造血細胞的檢驗方法（血液學(xué)檢驗課件）

骨髓細胞形態(tài)檢查第二章造血細胞檢驗骨髓是人出生后的主要造血器官。骨髓組織由網(wǎng)狀組織、基質(zhì)、血管系統(tǒng)和神經(jīng)等構(gòu)成的造血微環(huán)境，以及充滿其間的發(fā)育過程中的血細胞所組成。通過骨髓中各系血細胞數(shù)量的增減及其比例的改變，以及形態(tài)的異常，可以了解骨髓的造血功能和病理改變，從而對多數(shù)血液病及其某些其他系統(tǒng)疾病的診斷和輔助診斷具有一定的價值。在臨床治療過程中，動態(tài)觀察骨髓象的變化，也有助于觀察病情，判斷療效和估計預(yù)后。造血干細胞的分化及增殖示意圖一、血細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律細胞形態(tài)的變化規(guī)律從以下幾個方面來分析（一）細胞體積（二）細胞質(zhì)（三）細胞核（四）核質(zhì)比衡量血細胞是否處于原始或幼稚階段的重要客觀標志之一——核染色質(zhì)和核仁。一、血細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律血細胞發(fā)育成熟過程的一般規(guī)律一、血細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律1.細胞體積及外形細胞體積隨著血細胞的發(fā)育成熟，胞體由大逐漸變小

但巨核細胞相反，早幼粒細胞可比原粒細胞稍大一、血細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律1.細胞體積及外形外形紅細胞系始終呈圓形粒細胞和淋巴細胞系保持圓形或橢圓形不變漿細胞由圓形變?yōu)槁褕A形單核細胞系和巨核細胞則均由圓形或橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形一、血細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律2.核質(zhì)比細胞成熟過程中，胞核逐漸縮?。ň藓思毎猓|(zhì)量逐漸增多，由核大質(zhì)少變?yōu)楹诵≠|(zhì)多。一、血細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律3.細胞核大小由大變小核形

幼紅細胞核始終呈圓形，核漸縮小，核染質(zhì)固縮粒細胞系：原+早幼階段呈圓形或橢圓形，隨著細胞成熟，胞核的一側(cè)逐漸凹陷，最后形成分葉狀淋巴細胞的核始終呈圓形或橢圓形

一、血細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律3.細胞核大小由大變小核形

單核細胞系由圓形或橢圓形變?yōu)橐粋?cè)稍凹陷，形成腎形、不規(guī)則形，并有扭曲成折疊巨核細胞系的核由圓形或橢圓形，逐漸增大并分葉，分葉不規(guī)則堆疊形成為巨大的核一、血細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律3.細胞核核位置紅系居中；粒、單、漿及巨常偏位；淋巴核一側(cè)著邊，僅一側(cè)有胞質(zhì)核染色質(zhì)由細致疏松逐漸凝集變?yōu)榫o密粗糙，著色由淺變深核膜由不明顯到明顯核仁由清晰可見到消失一、血細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律4.細胞質(zhì)量由少逐漸增多，淋巴細胞例外染色紅、粒、巨核系列，均由嗜堿性變?yōu)槭人嵝裕ㄓ缮钏{或淺藍變?yōu)闇\紅；淋巴系呈透明天藍色；單核系呈淺灰藍色保持不變；漿細胞由淺灰藍色變?yōu)樯钏{色）一、血細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律4.細胞質(zhì)顆粒從無顆粒（原始細胞）→嗜天青顆粒（早幼粒細胞）→特異性顆粒（中性、嗜酸性和嗜堿性顆粒）；紅細胞胞質(zhì)中一般無顆?？张菡Ｇ闆r下，漿細胞中可見小空泡，其他細胞系列中一般無空泡，出現(xiàn)空泡多由于細胞退行性變一、血細胞形態(tài)演變的一般規(guī)律血細胞發(fā)育過程中有共同的形態(tài)學(xué)特點項目幼稚備注原始→成熟細胞大小大→小原始粒細胞比早幼粒細胞小，巨核細胞由小變大核質(zhì)比例大→小核大小大→小成熟紅細胞核消失核形態(tài)圓→凹陷→分葉有的細胞不分葉核染色質(zhì)細致→粗糙，疏松→致密核染色受色淡紫色→深紫色核膜不明顯→明顯淋巴細胞核膜較明顯核仁有→無胞質(zhì)量少→多小淋巴細胞較少胞質(zhì)顏色藍(嗜堿)→紅(嗜酸)或天藍→淺藍胞質(zhì)顆粒無→少→多粒細胞分為3種顆粒，小淋巴細胞無顆粒二、各系血細胞的形態(tài)特征骨髓各系細胞比例的正常范圍粒系：50%～60%，原粒<1%早幼粒<5%；紅系：20%，淋巴系：20%單核細胞系：<4%漿細胞系統(tǒng)：<2%巨核細胞：7～35個其他細胞：極少量二、各系血細胞的形態(tài)特征粒細胞系統(tǒng)紅細胞系統(tǒng)巨核細胞系統(tǒng)漿細胞系統(tǒng)單核細胞系統(tǒng)淋巴細胞系統(tǒng)364521骨髓細胞六大系統(tǒng)二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)在正常骨髓中約占45%～70%中性粒細胞在粒細胞系統(tǒng)占絕大部分嗜酸性粒細胞小于5%，嗜堿性粒細胞小于1%嗜酸性粒細胞增多，見于CML，嗜酸粒細胞增多癥，嗜酸粒細胞白血病，過敏性疾病等嗜堿性粒細胞增多，見于CML，嗜堿性粒細胞白血病

