生物技術(shù)概論

《生物技術(shù)概論》復(fù)習(xí)題及參考答案一、名詞解釋1.生物技術(shù)（biotechnology）：有時(shí)也稱為生物工程（bioengineering），是指人們以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合先進(jìn)的工程技術(shù)手段和其他基礎(chǔ)學(xué)科的科學(xué)原理，利用生物得體或其體系或它們的衍生物來(lái)制造人類所需要的各種產(chǎn)品或達(dá)到某種目的的一門(mén)新興的、綜合性的學(xué)科。2．基因工程（geneenginerring）：是指在基因水平上的操作并改變生物遺傳特性的技術(shù)。即按照人們的需要，用類似工程設(shè)計(jì)的方法將不同來(lái)源的基因（DNA分子）在體外構(gòu)建成雜種DNA分子，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞，并在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和表達(dá)的操作，也稱DNA重組技術(shù)。3．細(xì)胞工程（cellengineering）：是指在細(xì)胞為基本單位，在體外條件下進(jìn)行培養(yǎng)、繁殖或人為地使細(xì)胞某些生物學(xué)特性按人們的意愿發(fā)生改變，從而達(dá)到改良生物品種和創(chuàng)造新品種的目的，加速繁育動(dòng)植物個(gè)體，或獲得某種有用物質(zhì)的技術(shù)。4．酶工程（enzymeengineering）：是利用酶、細(xì)胞器或細(xì)胞所具有的特異催化功能或?qū)γ高M(jìn)行修飾改造，并借助生物反應(yīng)器和工藝過(guò)程來(lái)生產(chǎn)人類所需產(chǎn)品的技術(shù)。5．發(fā)酵工程（fermentationengineering）：是指利用包括工程微生物在內(nèi)的某些微生物或動(dòng)、植物細(xì)胞及其特定功能，通過(guò)現(xiàn)代工程技術(shù)手段（主要是發(fā)酵罐或生物反應(yīng)品的自動(dòng)化、高效化、功能多樣化、大型化）生產(chǎn)各種特定的有用物質(zhì)；或把微生物直接用于某些工業(yè)化生產(chǎn)的一種技術(shù)。由于發(fā)酵多與微生物密切聯(lián)系在一起，所以又稱之為微生物工程或微生物發(fā)酵工程。6.生物反應(yīng)器（bioreactor）：主要包括微生物反應(yīng)器、植物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器以及新發(fā)展起來(lái)的有活體生物反應(yīng)器之稱的轉(zhuǎn)基因植物生物反應(yīng)器，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生物反應(yīng)器等。7.轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：是指在基因組中穩(wěn)定地整合有導(dǎo)入的外源基因的動(dòng)物。8.轉(zhuǎn)基因植物：是指通過(guò)體外重組DNA技術(shù)將外源基因轉(zhuǎn)入到植物細(xì)胞或組織，從而獲得新遺傳特性的再生植物。9.細(xì)胞培養(yǎng)（cellculture）：是指微生物細(xì)胞或動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞在體外無(wú)菌條件下的保存和生長(zhǎng)，即細(xì)胞或組織在體外人工條件下的無(wú)菌培養(yǎng)、生長(zhǎng)增殖。10.抗原：凡能刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應(yīng)答的物質(zhì)均稱為抗原。11.組織培養(yǎng)：指在無(wú)菌和人為控制外因（營(yíng)養(yǎng)成分、光、溫、濕）的條件下，培養(yǎng)研究植物組織、器官，甚至進(jìn)而從中分化發(fā)育出整個(gè)植株的技術(shù)。一、簡(jiǎn)答題（每小題10分，共60分）1.什么是生物技術(shù)，生物技術(shù)的技術(shù)范疇包含哪幾方面？答：1.生物技術(shù)是指人們以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合先進(jìn)的工程技術(shù)手段和其他基礎(chǔ)學(xué)科的科學(xué)原理，利用生物得體或其體系或它們的衍生物來(lái)制造人類所需要的各種產(chǎn)品或達(dá)到某種目的的一門(mén)新興的、綜合性的學(xué)科。2.生物技術(shù)主要包括基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、發(fā)酵工程和生化工程（蛋白質(zhì)工程）5項(xiàng)工程（技術(shù)）。2.什么是細(xì)胞培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素是什么？答：（1）細(xì)胞培養(yǎng)就是使動(dòng)、植物和微生物細(xì)胞在體外無(wú)菌條件下的保存和生長(zhǎng)。（2）細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素有兩個(gè)方面：一是營(yíng)養(yǎng)，包括糖、氨基酸和維生素等；二是生長(zhǎng)環(huán)境，如一定的溫度、濕度、光照、培養(yǎng)液的酸堿度和無(wú)菌條件等。在酶工程中對(duì)酶或細(xì)胞進(jìn)行固定的方法有哪些？答：（1）載體結(jié)合法：將酶結(jié)合在非水溶性的載體上；（2）交聯(lián)法：利用雙功能試劑或多功能試劑的作用使酶與酶或細(xì)胞與細(xì)胞發(fā)生交聯(lián)而進(jìn)行固定化；（3）包埋法：將酶或細(xì)胞包裹在凝膠格子中或由半透膜組成的微囊中。簡(jiǎn)述發(fā)酵工程的基本過(guò)程。答：（1）發(fā)酵原料的預(yù)處理：對(duì)發(fā)酵原料進(jìn)行粉碎、蒸煮、水解等；（2）發(fā)酵過(guò)程的準(zhǔn)備：進(jìn)行種子制備和無(wú)菌消毒；（3）發(fā)酵過(guò)程：由微生物在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中所引起的生化反應(yīng)過(guò)程，分為厭氧性發(fā)酵和好氧性發(fā)酵兩種類型；（4）產(chǎn)品的分離與純化：從發(fā)酵液中制取符合質(zhì)量指標(biāo)的產(chǎn)品。簡(jiǎn)述生物技術(shù)在種植業(yè)的良種繁育中的作用。答：（1）快速無(wú)性繁殖：用植物組織培養(yǎng)的方法將小塊植物組織在室內(nèi)迅速、大規(guī)模繁殖的技術(shù)?？捎糜谏L(zhǎng)緩慢的名貴花卉和珍稀植物的繁殖。（2）人工種子：是一種含有植物胚狀體或芽、營(yíng)養(yǎng)成分、激素及其它成分的人工膠囊。應(yīng)用人工種子有利于保持農(nóng)作物品種優(yōu)良的種性，不受環(huán)境因素制約，進(jìn)行工廠化生產(chǎn)，在人工種皮中還可添加各種有利于胚狀體生長(zhǎng)的成分使作物高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)?？梢杂蒙锛夹g(shù)方法進(jìn)行生產(chǎn)的細(xì)胞因子有哪些？答：（1）白細(xì)胞介素：一組介導(dǎo)免疫細(xì)胞間相互作用的物質(zhì)，是人體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，對(duì)治療腫瘤及感染性疾病起重要作用；（2）促紅細(xì)胞生成素：由腎和胎肝產(chǎn)生的一種細(xì)胞因子，能治療各種原因引起的貧血；（3）集落刺激因子：一類刺激各類造血干細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的細(xì)胞因子；（4）腫瘤壞死因子：可使腫瘤細(xì)胞壞死而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒性，對(duì)多種腫瘤有治療效果。7.基因工程中，把外源基因（目的基因）分離出來(lái)的方法主要有哪些？答：（1）利用限制性內(nèi)切核酸酶酶切法直接分離目的基因（鳥(niǎo)槍法）；（2）利用PCR直接擴(kuò)增目的基因；（3）目的基因的化學(xué)合成；（4）通過(guò)構(gòu)建基因組文庫(kù)或cDNA文庫(kù)分離目的基因。與傳統(tǒng)的技術(shù)相比，生物技術(shù)有什么優(yōu)越性？答：（1）不可取代；（2）快速、精確；（3）低耗、高效；（4）副產(chǎn)物、副作用小，安全性好。簡(jiǎn)述單克隆抗體產(chǎn)生的技術(shù)原理。