2025年高考生物一輪復(fù)習(xí)：人教版（2019）選擇性必修3《生物技術(shù)與工程》必背考點(diǎn)清單

第第頁(yè)2025年高考生物一輪復(fù)習(xí)：人教版（2019）選擇性必修3《生物技術(shù)與工程》必背考點(diǎn)清單第1章發(fā)酵工程一、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1、什么是發(fā)酵工程？(★)發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)?；a(chǎn)對(duì)人類有用的產(chǎn)品。它涉及菌種的選育和培養(yǎng)、產(chǎn)物的分離和提純等方面。2、什么是發(fā)酵？(★)是指人們利用微生物，在適宜的條件下，將原料通過微生物的代謝轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。3、什么是傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)？(★)直接利用原料中天然存在的微生物，或利用前一次發(fā)酵保存下來的面團(tuán)、鹵汁等發(fā)酵物中的微生物進(jìn)行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)。4、發(fā)酵的類型有哪些？(★★)有氧發(fā)酵：如醋酸發(fā)酵；無氧發(fā)酵：如酒精發(fā)酵、乳酸發(fā)酵。5、酵母菌的新陳代謝類型？生殖方式？(★★★)酵母菌是異養(yǎng)兼性厭氧型微生物，屬于真菌。生殖方式：出芽生殖(主要)，孢子生殖6、利用酵母菌制作果酒的原理是什么？(★★★★★)在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖。酶酶C6H12O6＋6O2＋6H2O→6CO2＋12H2O+能量在無氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。酶酶C6H12O6→2C2H5OH＋2CO2+能量7、酵母菌繁殖及發(fā)酵的適宜溫度是多少？(★★★)28℃左右最適宜酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18℃-30℃。8、在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中，起主要作用的微生物——酵母菌來源于哪里？(★★★)附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌。土壤是酵母菌的大本營(yíng)9、葡萄酒所呈現(xiàn)的深紅色來源于哪里？(★★★★)紅葡萄皮的色素進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色10、在發(fā)酵過程中,其他微生物為什么沒有大量繁殖而影響酒的質(zhì)量？(★★★)在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。11、醋酸菌的新陳代謝類型？生殖方式？(★★★)醋酸菌是異養(yǎng)需氧型細(xì)菌,生殖方式為二分裂。12、利用醋酸菌制作果醋的原理是什么？(★★★★★)當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。酶酶C6H12O6＋2O2→CH3COOH（醋酸）＋2H2O+2CO2+能量酶酶C2H5OH＋O2→CH3COOH（醋酸）＋H2O+能量（提示：在變酸的酒的表面觀察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的）13、醋酸菌發(fā)酵的適宜溫度范圍是多少？(★★★)醋酸菌最適生長(zhǎng)溫度為30～35℃。14、請(qǐng)寫出果酒果醋制作的實(shí)驗(yàn)流程？(★★)挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→醋酸發(fā)酵果酒果醋15、如何檢驗(yàn)是否有酒精產(chǎn)生？(★★★★★)在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。16、如右圖裝置中各部分的作用是什么？(★★★★)充氣口作用是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣；排氣口是在酒精發(fā)酵時(shí)用來排出二氧化碳的；出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身相連接，其目的是防止空氣中微生物的污染。使用該裝置制酒時(shí)，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制醋時(shí)，應(yīng)該充氣口連接氣泵，輸入氧氣。17、果酒發(fā)酵裝瓶時(shí)為何要留有約1/3的空間？發(fā)酵時(shí)為何要定期擰松瓶蓋？(★★★★★)讓酵母菌在有氧條件下進(jìn)行有氧呼吸，以利于大量繁殖，縮短發(fā)酵時(shí)間。擰松瓶蓋以放出二氧化碳，防止發(fā)酵瓶爆裂。18、你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？為什么？(★★★★)應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。沖洗時(shí)不能反復(fù)多次沖洗，防止菌種流失。19、你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？(★★★)要先沖洗葡萄，再除去枝梗；榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈，并進(jìn)行酒精消毒；每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋，不要完全揭開瓶蓋等。20、腐乳發(fā)酵中起主要作用的是哪種微生物？(★★★)毛霉21、利用毛霉等微生物制作腐乳的原理是什么？(★★★★)毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳，不易成形。22、吃腐乳時(shí)，你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢？(了解)“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長(zhǎng)的菌絲（匍匐菌絲），對(duì)人體無害。23、乳酸菌的新陳代謝類型？(★★)異養(yǎng)厭氧型24、利用乳酸菌制作泡菜的原理是什么？(★★★★)在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解為乳酸。反應(yīng)式為：C6H12O62C3H6O3+能量25、配制鹽水時(shí)，清水與鹽的質(zhì)量比為多少？(★★★)5%-20%的鹽水26、向壇中注入鹽水前需要對(duì)鹽水如何處理？(★★★★)煮沸、冷卻27、泡菜制作過程中為什么要控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量？(★★★★)溫度過高、食鹽用量過低、腌制時(shí)間過短，容易造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。