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學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精第一部分測評(45分鐘,共100分)一、選擇題(每題3分,共60分)1.不同培養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都含有()A.碳源、磷酸鹽和維生素B.氮源和維生素C.水、碳源、氮源和無機鹽D.碳元素、氧元素、氫元素、氮元素2.培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是()①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線滅菌⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法A.⑤③②①④⑥B.①②③④⑤⑥C.⑥②③④①⑤D.③④②①⑥⑤3.高溫滅菌的原理是()A.每種微生物生長的最適溫度是一定的B.微生物對于高溫環(huán)境不適應(yīng)C.高溫破壞了細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸,影響其生命活動D.高溫降低了環(huán)境中氧的濃度4.下列操作與消毒和滅菌無關(guān)的是()A.接種前用火焰灼燒接種環(huán)B.接種前用酒精擦拭雙手C.將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.接種在酒精燈的火焰旁完成5.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入瓊脂這一理想的凝固劑,下列關(guān)于瓊脂的說法不正確的是()A.不被所培養(yǎng)的微生物分解利用,對所培養(yǎng)的微生物無毒害作用B.在微生物生長溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)C.瓊脂凝固點低,利于微生物的生長D.瓊脂在滅菌過程中不會被破壞,透明度好,凝固力強6.無菌技術(shù)包括以下幾個方面的敘述,其中錯誤的是()A.對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行滅菌B.將培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌C.為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行D.實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍物品相接觸7.有關(guān)平板畫線操作的敘述,不正確的是()A.第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物B.每次畫線前,灼燒接種環(huán)是為了殺死上次畫線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種C.在第二區(qū)域內(nèi)畫線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液D.畫線結(jié)束后,灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上面菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者8.下列敘述正確的是()A.培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B.培養(yǎng)基只有兩類:液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D.微生物在固體培養(yǎng)基上生長時,可以形成肉眼可見的單個細(xì)菌9.土壤中的微生物,絕大多數(shù)是()A.細(xì)菌B.酵母菌C.霉菌D.放線菌10.選擇土壤中分解尿素的微生物所需氮源為()A.硝酸B.氨C.尿素D.蛋白胨11.用做土壤分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)的培養(yǎng)基要嚴(yán)格()A.防腐B.消毒C.滅菌D.化療12.向以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)細(xì)菌后,指示劑將()A.變藍色B.變紅色C.變黑色D.變棕色13.下列生物能分解纖維素的是()①人②兔③牛④蘑菇⑤纖維桿菌A.①②③④⑤B.②③⑤C.②③④⑤D.③⑤14.從土壤中篩選蛋白酶產(chǎn)生菌時,所用培養(yǎng)基為()A.加富培養(yǎng)基B.選擇培養(yǎng)基C.基礎(chǔ)培養(yǎng)基D.鑒別培養(yǎng)基15.請選出下列正確的操作步驟()①土壤取樣②稱取10g土壤加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中③吸取0.1mL進行平板涂布④依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度A.①→②→③→④B.①→③→②→④C.①→②→④→③D.①→④→②→③16.下表表示某培養(yǎng)基的配方,下列敘述正確的是()成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅美藍蒸餾水含量10g10g2g0.4g0。065g1000mLA.從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基,從用途看該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基B.培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨C.該培養(yǎng)基缺少提供生長因子的物質(zhì)D.培養(yǎng)基調(diào)節(jié)好合適的pH后就可以接種菌種17.培養(yǎng)基在計量、熔化后,首先要做的是()A.調(diào)整pHB.分裝C.滅菌D.?dāng)R置斜面18.某細(xì)菌培養(yǎng)至對數(shù)期,當(dāng)細(xì)菌數(shù)目為105個/mL時開始計時,90min后細(xì)菌數(shù)目為1.6×106個/mL。