答：將能產(chǎn)生單一抗體的淋巴細(xì)胞與有增殖能力的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，形成雜交瘤細(xì)胞。由于雜交瘤細(xì)胞繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，因此它們既能表現(xiàn)出淋巴細(xì)胞分泌單一抗體的能力，又能表現(xiàn)出骨髓瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下大量繁殖的能力，從而可通過(guò)大規(guī)模培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體。在酶工程中對(duì)酶或細(xì)胞進(jìn)行固定的方法有哪些？答：（1）載體結(jié)合法：將酶結(jié)合在非水溶性的載體上；（2）交聯(lián)法：利用雙功能試劑或多功能試劑的作用使酶與酶或細(xì)胞與細(xì)胞發(fā)生交聯(lián)而進(jìn)行固定化；（3）包埋法：將酶或細(xì)胞包裹在凝膠格子中或由半透膜組成的微囊中。什么是生物反應(yīng)器，設(shè)計(jì)生物反應(yīng)器時(shí)應(yīng)考慮的因素主要有哪些？答：（1）利用酶或生物體所具有的生物功能，在體外進(jìn)行生化反應(yīng)的裝置系統(tǒng)稱為生物反應(yīng)器。（2）設(shè)計(jì)生物反應(yīng)器應(yīng)考慮的因素有：一是選擇特異性高的酶或特殊生產(chǎn)率高的細(xì)胞，以減少副產(chǎn)物的生成，提高原料利用率；二是盡可能提高產(chǎn)物的濃度，以盡量減少投資和產(chǎn)品后處理的開(kāi)支。簡(jiǎn)述生物技術(shù)在種植業(yè)的品種改良中作用。答：（1）細(xì)胞技術(shù)：應(yīng)用花藥或花粉培養(yǎng)進(jìn)行單倍體育種；誘導(dǎo)、篩選體細(xì)胞突變體，培育抗逆性強(qiáng)、品質(zhì)優(yōu)良的新品種；應(yīng)用原生質(zhì)體融合進(jìn)行體細(xì)胞雜交培育遠(yuǎn)緣雜種，創(chuàng)造新物種；應(yīng)用莖尖培養(yǎng)技術(shù)脫除植物病毒，保持優(yōu)良品種的種性。（2）基因工程：植物抗病基因工程，植物抗蟲(chóng)基因工程，植物抗除草劑基因工程，改良作物品質(zhì)的基因工程，生產(chǎn)有用藥物的基因工程?；蚬こ讨校淹庠椿颍康幕颍┓蛛x出來(lái)的方法主要有哪些？答：（1）利用限制性內(nèi)切核酸酶酶切法直接分離目的基因（鳥(niǎo)槍法）；（2）利用PCR直接擴(kuò)增目的基因；（3）目的基因的化學(xué)合成；（4）通過(guò)構(gòu)建基因組文庫(kù)或cDNA文庫(kù)分離目的基因?；蚬こ坛Ｓ玫墓ぞ呙负洼d體有哪些？答：（1）常用的工具酶有：限制性內(nèi)切酶、DAN連接酶和DNA末端修飾酶；（2）基因工程常用的載體有質(zhì)粒載體、噬菌體和動(dòng)植物病毒載體。簡(jiǎn)述單克隆抗體產(chǎn)生的技術(shù)原理。答：將能產(chǎn)生單一抗體的淋巴細(xì)胞與有增殖能力的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，形成雜交瘤細(xì)胞。由于雜交瘤細(xì)胞繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，因此它們既能表現(xiàn)出淋巴細(xì)胞分泌單一抗體的能力，又能表現(xiàn)出骨髓瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下大量繁殖的能力，從而可通過(guò)大規(guī)模培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體。什么是發(fā)酵工程，發(fā)酵的基本原理是什么？答：（1）發(fā)酵工程是指給微生物提供最適宜的發(fā)酵條件生產(chǎn)特定產(chǎn)品的一種技術(shù)；（2）發(fā)酵工程的基本原理是單一菌種在培養(yǎng)基中的純培養(yǎng)。胚胎分割在動(dòng)物遺傳育種上的重要意義是什么？答：（1）可以成倍地增加胚胎數(shù)量，有利于良種擴(kuò)群，可培育出相同遺傳性狀的同卵孿生動(dòng)物，為藥物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物學(xué)研究生產(chǎn)理想的動(dòng)物；（2）便于深入研究胚胎單個(gè)卵裂球的發(fā)育能力及其全能性，間接控制性別；（3）對(duì)進(jìn)行后裔測(cè)定，誘導(dǎo)母牛產(chǎn)雙犢等都有重要意義。利用生物技術(shù)生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白的原料來(lái)源極為廣泛，概括起來(lái)有四類，試問(wèn)是哪四類？答：（1）糖質(zhì)原料，如淀粉或纖維素的水解液、亞硫酸紙漿廢液、制糖的廢蜜等；（2）石油原料，如柴油、正烷烴、天然氣等；（3）石油化工產(chǎn)品，如醋酸、甲醇、乙醇等；（4）氫氣和碳酸氣。基因工程中，將目的基因?qū)胧荏w后，對(duì)攝入重組DNA分子的轉(zhuǎn)化細(xì)胞進(jìn)行篩選和檢測(cè)的方法有哪些？答：（1）根據(jù)載體選擇標(biāo)記基因篩選轉(zhuǎn)化子；（2）根據(jù)報(bào)告基因篩選轉(zhuǎn)化子；（3）根據(jù)形成的噬菌斑篩選轉(zhuǎn)化子。什么是細(xì)胞培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素是什么？答：（1）細(xì)胞培養(yǎng)就是使動(dòng)、植物和微生物細(xì)胞在體外無(wú)菌條件下的保存和生長(zhǎng)。（2）細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素有兩個(gè)方面：一是營(yíng)養(yǎng)，包括糖、氨基酸和維生素等；二是生長(zhǎng)環(huán)境，如一定的溫度、濕度、光照、培養(yǎng)液的酸堿度和無(wú)菌條件等。在酶工程中對(duì)酶或細(xì)胞進(jìn)行固定的方法有哪些？答：（1）載體結(jié)合法：將酶結(jié)合在非水溶性的載體上；（2）交聯(lián)法：利用雙功能試劑或多功能試劑的作用使酶與酶或細(xì)胞與細(xì)胞發(fā)生交聯(lián)而進(jìn)行固定化；（3）包埋法：將酶或細(xì)胞包裹在凝膠格子中或由半透膜組成的微囊中。簡(jiǎn)述發(fā)酵工程的基本過(guò)程。答：（1）發(fā)酵原料的預(yù)處理：對(duì)發(fā)酵原料進(jìn)行粉碎、蒸煮、水解等；（2）發(fā)酵過(guò)程的準(zhǔn)備：進(jìn)行種子制備和無(wú)菌消毒；（3）發(fā)酵過(guò)程：由微生物在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中所引起的生化反應(yīng)過(guò)程，分為厭氧性發(fā)酵和好氧性發(fā)酵兩種類型；（4）產(chǎn)品的分離與純化：從發(fā)酵液中制取符合質(zhì)量指標(biāo)的產(chǎn)品。什么是有益微生物，它們?cè)谵r(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的有什么作用？答：有益微生物是指對(duì)病菌和害蟲(chóng)有抑制作用，而對(duì)植物有促進(jìn)生長(zhǎng)作用的特殊微生物類群。它們能產(chǎn)生殺菌、殺蟲(chóng)物質(zhì)，與病菌爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)，占據(jù)病蟲(chóng)賴以生存、繁殖的空間，以及通過(guò)自身代謝產(chǎn)物誘導(dǎo)寄主植物增強(qiáng)抗病能力。有益微生物還能產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì)，其中激素可以刺激植物生長(zhǎng)，SOD還可消除植物體內(nèi)的有害自由基，增強(qiáng)生理活性，延緩植物衰老。因此，有益微生物在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中可以用作生物農(nóng)藥來(lái)防治病、蟲(chóng)害?？梢杂蒙锛夹g(shù)方法進(jìn)行生產(chǎn)的細(xì)胞因子有哪些？答：（1）白細(xì)胞介素：一組介導(dǎo)免疫細(xì)胞間相互作用的物質(zhì)，是人體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，對(duì)治療腫瘤及感染性疾病起重要作用；（2）促紅細(xì)胞生成素：由腎和胎肝產(chǎn)生的一種細(xì)胞因子，能治療各種原因引起的貧血；（3）集落刺激因子：一類刺激各類造血干細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的細(xì)胞因子；（4）腫瘤壞死因子：可使腫瘤細(xì)胞壞死而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒性，對(duì)多種腫瘤有治療效果?