一般在腌制10d后，亞硝酸鹽的含量開始下降。28、亞硝酸鹽與人體健康有什么關(guān)系？(★)膳食中的亞硝酸鹽一般不會(huì)危害人體健康，但在適宜pH、溫度和一定微生物作用下形成亞硝胺，亞硝胺具有致癌、致畸、致突變作用。二、微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用1、培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為哪些類型？分別有什么作用？(★★★★)液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂（是從紅藻中提取的一種多糖）后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。作用：液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn)，固體培養(yǎng)基應(yīng)用于微生物的分離和鑒定。2、培養(yǎng)基按照用途可分為哪些類型？分別有什么作用？(★★★★★)選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。作用：選擇培養(yǎng)基是指只允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成的，用以鑒別不同類別的微生物。3、什么叫做菌落？(★★★★★)微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見的子細(xì)胞群體，稱為菌落。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。4、培養(yǎng)基一般包括哪些化學(xué)成分？(★★★★★)水、碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。如牛肉膏和蛋白胨就可為微生物提供碳源、氮源、無機(jī)鹽和維生素等物質(zhì)。5、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么？(★★★★★)防止雜菌污染6、消毒與滅菌的常用方法分別有哪些？消毒與滅菌有哪些不同點(diǎn)？(★★★★★)（1）消毒方法：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒、紫外線消毒等。（2）滅菌方法： ①接種環(huán)、接種針、涂布器、試管口等使用灼燒滅菌法； ②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱；③培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋； 利用沸水、流通蒸汽或高壓蒸汽滅菌的方法為濕熱滅菌。比較項(xiàng)理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強(qiáng)烈全部微生物能7、什么是微生物的純培養(yǎng)？微生物的純培養(yǎng)步驟有哪些？(★★★★)由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體，稱為純培養(yǎng)物，獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。微生物的純培養(yǎng)步驟有配置培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離、培養(yǎng)等。8、培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？(★★)可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。9、為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？(★★★★★)通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。10、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？(★★★★★)將平板倒置，既可以避免培養(yǎng)基表面的水分過快地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。11、在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？(★★★★)空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。12、微生物常用的接種方法是哪兩種？(★★★★★)平板劃線法、稀釋涂布平板法。13、什么是平板劃線法？(★★★★)平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的菌落。14、什么是稀釋涂布平板法？(★★★★)稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。15、用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是什么？(★★★★)使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，以便于純化菌種。16、為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？(★★★★★)操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種；劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。17、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？(★★★★★)以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。18、在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？(★★★★★)劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。19、使用后的培養(yǎng)基丟棄前應(yīng)該如何處理？(★★★★★)進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境。20、實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是什么？所用的是哪種類型的培養(yǎng)基？(★★★★★)人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。選擇培養(yǎng)基。21、設(shè)置對(duì)照的主要目的是什么？(★★★)排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。22、請(qǐng)簡(jiǎn)述從土壤中分離尿素分解菌的大體實(shí)驗(yàn)步驟？(★★)（1）土壤取樣（2）樣品的稀釋（3）微生物的培養(yǎng)與觀察23、應(yīng)在什么樣的環(huán)境中取樣？