《畜禽產(chǎn)品中獸藥多殘留高通量篩選檢測 液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法》

ICS67.120

X04

團體標準

T/SZSXXXX—2020

畜禽產(chǎn)品中獸藥多殘留高通量篩選檢測

液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法

Highthroughputscreeningdetectionofveterinarydrugresiduesin

livestockandpoultryproductsbyliquidchromatography-tandemmass

spectrometry

（征求意見稿）

2020-XX-XX發(fā)布2020-XX-XX實施

深圳市深圳標準促進會發(fā)布

T/SZSXXXX-2020

畜禽產(chǎn)品中獸藥多殘留高通量篩選檢測液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法

1范圍

本文件規(guī)定了畜禽產(chǎn)品中132種獸藥（磺胺及菌增效劑類22種、氟喹諾酮類19種、苯并咪唑類

17種、大環(huán)內(nèi)酯類9種、β-受體激動劑類15種、精神控制類10種、解熱鎮(zhèn)痛類17種、硝基咪唑類6

種、氨苯砜、抗球蟲藥類8種、抗病毒類5種、酰胺醇類抗生素3種）殘留的液相色譜—質(zhì)譜/質(zhì)譜檢

測方法。

本文件適用于豬肉、雞肉、牛奶、雞蛋中132種獸藥殘留量的篩查檢測,其他動物源性食品可參照

執(zhí)行。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)則和試驗方法

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4原理

樣品經(jīng)EDTA和乙腈提取，再用MAS-Q鹽包凈化，液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法檢測。

