及卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者的部分基因，B正確；C、母親卵母細(xì)胞取核去質(zhì)，故該技術(shù)可避免母親細(xì)胞質(zhì)中的致病基因傳遞給后代，C正確；D、色盲基因位于X染色體上，屬于核基因，故該技術(shù)不可以避免母親的色盲基因傳遞給后代，D錯(cuò)誤。故選：D?！军c(diǎn)評(píng)】本題結(jié)合模式圖，考查細(xì)胞核移植技術(shù)和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記細(xì)胞核移植技術(shù)的概念及應(yīng)用，掌握體外受精技術(shù)的應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。（2023春?東莞市校級(jí)月考）我國(guó)中科院的研究團(tuán)隊(duì)利用細(xì)胞工程和基因編輯技術(shù)，成功培育出世界上首例只有雙母親來(lái)源的孤雌小鼠和雙父親來(lái)源的孤雄小鼠，實(shí)現(xiàn)了哺乳動(dòng)物的同性繁殖。實(shí)驗(yàn)流程如圖所示，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）卵細(xì)胞轉(zhuǎn)化成phFSC相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中的過(guò)程，該過(guò)程（填“存在”或“不存在”）基因的選擇性表達(dá)。（2）要培育孤雄小鼠需要將精子和具卵細(xì)胞細(xì)胞核特點(diǎn)的ahESC同時(shí)注入去核的卵母細(xì)胞形成重構(gòu)胚，在對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行去核時(shí)，除了顯微操作外還可以采用（至少答出兩種）等方法處理，得到的重構(gòu)胚通常需要發(fā)育到階段才能進(jìn)行胚胎移植。（3）不考慮致死情況，得到的孤雄小鼠性染色體組成為。利用胚胎分割的方法對(duì)乙進(jìn)行處理得到了多只孤雄小鼠，利用這些孤雄小鼠作為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行用于醫(yī)學(xué)研究的優(yōu)點(diǎn)是?！痉治觥?、卵細(xì)胞激活轉(zhuǎn)化成phFSC，通過(guò)基因編輯技術(shù)獲得具精子細(xì)胞核特點(diǎn)的phESC，獲得甲，從而得到孤雌小鼠。2、精子激活轉(zhuǎn)化成ahFSC，通過(guò)基因編輯技術(shù)獲得具卵細(xì)胞細(xì)胞核特點(diǎn)的ahESC，獲得乙，從而得到孤雄小鼠。【解答】解：（1）卵細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，轉(zhuǎn)化為孤雌胚胎干細(xì)胞相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中的脫分化階段，這個(gè)過(guò)程也存在某些基因的表達(dá)和某些基因的關(guān)閉，所以存在基因的選擇性表達(dá)。（2）對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行去核時(shí)，可以采取顯微操作、梯度離心、紫外線短時(shí)間照射、化學(xué)物質(zhì)處理等，通常重構(gòu)胚需要在體外培養(yǎng)到桑葚胚或囊胚期才能進(jìn)行移植。（3）不考慮致死，孤雄小鼠的染色體來(lái)源于兩只雄鼠產(chǎn)生的精子，所以其性染色體可能是XX、XY或YY，通過(guò)胚胎分割得到的同一批小鼠遺傳物質(zhì)相同，所以作為實(shí)驗(yàn)材料可以排除由基因的差異造成的個(gè)體差異。故答案為：（1）脫分化存在（2）梯度離心、紫外線短時(shí)間照射、化學(xué)物質(zhì)處理桑葚胚或囊胚（3）XX，XY或YY遺傳物質(zhì)相同，可以基本排除由基因不同造成的個(gè)體差異【點(diǎn)評(píng)】本題考查胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記受精作用的具體過(guò)程，識(shí)記胚胎移植的基本程序，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題。（2023?湖北模擬）體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)常需要提供一個(gè)類似該細(xì)胞在生物體內(nèi)的環(huán)境條件，培養(yǎng)方式可分為懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng)。下列敘述正確的是（）A．懸浮培養(yǎng)一般使用液體培養(yǎng)基 B．貼壁培養(yǎng)一般使用固體培養(yǎng)基 C．懸浮培養(yǎng)會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象 D．血液中淋巴細(xì)胞適合貼壁培養(yǎng)【分析】1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊剪碎組織用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞一制成細(xì)胞懸液一轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）一放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)一貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液一轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）一放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；（3）溫度和pH；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）?！