(★★★)在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層，有更多的微生物生長(zhǎng)。 24、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法有哪些？(★★★★★)測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。25、利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目的原理是什么？(★★★★)當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般設(shè)置3～5個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，并取平均值。26、稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目高還是低？為什么？(★★★★★)低，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。27、樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目，適于計(jì)數(shù)的平板其菌落數(shù)應(yīng)控制在什么范圍？(★★★★★)30-300之間28、培養(yǎng)時(shí)間不足會(huì)導(dǎo)致什么結(jié)果？如何減少這樣的誤差？(★)培養(yǎng)時(shí)間不足會(huì)導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目?？梢悦扛?4小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果。29、分解尿素的細(xì)菌的分離原理是什么？(★★★★)在培養(yǎng)基中以尿素為氮源，只有能合成脲酶的細(xì)菌才能生長(zhǎng)，缺乏脲酶的細(xì)菌因缺乏氮源而不能生長(zhǎng)繁殖。30、如何初步鑒定分解尿素的細(xì)菌？(★★★)細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)。在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。三、發(fā)酵工程及其應(yīng)用31、發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)有哪些？(★★)發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制、滅菌，接種，發(fā)酵，產(chǎn)品的分離、提純等方面。32、發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)應(yīng)該注意哪些問題？(★★)發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，要隨時(shí)檢測(cè)培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進(jìn)程。還要及時(shí)添加必需的營(yíng)養(yǎng)組分，要嚴(yán)格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件。環(huán)境條件不僅會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖，而且會(huì)影響微生物代謝產(chǎn)物的形成。33、發(fā)酵工程的應(yīng)用有哪些方面？(★★)在食品工業(yè)的應(yīng)用：生產(chǎn)傳統(tǒng)的發(fā)酵產(chǎn)品，生產(chǎn)各種各樣的食品添加劑，生產(chǎn)酶制劑等。在醫(yī)藥工業(yè)的應(yīng)用：如生產(chǎn)抗生素、氨基酸、激素、免疫調(diào)節(jié)劑等。在農(nóng)牧業(yè)上的應(yīng)用：生產(chǎn)微生物肥料、微生物農(nóng)藥、微生物飼料等。34、什么叫單細(xì)胞蛋白？(★★)通過發(fā)酵獲得的大量的微生物菌體，稱為單細(xì)胞蛋白。第2章細(xì)胞工程一、植物細(xì)胞工程1、什么是細(xì)胞全能性？(★★)細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后，仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能。2、什么是植物組織培養(yǎng)？(★★★)將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。3、什么是外植體？離體培養(yǎng)的植物器官、組織或細(xì)胞。4、什么是脫分化？再分化？(★★★)在一定的激素和營(yíng)養(yǎng)等條件的誘導(dǎo)下，已經(jīng)分化的細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞，進(jìn)而形成不定形的薄壁組織團(tuán)塊的過程。這些組織團(tuán)塊稱為愈傷組織。愈傷組織重新分化成芽、根等器官的過程，稱為再分化。5、脫分化的實(shí)質(zhì)是什么？恢復(fù)細(xì)胞的全能性。6、啟動(dòng)植物細(xì)胞分裂、脫分化、再分化的關(guān)鍵激素是什么？(★★★)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。7、菊花組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，為什么要強(qiáng)調(diào)所用器械的滅菌和實(shí)驗(yàn)人員的無菌操作？(★★★)防止雜菌污染，因?yàn)殡s菌生長(zhǎng)快，會(huì)和培養(yǎng)物爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。雜菌生長(zhǎng)過程中會(huì)產(chǎn)生有害的物質(zhì)，導(dǎo)致培養(yǎng)物迅速死亡。接種時(shí)如何注意外植體插入培養(yǎng)基的方向？(★★)形態(tài)學(xué)下端插入培養(yǎng)基，不能倒插9、什么是植物體細(xì)胞雜交技術(shù)？(★★★★)將不同來源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。10、去除植物細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體的方法？(★★★)酶解法（纖維素酶和果膠酶處理）。11、誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法？(★★★★)物理法：融合法、離心法，化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+_高PH融合法。12、融合的原生質(zhì)體需要篩選嗎？(★★)兩兩融合的原生質(zhì)體的三種類型：AA、BB、AB，符合要求的只有AB，因此需要進(jìn)行篩選。植物體細(xì)胞雜交的原理是什么？