5試劑和材料

注：以下所用的試劑，除特別注明者外均為分析純試劑；水符合GB/T6682規(guī)定的一級水。

5.1試劑

5.1.1甲醇，色譜純。

5.1.2乙腈，色譜純。

5.1.3甲酸，色譜純。

5.1.4乙腈。

5.1.5乙二胺四乙酸二鈉。

5.1.6檸檬酸。

5.1.7磷酸氫二鈉。

1

T/SZSXXXX-2020

5.1.8鹽酸。

5.1.9氫氧化鈉。

5.1.10乙酸銨，色譜純。

5.2溶液配制

5.2.10.1mol/L檸檬酸溶液：稱取21.01g檸檬酸（5.1.6），用水溶解，定容至1000mL。

5.2.20.2mol/L磷酸氫二鈉溶液：稱取28.41g磷酸氫二鈉（5.1.7），用水溶解，定容至1000mL。

5.2.3Mcllvaine緩沖溶液：將1000mL0.1mol/L檸檬酸溶液（5.2.1）與625mL0.2mol/L磷酸氫

二鈉溶液（5.2.2）混合，必要時用氫氧化鈉或鹽酸調(diào)節(jié)pH=4.0±0.05。

5.2.40.1mol/LNa2EDTA-Mcllvaine緩沖溶液：稱取60.5g乙二胺四乙酸二鈉（5.1.5）放入1625mL

Mcllvaine緩沖溶液（5.2.3）中，使其溶解，搖勻。

5.2.5乙腈水溶液：移取30mL乙腈（5.1.2），加入70mL水，混合均勻。

5.2.65mmol/L乙酸銨溶液：稱取0.385g乙酸銨（5.1.10），用水溶解，定容至1000mL。

5.3獸藥及相關(guān)化學(xué)品標準溶液

5.3.1按照獸藥及相關(guān)化學(xué)品的性質(zhì)，將132種獸藥及相關(guān)化學(xué)品標準品分成A磺胺及菌增效劑類、B

氟喹諾酮類、C苯并咪唑類、D大環(huán)內(nèi)酯類、Eβ-受體激動劑類、F精神控制類、G解熱鎮(zhèn)痛類、H硝基

咪唑類、I氨苯砜、J抗球蟲藥類、K抗病毒類、L酰胺醇類抗生素共12組，本標準對132種獸藥及相

關(guān)化學(xué)品標準品分組及詳細化合物信息見附錄A。

5.3.2標準儲備液的配置：取適量單個標準品（5.3.1），根據(jù)標準品的溶解度選擇甲醇、乙腈等適宜

溶劑溶解并定容至終濃度為1.00mg/mL，-18℃冷凍保存，有效期為12個月。

5.3.3混合標準中間液：根據(jù)每種獸藥及相關(guān)化學(xué)品的篩查限，確定其在混合標準中間液中的濃度，

再按獸藥及相關(guān)化學(xué)品組別分別配置12組混合標準中間液。移取一定量的單個獸藥標準儲備液（5.3.2）

于100mL容量瓶中，用甲醇、乙腈等適宜溶劑定容至刻度?；旌蠘藴手虚g液-18℃冷凍保存，有效期

為3個月。

5.3.4混合標準工作液：根據(jù)每種獸藥及相關(guān)化學(xué)品的篩查限，確定其在基混合標準工作液中的濃度。

移取一定量的獸藥混合標準中間液（5.3.3），用乙腈水溶液（5.2.5）配成不同濃度的混合標準工作液。

混合標準工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。

5.4材料

5.4.1凈化鹽包[CleanertMAS-Q（MS-9PA0228）]。1

5.4.2微孔濾膜：0.22μm，通用型。

6儀器和設(shè)備

1)1CleanertMAS-Q是Agela公司產(chǎn)品的商品名稱，給出這一信息是為了方便本標準的使用者，并不是表示對該

產(chǎn)品的認可。如果其他等效產(chǎn)品具有相同的效果，則可使用這些等效產(chǎn)品。

2

T/SZSXXXX-2020

6.1液相色譜—質(zhì)譜/質(zhì)譜儀，配電噴霧離子源(ESI)。

6.2渦旋振蕩器。

6.3高速離心機。

6.4氮吹儀。

6.5分析天平：感量0.1mg和10mg。

6.6超聲波清洗儀。

7試樣制備與貯存

7.1豬肉、雞肉

從原始樣品取出有代表性樣品約500g，用組織搗碎機充分搗碎混勻，裝入潔凈容器作為試樣，密

封，并標明標記。將試樣置于-18℃冷凍避光保存。

7.2牛奶

從原始樣品取出有代表性樣品約500g，充分混勻，裝入潔凈容器作為試樣，密封，并標明標記。

將試樣置于0℃～4℃冷藏避光保存。

7.3雞蛋

從原始樣品取出有代表性樣品約500g，去殼后用組織搗碎機攪拌充分混勻，裝入潔凈容器作為試

樣，密封，并標明標記。將試樣置于0℃～4℃冷藏避光保存。

8分析步驟

8.1提取

準確稱取勻漿試樣2.5g（精確至0.01g）于50ml具塞離心管中，加入1ml0.1mol/LNa2EDTA-

Mcllvaine緩沖溶液（5.2.4），渦旋15s，再加入9ml乙腈（5.1.4），振蕩10分鐘，超聲20min，9000

r/min離心5min。

8.2凈化

移取5ml上清液，加入凈化鹽包（5.4.1），振搖5min，9000r/min離心5min。移取4ml上清液

于刻度試管中，40℃氮吹至0.5mL以下，用乙腈水溶液（5.2.5）定容至1ml，過0.22μm濾膜（5.4.2），

供液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測定。

8.3測定

8.3.1液相色譜參考條件

液相色譜參考條件如下：

a)色譜柱：BEHC18，1.7μm，100×3.0mm（內(nèi)徑），或性能相當者；

b)流動相：正離子模式：A相：0.05％甲酸5mmol/L乙酸銨溶液；B相：甲醇；

負離子模式：A相：水；B相：甲醇；

3

T/SZSXXXX-2020

c)柱溫：40℃；

d)進樣量：5.0μL；

e)流動相洗脫梯度如表1所示。

表1流動相洗脫梯度

正離子模式負離子模式

時間/minA(%)B(%)流速mL/min時間/minA(%)B(%)流速mL/min

0.009730.30.009550.3

0.5080200.30.509550.3

7.0050500.32.505950.3

11.005950.34.505950.3

12.505950.34.609550.3

12.609730.36.009550.3

14.509730.3----

8.3.2質(zhì)譜參考條件

質(zhì)譜參考條件如下所示：

a)離子源：電噴霧離子源；

b)檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)；

c)質(zhì)譜儀器參數(shù)如表2所示。

表2質(zhì)譜儀器參數(shù)

