郭勇酶工程第四版第四章思考題答案

郭勇酶工程第四版第四章思考題答案一、名詞解釋1、細(xì)胞破碎：許多酶存在于細(xì)胞內(nèi)。為了提取這些胞內(nèi)酶，首先需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破碎處理。包括機(jī)械破碎,物理破碎：化學(xué)破碎：酶促破碎。2、酶的提取：是指將酶或其他含酶原料中提取出來，再與雜質(zhì)分開，而獲得所需求的酶制品過程。3、沉淀分離：使溶液中的溶質(zhì)由液相轉(zhuǎn)變?yōu)楣滔辔龀?，古老、?shí)用、簡(jiǎn)單的初步分離方法。4、層析分離：層析技術(shù)，亦稱色譜技術(shù)，是一種物理的分離方法。它是利用混合物中各組分的物理化學(xué)性質(zhì)的差別，使各組分以不同程度分布在兩個(gè)相中，其中一個(gè)相為固定的（稱為固定相），另一個(gè)相則流過此固定相（稱為流動(dòng)相）并使各組分以不同速度移動(dòng)，從而達(dá)到分離的目的。5、凝膠層析：利用某些凝膠對(duì)于不同分子大小的組分阻滯作用的不同。6、親和層析：由吸附層析發(fā)展起來的，是從復(fù)雜混和物中純化蛋白質(zhì)的最好方法。又稱：功能層析，生物專一吸附，選擇層析，利用生物大分子間特異的親和力來純化生物大分子，如：抗原和抗體；酶和底物或輔酶或抑制劑；激素和受體：RNA和其互補(bǔ)的DNA等。7、離心分離：離心是借助于離心機(jī)旋轉(zhuǎn)所產(chǎn)生的離心力，使不同大小和不同密度的物質(zhì)分開的技術(shù)。是最常用的一種方法。8、電泳：指帶電粒子在電場(chǎng)中向著與其所帶電荷性質(zhì)相反的電極方向移動(dòng)的過程。9、萃?。豪萌苜|(zhì)在互不相溶的兩相之間分配系數(shù)的不同而使溶質(zhì)得到純化或濃縮的方法。10、雙水相萃?。河址Q水溶液兩相分配技術(shù)，用兩種不相溶的親水性高分子聚合物水溶液，如聚乙二醇（PEG）和葡聚糖（Dextran）進(jìn)行萃取。由于形成的兩相均有很高的含水量（達(dá)70%-90%），故稱“雙水相”系統(tǒng)。11、超臨界萃?。豪贸R界流體的溶解能力與其密度的關(guān)系，即利用壓力和溫度對(duì)超臨界流體溶解能力的影響而進(jìn)行的。在超臨界狀態(tài)下，超臨界流體具有很好的流動(dòng)性和滲透性，將超臨界流體與待分離的物質(zhì)分開.12、過濾：借助于過濾解質(zhì)將不同大小、不同形狀的物質(zhì)分離的技術(shù)過程。包括膜過濾和非膜過濾。13、膜分離技術(shù)：大部分微濾以及超濾，反滲透，透析，電滲析等采用各種高分子膜為過濾介質(zhì)，稱為膜過濾，又稱為膜分離技術(shù)。14、結(jié)晶：是指物質(zhì)以晶體的狀態(tài)從蒸汽或溶液中析出的過程。結(jié)晶既是酶是否純凈的標(biāo)志（只有同類分子才能形成晶體），也是一種酶和雜蛋白分離的方法。二、填空題1、細(xì)胞破碎的主要方法有機(jī)械破碎，物理破碎，化學(xué)酶促。2、酶的提取方法主要有鹽溶液提取，酸溶液提取，堿溶液提取。3、結(jié)晶的方法主要有鹽析結(jié)晶，有機(jī)溶劑結(jié)晶法，透析平衡結(jié)晶法，等電點(diǎn)結(jié)晶法。4、離心方法主要有差速離心，密度梯度離心，等密度梯度離心。5、加壓膜分離可以分為微濾，超濾，反滲透。6、常用的萃取方法有有機(jī)溶劑萃取，雙水相萃取，超臨界萃取，反膠束萃取。