DB37T 2945-2017 海參、魚類水產(chǎn)品中乙酰甲喹主要代謝物的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法　　

IDB37/T2945—2017本標準按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標準由山東省海洋與漁業(yè)廳提出。本標準由山東省漁業(yè)標準化技術(shù)委員會歸口。本標準起草單位：山東省海洋資源與環(huán)境研究院、山東省水產(chǎn)品質(zhì)量檢驗中心。本標準主要起草人：劉慧慧、張秀珍、宮向紅、徐英江、任傳博、黃會、鄒榮婕、韓典峰、薛敬林、張華威、田秀慧、李佳蔚、羅晶晶。1DB37/T2945—2017海參中乙酰甲喹主要代謝物的測定件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3原理4試劑配制4.8無水硫酸鈉：優(yōu)級純。經(jīng)650℃灼燒4h,冷卻后貯存于密閉玻璃容器中備用。4.92mol/L鹽酸溶液：量取鹽酸167mL,用水稀釋并定容至1000mL。4.100.05mol/L乙酸鈉甲醇溶液：稱取乙酸鈉6.12g,用900mL水溶解，1mol/L氫氧化鈉調(diào)pH至7.0,加入甲醇并定容至1000mL。4.112%(V/V)甲酸乙酸乙酯溶液：量取甲酸2mL,加入乙酸乙酯并定容至100mL。4.120.1%甲酸乙腈水溶液：量取乙腈300mL,加入甲酸1mL,加入水并定容至1000mL。4.130.5%(V/V)甲酸水溶液：量取甲酸0.5mL,加入水并定容至100mL。4.143-甲基喹噁啉-2-羧酸標準品：純度≥98.0%。4.15N1-脫氧乙酰甲喹、脫二氧乙酰甲喹參照品：純度≥98.0%。2DB37/T2945—20170.0100g,分別用乙腈溶解并定容至100mL,-18℃保存，保存期6個月。備液各1mL,分別用乙腈稀釋并定容至100mL,4℃保存，保存期1個月。標準中間溶液各2mL,于10mL容量瓶中，乙腈稀釋并定容，現(xiàn)用現(xiàn)配。5.7分析天平：感量0.0001g。5.8天平：感量0.01g。測，-18℃以下冷凍保存?zhèn)溆谩７Q取樣品5g(±0.05g)于50mL離心管中，加入2mol/L鹽酸(4.9)15mL,均質(zhì)30s,超聲提6.3.1依次用甲醇3mL、2mol/L鹽酸(4.9)3mL活化MAX固相萃取柱，取備用液過柱，控制流速不超過2mL/min,用0.05mol/L乙酸鈉甲醇溶液(4.10)3mL淋洗固相萃取柱，將固相萃取柱抽干，用2%的甲酸乙酸乙酯溶液(4.11)6mL洗脫，控制流速不超過2mL/min。6.3.2收集洗脫液于10mL具塞玻璃離心管中，經(jīng)無水硫酸鈉脫水后于40℃水浴中氮吹至干，用0.1%甲酸乙腈水溶液(4.12)定容至1.0mL,過0.22μm濾膜，待測。中，分別加入2%的甲酸-乙酸乙酯溶液(4.11)4mL,與同批次樣品同時于40℃下氮氣吹干，定容、3DB37/T2945—20176.4.2此標準溶液中3-甲基喹噁啉-2-羧酸濃度分別為10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL,臨用前配制。以3-甲基喹噁啉-2-羧酸特征離子質(zhì)量色譜峰面積為縱坐標，標準溶液濃度6.5測定6.5.1.5柱溫：40℃。6.5.1.6流動相梯度洗脫程序見表1。時間(min)A(%)B(%)0.0050.25558.5058.51556.5.2.3離子源溫度：110℃。目標化合物母離子子離子碰撞能量3-甲基喹噁啉-2-羧酸N1-脫氧乙酰甲喹脫二氧乙酰甲喹注：*代表定量離子，N1-脫氧乙酰甲喹和脫二氧乙酰甲喹僅做定性用。46.5.3液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析6.5.3.1定性方法在相同的測試條件下，試樣液中3-甲基喹噁啉-2-羧酸、N1-脫氧乙酰甲喹、脫二氧乙酰甲喹保留時間與標準物質(zhì)保留時間相對偏差在±5%以內(nèi)，且檢測到的離子的相對豐度，用與最強離子(基峰)的強度百分比表示，應(yīng)當(dāng)與濃度相當(dāng)?shù)男Ｕ龢藴氏鄬ωS度一致?