二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)——階段劃分<2%原始粒細胞早幼粒細胞

中幼粒細胞(中性、嗜酸性、嗜堿性)

桿狀核粒細胞(中性、嗜酸性、嗜堿性)分葉核粒細胞(中性、嗜酸性、嗜堿性)

晚幼粒細胞(中性、嗜酸性、嗜堿性)8%、<1%、罕見<5%20%、<3%、<1%10%、<2%、罕見12%、<5%、<1%二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)——粒細胞發(fā)育原粒早幼粒中幼粒晚幼粒桿狀核分葉核血液二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)——粒細胞發(fā)育原始粒細胞早幼粒細胞中性中幼粒中性晚幼粒中性桿狀核中性分葉核嗜酸性中幼粒嗜酸性晚幼粒嗜酸性桿狀核嗜酸性分葉核嗜堿性中幼粒嗜堿性晚幼粒嗜堿性桿狀核嗜堿性分葉核特異性顆粒非特異性顆粒二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)1.原始粒細胞

（1）原粒I型胞體圓形或橢圓形，細胞核圓居中或稍偏，染色質(zhì)細致，核仁明顯，胞漿中無顆粒。（2）原粒II型在I型基礎(chǔ)上，胞漿有少數(shù)細小顆粒（少于20顆）二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)2.早幼粒細胞（1）核有偏位（2）核附近有淡染區(qū)（3）染色質(zhì)聚集，顆粒增多（4）胞體較原始細胞大,胞漿稍多（5）核仁1～4個或消失二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)3.中幼粒細胞（胞漿出現(xiàn)特異性顆粒）中性顆粒非常細小密集，呈粉黃底色，不透亮嗜酸性顆粒比中性顆粒大，大小一致，圓形，桔黃色嗜堿性顆粒大小不一，暗褐色，分布散亂，覆蓋核上注以顆粒的特性劃分嗜酸性、嗜堿性、中性粒細胞，自中至晚、桿、分葉核粒細胞的劃分，主要以細胞核的變化為依據(jù)。二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)3.中幼粒細胞（胞漿出現(xiàn)特異性顆粒）中性中幼粒細胞中性晚幼粒細胞二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)3.中幼粒細胞（胞漿出現(xiàn)特異性顆粒）中性桿狀核粒細胞中性分葉核粒細胞二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)粒細胞胞核凹陷程度的劃分標準二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)4.中性晚幼粒細胞直徑10～16μm，胞核腎型，有凹陷凹陷度在假設(shè)圓徑1/2～3/4，小于1/2為中幼粒，大于3/4為桿狀核二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)5.中性桿狀核粒細胞直徑10～13μm，胞核如桿狀、帶狀，胞核之凹陷度大于3/4，染色質(zhì)凝固塊狀二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)6.中性分葉核粒細胞直徑10～13μm，核呈分葉狀，葉與葉之間有一絲相連或完全斷開，中性粒細胞的核分為2～5葉二、各系血細胞的形態(tài)特征（一）粒細胞系統(tǒng)粒細胞系統(tǒng)總體形態(tài)特征胞體規(guī)則，呈圓形或類圓形胞核圓形→橢圓形→核一邊扁平→腎形→桿狀→分葉狀胞質(zhì)顆粒無顆粒→出現(xiàn)非特異性顆?！霈F(xiàn)特異性顆粒→特異性顆粒增多、非特異性顆粒減少→僅有特異性顆粒二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)紅細胞系統(tǒng)占骨髓有核細胞20～25％紅細胞系統(tǒng)臨床四階段劃分（原始紅，早幼紅，中幼紅，晚幼紅），有些學(xué)者提出六階段劃分（原始紅，早幼紅，中幼紅I,II，晚幼紅I,II）二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)——階段劃分