窘獯稹拷猓篈、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)均采用液體培養(yǎng)基，A正確；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)均采用液體培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；C、貼壁培養(yǎng)會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，懸浮培養(yǎng)不會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，C錯(cuò)誤；D、體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)常需要提供一個(gè)類似該細(xì)胞在生物體內(nèi)的環(huán)境條件，因此血液中淋巴細(xì)胞適合懸浮培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。故選：A?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。（2023春?宛城區(qū)校級(jí)月考）有研究表明“漸凍癥”是由突變的基因?qū)е逻\(yùn)動(dòng)神經(jīng)元合成了某種毒蛋白，從而阻礙了軸突內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的流動(dòng)。也有最新研究結(jié)果表明，利用誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）制作前驅(qū)細(xì)胞，然后移植給漸凍癥實(shí)驗(yàn)鼠，能延長(zhǎng)其壽命。下列相關(guān)描述錯(cuò)誤的是（）A．iPS細(xì)胞分化成的多種細(xì)胞中所有核酸相同，蛋白質(zhì)卻不完全相同 B．iPS細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，細(xì)胞種類增多 C．若控制運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元合成毒蛋白的基因替換，則可以起到良好的治療作用 D．植入神經(jīng)干細(xì)胞，恢復(fù)受損的運(yùn)動(dòng)功能，也許會(huì)在一定程度上使“漸凍癥”病情改善【分析】1、細(xì)胞分化的結(jié)果是形成形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能不同的細(xì)胞，使細(xì)胞的種類增多，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。2、iPS細(xì)胞的功能類似于胚胎干細(xì)胞?！窘獯稹拷猓篈、細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，因此iPS細(xì)胞分化成的多種細(xì)胞中DNA相同，RNA和蛋白質(zhì)不完全相同，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表弟，其結(jié)果是形成形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能不同的細(xì)胞，使細(xì)胞的種類增多，B正確；C、若控制運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元合成毒蛋白的基因替換，則無(wú)法合成該毒蛋白，所以可以起到治療該病的作用，C正確；D、植入神經(jīng)干細(xì)胞，誘導(dǎo)分化成前驅(qū)細(xì)胞，恢復(fù)受損的運(yùn)動(dòng)功能，也許會(huì)在一定程度上使“漸凍癥”病情改善，D正確。故選：A?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查細(xì)胞分化和干細(xì)胞的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記細(xì)胞分化的概念，掌握細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)；識(shí)記干細(xì)胞的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合題中信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。（2023春?萬(wàn)州區(qū)期末）如圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程示意圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．步驟②的細(xì)胞懸液中除必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加少量血清 B．步驟①的操作需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行 C．步驟③到④分瓶操作時(shí)所有細(xì)胞都需用胰蛋白酶處理 D．步驟③④需放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)且④培養(yǎng)過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)?！