2025年微生物菌群密度檢測(cè)研究報(bào)告

云陽金谷農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司檢查匯報(bào)試驗(yàn)名稱：菌落總數(shù)的檢查試驗(yàn)措施：平板計(jì)數(shù)法香豬脆、香脆肚。總負(fù)責(zé)人：熊經(jīng)理檢查時(shí)間：7月26—8月6號(hào)菌落總數(shù)的檢測(cè)平板計(jì)數(shù)法為了深入理解與熟悉我們產(chǎn)品的操作規(guī)范和要點(diǎn)的控制，掌握菌落總數(shù)的檢查措施和理解超凈工作臺(tái)的操作規(guī)范。二、試驗(yàn)儀器設(shè)備和所需試劑及試劑的配制。1、試驗(yàn)儀器及設(shè)備型組織搗碎機(jī)、隔水或智能恒溫培養(yǎng)箱GHP—9080、出廠編號(hào)13475、烘箱ZFD—5040(全自動(dòng)型鼓風(fēng)干燥箱)、蒸餾水制備機(jī)、滅菌過的250ml錐形瓶、1ml吸量管、10ml的吸量管、酒精燈、錐形瓶1000ml、培養(yǎng)皿、電子天平AL104、電磁爐、鍋、鍋鏟、PH試紙、恒溫水浴鍋HH—4出廠標(biāo)號(hào)160.53。2、試驗(yàn)試劑及配制2.1重要試劑：瓊脂、無菌生理鹽水、無菌水、75%的酒精、1moL/L氫氧化鈉、1moL/L的鹽酸。2.2藥物試劑2.21瓊脂：精確稱取12.5g胰蛋白胨、酵母浸膏7.5g、葡萄糖3.0g、瓊脂37.5g、蒸餾水2500ml,加入至鍋中煮沸溶解，先加入瓊脂將其熬化，在加入其他樣品，直至樣品熬化即可關(guān)掉火，冷卻后調(diào)解PH值(7.0左右即可)。酸性用氫氧化鈉調(diào)整、堿性用鹽酸進(jìn)行調(diào)整，將在120℃高壓滅菌15min即可。2.22無菌生理鹽水：精確稱取8.5g氯化鈉溶于1000ml蒸餾水中。2.23無菌水：吸取1000ml的蒸餾水，將在120℃高壓滅菌15min即可。2.241moL/L氫氧化鈉：稱取40g的氫氧化鈉溶于1000ml的蒸餾水中在2.4575%的酒精：分別吸取400ml的95%的無水乙醇和100ml的蒸餾水與1、樣品的稀釋1.1固體和半固體樣品：稱取25g樣品置盛有225ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000r/min～10000r/min均質(zhì)1min～2min,或放入盛有225ml稀釋液的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min~2min,制成1:10的樣品勻液。1.2液體樣品：以無菌吸管吸取25ml樣品置盛有225ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內(nèi)預(yù)置合適數(shù)量的無菌玻璃珠)中，充足混勻，制成1:10的樣品勻液。36℃±1℃48h±2h.2、檢樣與接種：25g(ml)樣品+225ml稀釋液，均質(zhì)，10倍系列稀釋選擇2個(gè)～3個(gè)合適稀釋度的樣品勻液，各取1ml分別加入無菌培養(yǎng)2.1用1ml無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1ml,沿管壁緩慢注于盛有9ml稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面),振搖試管或換用1支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻，制成1:100的樣品勻液。2.2.按上述操作程序，制備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1次1ml無菌吸管或吸頭。12.2.根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì)，選擇2個(gè)～3個(gè)合適稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液),在進(jìn)行10倍遞增稀釋時(shí)，吸取1ml樣殖。平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，混勻.4、培養(yǎng)：待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h。水產(chǎn)品30℃±1℃培養(yǎng)72h±3h。假如樣品中也許具有在瓊脂培養(yǎng)基表5、報(bào)告的菌落數(shù)量。菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位(colony-formingunits,CFU)6.1選用菌落數(shù)在30CFU～300CFU之間、無蔓延菌落生長的平板可記錄為多不可計(jì)。每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。6.2其中一種平板有較大片狀菌落生長時(shí)，則不適宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的二分之一，而其他二分之一中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以2,代表一種平板菌落數(shù)。6.3當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長時(shí)，則將每條單鏈作為一種菌落計(jì)數(shù)。