中幼紅細胞原始紅細胞早幼紅細胞

網(wǎng)織紅細胞成熟紅細胞

晚幼紅細胞<1%<5%10%10%二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)——階段劃分原始紅細胞中幼紅細胞晚幼紅細胞早幼紅細胞二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)1.原始紅細胞細胞圓形或橢圓形，直徑15～25μm胞核圓形或橢圓形，居中染色質(zhì)粗顆粒網(wǎng)狀，深紫紅色，核仁2～3個胞漿濃（深）藍色，著色不均，邊緣著色深，核周淺染（相當于高爾基體部分和線粒體），無顆粒，有鈍偽足0.03～0.05%二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)2.早幼紅細胞圓形，直徑15～18μm核圓形，略偏位，染色質(zhì)開始凝聚，核仁消失或不明顯胞漿量增多，藍色，核周明亮淡染區(qū)，無顆粒0.92～0.41%二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)3.中幼紅細胞胞體圓形，直徑8～18μm核圓形，居中，或偏位，染色質(zhì)凝聚小塊直至碎墨塊狀，核周邊出現(xiàn)透亮的縫隙核、漿各占半，漿灰蘭色，淡蘭色，嗜多色性（堿性核糖體與橙紅色血紅蛋白混合所致）7.41～1.91%二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)4.晚幼紅細胞直徑7～13μm，核圓形，偏位明顯染色質(zhì)凝聚成大塊或團塊狀(I)，甚至固縮不能看出任何結(jié)構(gòu)（碳核）(II)二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)4.晚幼紅細胞胞漿量增多，淡灰或粉紅色核/漿進一步變小此階段細胞基本沒有分裂能力10.75～2.36%

二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)5.網(wǎng)織紅細胞(煌焦油藍活體染色)網(wǎng)織紅細胞（Ret）是介于晚幼紅和成熟紅之間尚未完全成熟的紅細胞。因其質(zhì)內(nèi)尚存留多少不等的嗜堿物質(zhì)(RNA)，經(jīng)煌焦油藍或新亞甲藍活體染色后，嗜堿物質(zhì)凝聚成顆粒，其顆粒又可聯(lián)綴成線，而構(gòu)成網(wǎng)織狀，此種紅細胞即網(wǎng)織紅細胞。二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)5.網(wǎng)織紅細胞(煌焦油藍活體染色)二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)5.網(wǎng)織紅細胞(瑞氏染色)嗜多色性紅細胞（胞體直徑：8～11μm）正常成熟紅細胞漿為弱嗜酸性，呈較均勻的淡紅色，如呈灰蘭色（整個紅細胞或其一部分）則稱為嗜多色性紅細胞。這種紅細胞屬尚未完全成熟的紅細胞，故細胞體積多較大，其染成灰蘭色的嗜堿性物質(zhì)是胞漿中的核糖體，它隨著細胞的完全成熟而消失二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)5.網(wǎng)織紅細胞(瑞氏染色)目前認為嗜多色性紅細胞經(jīng)煌焦油蘭染色后即表現(xiàn)為網(wǎng)織紅細胞二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)6.成熟紅細胞成熟紅細胞（胞體直徑：7～7.5μm）成熟紅細胞是呈粉紅色，中央稍淺，大小近似相等無核的細胞二、各系血細胞的形態(tài)特征（二）紅細胞系統(tǒng)