；蚬こ讨校淹庠椿颍康幕颍┓蛛x出來(lái)的方法主要有哪些？答：（1）利用限制性內(nèi)切核酸酶酶切法直接分離目的基因（鳥(niǎo)槍法）；（2）利用PCR直接擴(kuò)增目的基因；（3）目的基因的化學(xué)合成；（4）通過(guò)構(gòu)建基因組文庫(kù)或cDNA文庫(kù)分離目的基因?；蚬こ坛Ｓ玫墓ぞ呙负洼d體有哪些？答：（1）常用的工具酶有：限制性內(nèi)切酶、DAN連接酶和DNA末端修飾酶；（2）基因工程常用的載體有質(zhì)粒載體、噬菌體和動(dòng)植物病毒載體。簡(jiǎn)述單克隆抗體產(chǎn)生的技術(shù)原理。答：將能產(chǎn)生單一抗體的淋巴細(xì)胞與有增殖能力的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，形成雜交瘤細(xì)胞。由于雜交瘤細(xì)胞繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，因此它們既能表現(xiàn)出淋巴細(xì)胞分泌單一抗體的能力，又能表現(xiàn)出骨髓瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下大量繁殖的能力，從而可通過(guò)大規(guī)模培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體。什么是發(fā)酵工程，發(fā)酵的基本原理是什么？答：（1）發(fā)酵工程是指給微生物提供最適宜的發(fā)酵條件生產(chǎn)特定產(chǎn)品的一種技術(shù)；（2）發(fā)酵工程的基本原理是單一菌種在培養(yǎng)基中的純培養(yǎng)。胚胎分割在動(dòng)物遺傳育種上的重要意義是什么？答：（1）可以成倍地增加胚胎數(shù)量，有利于良種擴(kuò)群，可培育出相同遺傳性狀的同卵孿生動(dòng)物，為藥物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物學(xué)研究生產(chǎn)理想的動(dòng)物；（2）便于深入研究胚胎單個(gè)卵裂球的發(fā)育能力及其全能性，間接控制性別；（3）對(duì)進(jìn)行后裔測(cè)定，誘導(dǎo)母牛產(chǎn)雙犢等都有重要意義。利用生物技術(shù)生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白的原料來(lái)源極為廣泛，概括起來(lái)有四類，試問(wèn)是哪四類？答：（1）糖質(zhì)原料，如淀粉或纖維素的水解液、亞硫酸紙漿廢液、制糖的廢蜜等；（2）石油原料，如柴油、正烷烴、天然氣等；（3）石油化工產(chǎn)品，如醋酸、甲醇、乙醇等；（4）氫氣和碳酸氣。基因工程中將目的基因?qū)胧荏w所用的載體要求的條件是什么？答：（1）具有允許外源DNA片段組入的克隆位點(diǎn)(限制性內(nèi)切核酸酶的識(shí)別序列)；（2）能攜帶外源DNA片段（基因）進(jìn)入受體細(xì)胞，或停留在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行自我復(fù)制；或整合到染色體DNA、線粒體DNA和葉綠體DNA中，隨這些DNA同步復(fù)制；（3）必須具有選擇性標(biāo)記，以便篩選克隆子。什么是細(xì)胞工程，細(xì)胞工程包括哪幾個(gè)方面內(nèi)容？答：（1）細(xì)胞工程是采用類似工程設(shè)計(jì)的方法，運(yùn)用精巧的細(xì)胞學(xué)技術(shù)，有計(jì)劃地改造細(xì)胞的遺傳結(jié)構(gòu)，從而培育出人們所需要的動(dòng)植物品種或具有某些新性狀的細(xì)胞群體的過(guò)程。（2）細(xì)胞工程包括動(dòng)植物細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)、細(xì)胞重組技術(shù)及遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移技術(shù)等四個(gè)方面。什么是生物反應(yīng)器，設(shè)計(jì)生物反應(yīng)器時(shí)應(yīng)考慮的因素主要有哪些？答：（1）利用酶或生物體所具有的生物功能，在體外進(jìn)行生化反應(yīng)的裝置系統(tǒng)稱為生物反應(yīng)器。（2）設(shè)計(jì)生物反應(yīng)器應(yīng)考慮的因素有：一是選擇特異性高的酶或特殊生產(chǎn)率高的細(xì)胞，以減少副產(chǎn)物的生成，提高原料利用率；二是盡可能提高產(chǎn)物的濃度，以盡量減少投資和產(chǎn)品后處理的開(kāi)支。簡(jiǎn)述發(fā)酵工程在現(xiàn)代食品工業(yè)中的作用。答：（1）利用微生物菌體發(fā)酵生產(chǎn)微生物蛋白；（2）利用微生物酶發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖；（3）利用微生物代謝產(chǎn)物發(fā)酵生產(chǎn)氨基酸、奶制品、飲料、酒類、和食品添加劑等。簡(jiǎn)述生物技術(shù)在畜禽疾病防治中的作用。答：（1）應(yīng)用核酸探針技術(shù)進(jìn)行畜禽傳染性疾病的診斷，檢測(cè)潛伏感染和帶菌動(dòng)物，研究疾病發(fā)生機(jī)制和進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查等；（2）應(yīng)用單克隆抗體技術(shù)進(jìn)行動(dòng)物疾病的診斷和治療；（3）研制基因工程疫苗，包括細(xì)胞基因工程疫苗、病毒基因工程疫苗、寄生蟲(chóng)基因工程疫苗和真菌基因工程疫苗，防治動(dòng)物疾病。利用生物技術(shù)開(kāi)發(fā)出來(lái)的對(duì)食品衛(wèi)生快速檢查的方法有哪些？答：酶免疫分析法、放射免疫分析法、單克隆抗體法和DNA探針?lè)ǖ取Ｅc傳統(tǒng)的技術(shù)相比，生物技術(shù)有什么優(yōu)越性？答：（1）不可取代；（2）快速、精確；（3）低耗、高效；（4）副產(chǎn)物、副作用小，安全性好。簡(jiǎn)述在基因工程中目的基因與載體結(jié)合的重組工藝過(guò)程。答：用同一種限制性內(nèi)切核酸酶切割含有目的基因的外源DNA和載體DNA，產(chǎn)生具相同粘性末端的DNA片段，在DNA連接酶的作用下，載體切口的粘性末端與目的基因DNA片段兩端的粘性末端即可因堿基配對(duì)互補(bǔ)結(jié)合而形成重組DNA分子。簡(jiǎn)述細(xì)胞重組（重建）的主要內(nèi)容和方法。答：（1）核移植：借助顯微操作儀，在顯微鏡下用微吸管將一個(gè)細(xì)胞中的細(xì)胞核吸出直接稱到另一個(gè)去核的細(xì)胞中。（2）葉綠體移植：將分離純化的葉綠體與原生質(zhì)體共培養(yǎng)，通過(guò)細(xì)胞的胞飲作用將葉綠體攝入原生質(zhì)體，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)，原生質(zhì)體再生成完整植株；（3）線粒體移植：利用顯微注射、載體轉(zhuǎn)移、胞飲攝入等方法進(jìn)行移植。在生物技術(shù)的酶工程中，為什么固定化細(xì)胞比固定化酶應(yīng)用更為普遍？答：（1）固定化細(xì)胞省去了破碎細(xì)胞提取酶的步驟，酶在細(xì)胞內(nèi)環(huán)境中穩(wěn)定性較高，進(jìn)行完整細(xì)胞固定化時(shí)，酶活力損失較少。（2）保留了細(xì)胞內(nèi)原有的多酶系統(tǒng)，對(duì)于多步催化轉(zhuǎn)換的反應(yīng)優(yōu)勢(shì)明顯，應(yīng)用固定化細(xì)胞生物反應(yīng)器可將發(fā)酵工藝改為連續(xù)酶法反應(yīng)，從而降低制造成本。簡(jiǎn)述生物技術(shù)在種植業(yè)的良種繁育中的作用。答：（1）快速無(wú)性繁殖：用植物組織培養(yǎng)的方法將小塊植物組織在室內(nèi)迅速、大規(guī)模繁殖的技術(shù)?？捎糜谏L(zhǎng)緩慢的名貴花卉和珍稀植物的繁殖。（2）人工種子：是一種含有植物胚狀體或芽、營(yíng)養(yǎng)成分、激素及其它成分的人工膠囊。應(yīng)用人工種子有利于保持農(nóng)作物品種優(yōu)良的種性，不受環(huán)境因素制約，進(jìn)行工廠化生產(chǎn)，在人工種皮中還可添加各種有利于胚狀體生長(zhǎng)的成分使作物高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)。應(yīng)用生物技術(shù)的方法可將農(nóng)作物秸稈直接轉(zhuǎn)化為哪些可再生的資源。