窘獯稹拷猓篈、步驟②的細(xì)胞懸液中除必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加少量血清，A正確；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程需要無(wú)菌操作，故步驟①的操作需要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行，B正確；C、步驟③到④的分瓶操作時(shí)不是所有細(xì)胞都需用胰蛋白酶處理，如生活在溶液中的未貼壁細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、步驟③為原代培養(yǎng)，④為傳代培養(yǎng)，都需置于需放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)，且④培養(yǎng)過(guò)程中部分細(xì)胞核型改變，可能會(huì)發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化，D正確。故選：C?！军c(diǎn)評(píng)】本題主要考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力，能夠運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，對(duì)生物學(xué)問(wèn)題作出準(zhǔn)確的判斷，難度適中。24．（2022?河北二模）克隆的英文“clone”源于希臘語(yǔ)的“klon”（嫩枝）。生物的無(wú)性繁殖方式統(tǒng)稱為克隆，這門生物技術(shù)叫克隆技術(shù)?？寺〖夹g(shù)在增加動(dòng)物數(shù)量以及優(yōu)良家畜的繁殖過(guò)程中被廣泛應(yīng)用?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）用核移植的方法可以獲取克隆動(dòng)物，哺乳動(dòng)物核移植可以分為和體細(xì)胞核移植；體細(xì)胞核移植的難度明顯高于前者的原因是。（2）動(dòng)物細(xì)胞核移植過(guò)程中，通常采用卵（母）細(xì)胞作為受體細(xì)胞，原因可能是。核移植前需將卵母細(xì)胞培養(yǎng)至MⅡ中期，并去核，去核的目的是。（3）克隆技術(shù)可用于動(dòng)物器官移植，能解決等問(wèn)題；胚胎分割（填“屬于”或“不屬于”）克隆，應(yīng)選取階段的胚胎進(jìn)行分割，要保證將均等分割?！痉治觥縿?dòng)物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植．體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，原因：動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難。動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物，克隆動(dòng)物的核基因完全來(lái)自供體動(dòng)物，而細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自受體細(xì)胞；核移植包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植，其中體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，因?yàn)轶w細(xì)胞的全能性低于胚胎細(xì)胞?！窘獯稹拷猓海?）哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植；體細(xì)胞核移植的難度明顯高于前者的原因是動(dòng)物胚胎，細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易，而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高、恢復(fù)其全能性比較困難。（2）動(dòng)物細(xì)胞核移植過(guò)程中，通常采用卵（母）細(xì)胞作為受體細(xì)胞，原因可能是卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核發(fā)育的物質(zhì)。核移植前需將卵母細(xì)胞培養(yǎng)至MⅡ中期，并去核，去核的目的是避免卵母細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)傳遞到子代。（3）克隆技術(shù)可用于動(dòng)物器官移植，能解決供體器官不足和排斥反應(yīng)等問(wèn)題；胚胎分割屬于克隆，應(yīng)選取桑葚胚或囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割，要保證將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。故答案為：（1）胚胎細(xì)胞核移植動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易，而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高、恢復(fù)其全能性比較困難（2）卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核恢復(fù)分裂能力的物質(zhì)避免卵母細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)傳遞到子代（3）供體器官不足和排斥反應(yīng)屬于桑葚胚或囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)【點(diǎn)評(píng)】本題考查核移植的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，對(duì)生物學(xué)問(wèn)題作出準(zhǔn)確的判斷和得出正確的結(jié)論?？挤?