（★★★★★)原生質(zhì)體融合的過程利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，雜種細(xì)胞發(fā)育成雜種植株利用了植物細(xì)胞的全能性。14、植物體細(xì)胞雜交的意義是什么？(★★★)打破生殖隔離，克服了遠(yuǎn)緣雜交育種，培育植物新品種。15、什么是脫毒苗？(★★)切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生出不帶病毒的幼苗。二、動(dòng)物細(xì)胞工程16、動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)有哪些？其中哪種技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)？(★★★)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞核移植等，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。什么是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)？(★★)從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后再適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要的營(yíng)養(yǎng)條件有哪些？(★★)葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。19、體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，如何營(yíng)造無菌、無毒的環(huán)境？(★★★)對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作。對(duì)培養(yǎng)液定期更換，以便清除代謝廢物。20、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要怎樣的氣體環(huán)境？(★★★)通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，并將它們置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。21、如何將新鮮取材的動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞？（★★★★★)用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。22、什么是細(xì)胞貼壁？(★★★)某些動(dòng)物細(xì)胞需要貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上進(jìn)行生長(zhǎng)增殖的現(xiàn)象。23、什么是原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)？(★★★)動(dòng)物組織經(jīng)胰蛋白酶處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。將分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。24、懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞與貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞如何收集進(jìn)行傳代培養(yǎng)？(★★★)懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集，貼壁細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶處理成單個(gè)細(xì)胞后，再用離心法搜集25、干細(xì)胞的種類？(★★)胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞。26、什么是胚胎干細(xì)胞？(★★★★)簡(jiǎn)稱ES細(xì)胞，存在于早期胚胎中，具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能。27、什么是成體干細(xì)胞？(★★)成體干細(xì)胞是成體組織或器官內(nèi)的干細(xì)胞，具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞活組織，不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。28、成體干細(xì)胞的種類？(★★)包括骨髓造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、精原干細(xì)胞等。29、什么是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)？(★★)使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。30、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的原理是什么？(★★)細(xì)胞膜的流動(dòng)性。31、誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有哪些？(★★★)PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法等。32、什么是滅活？(★★)用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力，但并不破壞它們的抗原結(jié)構(gòu)。33、滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是什么？(★★★)病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞相互聚集，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。34、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞有什么特征？(★★★)既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體。35、雜交瘤細(xì)胞如何處理才能獲得能分泌所需抗體的迅速增殖的細(xì)胞？(★★★★)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。36、如何抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行增殖？(★★★★)體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射倒小鼠腹腔。單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)？(★★)特異性強(qiáng)，靈敏度高，又可以大量制備。38、什么是動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)？