答：（1）利用微生物發(fā)酵可將農(nóng)作物秸稈轉(zhuǎn)化為乙醇，作為能源，還可生產(chǎn)丙酮、丁醇等化工原料；（2）可將農(nóng)作物秸稈進(jìn)行微生物厭氧發(fā)酵生產(chǎn)甲烷，作為燃料；（3）還可利用微生物菌體發(fā)酵將農(nóng)作物秸稈轉(zhuǎn)化為單細(xì)胞蛋白，作為食品與飼料的新來(lái)源。什么是生物技術(shù)，生物技術(shù)的技術(shù)范疇包括哪幾方面？答：利用生物有機(jī)體（從微生物到高等動(dòng)、植物）或其組成部分（包括器官、組織、細(xì)胞或細(xì)胞器等）發(fā)展新產(chǎn)品或新工藝的一種技術(shù)體系。生物技術(shù)包括基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、發(fā)酵工程等方面。基因工程中，目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)的正確表達(dá)主要受哪些因素影響？答：（1）目的基因必須必處于正確的閱讀框架中；（2）目的基因的閱讀框架與載體DNA的起始密碼子相吻合；（3）載體的目的基因上游必須連有一個(gè)適當(dāng)?shù)膯?dòng)子；（4）目的基因的蛋白質(zhì)產(chǎn)物能在受體細(xì)胞內(nèi)形成融合蛋白。簡(jiǎn)述植物細(xì)胞融合與動(dòng)物細(xì)胞融合的區(qū)別。答：（1）植物細(xì)胞有細(xì)胞壁，需要先用纖維素酶去壁，形成原生質(zhì)體后，才能進(jìn)行細(xì)胞融合；（2）植物細(xì)胞融合后形成的雜種細(xì)胞，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后有可能分化發(fā)育成植株，而動(dòng)物細(xì)胞的雜種細(xì)胞則缺乏這種能力。簡(jiǎn)述酶工程在消除污染、保護(hù)環(huán)境中的作用。答：（1）環(huán)境監(jiān)測(cè)：利用固定化酶進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測(cè)，測(cè)定有毒物質(zhì)的含量，如用固定化多酚氧化酶檢測(cè)水中的酚類物質(zhì)；利用固定化酶還可檢測(cè)有機(jī)磷、有機(jī)氯農(nóng)藥和其它痕量的環(huán)境污染物。（2）處理三廢：應(yīng)用固定化酶或固定化細(xì)胞可以組成快速、高效、連續(xù)運(yùn)行的污水處理系統(tǒng)和大氣凈化系統(tǒng)。簡(jiǎn)述生物技術(shù)在種植業(yè)的品種改良中作用。答：（1）細(xì)胞技術(shù)：應(yīng)用花藥或花粉培養(yǎng)進(jìn)行單倍體育種；誘導(dǎo)、篩選體細(xì)胞突變體，培育抗逆性強(qiáng)、品質(zhì)優(yōu)良的新品種；應(yīng)用原生質(zhì)體融合進(jìn)行體細(xì)胞雜交培育遠(yuǎn)緣雜種，創(chuàng)造新物種；應(yīng)用莖尖培養(yǎng)技術(shù)脫除植物病毒，保持優(yōu)良品種的種性。（2）基因工程：植物抗病基因工程，植物抗蟲(chóng)基因工程，植物抗除草劑基因工程，改良作物品質(zhì)的基因工程，生產(chǎn)有用藥物的基因工程。用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)“轉(zhuǎn)基因藥物”與用微生物等生產(chǎn)的基因工程藥物比較，其優(yōu)點(diǎn)有哪些？答：（1）產(chǎn)量高：利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因藥物可達(dá)每升乳汁幾十克，而用微生物生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因藥物在每升培養(yǎng)液中只能獲得幾毫克。（2）成本低：用微生物或動(dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)基因工程藥物所用的生物反應(yīng)器要求非常精密，反應(yīng)條件都由傳感器指示，全自動(dòng)控制，因而價(jià)格昂貴。而轉(zhuǎn)基因動(dòng)物只需正常的飼養(yǎng)條件，耗資極少。（3）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)的產(chǎn)品具有與人體自身產(chǎn)生的蛋白質(zhì)相同的生物學(xué)活性。基因工程中，把外源基因（目的基因）分離出來(lái)的方法主要有哪些？答：（1）利用限制性內(nèi)切核酸酶酶切法直接分離目的基因（鳥(niǎo)槍法）；（2）利用PCR直接擴(kuò)增目的基因；（3）目的基因的化學(xué)合成；（4）通過(guò)構(gòu)建基因組文庫(kù)或cDNA文庫(kù)分離目的基因。與傳統(tǒng)的技術(shù)相比，生物技術(shù)有什么優(yōu)越性？答：（1）不可取代；（2）快速、精確；（3）低耗、高效；（4）副產(chǎn)物、副作用小，安全性好。簡(jiǎn)述單克隆抗體產(chǎn)生的技術(shù)原理。答：將能產(chǎn)生單一抗體的淋巴細(xì)胞與有增殖能力的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，形成雜交瘤細(xì)胞。由于雜交瘤細(xì)胞繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，因此它們既能表現(xiàn)出淋巴細(xì)胞分泌單一抗體的能力，又能表現(xiàn)出骨髓瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下大量繁殖的能力，從而可通過(guò)大規(guī)模培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體。在酶工程中對(duì)酶或細(xì)胞進(jìn)行固定的方法有哪些？答：（1）載體結(jié)合法：將酶結(jié)合在非水溶性的載體上；（2）交聯(lián)法：利用雙功能試劑或多功能試劑的作用使酶與酶或細(xì)胞與細(xì)胞發(fā)生交聯(lián)而進(jìn)行固定化；（3）包埋法：將酶或細(xì)胞包裹在凝膠格子中或由半透膜組成的微囊中。什么是生物反應(yīng)器，設(shè)計(jì)生物反應(yīng)器時(shí)應(yīng)考慮的因素主要有哪些？答：（1）利用酶或生物體所具有的生物功能，在體外進(jìn)行生化反應(yīng)的裝置系統(tǒng)稱為生物反應(yīng)器。（2）設(shè)計(jì)生物反應(yīng)器應(yīng)考慮的因素有：一是選擇特異性高的酶或特殊生產(chǎn)率高的細(xì)胞，以減少副產(chǎn)物的生成，提高原料利用率；二是盡可能提高產(chǎn)物的濃度，以盡量減少投資和產(chǎn)品后處理的開(kāi)支。簡(jiǎn)述生物技術(shù)在種植業(yè)的品種改良中作用。答：（1）細(xì)胞技術(shù)：應(yīng)用花藥或花粉培養(yǎng)進(jìn)行單倍體育種；誘導(dǎo)、篩選體細(xì)胞突變體，培育抗逆性強(qiáng)、品質(zhì)優(yōu)良的新品種；應(yīng)用原生質(zhì)體融合進(jìn)行體細(xì)胞雜交培育遠(yuǎn)緣雜種，創(chuàng)造新物種；應(yīng)用莖尖培養(yǎng)技術(shù)脫除植物病毒，保持優(yōu)良品種的種性。（2）基因工程：植物抗病基因工程，植物抗蟲(chóng)基因工程，植物抗除草劑基因工程，改良作物品質(zhì)的基因工程，生產(chǎn)有用藥物的基因工程。什么是生物技術(shù)，生物技術(shù)的技術(shù)范疇包含哪幾方面？答：1.生物技術(shù)是指人們以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合先進(jìn)的工程技術(shù)手段和其他基礎(chǔ)學(xué)科的科學(xué)原理，利用生物得體或其體系或它們的衍生物來(lái)制造人類所需要的各種產(chǎn)品或達(dá)到某種目的的一門(mén)新興的、綜合性的學(xué)科。2.生物技術(shù)主要包括基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、發(fā)酵工程和生化工程（蛋白質(zhì)工程）5項(xiàng)工程（技術(shù)）。2.什么是細(xì)胞培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素是什么？答：（1）細(xì)胞培養(yǎng)就是使動(dòng)、植物和微生物細(xì)胞在體外無(wú)菌條件下的保存和生長(zhǎng)。（2）細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素有兩個(gè)方面：一是營(yíng)養(yǎng)，包括糖、氨基酸和維生素等；二是生長(zhǎng)環(huán)境，如一定的溫度、濕度、光照、培養(yǎng)液的酸堿度和無(wú)菌條件等。在酶工程中對(duì)酶或細(xì)胞進(jìn)行固定的方法有哪些？