試問再過多久細(xì)菌數(shù)目會達到6。4×106個/mL()A.30minB.45minC.60minD.90min19.用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中尿素分解菌的數(shù)目,為了提高實驗結(jié)果的可信度,往往要設(shè)置對照實驗,對于對照組的要求不包括以下哪項()A.對照組培養(yǎng)基也嚴(yán)格滅菌,且不接種任何微生物B.對照組和實驗組培養(yǎng)基放在相同條件下培養(yǎng)C.所用培養(yǎng)基成分及pH大小完全與實驗組一致D.培養(yǎng)基的量的大小與實驗組必須絕對相同20.下列環(huán)境中,纖維素分解菌含量最高的是()A.熱帶雨林中土壤B.寒帶森林中土壤C.花盆中D.荒漠地區(qū)二、非選擇題(共40分)21.(8分)某化工廠的污水池中,含有一種有害的、難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功地篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實驗的主要步驟如下圖所示。請分析回答問題:(1)加入化合物A的培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基,“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的________。(2)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時,常采用平板畫線的方法接種。獲得單菌落后繼續(xù)篩選,在每次畫線之前都要灼燒接種環(huán),目的是______________________________________________。(3)某同學(xué)計劃統(tǒng)計污水池中目的菌的總數(shù),他選用104、105、106稀釋液進行平板培養(yǎng),每種稀釋液都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿。從設(shè)計實驗的角度看還應(yīng)設(shè)置哪些對照實驗在相同條件下同時培養(yǎng)?22.(14分)下表是一種培養(yǎng)基的配方,請回答。牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂水0.5g1g0。5g2g200mL(1)此培養(yǎng)基的營養(yǎng)要素有______類,其中蛋白胨能提供的是______、______和______。(2)在各種成分溶化后分裝前,必須進行的是________。(3)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時,一般選擇菌落在________的平板進行計數(shù),在某一稀釋度下平板上的平均菌落數(shù)為50個,所用稀釋液的體積為0。2mL,稀釋倍數(shù)為105時,則每毫升樣品中的菌落數(shù)為________。23.(8分)下圖為分離并統(tǒng)計分解纖維素的微生物的實驗流程,據(jù)此回答有關(guān)問題:(1)要從富含纖維素的環(huán)境中分離纖維素分解菌,從高溫?zé)崛袑ふ夷蜔峋?,這說明__________________________________________________________________________________________________。(2)在將樣品接種到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基之前,可通過選擇培養(yǎng)增加纖維素分解菌的濃度,某同學(xué)根據(jù)需要配制了纖維素分解菌的培養(yǎng)基如下,整個實驗過程嚴(yán)格無菌操作。纖維素粉NaNO3Na2HPO4·7H2OKH2PO45g1g1。2g0。9gMgSO4·7H2OKCl酵母膏、水解酪素0.5g0。5g適量如果將其中的纖維素粉換成________,菌落數(shù)________,即可說明選擇培養(yǎng)基的作用。(3)接種微生物最常用的平板畫線法和稀釋涂布平板法,本實驗宜采用________法,原因是________________________________________________________________________.24.(10分)請回答下面兩個實驗中的問題:(1)實驗室保存的大腸桿菌不慎混入了酵母菌,上圖所示將混合菌液稀釋后,利用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)所顯示的兩種菌落。下面是篩選分離大腸桿菌的一般操作,請回答:第一步:向一個培養(yǎng)皿內(nèi)加入某種物質(zhì),其中的大腸桿菌不能生存,而酵母菌生存不受影響。加入的某種物質(zhì)最可能是________________。第二步:通過____________________________,則可以鑒別并篩選出大腸桿菌.(2)你認(rèn)為怎樣才能得到被32P標(biāo)記的T2噬菌體?請簡述你的實驗方案。第一步:_______________________________________________________________。第二步:_______________________________________________________________。參考答案1答案:C解析:培養(yǎng)基中的水、無機鹽、碳源和氮源是微生物生長繁殖所必需的營養(yǎng)物質(zhì)。2答案:A解析:培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌;培養(yǎng)皿能耐高溫,需用干熱滅菌;接種環(huán)可用灼燒滅菌達到迅速徹底的滅菌效果;實驗操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進行消毒,如用酒精擦拭雙手;空氣可用紫外線消毒;牛奶為不破壞其營養(yǎng)成分可采用巴氏消毒法。3答案:C解析:蛋白質(zhì)和核酸是細(xì)胞表現(xiàn)生命活動的最重要物質(zhì),它們都是高分子化合物,具有復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu),高溫能使它們的空間結(jié)構(gòu)受到破壞而失去活性。