動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體的制備血清抗體與單克隆抗體的比較產(chǎn)生特點(diǎn)血清抗體由漿細(xì)胞分泌一般從血清中分離，產(chǎn)量低、純度低、特異性差單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞分泌特異性強(qiáng)、靈敏度高，能大量制備比較制備單克隆抗體過(guò)程中的兩次篩選第一次篩選第二次篩選篩選原因誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以經(jīng)選擇培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞篩選方法用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種核融合后形成的細(xì)胞（“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞）都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞（“B瘤”細(xì)胞）才能生長(zhǎng)用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群篩選目的得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞取相應(yīng)B淋巴細(xì)胞前必須先注射相應(yīng)抗原，否則不能獲得想要的單克隆抗體。誘導(dǎo)融合的兩種細(xì)胞名稱及作用：免疫過(guò)的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）的作用是產(chǎn)生抗體，骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖。每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。單克隆抗體的獲取：將雜交瘤細(xì)胞在體外或小鼠腹腔中培養(yǎng)，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可獲得大量的單克隆抗體。植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較植物體細(xì)胞雜交（以培育番茄馬鈴薯植株為例）動(dòng)物細(xì)胞融合（以單克隆抗體的制備為例）原理（理論基礎(chǔ)）細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖融合前處理酶解法去除細(xì)胞壁（纖維素酶、果膠酶）注射特定抗原，免疫處理正常小鼠促融方法①物理法：電融合法、離心法等；②化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+高pH融合法①物理、化學(xué)法：電融合法、PEG融合法；②生物法：滅活病毒誘導(dǎo)法過(guò)程意義和用途①打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種，培育植物新品種；②克服有性雜交的母系遺傳現(xiàn)象，獲得細(xì)胞質(zhì)基因的雜合子，研究細(xì)胞質(zhì)遺傳①制備單克隆抗體②診斷、治療、預(yù)防疾病。如“單抗診斷試劑盒”、抗體藥物偶聯(lián)物治療癌癥相同點(diǎn)利用的原理都有細(xì)胞膜的流動(dòng)性；都能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙；含有兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)動(dòng)物細(xì)胞融合是制備單克隆抗體的基礎(chǔ)，制備單克隆抗體是動(dòng)物細(xì)胞融合的應(yīng)用。（2023?江漢區(qū)校級(jí)模擬）如圖可用來(lái)表示多種生物工程技術(shù)的流程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．若表示植物體細(xì)胞雜交，整個(gè)過(guò)程中培養(yǎng)基的滲透壓都是重要影響因素 B．若表示試管牛的繁殖流程，則1、2得到3的過(guò)程可以體內(nèi)也可以體外 C．若表示單克隆抗體的制備，需多次克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)以達(dá)到篩選目的 D．若表示克隆牛的培育流程，獲得1、2都需要用到細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)【分析】單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞，第二次篩選：利用多孔板法和抗原﹣抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞?！窘獯稹拷猓篈、若上圖表示植物體細(xì)胞雜交流程，形成3的過(guò)程表示原生質(zhì)體的融合過(guò)程，去壁過(guò)程需要提高培養(yǎng)基的滲透壓，避免原生質(zhì)體吸水漲破，3過(guò)程已經(jīng)長(zhǎng)出細(xì)胞壁，可以降低滲透壓，因此整個(gè)過(guò)程中培養(yǎng)基的滲透壓都是重要的影響因素，A正確；B、若上圖表示試管牛的繁殖流程，1、2得到3的過(guò)程表示精子與卵細(xì)胞結(jié)合形成受精卵，受精卵發(fā)育形成早期胚胎，早期胚胎植入到母體子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，1、2得到3的過(guò)程需要在體外進(jìn)行，B錯(cuò)誤；C、若上圖表示單克隆抗體的制備過(guò)程，3表示雜交瘤細(xì)胞的形成過(guò)程，得到雜交瘤細(xì)胞后需要經(jīng)過(guò)專一性抗體檢測(cè)和多次克隆化培養(yǎng)，以達(dá)到篩選目的，C正確；D、若上圖表示克隆牛的培育流程，1、2得到3的過(guò)程表示供體細(xì)胞提供細(xì)胞核，植入到去核的卵母細(xì)胞形成重構(gòu)胚，獲得供體細(xì)胞和去核的卵母細(xì)胞都需要用到細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，即獲得1、2都需要用到細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，D正確。