7成果與匯報(bào)7.1菌落總數(shù)的計(jì)算措施7.1.1若只有一種稀釋度平板上的菌落數(shù)在合適計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每g(ml)樣品中菌落總數(shù)成果。7.1.2若有兩個(gè)持續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在合適計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí)，按公式(1)計(jì)算：N=∑C/(N?+0.1n?)d…………N——樣品中菌落數(shù)；∑C——平板(含合適范圍菌落數(shù)的平板)菌落數(shù)之和；n,——第一稀釋度(低稀釋倍數(shù))平板個(gè)數(shù)；n?——第二稀釋度(高稀釋倍數(shù))平板個(gè)數(shù)；d——稀釋因子(第一稀釋度)。上述數(shù)據(jù)按7.2.2數(shù)字修約后，表達(dá)為25000或2.5×104。7.1.3若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均不小于300CFU,則對(duì)稀釋度7.1.4若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均不不小于30CFU,則應(yīng)按稀釋度7.1.5若所有稀釋度(包括液體樣品原液)平板均無菌落生長，則以不不小于1乘以最低稀釋倍數(shù)計(jì)算。7.1.6若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均不在30CFU～300CFU之間，7.2菌落總數(shù)的匯報(bào)7.2.1菌落數(shù)不不小于100CFU時(shí)，按“四舍五入”原則修約，以整數(shù)匯報(bào)。7.2.2菌落數(shù)不小于或等于100CFU時(shí)，第3位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后，取前2位數(shù)字，背面用0替代位數(shù)；也可用10的指數(shù)7.2.3若所有平板上為蔓延菌落而無法計(jì)數(shù)，則匯報(bào)菌落蔓延。7.2.4若空白對(duì)照上有菌落生長，則本次檢測(cè)成果無效。空白數(shù)數(shù)數(shù)005800000若只有一種稀釋度平板上的菌落數(shù)在合適計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每g(ml)樣品中菌落總數(shù)成果。因此：N=37+38+39/3×10二、奇爽菌落總數(shù)的數(shù)據(jù)分析空白123000406若有兩個(gè)持續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在合適計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí)，按公式(1)N——樣品中菌落數(shù)；成果2∑C——平板(含合適范圍菌落數(shù)的平板)菌落數(shù)之和；n?——第一稀釋度(低稀釋倍數(shù))平板個(gè)數(shù)；n?——第二稀釋度(高稀釋倍數(shù))平板個(gè)數(shù)；d——稀釋因子(第一稀釋度)。N=267+281+295+44+34+29/(3+0.1×3)×10N=2879個(gè)/g三、香豬脆菌落總數(shù)的數(shù)據(jù)分析成果1空白300感雜40001若只有一種稀釋度平板上的菌落數(shù)在合適計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每g(ml)樣品中菌落總數(shù)成果。因此：N=57+60+34/3×10N=503個(gè)/g空白12300感雜40001若只有一種稀釋度平板上的菌落數(shù)在合適計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每g(ml)樣品中菌落總數(shù)成果。N=243個(gè)/g空白1230087若只有一種稀釋度平板上的菌落數(shù)在合適計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每g(ml)樣品中菌落總數(shù)成果。因此：N=53+118+84/3×100五、有友菌落總數(shù)的數(shù)據(jù)分析空白130120感雜感雜00000只有一種稀釋度平板上的菌落數(shù)在合適計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每g(ml)樣品中菌因此：N=1+7+3/3×10N=33個(gè)/g六、香脆肚菌落總數(shù)的數(shù)據(jù)分析空白123000若有兩個(gè)持續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在合適計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí)，按公式(1)N——樣品中菌落數(shù)；∑C——平板(含合適范圍菌落數(shù)的平板)菌落數(shù)之和；n,——第一稀釋度(低稀釋倍數(shù))平板個(gè)數(shù)；n?——第二稀釋度(高稀釋倍數(shù))平板個(gè)數(shù)；d——稀釋因子(第一稀釋度)。通過一系列的試驗(yàn)論證表明：自己