紅細胞系統(tǒng)總體形態(tài)特征胞體：規(guī)則，呈圓形或類圓形胞核：圓形，居中胞質(zhì)顏色：深藍色→藍灰色→灰紅色→淡紅色胞質(zhì)顆粒：無二、各系血細胞的形態(tài)特征（三）淋巴細胞系統(tǒng)——階段劃分原始淋巴細胞幼稚淋巴細胞淋巴細胞二、各系血細胞的形態(tài)特征（三）淋巴細胞系統(tǒng)1.原始淋巴細胞胞體胞體大小同原粒，圓或橢圓，邊緣齊胞質(zhì)胞質(zhì)極少、藍、天藍，呈透明狀態(tài)無顆粒常有狹窄的核周（淡染）區(qū)二、各系血細胞的形態(tài)特征（三）淋巴細胞系統(tǒng)1.原始淋巴細胞胞核胞核園或橢園形，居中或者稍偏位 染色質(zhì)均勻、細粒狀，紫紅色較原粒深 核膜厚且又清晰

小核仁1～2（個），明顯、淡藍、呈凹陷二、各系血細胞的形態(tài)特征（三）淋巴細胞系統(tǒng)2.幼稚淋巴細胞與原淋比較：胞體略小胞質(zhì)量稍多，淡藍、透明，偶有少量較粗大的嗜天青顆粒、染紫紅色胞核偶有凹陷，染色質(zhì)粗、緊、可見濃集處

核仁模糊不清或無二、各系血細胞的形態(tài)特征（三）淋巴細胞系統(tǒng)3.成熟淋巴細胞直徑5～18μm染色質(zhì)致密塊狀，有的有假核仁胞漿量少，蘭色，透亮，有少許嗜天青顆粒大淋巴細胞：胞漿量多在正常骨髓中約占15%～25%二、各系血細胞的形態(tài)特征（四）單核細胞系統(tǒng)——階段劃分原始單核細胞幼稚單核細胞單核細胞二、各系血細胞的形態(tài)特征（四）單核細胞系統(tǒng)1.原始單核細胞胞體個較大、14～25μm，圓或橢圓邊不整，常有偽足胞質(zhì)量較多，灰藍；胞核偏位或居中，圓、橢圓或者形不規(guī)，有時折疊或扭曲，染色質(zhì)松、纖細，交織呈現(xiàn)細絲網(wǎng)，染成淡紫紅色核膜薄、不明顯，核仁常有1～3個，大而清晰易于辨二、各系血細胞的形態(tài)特征（四）單核細胞系統(tǒng)2.幼稚單核細胞與原單細胞比較胞體略大，為15～25μm胞質(zhì)量增多，灰藍、不透明，可出現(xiàn)細小而均勻分布的嗜天青顆粒二、各系血細胞的形態(tài)特征（四）單核細胞系統(tǒng)2.幼稚單核細胞與原單細胞比較胞核常偏位，核形不規(guī)則更突出，呈扭曲折疊、有凹陷、切跡，染色質(zhì)較原單粗，但仍疏松呈絲網(wǎng)狀；核仁可隱可無二、各系血細胞的形態(tài)特征（四）單核細胞系統(tǒng)3.成熟單核細胞胞體稍小，直徑12～20μm核居中或偏一側(cè)，形狀不規(guī)則染色質(zhì)凝聚，如篩底或粗線條狀胞漿量多，灰藍色，散布細小粉紅色顆粒在正常骨髓中<5%二、各系血細胞的形態(tài)特征（五）漿細胞系統(tǒng)——階段劃分原漿細胞幼漿細胞漿細胞二、各系血細胞的形態(tài)特征（五）漿細胞系統(tǒng)1.原始漿細胞胞體較原粒大，較原單小胞質(zhì)量多、深藍、不透明，有近核淡染區(qū)，無顆粒，偶見空泡二、各系血細胞的形態(tài)特征（五）漿細胞系統(tǒng)1.原始漿細胞胞核圓形卵圓形，占細胞的2/3，居中或偏于一側(cè)，染色質(zhì)呈粗粒網(wǎng)狀，均勻分散，染紫紅色；核仁2～5個，染淡藍色（見于漿白、MM）二、各系血細胞的形態(tài)特征（五）漿細胞系統(tǒng)2.幼稚漿細胞與原漿細胞比較胞體略小，多呈橢圓形胞質(zhì)量增多，深藍色，不透明，有半月形的近核淺染色區(qū)，有時可有空泡和少數(shù)嗜天青顆粒二、各系血細胞的形態(tài)特征（五）漿細胞系統(tǒng)2.幼稚漿細胞與原漿細胞比較胞核圓形或橢，約占細胞的1/2，常偏于一側(cè)，核軸與細胞長軸垂直，染色質(zhì)較粗糙，有濃集，染深紫紅色；核仁或隱或無二、各系血細胞的形態(tài)特征（五）漿細胞系統(tǒng)3.漿細胞與幼漿細胞比較胞體更小，橢圓或不規(guī)則形，可有刺狀突出胞質(zhì)豐富，深藍或紫藍色，不透明，有泡沫感，核周有明顯的淡染區(qū)，漿內(nèi)常有小空泡，一般無顆粒，胞質(zhì)常呈飄揚的旗幟樣二、各系血細胞的形態(tài)特征（五）漿細胞系統(tǒng)3.漿細胞與幼漿細胞比較胞核較小，占細胞的1/3左右，偏位，染色質(zhì)粗糙，凝成大塊，常有車輻狀排列；無核仁二、各系血細胞的形態(tài)特征（六）巨核細胞系統(tǒng)——階段劃分