答：（1）載體結(jié)合法：將酶結(jié)合在非水溶性的載體上；（2）交聯(lián)法：利用雙功能試劑或多功能試劑的作用使酶與酶或細(xì)胞與細(xì)胞發(fā)生交聯(lián)而進(jìn)行固定化；（3）包埋法：將酶或細(xì)胞包裹在凝膠格子中或由半透膜組成的微囊中。簡(jiǎn)述發(fā)酵工程的基本過(guò)程。答：（1）發(fā)酵原料的預(yù)處理：對(duì)發(fā)酵原料進(jìn)行粉碎、蒸煮、水解等；（2）發(fā)酵過(guò)程的準(zhǔn)備：進(jìn)行種子制備和無(wú)菌消毒；（3）發(fā)酵過(guò)程：由微生物在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中所引起的生化反應(yīng)過(guò)程，分為厭氧性發(fā)酵和好氧性發(fā)酵兩種類型；（4）產(chǎn)品的分離與純化：從發(fā)酵液中制取符合質(zhì)量指標(biāo)的產(chǎn)品。簡(jiǎn)述生物技術(shù)在種植業(yè)的良種繁育中的作用。答：（1）快速無(wú)性繁殖：用植物組織培養(yǎng)的方法將小塊植物組織在室內(nèi)迅速、大規(guī)模繁殖的技術(shù)。可用于生長(zhǎng)緩慢的名貴花卉和珍稀植物的繁殖。（2）人工種子：是一種含有植物胚狀體或芽、營(yíng)養(yǎng)成分、激素及其它成分的人工膠囊。應(yīng)用人工種子有利于保持農(nóng)作物品種優(yōu)良的種性，不受環(huán)境因素制約，進(jìn)行工廠化生產(chǎn)，在人工種皮中還可添加各種有利于胚狀體生長(zhǎng)的成分使作物高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)。可以用生物技術(shù)方法進(jìn)行生產(chǎn)的細(xì)胞因子有哪些？答：（1）白細(xì)胞介素：一組介導(dǎo)免疫細(xì)胞間相互作用的物質(zhì)，是人體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，對(duì)治療腫瘤及感染性疾病起重要作用；（2）促紅細(xì)胞生成素：由腎和胎肝產(chǎn)生的一種細(xì)胞因子，能治療各種原因引起的貧血；（3）集落刺激因子：一類刺激各類造血干細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的細(xì)胞因子；（4）腫瘤壞死因子：可使腫瘤細(xì)胞壞死而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒性，對(duì)多種腫瘤有治療效果。生物技術(shù)在農(nóng)業(yè)植業(yè)中的意義或作用是什么？答：（1）培育抗逆的作用優(yōu)良品系；（2）植物種苗的工廠化生產(chǎn)；（3）提高糧食品質(zhì)；（4）生物固氮，減少化肥使用量。簡(jiǎn)述生物技術(shù)在種植業(yè)的良種繁育中的作用答：植物細(xì)胞培養(yǎng)和組織培養(yǎng)技術(shù)可以不經(jīng)過(guò)有性世代過(guò)程。直接取營(yíng)養(yǎng)體細(xì)胞或外植體，在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液或培養(yǎng)基中短時(shí)間內(nèi)由愈傷組織誘導(dǎo)產(chǎn)生幼苗從而再生出植株，進(jìn)行快速無(wú)性繁殖，另外，植物再生技術(shù)在生產(chǎn)不帶病原菌的植物無(wú)性系，保存珍貴的植物種質(zhì)資源地發(fā)揮著重要作用。論述生物技術(shù)在食品工業(yè)中的作用？答：（1）開(kāi)辟新的食品資源：利用微生物菌體發(fā)酵生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白；應(yīng)用微生物酶工程生產(chǎn)高果糖漿、飴糖、麥芽糖、高麥芽糖漿、麥芽糊精、偶聯(lián)糖等淀粉糖產(chǎn)品。（2）提高食品品質(zhì)：利用發(fā)酵工程、酶工程技術(shù)生產(chǎn)酸味劑、甜味劑和鮮味劑等食品添加劑。在肉類和魚(yú)類加工中應(yīng)用酶來(lái)改善組織，嫩化肉類和轉(zhuǎn)化廢棄蛋白質(zhì)。在乳品加工中應(yīng)用酶進(jìn)行干酪生產(chǎn)、分解乳糖和黃油增香。在果蔬加工中應(yīng)用酶進(jìn)行柑橘脫苦、果汁澄清和果蔬保藏等。在飲料、釀酒工業(yè)中應(yīng)用酶發(fā)酵生產(chǎn)各種飲料。在焙烤食品生產(chǎn)中應(yīng)用淀粉酶和蛋白酶來(lái)提高焙烤品質(zhì)和增加香味。（3）食品衛(wèi)生檢測(cè)：酶免疫分析法、放射免疫分析法、單克隆抗體法和DNA探針?lè)ㄓ糜跈z測(cè)食品中的沙門(mén)氏桿菌等。（4）食品脫毒：利用發(fā)酵法、酶解法等對(duì)食品中的有毒糖苷類物質(zhì)（硫代葡萄糖苷）、寡糖（β-半乳糖苷）和棉酚等進(jìn)行處理，以脫除有毒物質(zhì)。試論述生物技術(shù)與醫(yī)藥衛(wèi)生的關(guān)系？答：（1）疫苗生產(chǎn)：病原體減毒或弱化疫苗、基因工程疫苗和核酸疫苗。病原體減毒和弱化疫苗是利用微生物的純種培養(yǎng)技術(shù)以及減毒疫苗的制備技術(shù)來(lái)生產(chǎn)的，是以減毒或弱化的病原體作為疫苗?；蚬こ桃呙缡菍⒉≡w的抗原基因克隆在細(xì)菌或真核細(xì)胞內(nèi)，利用細(xì)菌或細(xì)胞生產(chǎn)病原體的抗原，利用抗原作為疫苗。而核酸疫苗則是將含有編碼蛋白質(zhì)基因序列的質(zhì)粒載體，經(jīng)肌肉注射或微彈轟擊等方法導(dǎo)入體內(nèi)，通過(guò)宿主細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)抗原蛋白質(zhì)，誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生對(duì)抗該抗原蛋白的免疫應(yīng)答，以達(dá)到預(yù)防和治療疾病的目的。（2）疾病診斷：?jiǎn)慰寺】贵w與ELISA技術(shù)用于診斷傳染性疾病、檢測(cè)腫瘤相關(guān)基因、確定激素水平、檢驗(yàn)血液中的藥物含量及鑒定微生物病原體。DNA診斷技術(shù)可用于診斷遺傳性疾病、腫瘤和傳染性疾病。（3）生物制藥與基因工程藥物：利用微生物發(fā)酵可生產(chǎn)各種抗生素。利用植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)可生產(chǎn)天然藥物，如紫草寧、紫杉醇、人參皂苷、強(qiáng)心苷、胡蘿卜素等。利用單克隆抗體制備技術(shù)可制備用于腫瘤治療的“生物導(dǎo)彈”。利用基因工程技術(shù)可以生產(chǎn)基因工程藥物，如人胰島素、人生長(zhǎng)激素、人干擾素、細(xì)胞因子（白細(xì)胞介素、促紅細(xì)胞生成素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子等）、生長(zhǎng)因子（表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、血小板來(lái)源生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子）、溶血栓劑、SOD、凝血因子等。（4）基因治療：向有基因缺陷的細(xì)胞導(dǎo)入外源基因，以達(dá)到治療目的?；蛑委熆捎糜谶z傳性疾病及腫瘤的治療。試述現(xiàn)代生物技術(shù)在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用及意義。答：（1）動(dòng)物疾病防治：應(yīng)用核酸探針技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)和基因工程疫苗有效地防治動(dòng)物疾病。（2）培育優(yōu)良的動(dòng)物品種：利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將與動(dòng)物優(yōu)良品質(zhì)有關(guān)的基因轉(zhuǎn)移到動(dòng)物體內(nèi)，使動(dòng)物獲得新的品質(zhì)。（3）動(dòng)物的大量快速無(wú)性繁殖：利用人工授精、胚胎移植、胚胎分割、體外生產(chǎn)胚胎和性別控制等技術(shù)大量快速繁殖動(dòng)物優(yōu)良品種。（4）優(yōu)質(zhì)動(dòng)物飼料的生產(chǎn)：應(yīng)用基因工程進(jìn)行DNA重組生長(zhǎng)激素的研制與應(yīng)用可提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速率、飼料轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)奶量、瘦肉率等；應(yīng)用發(fā)酵工程技術(shù)和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)飼用酶制劑、添補(bǔ)氨基酸、飼用維生素、抗生素和益生菌、寡肽和寡糖、有機(jī)微量元素和天然植物提取物等各種飼料添加劑。