分類？(★★★)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。39、為什么動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度更高？(★★★)由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，表現(xiàn)全能性相對(duì)容易，而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，表現(xiàn)全能性十分困難。40、去核的卵母細(xì)胞需要在體外培到什么時(shí)期？常用去核的方法？(★★★)MⅡ期顯微操作法41、什么是重構(gòu)胚胎？(★★)人工重新構(gòu)建的胚胎，具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。三、胚胎工程42、什么是胚胎工程？(★★)是指對(duì)生殖細(xì)胞、受精卵或早期胚胎細(xì)胞進(jìn)行多種顯微操作和處理，然后將獲得的胚胎移植到雌性動(dòng)物體內(nèi)生產(chǎn)后代，以滿足人類的各種需求。胚胎工程技術(shù)分類？(★★★)體外受精、胚胎移植、胚胎分割等。44、什么是精子獲能？(★★★★)剛剛排出的精子不能立即與卵子受精，必須在雌性動(dòng)物的生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后，才能獲得受精能力的生理現(xiàn)象。45、防止多精入卵的屏障？(★★★★★)透明帶反應(yīng)和卵黃膜的封閉作用。46、多數(shù)哺乳動(dòng)物受精的標(biāo)志？(★★★★)觀察到兩個(gè)極體或出現(xiàn)雌、雄原核。早期胚胎發(fā)育可以分為幾個(gè)階段？(★★★★★)桑葚胚、囊胚、原腸胚囊胚中的內(nèi)細(xì)胞圖與滋養(yǎng)層細(xì)胞的發(fā)育方向？（★★★★★）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織，滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤。哺乳動(dòng)物的體外受精技術(shù)包括哪些步驟？(★★★)卵母細(xì)胞的采集、精子的獲取和受精50什么是胚胎移植技術(shù)？(★★★)將通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。胚胎移植的操作步驟又哪些？(★★★)供體、受體的選擇和處理，配種或人工授精，胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存，胚胎的移植，以及移植后的檢查。胚胎移植的優(yōu)勢(shì)？(★★★★)充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力。什么是胚胎分割技術(shù)？(★★★)采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。胚胎分割時(shí)應(yīng)選用怎樣的胚胎？(★★★)發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚。分割囊胚階段的胚胎需要注意什么？(★★★)將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。胚胎分割的應(yīng)用又哪些？(★★)促進(jìn)優(yōu)良動(dòng)物品種的繁殖，胚胎移植前的性別鑒定、遺傳病篩查等。第3章基因工程一、重組DNA技術(shù)的基本工具1、什么是基因工程（重組DNA技術(shù)）？(★★★★)基因工程是指按照人們的愿望，通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。從技術(shù)操作層面看，由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫作重組DNA技術(shù)。2、重組DNA技術(shù)的基本工具是什么？(★★★★★)準(zhǔn)確切割DNA分子的“分子手術(shù)刀”——限制性內(nèi)切核酸酶；將DNA片段再連接起來的“分子縫合針”——DNA連接酶；將體外重組好的DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞的“分子運(yùn)輸車”——基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體。3、限制性核酸內(nèi)切酶主要是從哪種生物中分離純化出來的？(★)原核生物4、限制性核酸內(nèi)切酶的作用原理？(★★★★)識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。5、限制性核酸內(nèi)切酶切割產(chǎn)生的DNA片段通常有哪兩種形式？(★★★)粘性末端和平末端。6、大多數(shù)限制性內(nèi)切酶的識(shí)別序列由幾個(gè)核苷酸組成？EcoRl、SmaI的識(shí)別序列分別是什么？(★)6個(gè)；G與A，G與C7、DNA鏈接酶的作用機(jī)理是什么？(★★★)恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。8、基因工程操作過程中，DNA連接酶主要有哪兩類？比較兩種酶功能的異同。(★★★)常用類型E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶來源大腸桿菌T4噬菌體功能只縫合黏性末端縫合黏性末端和平末端（連接平末端的效率相對(duì)較低）9、區(qū)分作用于DNA的幾種酶？(★★★)名稱作用部位作用結(jié)果限制酶磷酸二酯鍵將DNA切成兩個(gè)片段DNA連接酶磷酸二酯鍵將兩個(gè)DNA片段連接為一個(gè)DNA分子DNA聚合酶磷酸二酯鍵將單個(gè)脫氧核苷酸依次連接到單鏈末端DNA(水解)酶磷酸二酯鍵將DNA片段水解為單個(gè)脫氧核苷酸10、中使用的載體都有哪些？常用哪種？(★★★)質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒。常用的是質(zhì)粒。11、什么是質(zhì)粒？有何特點(diǎn)？(★★★★★)質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于真核細(xì)胞細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子。特點(diǎn)：①裸露的、環(huán)狀、雙鏈、具有自我復(fù)制能力；②有一至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)；③人工改造過的作為載體的質(zhì)粒常有特殊的標(biāo)記基因。12、基因工程中人工改造的質(zhì)粒為何要有特殊的標(biāo)記基因？(★★★★★)便于重組DNA分子的篩選。13、攜帶外源DNA片段的質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞后的復(fù)制方式是怎樣的？(★★★)在細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制，或整合到受體DNA上，隨受體DNA同步復(fù)制。