顆粒型巨核細胞原始巨核細胞幼稚巨核細胞

裸核型巨核細胞

產(chǎn)板型巨核細胞血小板二、各系血細胞的形態(tài)特征（六）巨核細胞系統(tǒng)原始巨核細胞顆粒型巨核細胞幼稚巨核細胞二、各系血細胞的形態(tài)特征（六）巨核細胞系統(tǒng)產(chǎn)板型巨核細胞血小板裸核型巨核細胞二、各系血細胞的形態(tài)特征（六）巨核細胞系統(tǒng)特點：1.巨核細胞自原巨至裸核不做細胞整體分裂，僅僅是DNA的核內(nèi)復(fù)制，染色體由2倍體可增至128倍體，細胞形態(tài)也由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形，胞體明顯由小到大。血小板的生成是巨核細胞走向解體的過程。二、各系血細胞的形態(tài)特征（六）巨核細胞系統(tǒng)特點：2.產(chǎn)生血小板的能力與其倍體數(shù)有關(guān)：倍體數(shù)越高產(chǎn)生血小板越多。一般從8倍體開始產(chǎn)生血小板，病理情況下可提前或不產(chǎn)生。3.臨床劃分：原始巨核－幼稚巨核－成熟巨核（包括顆粒巨和產(chǎn)板巨）－裸核－血小板第二節(jié)骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查第二章造血細胞檢驗一、概述1.適應(yīng)證原因不明的外周血細胞數(shù)量和形態(tài)異常不明原因的發(fā)熱，肝、脾、淋巴結(jié)腫大不明原因骨痛、骨質(zhì)破壞、腎功能異常、黃疸、紫癜、血沉明顯增加血液病定期復(fù)查及化療后的療效觀察微生物培養(yǎng)骨髓活檢、骨髓細胞表面抗原檢測、造血干/祖細胞培養(yǎng)等一、概述2.禁忌證嚴重出血的血友病禁忌做骨髓穿刺。有出血傾向或凝血時間明顯延長者不宜做，為明確診斷疾病也可做，穿刺后必須局部壓迫止血5～10分鐘。晚期妊娠的婦女慎做骨髓穿刺，小兒及不合作者不宜做胸骨穿刺。一、概述3.臨床應(yīng)用血液系統(tǒng)疾病的診斷觀察療效、判斷預(yù)后二、標本采集（一）骨髓取材部位髂后上棘髂前上棘胸骨其他部位：脛骨頭內(nèi)側(cè)定位穿刺二、標本采集（一）骨髓取材部位髂后上棘穿刺術(shù)二、標本采集（一）骨髓取材部位髂前上棘穿刺術(shù)二、標本采集（一）骨髓取材部位胸骨穿刺時手固定胸骨的姿勢二、標本采集（一）骨髓取材部位胸骨穿刺點二、標本采集（一）骨髓取材部位小兒可穿刺部位二、標本采集（一）骨髓取材部位棘突穿刺剖面二、標本采集（二）骨髓穿刺方法1.骨髓取材滿意指標患者在抽吸骨髓瞬間有特殊的酸痛感骨髓液抽取量要少于0.2ml骨髓涂片中有較多的骨髓小?；蛑镜慰梢姶罅抗撬杼赜屑毎行詶U狀核粒細胞與分葉核粒細胞比值大于外周血中二者比值，有核細胞數(shù)大于外周血中有核細胞數(shù)二、標本采集（二）骨髓穿刺方法2.骨髓取材失敗指標取材失敗即骨髓稀釋完全稀釋：骨髓涂片與血涂片的細胞成分完全一樣部分稀釋：混有部分血液，骨髓小粒、油滴少或不見，有核細胞少，骨髓特有細胞少，成熟細胞/幼稚細胞>3/5二、標本采集（三）骨髓質(zhì)量保證嚴格無菌穿刺，預(yù)防感染初診患者于治療前做骨髓穿刺；死亡病例可在死亡后半小時內(nèi)進行穿刺動作應(yīng)緩慢，避免稀釋多部位穿刺，可提高疾病診斷的陽性率二、標本采集（四）干抽常見于：原發(fā)性和繼發(fā)性骨髓纖維化骨髓極度增生，如白血病、真性紅細胞增多癥等骨髓增生減低，如再生障礙性貧血腫瘤骨髓浸潤，包括惡性淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓轉(zhuǎn)移癌三、骨髓涂片、染色——骨髓涂片染色注意事項與外周血涂片的制備、染色大體相同不同之處：推片速度應(yīng)比外周血涂片慢應(yīng)選擇含骨髓小粒多的標本作涂片涂片固定和染色時間較血片稍長，可在低倍鏡下觀察，待染色滿意后再沖洗不宜將涂片全部染色，以防止染色不佳，失去全部涂片四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（一）血涂片染色（二）血涂片檢查的意義骨髓象相似而血象有區(qū)別，如缺鐵性貧血、溶血性貧血、急性失血骨髓象變化不顯著而血象有顯著異常如傳染性單核細胞增多癥四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（二）血涂片檢查的意義骨髓象有區(qū)別而血象相似如傳染性淋巴細胞增多癥和慢性淋巴細胞白血病骨髓象有顯著異常而血象變化不顯著如多發(fā)性骨髓瘤、戈謝病、尼曼-匹克病四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（三）骨髓涂片檢查低倍鏡檢查（10倍）1.觀察涂片情況2.判斷骨髓增生程度3.觀察巨核細胞4.注意有無異常細胞四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（三）骨髓涂片檢查1.觀察骨髓涂片情況四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（三）骨髓涂片檢查2.判斷骨髓增生程度以有核細胞的量來反映。一般低倍鏡觀察有核細胞與成熟紅細胞之間的比例，并結(jié)合觀察骨髓小粒的結(jié)構(gòu)及其內(nèi)的細胞數(shù)量與成分來判斷正常為1:20采用五級分類法：增生極度活躍、明顯活躍、活躍、減低、明顯減低。四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（三）骨髓涂片檢查