試述生物技術(shù)在環(huán)境污治理方面的應(yīng)用。答：（1）生化強(qiáng)化處理技術(shù)：采用各種生物、物理和化學(xué)的方法來(lái)強(qiáng)化活性污泥法進(jìn)行污水處理的處理能力和降解效果，包括高濃度活性污泥法、生物-鐵法、粉末活性炭法。（2）上流式厭氧污泥床法（UASB法）：UASB法是以反應(yīng)器為核心的污水處理方法，該方法的反應(yīng)器體積大，具有快速高效厭氧處理有機(jī)廢水的性能，沉降性能、產(chǎn)甲烷和降解有機(jī)物的性能都很高，化學(xué)需氧量（COD）去除率高達(dá)80%～90%。（3）水解—好氧生物處理工藝（H/O法）：利用兼性的水解——產(chǎn)酸菌將廢水中懸浮物水解成可溶性物質(zhì)，將難降解的大分子分解為小分子，因而用于處理工業(yè)廢水效果顯著。（4）生物除磷脫氮技術(shù)：利用微生物“硝化—反硝化（脫氮）”的原理脫除水體中的氮素，利用聚磷微生物（如假單胞菌屬）超量攝取磷來(lái)除去污水中的磷，使污水得以凈化。（5）間隙式活性污泥法（SBR法）：在一個(gè)設(shè)有攪拌和曝氣裝置的反應(yīng)槽內(nèi)依次進(jìn)行進(jìn)水—反應(yīng)—沉淀—排水—待料等5個(gè)基本過(guò)程，在進(jìn)水階段和反應(yīng)階段可根據(jù)廢水性質(zhì)進(jìn)行多種好氧（曝氣）和厭氧（攪拌）組合的操作，以達(dá)到去除生物需氧量（BOD）、硝化或脫氮除磷的凈化目標(biāo)。（6）空氣凈化生物技術(shù)：用生物過(guò)濾法、生物洗滌法和生物吸收法等方法來(lái)處理廢氣和凈化空氣。（7）有機(jī)廢物快速堆肥和發(fā)酵技術(shù)：運(yùn)用生物技術(shù)對(duì)固體廢物進(jìn)行“無(wú)害化、資源化和減量化”處理，以變廢為寶化害為利，如對(duì)有機(jī)廢物進(jìn)行堆肥處理，可使這類廢物成為優(yōu)良的土壤改良劑和優(yōu)質(zhì)肥料。（8）廢纖維素糖化、蛋白化和乙醇化技術(shù)：利用纖維素酶酶解纖維素廢料可以生產(chǎn)糖類（如葡萄糖）；利用纖維素廢料可生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白，用生物方法處理廢纖維素還可生產(chǎn)工藝乙醇。（9）酵母循環(huán)系統(tǒng)：利用酵母菌—活性污泥二段式好氧處理系統(tǒng)處理食品廢水，生產(chǎn)性能高，COD去除率可達(dá)95%以上，BOD去除率可達(dá)99%。簡(jiǎn)述發(fā)酵工程的基本過(guò)程答：首先必須從必然界分離得到能生產(chǎn)所需產(chǎn)物的菌種，并經(jīng)分離、純化及選育后或是經(jīng)基因工程改造后的“工程菌”，才能供給發(fā)酵使用，然后將處于休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種，通過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)而獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種。第三是進(jìn)行無(wú)菌狀態(tài)下進(jìn)行純種培養(yǎng)，微生物合成大量產(chǎn)物的過(guò)程，第四，發(fā)酵結(jié)束后，要對(duì)發(fā)酵液或生物細(xì)胞進(jìn)行分離和提取精制，將發(fā)酵產(chǎn)物制成合乎要求的成品。簡(jiǎn)述基因工程基本步驟？答：①獲得目的基因；②載體與目的基因重組；③轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞；④重組體篩選簡(jiǎn)述發(fā)酵工程在現(xiàn)代食品工業(yè)中的作用？答：食品和飲料的發(fā)酵是通過(guò)微生物或酶對(duì)農(nóng)產(chǎn)品原料的作用，發(fā)生相關(guān)的化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生更有營(yíng)養(yǎng)、更易消化、口味更好，無(wú)病原微生物，無(wú)毒害的產(chǎn)物，如：酒精飲料，用糖類物質(zhì)和淀粉類物質(zhì)與適當(dāng)?shù)奈⑸镆黄疳j釀，提供出酵條件，最終得到含有多種成分，酒精含量從百分之幾到更高的酒，②奶制品，乳酸桿菌在奶中生長(zhǎng)時(shí)，將乳糖變?yōu)槿樗?，及其他反?yīng)，使奶制品具有獨(dú)特的口味和外觀。③水果和蔬菜可以用鹽和酸保存，而酸主要是細(xì)胞產(chǎn)生的乳酸；④谷類發(fā)酵食品是面包。細(xì)胞全能性學(xué)說(shuō)的基本內(nèi)容是什么及在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用答：即個(gè)體或組織、器官已經(jīng)分化的細(xì)胞在適宜的培養(yǎng)條件下具有再生成完整個(gè)體的遺傳潛能。二、論述題（每小題20分，共40分）論述生物技術(shù)在食品工業(yè)中的作用？答：（1）開(kāi)辟新的食品資源：利用微生物菌體發(fā)酵生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白；應(yīng)用微生物酶工程生產(chǎn)高果糖漿、飴糖、麥芽糖、高麥芽糖漿、麥芽糊精、偶聯(lián)糖等淀粉糖產(chǎn)品。（2）提高食品品質(zhì)：利用發(fā)酵工程、酶工程技術(shù)生產(chǎn)酸味劑、甜味劑和鮮味劑等食品添加劑。在肉類和魚(yú)類加工中應(yīng)用酶來(lái)改善組織，嫩化肉類和轉(zhuǎn)化廢棄蛋白質(zhì)。在乳品加工中應(yīng)用酶進(jìn)行干酪生產(chǎn)、分解乳糖和黃油增香。在果蔬加工中應(yīng)用酶進(jìn)行柑橘脫苦、果汁澄清和果蔬保藏等。在飲料、釀酒工業(yè)中應(yīng)用酶發(fā)酵生產(chǎn)各種飲料。在焙烤食品生產(chǎn)中應(yīng)用淀粉酶和蛋白酶來(lái)提高焙烤品質(zhì)和增加香味。（3）食品衛(wèi)生檢測(cè)：酶免疫分析法、放射免疫分析法、單克隆抗體法和DNA探針?lè)ㄓ糜跈z測(cè)食品中的沙門(mén)氏桿菌等。（4）食品脫毒：利用發(fā)酵法、酶解法等對(duì)食品中的有毒糖苷類物質(zhì)（硫代葡萄糖苷）、寡糖（β-半乳糖苷）和棉酚等進(jìn)行處理，以脫除有毒物質(zhì)。試論述生物技術(shù)與醫(yī)藥衛(wèi)生的關(guān)系？答：（1）疫苗生產(chǎn)：病原體減毒或弱化疫苗、基因工程疫苗和核酸疫苗。病原體減毒和弱化疫苗是利用微生物的純種培養(yǎng)技術(shù)以及減毒疫苗的制備技術(shù)來(lái)生產(chǎn)的，是以減毒或弱化的病原體作為疫苗。基因工程疫苗是將病原體的抗原基因克隆在細(xì)菌或真核細(xì)胞內(nèi)，利用細(xì)菌或細(xì)胞生產(chǎn)病原體的抗原，利用抗原作為疫苗。而核酸疫苗則是將含有編碼蛋白質(zhì)基因序列的質(zhì)粒載體，經(jīng)肌肉注射或微彈轟擊等方法導(dǎo)入體內(nèi)，通過(guò)宿主細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)抗原蛋白質(zhì)，誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生對(duì)抗該抗原蛋白的免疫應(yīng)答，以達(dá)到預(yù)防和治療疾病的目的。（2）疾病診斷：?jiǎn)慰寺】贵w與ELISA技術(shù)用于診斷傳染性疾病、檢測(cè)腫瘤相關(guān)基因、確定激素水平、檢驗(yàn)血液中的藥物含量及鑒定微生物病原體。DNA診斷技術(shù)可用于診斷遺傳性疾病、腫瘤和傳染性疾病。（3）生物制藥與基因工程藥物：利用微生物發(fā)酵可生產(chǎn)各種抗生素。利用植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)可生產(chǎn)天然藥物，如紫草寧、紫杉醇、人參皂苷、強(qiáng)心苷、胡蘿卜素等。利用單克隆抗體制備技術(shù)可制備用于腫瘤治療的“生物導(dǎo)彈”。利用基因工程技術(shù)可以生產(chǎn)基因工程藥物，如人胰島素、人生長(zhǎng)激素、人干擾素、細(xì)胞因子（白細(xì)胞介素、促紅細(xì)胞生成素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子等）、生長(zhǎng)因子（表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、血小板來(lái)源生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子）、溶血栓劑、SOD、凝血因子等。（4）基因治療：向有基因缺陷的細(xì)胞導(dǎo)入外源基因，以達(dá)到治療目的?；蛑委熆捎糜谶z傳性疾病及腫瘤的治療。