7、按照凝膠的組成系統(tǒng)不同，聚丙烯酰胺凝膠電泳可以分為連續(xù)凝膠電泳，不連續(xù)凝膠電泳，濃度梯度凝膠電泳，SDS-凝膠電泳8、在CO2超臨界萃取中，目標(biāo)產(chǎn)物的分離方法主要有等壓分離，等溫分離，吸附分離三、選擇題1、酶的提取是（C）的技術(shù)過程。A、從含酶物料中分離獲得所需酶B、從含溶液中分離獲得所需酶C、使胞內(nèi)酶從含酶物料中充分溶解到溶劑或者溶液中D、使從含酶物料中充分溶解到溶劑或者溶液中2、在凝膠層析的洗脫過程中，（A）A、分子質(zhì)量最大的分子最先流出B、分子質(zhì)量最小的分子最先流出C、蛋白質(zhì)分子最先流出D、鹽分子最先流出3、超臨界流體能夠用于物質(zhì)分離的主要原因在于（C）A、臨界流體的密度接近于液體B、超臨界流體的黏度接近于液體C、在超臨界流體中不同物質(zhì)的溶解度不同D、超臨界流體的擴(kuò)散系數(shù)接近于氣體，是通常液體的近百倍4、等電點(diǎn)聚集電泳系統(tǒng)中，形成pH梯度的主要原因是（B）A、系統(tǒng)中有pH梯度支持介質(zhì)B、系統(tǒng)中有兩性電解質(zhì)載體C、系統(tǒng)中有不同等電點(diǎn)的蛋白質(zhì)D、系統(tǒng)中陽(yáng)極槽裝酸液，陰極槽裝堿液四、簡(jiǎn)答題1、簡(jiǎn)述酶沉淀分離的主要方法及其原理。沉淀分離方法分離原理。鹽析沉淀法利用不同蛋白質(zhì)在不同的鹽濃度條件下溶解度不同的特性，通過在酶液中添加一定濃度的中性鹽，使酶或雜質(zhì)從溶液中析出沉淀，從而使酶與雜質(zhì)分離等電點(diǎn)沉淀法利用兩性電解質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)溶解度最低，以及不同的兩性電解質(zhì)有不同的等電點(diǎn)這一特性，通過調(diào)節(jié)溶液的pH值，使酶或雜質(zhì)沉淀析出，從而使酶與雜質(zhì)分離有機(jī)溶劑沉淀法利用酶與其它雜質(zhì)在有機(jī)溶劑中的溶解度不同，通過添加一定量的某種有機(jī)溶劑，使酶或雜質(zhì)沉淀析出，從而使酶與雜質(zhì)分離。復(fù)合沉淀法在酶液中加入某些物質(zhì)，使它與酶形成復(fù)合物而沉淀下來，從而使酶與雜質(zhì)分離選擇性變性沉淀法選擇一定的條件使酶液中存在的某些雜質(zhì)變性沉淀，而不影響所需的酶，從而使酶與雜質(zhì)分離。2、何謂膜分離技術(shù)？在酶的生產(chǎn)中有何應(yīng)用？膜分離技術(shù)：大部分微濾以及超濾，反滲透，透析，電滲析等采用各種高分子膜為過濾介質(zhì)，稱為膜過濾，又稱為膜分離技術(shù)。應(yīng)用，除菌，分離病毒及生物大分子，純水制備。應(yīng)用：脫鹽，海水淡化，純水制備，從發(fā)酵液中分離檸檬酸、谷氨酸及凝膠電洗脫。3、簡(jiǎn)述雙水相萃取的概念與特點(diǎn)。雙水相萃?。河址Q水溶液兩相分配技術(shù)，用兩種不相溶的親水性高分子聚合物水溶液，如聚乙二醇（PEG）和葡聚糖（Dextran）進(jìn)行萃取。由于形成的兩相均有很高的含水量（達(dá)70%-90%），故稱“雙水相”系統(tǒng)。優(yōu)點(diǎn)：①每一水相中均有很高的含水量，為酶等生物物質(zhì)提供了一個(gè)良好的環(huán)境；PEG、Dextran和無機(jī)鹽對(duì)酶等無毒害作用，不會(huì)引起變性。4、簡(jiǎn)述超臨界萃取的概念與特點(diǎn)。超臨界萃取：利用超臨界流體的溶解能力與其密度的關(guān)系，即利用壓力和溫度對(duì)超臨界流體溶解能力的影響而進(jìn)行的。在超