有核細胞：成熟紅細胞有核細胞占全部細胞百分率有核細胞/1000個成熟紅細胞常見原因

范圍平均范圍平均極度活躍1:0.5～2.01:1>50238.96～521.07351.96白血病明顯活躍1:5～121:10>1043.78～230.77114.51增生貧血增生活躍1:16～321:201～11021.53～63.6735.34正常骨髓增生減低1:35～701:500.5～17.41～19.6110.53慢性再障極度減低1:3001:200<0.51.96～7.414.85急性再障骨髓增生程度分級四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（三）骨髓涂片檢查3.觀察巨核細胞觀察以下方面：數(shù)量、成熟程度、產(chǎn)血小板功能及其形態(tài)（包括血小板形態(tài)）。四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（三）骨髓涂片檢查4.觀察有無異常細胞由于異常細胞的體積較大、形態(tài)特殊，故應(yīng)觀察涂片尾部、邊緣、骨髓小粒周圍。如惡性組織細胞病的異常組織細胞、轉(zhuǎn)移癌細胞、高雪細胞、尼曼-匹克細胞等。四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（三）骨髓涂片檢查油鏡檢查（100倍）1.有核細胞分類計數(shù)2.各細胞系形態(tài)觀察四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（三）骨髓涂片檢查——油鏡檢查選擇有核細胞分布均勻、結(jié)構(gòu)清晰、著色良好的涂膜體尾交界處部位作油鏡檢查。1.有核細胞分類計數(shù)在油鏡下連續(xù)分數(shù)200個或500個有核細胞，按細胞的不同系列和不同的發(fā)育階段分別計數(shù)。然后計算出分別占有核細胞總數(shù)的百分數(shù)。再累計粒系和紅系總數(shù)，計算粒紅比例（G:E）。分類計數(shù)時，巨核細胞及分裂、退化細胞不計入。四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（三）骨髓涂片檢查——油鏡檢查2.觀察細胞形態(tài)仔細觀察各系列細胞的形態(tài)有無異常，包括注意成熟紅細胞的形態(tài)有無異常，有無特殊異常細胞出現(xiàn)，必要時還需注意有無寄生蟲。四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（四）骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查報告方式填寫自然情況及穿刺部位、時間、臨床診斷填寫骨髓取材、制備、染色情況填寫各期細胞百分比、骨髓增生程度、粒紅比值文字描述：骨髓片、血片、細胞化學(xué)染色特征填寫診斷意見和建議：肯定性、支持性、可疑性、排除性、形態(tài)學(xué)描述、對于已明確診斷者四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（五）骨髓象檢查注意事項全面分析:形態(tài)(胞體、胞核、胞漿），染色歸入下一階段原則大數(shù)歸類法急白時通過幼稚細胞、成熟細胞、結(jié)合血片、細胞化學(xué)染色結(jié)果推測原始細胞歸屬四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（五）骨髓象檢查注意事項分類不明細胞涂片中血小板少者，要排除標本凝固的可能性血片檢驗有助于疾病的診斷及化療后療效的觀察四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（六）標本保存與資料存檔登記標本保存資料保存外借標本四、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查（七）骨髓象檢查質(zhì)量保證檢驗者臨床診斷水平檢驗者操作技術(shù)水平先進技術(shù)的應(yīng)用五、正常骨髓象正常骨髓象特征有核細胞增生活躍各系、各階段細胞所占有核細胞的比例在正常參考范圍內(nèi)。小兒淋巴細胞偏高，可達40%，主要是成熟淋巴細胞各系、各階段細胞形態(tài)上無明顯異常無特殊病理細胞及血液寄生蟲六、骨髓象分析（一）骨髓有核細胞增生程度