1.試述現(xiàn)代生物技術(shù)在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用及意義。答：（1）動(dòng)物疾病防治：應(yīng)用核酸探針技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)和基因工程疫苗有效地防治動(dòng)物疾病。（2）培育優(yōu)良的動(dòng)物品種：利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將與動(dòng)物優(yōu)良品質(zhì)有關(guān)的基因轉(zhuǎn)移到動(dòng)物體內(nèi)，使動(dòng)物獲得新的品質(zhì)。（3）動(dòng)物的大量快速無(wú)性繁殖：利用人工授精、胚胎移植、胚胎分割、體外生產(chǎn)胚胎和性別控制等技術(shù)大量快速繁殖動(dòng)物優(yōu)良品種。（4）優(yōu)質(zhì)動(dòng)物飼料的生產(chǎn)：應(yīng)用基因工程進(jìn)行DNA重組生長(zhǎng)激素的研制與應(yīng)用可提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速率、飼料轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)奶量、瘦肉率等；應(yīng)用發(fā)酵工程技術(shù)和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)飼用酶制劑、添補(bǔ)氨基酸、飼用維生素、抗生素和益生菌、寡肽和寡糖、有機(jī)微量元素和天然植物提取物等各種飼料添加劑。試述生物技術(shù)在環(huán)境污治理方面的應(yīng)用。答：（1）生化強(qiáng)化處理技術(shù)：采用各種生物、物理和化學(xué)的方法來(lái)強(qiáng)化活性污泥法進(jìn)行污水處理的處理能力和降解效果，包括高濃度活性污泥法、生物-鐵法、粉末活性炭法。（2）上流式厭氧污泥床法（UASB法）：UASB法是以反應(yīng)器為核心的污水處理方法，該方法的反應(yīng)器體積大，具有快速高效厭氧處理有機(jī)廢水的性能，沉降性能、產(chǎn)甲烷和降解有機(jī)物的性能都很高，化學(xué)需氧量（COD）去除率高達(dá)80%～90%。（3）水解—好氧生物處理工藝（H/O法）：利用兼性的水解——產(chǎn)酸菌將廢水中懸浮物水解成可溶性物質(zhì)，將難降解的大分子分解為小分子，因而用于處理工業(yè)廢水效果顯著。（4）生物除磷脫氮技術(shù)：利用微生物“硝化—反硝化（脫氮）”的原理脫除水體中的氮素，利用聚磷微生物（如假單胞菌屬）超量攝取磷來(lái)除去污水中的磷，使污水得以凈化。（5）間隙式活性污泥法（SBR法）：在一個(gè)設(shè)有攪拌和曝氣裝置的反應(yīng)槽內(nèi)依次進(jìn)行進(jìn)水—反應(yīng)—沉淀—排水—待料等5個(gè)基本過(guò)程，在進(jìn)水階段和反應(yīng)階段可根據(jù)廢水性質(zhì)進(jìn)行多種好氧（曝氣）和厭氧（攪拌）組合的操作，以達(dá)到去除生物需氧量（BOD）、硝化或脫氮除磷的凈化目標(biāo)。（6）空氣凈化生物技術(shù)：用生物過(guò)濾法、生物洗滌法和生物吸收法等方法來(lái)處理廢氣和凈化空氣。（7）有機(jī)廢物快速堆肥和發(fā)酵技術(shù)：運(yùn)用生物技術(shù)對(duì)固體廢物進(jìn)行“無(wú)害化、資源化和減量化”處理，以變廢為寶化害為利，如對(duì)有機(jī)廢物進(jìn)行堆肥處理，可使這類廢物成為優(yōu)良的土壤改良劑和優(yōu)質(zhì)肥料。（8）廢纖維素糖化、蛋白化和乙醇化技術(shù)：利用纖維素酶酶解纖維素廢料可以生產(chǎn)糖類（如葡萄糖）；利用纖維素廢料可生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白，用生物方法處理廢纖維素還可生產(chǎn)工藝乙醇。（9）酵母循環(huán)系統(tǒng)：利用酵母菌—活性污泥二段式好氧處理系統(tǒng)處理食品廢水，生產(chǎn)性能高，COD去除率可達(dá)95%以上，BOD去除率可達(dá)99%。植物細(xì)胞工程包括哪幾個(gè)方面內(nèi)容？各具有何意義？答：（1）植物器官培養(yǎng)：指對(duì)植物根、莖、葉、花、果實(shí)以及各部原基（芽原基、根原基）的離體培養(yǎng)技術(shù)。植物器官培養(yǎng)技術(shù)可以用于植物的離體無(wú)性快速繁殖，以加速植物良種和瀕危珍稀植物的繁育；還可用于植物的脫毒培養(yǎng)，以恢復(fù)良種的種性和提高產(chǎn)量和品質(zhì)。（2）植物胚胎培養(yǎng)：指以胚珠、幼胚、成熟胚和胚乳為材料的離體培養(yǎng)技術(shù)。在植物遠(yuǎn)緣雜交育種中可用胚胎培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行胚挽救，以獲得珍貴的遠(yuǎn)緣雜種；成熟胚培養(yǎng)技術(shù)可用于打破種子休眠，提高種子發(fā)芽率；胚乳培養(yǎng)技術(shù)可用于植物多倍體育種。（3）植物組織培養(yǎng)：指植物各部分組織，如莖組織、葉肉組織、根組織、形成層、貯藏薄壁組織、珠心組織等為材料進(jìn)行離體培養(yǎng)，使之成為愈傷組織的技術(shù)。利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成的愈傷組織可作為植物遺傳轉(zhuǎn)化的受體，也可作為分離單細(xì)胞和原生質(zhì)體的材料。（3）植物細(xì)胞培養(yǎng)：指用能保持較好分散性的植物細(xì)胞或很小的細(xì)胞團(tuán)（6~7個(gè)細(xì)胞）為材料進(jìn)行的離體培養(yǎng)技術(shù)，如花粉、葉肉細(xì)胞、根尖細(xì)胞等的離體培養(yǎng)。植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)可用于生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物，也可用于制作人工種子；離體花粉（小孢子）培養(yǎng)可誘發(fā)單倍體植物，進(jìn)而通過(guò)單倍體育種選育優(yōu)良品種。（4）植物原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細(xì)胞雜交：通過(guò)原生質(zhì)體分離培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交可克服植物遠(yuǎn)緣雜交中存在的生殖隔離障礙而獲得自然界中沒(méi)有的新物種或植物新類型。試述生物技術(shù)在農(nóng)業(yè)種植業(yè)中的應(yīng)用。答：（1）提高農(nóng)作物產(chǎn)量和品質(zhì)：利用基因工程技術(shù)進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移，培育抗逆（抗病、抗蟲(chóng)、抗旱、抗寒）的和品質(zhì)優(yōu)良的作物優(yōu)良品系。（2）植物種苗的工廠化生產(chǎn)：利用植物細(xì)胞技術(shù)對(duì)優(yōu)良品種進(jìn)行大規(guī)模的快速無(wú)性繁殖和脫除植物病毒培育脫毒種苗。（3）提高糧食品質(zhì)：應(yīng)用生物技術(shù)培育品質(zhì)好、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高的作物新品系。（4）生物固氮，減少化學(xué)肥料使用量。（5）生物農(nóng)藥、抗病蟲(chóng)基因工程，生產(chǎn)綠色食品。試述現(xiàn)代生物技術(shù)在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用及意義。答：（1）動(dòng)物疾病防治：應(yīng)用核酸探針技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)和基因工程疫苗有效地防治動(dòng)物疾病。（2）培育優(yōu)良的動(dòng)物品種：利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將與動(dòng)物優(yōu)良品質(zhì)有關(guān)的基因轉(zhuǎn)移到動(dòng)物體內(nèi)，使動(dòng)物獲得新的品質(zhì)。（3）動(dòng)物的大量快速無(wú)性繁殖：利用人工授精、胚胎移植、胚胎分割、體外生產(chǎn)胚胎和性別控制等技術(shù)大量快速繁殖動(dòng)物優(yōu)良品種。