故選B?！军c(diǎn)評(píng)】本題需要學(xué)生掌握單克隆抗體的制備過(guò)程及原理。（2023?威海二模）抗犬細(xì)小病毒的單克隆抗體是利用細(xì)胞融合技術(shù)，將經(jīng)滅活犬細(xì)小病毒免疫過(guò)的小鼠的B淋巴細(xì)胞與瘤細(xì)胞融合，篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，將其注射到無(wú)特定病原體感染的小鼠體內(nèi)，從腹腔中提取的高效特異性抗體。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．對(duì)小鼠注射滅活的犬細(xì)小病毒后即可從小鼠脾臟中分離出分泌相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞 B．滅活病毒可使細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與瘤細(xì)胞融合 C．至少需要經(jīng)過(guò)兩次篩選才能獲得所需的雜交瘤細(xì)胞 D．利用該單克隆抗體可以診斷是否感染犬細(xì)小病毒【分析】1、在單克隆抗體的制備過(guò)程中使用的細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；抗原侵入機(jī)體后，發(fā)生體液免疫，體內(nèi)產(chǎn)生抗犬細(xì)小病毒的抗體；在單克隆抗體的制備過(guò)程中，在選擇培養(yǎng)基中有兩次篩選，第一次篩選的目的是選擇出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選的目的是選擇出能分泌犬細(xì)小病毒單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，采用抗原﹣﹣抗體雜交法。2、單克隆抗體的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備?！窘獯稹拷猓篈、對(duì)小鼠注射滅活的犬細(xì)小病毒一段時(shí)間后，可從小鼠脾臟中分離出分泌相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是滅活病毒可使細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，從而誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與瘤細(xì)胞融合，B正確；C、單克隆抗體制備過(guò)程至少要經(jīng)過(guò)兩次篩選，第一次是利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次是利用抗原﹣抗體雜交篩選出能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，C正確；D、利用單克隆抗體的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)，可以診斷是否感染犬細(xì)小病毒，D正確。故選：A。【點(diǎn)評(píng)】本題主要考查單克隆抗體制備過(guò)程及動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決實(shí)際問(wèn)題的能力。（2023春?北海期末）2023年3月份以來(lái)，季節(jié)性甲型H1N1亞型流感病毒感染率呈上升趨勢(shì)，此外國(guó)內(nèi)專家預(yù)測(cè)新冠病毒感染的第二波高峰期也在2023年6月底到達(dá)，這兩種病毒引起的癥狀極為相似，為了對(duì)癥下藥，疑似病患可以用相應(yīng)的兩種抗原檢測(cè)盒檢測(cè)出自己是感染了甲流還是新冠病毒。如圖1所示為抗原檢測(cè)試劑盒的使用方法，可通過(guò)肉眼觀察到顯色結(jié)果。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）抗原檢測(cè)試劑盒是利用的原理進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)的實(shí)質(zhì)是檢測(cè)樣本中是否含有新冠病毒的。（2）抗原檢測(cè)試劑盒的生產(chǎn)依賴于單克隆抗體的制備。如圖2為制取新冠病毒X蛋白的單克隆抗體的部分過(guò)程。①圖中a操作是指向小鼠體內(nèi)注入，之后一般從該小鼠的中提取淋巴細(xì)胞，并在體外讓淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。與誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合相比，誘導(dǎo)這兩種細(xì)胞融合的特有方法是誘導(dǎo)法。②誘導(dǎo)融合后至少要經(jīng)過(guò)兩次篩選，圖中的篩選1是指利用將細(xì)胞篩選出來(lái)；篩選2篩選出來(lái)細(xì)胞具有的特點(diǎn)，可直接用于大量培養(yǎng)生產(chǎn)單克隆抗體?！痉治觥繂慰寺】贵w是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來(lái)制備，雜交瘤抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體，又能無(wú)限增殖。用具備這種特性的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群，可制備針對(duì)一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。【解答】解：（1）試劑盒上含有抗體，可以和抗原結(jié)合，所以原理是抗原一抗體雜交；試劑盒中含有新冠病毒的抗體，所以檢測(cè)的實(shí)質(zhì)是檢測(cè)樣本中是否含有新冠病毒的抗原蛋白。