；迮c次強碎片離子豐度比應(yīng)符合表3要求。表3基峰與次強碎片離子豐度比要求次強碎片離子相對豐度(%)允許偏差(%)6.5.3.2定量方法將混合標準溶液(6.4)和樣品制備液等體積進樣，以峰面積計算，外標法定量。定量離子采用豐度最大的二級特征離子碎片(表2),在上述條件下，標準溶液中目標化合物的特征離子流色譜圖參見《色譜圖》(見附錄A)。6.5.3.3空白試驗除不加試樣外，均按上述測定條件和步驟進行。樣品中3-甲基喹噁啉-2-羧酸殘留量按公式(1)計算。計算結(jié)果需扣除空白值。結(jié)果保留三位有效數(shù)字。.......................................(1)式中：X——試樣中3-甲基喹噁啉-2-羧酸殘留量，單位為微克每千克(μg/kg);C——試樣制備液中3-甲基喹噁啉-2-羧酸濃度，單位為納克每毫升(ng/mL);V——試樣最終定容體積，單位為毫升(mL);m——試樣的質(zhì)量，單位為克(g)。8定量限本方法3-甲基喹噁啉-2-羧酸定量限為2.0μg/kg。9準確度3-甲基喹噁啉-2-羧酸在添加濃度2μg/kg~20μg/kg時，回收率均為70%～120%。5DB37/T2945—2017本方法的批內(nèi)相對標準偏差小于15%,批間相對標準偏差小于15%。6DB37/T2945—2017(資料性附錄)色譜圖BZ1020160611-233.723:MRMof2ChannelsES+187.17>159.15(STY-MEQ)2.91e60.5020160611-231.001.502.002.503.003.504.003.144.505.005.502:MRMof2ChannelsES+189>143.1(MQCA)1.14e50.5020160611-231.001.502.002.503.003.504.003.444.505.005.501:MRMof2ChannelsES+203>143(ty-MEQ)4.64e4-0.501.001.502.002.503.003.603.504.004.505.005.50Time圖A.1標準溶液選擇離子流圖(3-甲基喹噁啉-2-羧酸、N1-脫氧乙酰甲喹、脫二氧乙酰甲喹濃度均為10.0ng/mL)7DB37/T2945—2017YPKB-HS20160528-17100-3.723:MRMof2ChannelsES+187.17>159.15(STY-MEQ)9.86e40-0.501.001.502.002.5020160528-17-2.292.330-WiMM0.501.001.502.002.5020160528-173.413.033.574.323.003.504.004.503.043.022.962.573.593.713.733.753.773.813.884.213.003.504.004.503.353.415.002:MRM4.795.001:MRM5.50of2ChannelsES+189>143.1(MQCA)4.22e35.50of2ChannelsES+203>143(ty-MEQ)4.93e3■0.110.400.770.981.210-h49-0.501.002.231.701.852.231.502.003.342.983.212.652.943.643.674.094.124.344.62Time4.505.003.504.005.504.505.003.504.005.502.50圖A.2空白海參選擇離子流圖T820160611-363.723:MRMof2ChannelsES+187.17>159.15(STY-MEQ)1.42e70-0.5020160611-361.001.502.002.503.003.504.003.144.505.005.502:MRMof2ChannelsES+189>143.1(MQCA)5.36e50-0.5020160611-361.001.502.002.503.003.504.003.444.505.005.501:MRM