（4）優(yōu)質(zhì)動(dòng)物飼料的生產(chǎn)：應(yīng)用基因工程進(jìn)行DNA重組生長(zhǎng)激素的研制與應(yīng)用可提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速率、飼料轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)奶量、瘦肉率等；應(yīng)用發(fā)酵工程技術(shù)和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)飼用酶制劑、添補(bǔ)氨基酸、飼用維生素、抗生素和益生菌、寡肽和寡糖、有機(jī)微量元素和天然植物提取物等各種飼料添加劑。試述生物技術(shù)在環(huán)境污治理方面的應(yīng)用。答：（1）生化強(qiáng)化處理技術(shù)：采用各種生物、物理和化學(xué)的方法來(lái)強(qiáng)化活性污泥法進(jìn)行污水處理的處理能力和降解效果，包括高濃度活性污泥法、生物-鐵法、粉末活性炭法。（2）上流式厭氧污泥床法（UASB法）：UASB法是以反應(yīng)器為核心的污水處理方法，該方法的反應(yīng)器體積大，具有快速高效厭氧處理有機(jī)廢水的性能，沉降性能、產(chǎn)甲烷和降解有機(jī)物的性能都很高，化學(xué)需氧量（COD）去除率高達(dá)80%～90%。（3）水解—好氧生物處理工藝（H/O法）：利用兼性的水解——產(chǎn)酸菌將廢水中懸浮物水解成可溶性物質(zhì)，將難降解的大分子分解為小分子，因而用于處理工業(yè)廢水效果顯著。（4）生物除磷脫氮技術(shù)：利用微生物“硝化—反硝化（脫氮）”的原理脫除水體中的氮素，利用聚磷微生物（如假單胞菌屬）超量攝取磷來(lái)除去污水中的磷，使污水得以凈化。（5）間隙式活性污泥法（SBR法）：在一個(gè)設(shè)有攪拌和曝氣裝置的反應(yīng)槽內(nèi)依次進(jìn)行進(jìn)水—反應(yīng)—沉淀—排水—待料等5個(gè)基本過(guò)程，在進(jìn)水階段和反應(yīng)階段可根據(jù)廢水性質(zhì)進(jìn)行多種好氧（曝氣）和厭氧（攪拌）組合的操作，以達(dá)到去除生物需氧量（BOD）、硝化或脫氮除磷的凈化目標(biāo)。（6）空氣凈化生物技術(shù)：用生物過(guò)濾法、生物洗滌法和生物吸收法等方法來(lái)處理廢氣和凈化空氣。（7）有機(jī)廢物快速堆肥和發(fā)酵技術(shù)：運(yùn)用生物技術(shù)對(duì)固體廢物進(jìn)行“無(wú)害化、資源化和減量化”處理，以變廢為寶化害為利，如對(duì)有機(jī)廢物進(jìn)行堆肥處理，可使這類廢物成為優(yōu)良的土壤改良劑和優(yōu)質(zhì)肥料。（8）廢纖維素糖化、蛋白化和乙醇化技術(shù)：利用纖維素酶酶解纖維素廢料可以生產(chǎn)糖類（如葡萄糖）；利用纖維素廢料可生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白，用生物方法處理廢纖維素還可生產(chǎn)工藝乙醇。（9）酵母循環(huán)系統(tǒng)：利用酵母菌—活性污泥二段式好氧處理系統(tǒng)處理食品廢水，生產(chǎn)性能高，COD去除率可達(dá)95%以上，BOD去除率可達(dá)99%。植物細(xì)胞工程包括哪幾個(gè)方面內(nèi)容？各具有何意義？答：（1）植物器官培養(yǎng)：指對(duì)植物根、莖、葉、花、果實(shí)以及各部原基（芽原基、根原基）的離體培養(yǎng)技術(shù)。植物器官培養(yǎng)技術(shù)可以用于植物的離體無(wú)性快速繁殖，以加速植物良種和瀕危珍稀植物的繁育；還可用于植物的脫毒培養(yǎng)，以恢復(fù)良種的種性和提高產(chǎn)量和品質(zhì)。（2）植物胚胎培養(yǎng)：指以胚珠、幼胚、成熟胚和胚乳為材料的離體培養(yǎng)技術(shù)。在植物遠(yuǎn)緣雜交育種中可用胚胎培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行胚挽救，以獲得珍貴的遠(yuǎn)緣雜種；成熟胚培養(yǎng)技術(shù)可用于打破種子休眠，提高種子發(fā)芽率；胚乳培養(yǎng)技術(shù)可用于植物多倍體育種。（3）植物組織培養(yǎng)：指植物各部分組織，如莖組織、葉肉組織、根組織、形成層、貯藏薄壁組織、珠心組織等為材料進(jìn)行離體培養(yǎng)，使之成為愈傷組織的技術(shù)。利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成的愈傷組織可作為植物遺傳轉(zhuǎn)化的受體，也可作為分離單細(xì)胞和原生質(zhì)體的材料。（3）植物細(xì)胞培養(yǎng)：指用能保持較好分散性的植物細(xì)胞或很小的細(xì)胞團(tuán)（6~7個(gè)細(xì)胞）為材料進(jìn)行的離體培養(yǎng)技術(shù)，如花粉、葉肉細(xì)胞、根尖細(xì)胞等的離體培養(yǎng)。植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)可用于生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物，也可用于制作人工種子；離體花粉（小孢子）培養(yǎng)可誘發(fā)單倍體植物，進(jìn)而通過(guò)單倍體育種選育優(yōu)良品種。（4）植物原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細(xì)胞雜交：通過(guò)原生質(zhì)體分離培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交可克服植物遠(yuǎn)緣雜交中存在的生殖隔離障礙而獲得自然界中沒(méi)有的新物種或植物新類型。試論述生物技術(shù)與醫(yī)藥衛(wèi)生的關(guān)系？答：（1）疫苗生產(chǎn)：病原體減毒或弱化疫苗、基因工程疫苗和核酸疫苗。病原體減毒和弱化疫苗是利用微生物的純種培養(yǎng)技術(shù)以及減毒疫苗的制備技術(shù)來(lái)生產(chǎn)的，是以減毒或弱化的病原體作為疫苗?；蚬こ桃呙缡菍⒉≡w的抗原基因克隆在細(xì)菌或真核細(xì)胞內(nèi)，利用細(xì)菌或細(xì)胞生產(chǎn)病原體的抗原，利用抗原作為疫苗。而核酸疫苗則是將含有編碼蛋白質(zhì)基因序列的質(zhì)粒載體，經(jīng)肌肉注射或微彈轟擊等方法導(dǎo)入體內(nèi)，通過(guò)宿主細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)抗原蛋白質(zhì)，誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生對(duì)抗該抗原蛋白的免疫應(yīng)答，以達(dá)到預(yù)防和治療疾病的目的。（2）疾病診斷：?jiǎn)慰寺】贵w與ELISA技術(shù)用于診斷傳染性疾病、檢測(cè)腫瘤相關(guān)基因、確定激素水平、檢驗(yàn)血液中的藥物含量及鑒定微生物病原體。DNA診斷技術(shù)可用于診斷遺傳性疾病、腫瘤和傳染性疾病。（3）生物制藥與基因工程藥物：利用微生物發(fā)酵可生產(chǎn)各種抗生素。利用植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)可生產(chǎn)天然藥物，如紫草寧、紫杉醇、人參皂苷、強(qiáng)心苷、胡蘿卜素等。利用單克隆抗體制備技術(shù)可制備用于腫瘤治療的“生物導(dǎo)彈”。利用基因工程技術(shù)可以生產(chǎn)基因工程藥物，如人胰島素、人生長(zhǎng)激素、人干擾素、細(xì)胞因子（白細(xì)胞介素、促紅細(xì)胞生成素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子等）、生長(zhǎng)因子（表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、血小板來(lái)源生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子）、溶血栓劑、SOD、凝血因子等。（4）基因治療：向有基因缺陷的細(xì)胞導(dǎo)入外源基因，以達(dá)到治療目的?；蛑委熆捎糜谶z傳性疾病及腫瘤的治療。試述基因工程中，將目的基因?qū)胧荏w后，對(duì)攝入重組DNA分子的轉(zhuǎn)化細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定的方法。答：轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選：（1）利用克隆載體攜帶的選擇標(biāo)記基因篩選克隆子：利用抗生素抗性基因和相應(yīng)的選擇藥物進(jìn)行篩選；利用載體除草劑抗性基因和相應(yīng)的選擇藥物進(jìn)行篩選；利用乳糖操縱子lacZ’基因互補(bǔ)顯色進(jìn)行篩選；根據(jù)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑非依賴型基因進(jìn)行篩選；根據(jù)核苷酸合成代謝相關(guān)酶基因的缺失互補(bǔ)進(jìn)行篩選。（2）利用克隆載體攜帶的報(bào)告基因進(jìn)行篩選：β