離子源/氮氣正離子負離子

電噴霧電壓（IS）5500V-4500V

氣簾氣壓力（CUR）30psi30psi

離子源霧化器溫（TEM）600℃600℃

霧化氣壓力（GS1）50psi50psi

輔助氣壓力（GS2）60psi60psi

d)定性定量離子對及錐孔電壓（DP）、碰撞能量（CE）見附錄A，典型譜圖見附錄B。

8.4定性檢測

a)試樣溶液中目標化合物色譜峰保留時間與同批次標準溶液中該目標化合物的保留時間偏差在

±2.5%之內(nèi)，則可以初步判斷試樣中存在該獸藥殘留。

b)試樣溶液中目標化合物所監(jiān)測定性離子均出現(xiàn)，且信噪比大于等于3；試樣溶液中的離子相對

豐度與空白添加標準溶液中的離子相對豐度相比，符合表3的要求，則可判定為試樣中存在該種化合物；

試樣溶液中目標化合物檢測濃度大于等于方法篩查限時判定為陽性結(jié)果。

表3試樣溶液中離子相對豐度的允許偏差范圍

相對豐度允許偏差（％）

?50±20

?20～50±25

?10～20±30

≤10±50

4

T/SZSXXXX-2020

9靈敏度

132種獸藥的篩查限見附錄A。

5

T/SZSXXXX-2020

附錄A

（資料性）

132種化合物基本信息、質(zhì)譜參數(shù)及方法篩查限

132種化合物基本信息、質(zhì)譜參數(shù)及方法篩查限如表A.1所示。

表A.1132種化合物基本信息、質(zhì)譜參數(shù)及方法篩查限

保留時間方法篩查限

類別序號藥物名稱英文名稱CAS號母離子子離子DP/VCE/eV掃描模式

（min）μg/kg

251.1156.0*4022

1磺胺嘧啶Sulfadiazine68-35-93.69ESI+10

251.1924038

256156.0*4022

2磺胺噻唑Sulfathiazole72-14-03.9ESI+10

2561084032

250.1156.1*4023

3磺胺吡啶Sulfapyridine144-83-24.23ESI+10

250.11084032

265.2156.1*8225

4磺胺甲基嘧啶Sulfamerazine127-79-74.47ESI+10

265.2172.18225

A.磺胺類及

279.1186.1*6023

抗菌增效劑5磺胺二甲基嘧啶Sulfamethazine57-68-13.76ESI+10

279.11566027

281.1156.0*7525

6磺胺間甲氧嘧啶Sulfamonomethoxine1220-83-36.12ESI+10

281.1126.17530

271156.1*6521

7磺胺甲噻二唑Sulfamethizole144-82-15.01ESI+10

2711086536

281.1156.1*7025

8磺胺對甲氧嘧啶Sulfameter651-06-94.91ESI+10

281.1108.17035

9磺胺氯噠嗪Sulfachloropyridazine80-32-0285.1156.0*5.786522ESI+10

6

T/SZSXXXX-2020

保留時間方法篩查限

類別序號藥物名稱英文名稱CAS號母離子子離子DP/VCE/eV掃描模式

（min）μg/kg

285.1108.16537

281156.0*7525

10磺胺甲氧噠嗪Sulfamethoxypyridazine80-35-35.4ESI+10

281126.17527

磺胺鄰二甲氧嘧311.1156.1*7030

11Sulfadoxine2447-57-66.33ESI+10

啶311.1108.27037

磺胺間二甲氧嘧311.1156.1*7028

12Sulfadimethoxine122-11-27.92ESI+10

啶311.12187028

254.1156.0*6522

13磺胺甲噁唑Sulfamethoxazole723-46-65.93ESI+10

254.11086536

268.1156.1*8222

14磺胺二甲異噁唑Sulfisoxazole127-69-56.3ESI+10

268.1113.28225

A.磺胺類及

277.1156.0*6019

抗菌增效劑15苯甲?；前稴ulfabenzamide127-71-96.78ESI+10

277.11086032

301.1156.0*8024

16磺胺喹惡啉Sulfaquinoxaline59-40-58.32ESI+10

301.11088036

215156.0*5217

17磺胺醋酰Sulfacetamide144-80-93.31ESI+10

2151085229

291.1230.1*9533

18甲氧芐氨嘧啶Trimethoprim738-70-54.85ESI+10

291.1123.19534

315156.0*9027

19磺胺苯吡唑Sulfaphenazole526-08-97.32ESI+10

3151089040

278.6156.0*11027

20磺胺二甲異嘧啶Sulfisomidine515-64-05.29ESI+10

278.6186.211023

7

T/SZSXXXX-2020

保留時間方法篩查限

類別序號藥物名稱英文名稱CAS號母離子子離子DP/VCE/eV掃描模式

（min）μg/kg

268156.0*5022

21磺胺噁唑Sulfamoxole729-99-74.9ESI+10

2681085046

285156.0*5022

22磺胺氯吡嗪Sulfaclozina102-65-87.56ESI+10

2851085046

360316.1*8025

23恩諾沙星Enrofloxacin93106-60-65.63ESI+5

360245.18035

320.1276.1*8026

24諾氟沙星Norfloxacin70458-96-75.28ESI+5

320.1233.18035

334.1316.1*8027

25培氟沙星Pefloxacin70458-92-35.13ESI+5

334.1290.28025

332.1288.1*8025

26環(huán)丙沙星Ciprofloxacin85721-33-15.47ESI+5

332.1245.18033

362.2318.1*8026

B.氟喹諾酮27氧氟沙星Ofloxacin82419-36-15.05ESI+5

362.2261.18038

類

386342.3*8025

28沙拉沙星Sarafloxacin98105-99-86.25ESI+5

3862998038

321.2303.1*6528

29依諾沙星Enoxacin74011-58-85.08ESI+5

321.2232.16549

352265.0*8033

30洛美沙星Lomefloxacin98079-51-75.81ESI+5

352308.18028

233215.0*6818

31萘啶酸Nalidixicacid389-08-29.94ESI+5

2331876834

32惡喹酸Oxolinicacid14698-29-4262216.1*8.237040ESI+5

8

T/SZSXXXX-2020

保留時間方法篩查限

類別序號藥物名稱英文名稱CAS號母離子子離子DP/VCE/eV掃描模式

（min）μg/kg

262244.17026

262.1202.1*7742

33氟甲喹Flumequin42835-25-610.27ESI+5

262.1244.17723

358.1340.1*6530

34達氟沙星Danofloxacin112398-08-05.56ESI+5

358.1255.16555

400.1356.1*8028

35雙氟沙星Difloxacin98106-17-36.13ESI+5

400.1299.18041