（2）①圖中a操作是指往小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，這里應(yīng)該是新冠病毒的X蛋白，之后一般從該小鼠的脾臟中提取淋巴細(xì)胞，因?yàn)槠⑴K作為免疫器官，其中有大量的免疫細(xì)胞，而后在體外讓淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。與誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合相比，誘導(dǎo)這兩種細(xì)胞融合的特有方法是滅活病毒誘導(dǎo)法。②誘導(dǎo)融合后至少要經(jīng)過(guò)兩次篩選，圖中的篩選1是指利用選擇培養(yǎng)基將雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái)，因?yàn)榻?jīng)過(guò)誘導(dǎo)融合后會(huì)產(chǎn)生多種類型的融合細(xì)胞，因而需要將雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái)；篩選2是利用抗原﹣抗體雜交，即抗原和抗體特異性結(jié)合的原理將能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái)，這類細(xì)胞既能產(chǎn)生特定的抗體，而且還能大量增殖，因而可以在體外或體內(nèi)進(jìn)行大量培養(yǎng)，進(jìn)而可用于生成單克隆抗體。故答案為：（1）抗原一抗體雜交（或答抗原和抗體特異性結(jié)合）抗原蛋白（2）新冠病毒的X蛋白脾臟滅活病毒選擇培養(yǎng)基雜交瘤既能大量增殖，又能產(chǎn)生特定的抗體【點(diǎn)評(píng)】本題以新型冠狀病毒的檢測(cè)和單克隆抗體的制作為素材，考查特異性免疫和單克隆抗體的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生提取信息和分析問(wèn)題的能力。（2023春?茅箭區(qū)校級(jí)期末）人體心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由肌鈣蛋白T（cTnT）、肌鈣蛋白I（cTnI）和肌鈣蛋白C（cTnC）三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成，其中cTnI在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗cTnI的單克隆抗體，科研人員完成了以下過(guò)程。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．骨髓瘤細(xì)胞的恒溫培養(yǎng)箱中應(yīng)加入95%O2和5%CO2的混合氣體 B．為了減輕代謝物積累對(duì)細(xì)胞的傷害，可在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素 C．②過(guò)程需利用多孔培養(yǎng)板進(jìn)行抗體檢測(cè)，每個(gè)孔中要接種多個(gè)雜交瘤細(xì)胞 D．若要克服鼠源性單抗的異源性反應(yīng)，可通過(guò)蛋白質(zhì)工程將抗原結(jié)合區(qū)域外的其他部分替換為人抗體區(qū)段【分析】分析題圖：①表示用選擇培養(yǎng)基篩選處雜交瘤細(xì)胞；②表示篩選獲得能產(chǎn)生抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞，因此丙細(xì)胞具有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特點(diǎn)，既能產(chǎn)生特定抗體，又能無(wú)限增殖?！窘獯稹拷猓篈、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境是在恒溫培養(yǎng)箱中應(yīng)加入95%空氣和5%CO2的混合氣體，A錯(cuò)誤；B、為了防止動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中被細(xì)菌污染，可在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素，B錯(cuò)誤；C、②過(guò)程需利用多孔培養(yǎng)板進(jìn)行抗體檢測(cè)，每個(gè)孔中要接種1個(gè)雜交瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、若要克服圖示鼠源性抗cTnI單克隆抗體的異源性反應(yīng)，可通過(guò)蛋白質(zhì)工程將抗原結(jié)合區(qū)域外的其他部分替換為人抗體區(qū)段，D正確。故選：D?！军c(diǎn)評(píng)】本題結(jié)合模式圖，考查單克隆抗體的制備過(guò)程，要求考生識(shí)記單克隆抗體制備的原理、過(guò)程，掌握單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)及相關(guān)應(yīng)用，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。（2023春?石家莊期末）細(xì)胞融合技術(shù)有著廣泛應(yīng)用，據(jù)下圖分析問(wèn)題。（1）若a、b分別是小麥和長(zhǎng)穗偃麥的花粉，這兩個(gè)品種的花粉細(xì)胞雜交之前必須先用去除細(xì)胞壁，再用化學(xué)法誘導(dǎo)融合，可產(chǎn)生種融合細(xì)胞（僅考慮兩兩融合）。（2）若將d再生細(xì)胞壁后，利用技術(shù)，培育成雜種植株，該技術(shù)依據(jù)的生物學(xué)原理是。培育d植株的技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中的意義是。（3）圖1是新冠病毒抗原檢測(cè)試劑盒中新型冠狀病毒單克隆抗體的制備過(guò)程，a是經(jīng)新冠病毒S蛋白處理過(guò)的小鼠中提取的B淋巴