14、DNA的粗提取的原理是什么？(★★★★)利用DNA和其他物質(zhì)（RNA、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等）在理化性質(zhì)方面的差異，提取DNA。15、DNA鑒定的原理是什么?(★★★★★)DNA遇二苯胺在沸水浴條件下顯藍(lán)色。16、在洋蔥研磨液的上清液中加入漁獵的95%的酒精的目的是什么？(★★★)DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精，利用這一原理，可以初步分離DNA和蛋白質(zhì)。17、為什么要用2mol/L的NaCl溶解提取的DNA?(★★★)DNA在不同濃度的NaCl中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液。二、基因工程的基本操作程序18、培育轉(zhuǎn)基因生物的主要步驟是什么？(★★★★★)目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)耸荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。19、什么是目的基因？(★★★)在基因工程的設(shè)計(jì)和操作中，用于改變受體細(xì)胞性狀或獲得預(yù)期表達(dá)產(chǎn)物等的基因就是自的基因。20、培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉用到的目的基因是什么？是從哪種生物中獲取的？能表達(dá)哪種蛋白？(★★★★)Bt抗蟲蛋白基因，簡(jiǎn)稱Bt基因；蘇云金桿菌；蘇云金桿菌伴孢晶體蛋白（Bt抗蟲蛋白）。21、Bt抗蟲蛋白殺蟲的原理是什么？(★)破壞鱗翅目昆蟲的消化系統(tǒng)來殺死棉鈴蟲。22、篩選目的基因較為有效的方法是什么？(★★★)從相關(guān)的已知結(jié)構(gòu)和功能清晰的基因中篩選。23、獲取和擴(kuò)增目的基因的常用方法是什么？(★★★★★)PCR24、什么是PCR？(★★★★★)PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。它是一項(xiàng)根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對(duì)目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)。25、PCR的條件是什么？(★★★★)PCR反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中才能進(jìn)行，需提供DNA模板，分別與兩條模板鏈結(jié)合的2種引物，4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶;同時(shí)通過控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行。26、引物的化學(xué)的本質(zhì)是什么？(★★)引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)的短單鏈核酸。（通常為20~30個(gè)核苷酸）27、PCR的過程是什么?(★★★★)目的基因DNA受熱變性后解為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合；然后以單鏈DNA為模板，在DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸，即將4種脫氧核苷酸加到引物的3'端，如此重復(fù)循環(huán)多次。由于延伸后得到的產(chǎn)物又可以作為下一個(gè)循環(huán)的模板，因而每一次循環(huán)后目的基因的量可以增加一倍，即成指數(shù)形式擴(kuò)增(約為2n，其中n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù))。每次循環(huán)一般可以分為變性、復(fù)性和延伸三步。28、基因表達(dá)載體構(gòu)建的目的是什么？(★★★)讓基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代；同時(shí)，使轉(zhuǎn)入的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。29、一個(gè)完整的表達(dá)載體需要有哪些結(jié)構(gòu)？(★★★★)復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子和終止子等。30、什么是啟動(dòng)子？作用是什么？(★★★)啟動(dòng)子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的上游，緊挨轉(zhuǎn)錄的起始位點(diǎn)，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位。驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達(dá)出蛋白質(zhì)。31、誘導(dǎo)型啟動(dòng)子的作用是什么？(★)當(dāng)誘導(dǎo)物存在時(shí)，可以激活或抑制目的基因的表達(dá)。32、什么是終止子？作用是什么？(★★★)位于基因的下游，一段具有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段。它可以使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停下來。33、構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程是怎么樣的？(★★★)首先用一定的限制酶切割載體，使它出現(xiàn)一個(gè)切口;然后用同種限制酶或能產(chǎn)生相同末端的限制酶切割含有目的基因的DNA片段;再利用DNA連接酶將目的基因片段拼接到載體的切口處，這樣就形成了一個(gè)重組DNA分子。34、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的常用方法有哪些？(★★★★)花粉管通道法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、顯微注射、感受態(tài)細(xì)胞法。35、Bt基因?qū)朊藁?xì)胞用的方法是什么？操作方式有哪些？(★★★)花粉管通道法?？梢杂梦⒘孔⑸淦鲗⒑康幕虻腄NA溶液直接注人子房中;可以在植物受粉后的一定時(shí)間內(nèi)，剪去柱頭，將DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道進(jìn)人胚囊。36、什么是轉(zhuǎn)化？(★★)是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)、并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。37、Ti質(zhì)粒來自于哪種生物？其特點(diǎn)是什么？(★)農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)含有Ti質(zhì)粒。