1.增生極度活躍：反映骨髓造血功能亢進，見于各種急性白血病、慢性粒細胞白血病、淋巴瘤白血病六、骨髓象分析（一）骨髓有核細胞增生程度2.增生明顯活躍：反映骨髓造血功能旺盛，常見于增生性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜、MDS、慢性白血病、真紅、類白血病反應(yīng)、化療后恢復(fù)期六、骨髓象分析（一）骨髓有核細胞增生程度

3.增生活躍：反映骨髓造血功能基本正常，常見于正常骨髓象、傳單、多發(fā)性骨髓瘤、不典型再生障礙性貧血、骨髓部分稀釋、骨髓造血功能較差的貧血六、骨髓象分析（一）骨髓有核細胞增生程度

4.增生減低：反映骨髓造血功能降低，常見于再障、PNH、骨髓增生低下、低增生性白血病、骨髓部分稀釋、化療后六、骨髓象分析（一）骨髓有核細胞增生程度

5.增生極度減低：反映骨髓造血功能衰竭，常見于再生障礙性貧血、骨髓稀釋、化療后六、骨髓象分析（二）粒紅比值改變1.粒紅比值增加：由粒細胞增多或有核紅細胞減少所致，常見于各種粒細胞白血病、類白血病反應(yīng)、純紅細胞性再障六、骨髓象分析（二）粒紅比值改變2.粒紅比值正常：粒細胞和有核紅細胞數(shù)量正?；騼上导毎瑫r增加或減少所致，常見于正常人骨髓、多發(fā)性骨髓瘤、再障、傳單、ITP、原發(fā)性血小板增多癥、骨髓纖維化六、骨髓象分析（二）粒紅比值改變3.粒紅比值降低：由粒細胞減少或有核紅細胞增多所致，常見于粒細胞缺乏癥、增生性貧血、巨幼貧、鐵粒幼細胞貧血、紅白血病、紅血病、真性紅細胞增多癥六、骨髓象分析（三）粒細胞系統(tǒng)的細胞數(shù)量改變1.粒系細胞增多各型粒細胞性白血病急性炎癥和感染性疾病類白血病反應(yīng)2.粒系細胞減少再生障礙性貧血粒細胞缺乏或減少癥六、骨髓象分析（四）紅細胞系統(tǒng)的細胞數(shù)量改變1.紅系細胞增多增生性貧血急性紅白血病真性紅細胞增多癥2.紅系細胞減少再生障礙性貧血(純紅再障)六、骨髓象分析（五）巨核細胞系統(tǒng)的細胞數(shù)量改變1.增高（1）特發(fā)性血小板減少性紫癜，（2）Evans綜合征（3）骨髓增殖性疾?。?）脾功能亢進和大出血后（5）AML-M7