故C項敘述就是高溫滅菌的原理.4答案:C解析:要建立“有菌觀念”。接種用具、器皿、空氣中都充滿了微生物,都有污染的可能,必須嚴(yán)格地消毒滅菌.A、B、D都是實驗操作過程中滅菌或防止雜菌污染的措施.將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)是為了防止污染,與滅菌無關(guān)。5答案:C解析:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑如瓊脂后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基,它是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一,固體培養(yǎng)中可形成肉眼可見的單個細(xì)胞繁殖而來的子細(xì)胞群體,即菌落,用于微生物的分離、計數(shù)和菌種鑒定等。瓊脂作為一種理想的凝固劑,是其性質(zhì)決定的,瓊脂不會被微生物利用且對其無毒害作用,在滅菌過程中不會被破壞,透明度好,凝固力強。瓊脂在98℃以上熔化,在44℃以下凝固,所以在微生物生長溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài).6答案:A解析:對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行消毒,而不是滅菌。7答案:C解析:純化大腸桿菌的平板畫線中,接種環(huán)取菌種前灼燒的目的是避免接種環(huán)上可能存在微生物污染培養(yǎng)物,以后每次畫線前的灼燒接種環(huán)為了殺死上次畫線后殘留的菌種,畫線結(jié)束仍需灼燒接種環(huán),是避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者,從第二次畫線開始,每次畫線時接種環(huán)上的菌種直接來源于上次畫線的末端。8答案:A解析:培養(yǎng)基是微生物生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。包括固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基中加入凝固劑后制成的,加水不能再變成液體培養(yǎng)基;單個細(xì)菌用肉眼看不見,肉眼可見的是培養(yǎng)基上形成的菌落。9答案:A解析:土壤中的微生物,70%~90%是細(xì)菌。10答案:C解析:只有能合成脲酶的微生物能分解尿素,以尿素為氮源,缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖,而受到抑制,所以,能夠選擇出分解尿素的微生物。11答案:C解析:防腐是在某些化學(xué)物質(zhì)或物理作用下,能防止或抑制微生物生長的一種措施,能防止食品腐敗或霉變;消毒是利用某種方法殺死或滅活物體或物體中所有病原微生物的一種措施,具有防止感染或傳播的作用,一般消毒對芽孢無殺滅作用;化療是利用具有選擇毒性的化學(xué)物質(zhì)如抗生素,對生物體內(nèi)部的微生物感染組織或病變細(xì)胞進行治療,以殺死病原微生物或病變細(xì)胞,對培養(yǎng)基利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有微生物,采用高壓蒸汽滅菌,滅菌后的培養(yǎng)基不再有可存活的微生物。12答案:B解析:細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成了氨,氨會使培養(yǎng)基的堿性增強,pH升高,加入酚紅指示劑將變紅。13答案:C解析:兔、牛為草食性動物,其腸道內(nèi)有分解纖維素的微生物,蘑菇、纖維桿菌能分泌纖維素酶,分解纖維素,人不能消化纖維素。14答案:B解析:從土壤中篩選蛋白酶產(chǎn)生菌時,可以在培養(yǎng)基中添加牛奶或酪素制備培養(yǎng)基平板,微生物生長時若產(chǎn)生蛋白酶,則會水解牛奶或酪素,在平板上形成透明的蛋白質(zhì)水解圈。15答案:C解析:首先是土壤取樣,再進行樣品稀釋,最后是培養(yǎng)與觀察.16答案:B解析:此配方中,葡萄糖主要作碳源,蛋白胨作氮源,同時還可提供生長因子。從用途看該培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基。在調(diào)節(jié)好pH后,還需滅菌后才可用于菌種的培養(yǎng)。17答案:A解析:制作培養(yǎng)基有許多事項要注意,在計量、熔化后首先要做的是調(diào)整pH。18答案:A解析:細(xì)菌的分裂為二分裂方式,其數(shù)量呈指數(shù)增長,因此當(dāng)由105個/mL增至1。6×106個/mL,則說明其增殖了4次,周期為90min/4=15min/次,當(dāng)其由1.6×106個/mL再增至6.4×106個/mL時,又增殖了2次,共需:15min/次×2次=30min.19答案:D解析:設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響,提高實驗結(jié)果的可信度.設(shè)置對照實驗的原則之一是單一變量原則,即除了所要驗證的條件不一樣之外,其他條件因素都相同。本實驗中培養(yǎng)基的量都是在倒平板時目測估計的,所以其中的含量不是絕對的等量.一般來說,固體培養(yǎng)基量的大小在一定范圍內(nèi)不會影響菌落的數(shù)目。20答案:A解析:生物與環(huán)境是相互依存的,纖維素含量高,纖維素分解菌含量較多。21解析:(1)加入某物質(zhì)后能將細(xì)菌篩選,則說明該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中只有化合物A能提供氮源和碳源,因此“目的菌”生長所需的氮源和碳源都來自化合物A。(2)第二次開始畫線前必須灼燒接種環(huán),目的就是為了殺死上次畫線后殘留于環(huán)上的同種菌.(3)為了對照,需要設(shè)置空白選擇培養(yǎng)基.答案:(1)選擇化合物A(2)殺死上次畫線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種(3)不接種的空白選擇培養(yǎng)基,證明培養(yǎng)基制備是否合格(是否被雜菌污染)。
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