農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞后，能將Ti質(zhì)粒上的T-DNA(可轉(zhuǎn)移的DNA)轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞，并且將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上。38、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是什么？(★)將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA中，通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化作用，使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞。39、目的基因檢測(cè)和鑒定的目的是什么?(★★★)檢查目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后是否穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳性。40、以抗蟲棉為例，如何進(jìn)行目的基因的檢測(cè)和鑒定？(★★★)首先是分子水平的檢測(cè)，包括通過PCR等技術(shù)檢測(cè)棉花的染色體DNA上是否插入了Bt基因或檢測(cè)Bt基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA;從轉(zhuǎn)基因棉花中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原——抗體雜交，檢測(cè)Bt基因是否翻譯成Bt抗蟲蛋白等。其次，還需要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。例如，通過采摘抗蟲棉的葉片飼喂棉鈴蟲來確定Bt基因是否賦予了棉花抗蟲特性以及抗性的程度。41、基因工程的基本操作程序是怎樣的？(★★★★★)獲取質(zhì)粒、噬菌體等載體將含有目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞檢測(cè)和鑒定目的基因是否穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性用限制酶切割載體和含有目的基因的DNA片段，然后用DNA連接酶連接獲取質(zhì)粒、噬菌體等載體將含有目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞檢測(cè)和鑒定目的基因是否穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性用限制酶切割載體和含有目的基因的DNA片段，然后用DNA連接酶連接，構(gòu)建基因表達(dá)載體。篩選和獲取目的基因篩選和獲取目的基因42、獲取目的基因的方法有哪些？(★)人工合成、PCR擴(kuò)增和構(gòu)建基因文庫(kù)43、將目的基因?qū)胧芫殉Ｓ玫姆椒ㄊ鞘裁矗?★)顯微注射44、基因工程的受體細(xì)胞常用生物是什么?應(yīng)用最廣的是哪種？(★)原核生物；大腸桿菌。45、如何處理大腸桿菌以便重組基因?qū)肫渲?？（如何獲得感受態(tài)細(xì)胞？）(★★)用Ca2+處理大腸桿菌細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。46、PCR的原理是什么？(★★)DNA熱變性原理和DNA復(fù)制的原理47、PCR過程中如何控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合？(★)利用DNA的熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。48、PCR反應(yīng)體系應(yīng)該提供哪些條件？(★★)緩沖液、DNA模板、四種脫氧核苷酸為原料、耐熱的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）、兩種引物、能量49、PCR一般要經(jīng)歷多少次循環(huán)？(★★)30多次50、PCR反應(yīng)過程的每次循環(huán)可分為哪三個(gè)階段？分別指代怎樣的過程？(★★★)變性：升溫到90℃以上，DNA解旋為單鏈；復(fù)性：降溫到50℃左右，兩種引物與兩條單鏈配對(duì)結(jié)合；延伸：升溫到72℃左右，四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，合成新的DNA鏈。51、DNA的合成方向是怎樣的？(★★★★)總是從子鏈的5′端向3′端延伸52、PCR與體內(nèi)DNA復(fù)制的主要不同點(diǎn)有哪些？(★)體內(nèi)復(fù)制需要解旋酶，PCR通過高溫解旋；體內(nèi)復(fù)制是普通的DNA聚合酶，PCR需要耐高溫的DNA聚合酶。53、為避免外源DNA等因素的污染，應(yīng)該如何操作？(★)微量離心管、槍頭、緩沖液、蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。54、DNA電泳的原理是什么？(★★★)DNA分子具有可解離的基團(tuán)，在一定的pH下，這些基團(tuán)可以帶上正電荷或負(fù)電荷。在電場(chǎng)的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與它所帶電荷相反的電極移動(dòng)，這個(gè)過程就是電泳。55、PCR產(chǎn)物一般通過哪種電泳來鑒定？(★)瓊脂糖凝膠電泳。56、在凝膠中DNA分子的遷移速率與什么有關(guān)？(★★★)與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)。57、電泳結(jié)束后如何觀察電泳結(jié)果？(★)凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來。58、瓊脂糖凝膠的一般配制質(zhì)量體積比是多少？(★)0.8~1.2%59、制備瓊脂糖凝膠時(shí)，添加染料的是在什么時(shí)候？(★)瓊脂糖加熱融化后稍冷卻。60、PCR實(shí)驗(yàn)前要將緩沖液、酶等做如何存放？(★)分裝成小份，放在-20℃存放。三、基因工程的應(yīng)用61、基因工程在農(nóng)牧業(yè)方面主要有哪些應(yīng)用？(★)用于改良植物品質(zhì)、提高動(dòng)物生長(zhǎng)速率、改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)。62、轉(zhuǎn)基因抗除草劑植物培育的原理是什么？(★)將降解或抵抗某種除草劑的基因?qū)胱魑铩?3、為解決乳糖不耐受、降低牛奶中的乳糖含量，科學(xué)家在奶牛體內(nèi)轉(zhuǎn)入什么基因？(★)腸乳糖酶基因64、基因工程在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域有何應(yīng)用？(★)對(duì)微生物或動(dòng)植物的細(xì)胞進(jìn)行基因改造，使它們能夠生產(chǎn)藥物；讓哺乳動(dòng)物批量生