中國藥典六與美英藥典微生物限度比較

中國藥典與美英藥典微生物限度檢查法的比較蘇德模1.收載的檢查項目USP++++++CP++++++++需氣菌真菌大腸埃希菌沙門菌銅綠色假單胞菌金黃色葡萄球菌梭菌大腸菌群腸桿菌科及其他某些革蘭陰性桿菌BP++++++++++腸道菌、腸桿菌科支原體+分枝桿菌病毒的其他因子活螨+++2.檢驗量

CP

取10g或10ml供試品BP、USP

10g或10ml供試品數(shù)份CPBPUSP一般制劑0.9%的氯化鈉溶液pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液乳糖肉湯pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液其他合適培養(yǎng)基pH7.2磷酸鹽緩沖液,大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基,乳糖液體培養(yǎng)基5克吐溫-20或吐溫-80十四烷酸異丙酯吐溫-20

其他助溶劑非水溶性的制劑（膏劑、油劑）其他司盤80、單硬脂酸甘油酯、吐溫-80十四烷酸異丙酯不溶于水的膜劑腸溶膠囊制備供試液最終pH調至7.0氣霧劑制備法樣品加稀釋劑至培養(yǎng)基時間不超過1hr3.供試液制備*0.4%l卵磷脂,4.0%吐溫4.制劑抑菌作用的確定（陽性對照試驗）CP

BPUSP控制菌陽性菌加量10~102

個

102

個105

~106

個需氣菌及真菌計數(shù)50~100回收率大小于70%判斷是否有抑菌作用25~200個金葡、白念、枯草、大腸菌在有無制劑存在下生長的稀釋級差別大小判斷是否有抑菌作用根據(jù)控制菌陽性菌生長的結果判斷抑菌作用處理方法中和法+++*稀釋法++++++薄膜過濾法離心沉淀法+5.需氣菌和真菌計數(shù)CPBPUSP方法平皿法++試管法+（澆碟、涂抹）++薄膜過濾法++培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂玫瑰紅鈉瓊脂大豆酪蛋白消化瓊脂含抗生素的沙氏葡萄糖瓊脂大豆酪蛋白消化瓊脂沙氏葡萄糖瓊脂5.需氣菌和真菌計數(shù)(續(xù))3個連續(xù)稀釋級稀釋級的選擇培養(yǎng)溫度30~35℃23~28℃1個

2個30~35℃20~25℃

30~35℃20~25℃培養(yǎng)時間（天）需氣菌2(5~7)52~3真菌3(5~7)55~7計數(shù)結果需氣菌真菌〈300〈10030~300不生長按〈10個/1g或ml報告結果報告一般30~30030~100不生長按〈10個/1g或ml報告1g或ml1g或ml1g或ml6.大腸埃希菌CPBPUSP方法MI法I法IMViC法1110檢驗量（g或ml）稀釋劑09%氯化鈉溶液乳糖液體培養(yǎng)基預增菌增菌BL增菌培養(yǎng)基35~37℃18~24hM-I35~37℃5.24hpH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液大豆酪胨肉湯35~37℃18~48hMac肉湯

43~45℃18~24h乳糖液體培養(yǎng)基35~37℃24~48h分離Mac.瓊脂平板35~37℃18~72h生化試驗MI及IMViC+Mac、EMB瓊脂平板

35~37℃24~48h+7.大腸菌群CPBPUSP11檢驗量（g或ml）稀釋劑pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液乳糖肉湯預增菌35~37℃2~5h增菌分離0.1g,0.01g0.001g

BL培養(yǎng)基35~37℃18~24hEMB或Mac.C瓊脂平板35~37℃

18~24h0.1g,0.01g,0.001g乳糖肉湯培養(yǎng)基35~37℃24~48hVRB.瓊脂平板35~37℃18~24h生化試驗+-8.銅綠假單胞菌CPBPUSP檢驗量1（g或ml）1（g或ml）10（g或ml）pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基增菌大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基35~37℃18~48h分離稀釋劑

09%氯化鈉溶液pH7.2磷酸鹽緩沖液膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基

35~37℃18~24h溴化十六烷基三甲銨瓊脂平板35~37℃18~24h大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基35~37℃24~48hCetrimide瓊脂35~37℃72h生化試驗5種Cetrimide瓊脂,培養(yǎng)18~72h大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基41~43℃18~48h。薄膜過濾大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基18~48h,Cetrimide瓊脂平板1種（42±1）3種9.金黃色葡萄球菌CPBPUSP檢驗量1110（g或ml）（g或ml）（g或ml）稀釋劑09%氯化鈉溶液pH7.0氯化鈉大豆酪蛋白消化培養(yǎng)pH7.0氯化鈉-蛋白-蛋白胨緩沖基胨緩沖液液增菌營養(yǎng)肉湯（或含亞大豆酪蛋白大豆酪蛋白消化培養(yǎng)碲酸甲）培養(yǎng)基消化培養(yǎng)基基35~37℃18~24h35~37℃18~435~37℃24~48h分離甘露醇氯化鈉瓊脂8h

hBP瓊脂平板VJ(甘露醇氯化鋰)瓊平板、卵黃氯化鈉35~37℃18~7脂、MS(甘露醇氯化瓊脂平板2h鈉)瓊脂、BP瓊脂平35~37℃24~48h板凝固酶+凝固酶、35~37℃2+4+4~48h試驗DNA酶10.沙門菌CPBPUSP檢驗量1（g或ml）10（g或ml）10（g或ml）稀釋劑pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液乳糖液體培養(yǎng)基增菌09%氯化鈉溶液spH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基35~37℃18~24h大豆酪胨肉湯35~37℃18~24h乳糖液體培養(yǎng)基35~37℃培養(yǎng)二次增菌TTB培養(yǎng)基35~37℃18~24h四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基41~43℃18~24hSCsTTB液體培養(yǎng)基35~37℃12~24h分離生化試驗EMBsMac.Cs

DHLsSS瓊脂平板35~37℃+18~24hDCsXLDsBG.瓊脂平板35~37℃18~72h+BGsXLDsBS瓊脂平板35~37℃24~48h+11梭菌CPBPUSP11010檢驗量（g或ml）稀釋劑乳糖肉湯加熱處理09%無菌氯化鈉溶

液pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液1份80℃10min另1份不加熱1份80℃10min另1份不加熱增菌分離過氧化氫酶試驗100ml

0.1%葡萄糖庖肉培養(yǎng)基35~37℃72~96h含慶大霉素哥倫比亞瓊脂平板35~37℃48~72h+100ml梭菌增菌培養(yǎng)基35~37℃厭氧48h含和不含慶大霉素哥倫比亞瓊脂平板35~37℃48h+12.結果判斷及復試CPBPUSP控制菌

一次檢出為準一次檢出為 不符合標準準 規(guī)定,取大于25g的樣品復試重新抽樣復試兩次,三次結果平均值報告需氣菌和

第一次試驗結果

測定結果在真菌超過規(guī)定的標準,規(guī)定的限度標準5倍以內均為合格同上微生物限度標準

1.收載方式CPBPUSP各論項下+++制劑通則++專論+++2.制劑通則中規(guī)定微生物限度的劑型CP

BPUSP注射液1.植入劑1.注射液1.植入劑1.注射液1.植入劑1.注射液1.植入劑1.注射液1.植入劑1.注射液1.植入劑1.注射液1.植入劑1.