六、骨髓象分析（五）巨核細胞系統(tǒng)的細胞數(shù)量改變2.減低（1）再生障礙性貧血（2）急性白血?。ǔ釧ML-M7）（3）其他骨髓病、放射?。?）急性感染、中毒六、骨髓象分析（六）單核細胞系統(tǒng)的細胞數(shù)量改變1.增多急性單核細胞性白血病急性粒單細胞性白血病骨髓增生異常綜合征感染性疾病自身免疫性疾病惡性腫瘤六、骨髓象分析（六）單核細胞系統(tǒng)的細胞數(shù)量改變1.增多淋巴細胞絕對性增多急、慢性淋巴細胞性白血病淋巴瘤傳染性淋巴細胞增多癥傳染性單核細胞增多癥病毒感染六、骨髓象分析（六）單核細胞系統(tǒng)的細胞數(shù)量改變1.增多淋巴細胞相對性增多再生障礙性貧血粒細胞缺乏或減少癥六、骨髓象分析（六）單核細胞系統(tǒng)的細胞數(shù)量改變1.增多多發(fā)性骨髓瘤漿細胞白血病巨球蛋白血癥反應(yīng)性漿細胞增多：慢性炎癥，感染，腫瘤，自身免疫性疾病，過敏性疾病再生障礙性貧血、粒細胞缺乏第三節(jié)血細胞檢驗的臨床應(yīng)用評價第二章造血細胞檢驗一、結(jié)果的可靠性血液學(xué)檢驗人員臨床操作技能標本與試劑的質(zhì)量血液學(xué)檢驗人員的臨床診斷水平二、實驗方法的評價形態(tài)學(xué)觀察對細胞認識的局限性：流式技術(shù)、FISH技術(shù)、PCR技術(shù)、DNA測序等先進技術(shù)的應(yīng)用結(jié)合骨髓活檢或病理切片增加診斷的準確性檢測方法的標化和嚴格的質(zhì)量控制注意研究患者的病史，參考臨床資料二、實驗方法的評價流式細胞計數(shù)儀二、實驗方法的評價流式細胞儀技術(shù)原理二、實驗方法的評價DNA和端粒進行原位熒光雜交顯微觀察二、實驗方法的評價PCR技術(shù)二、實驗方法的評價DNA測序技術(shù)概述細胞化學(xué)染色是細胞學(xué)和化學(xué)相結(jié)合而形成的一門科學(xué)，是以細胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合運用化學(xué)反應(yīng)的原理對血細胞內(nèi)的各種化學(xué)成分(如酶類、酯類、鐵、蛋白質(zhì)、核酸等)作定性、定位、半定量分析的方法?；静襟E

固定

顯示

復(fù)染

物理法

化學(xué)法

干燥固定

火焰固定

蒸汽固定

液體固定

固定方法偶氮偶聯(lián)法

雪夫反應(yīng)

聯(lián)苯胺法

普魯士藍反應(yīng)

金屬沉淀法

顯示方法

復(fù)染的目的在于使各種細胞能顯示出來以便于觀察。選擇復(fù)染液的顏色應(yīng)與有色沉淀的顏色有明顯的對比度，即能使細胞結(jié)構(gòu)顯示又能清楚地看出細胞化學(xué)染色結(jié)果。臨床應(yīng)用輔助判斷急性白血病的細胞類型輔助血液系統(tǒng)等疾病的診斷和鑒別診斷觀察疾病療效和預(yù)后探討發(fā)病機制第二節(jié)細胞化學(xué)染色技術(shù)細胞化學(xué)染色過氧化物酶染色蘇丹黑染色酯酶染色過碘酸-雪夫反應(yīng)中性粒細胞堿性磷酸酶染色酸性磷酸酶染色鐵染色一、過氧化物酶（POX）染色（一）原理POX的染色方法有多種，如復(fù)方聯(lián)苯胺法、二氨基聯(lián)苯胺法、四甲基聯(lián)苯胺、改良的pereira染色法等等。二氨基聯(lián)苯胺染色是臨床常用的方法。二氨基聯(lián)苯胺法：血細胞內(nèi)的POX，能分解H2O2而釋放出新生氧，后者氧化二氨基聯(lián)苯胺，形成金黃色不溶性沉淀，定位于細胞質(zhì)內(nèi)酶所在的部位。一、過氧化物酶（POX）染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)1.粒細胞系統(tǒng)分化差的早期原始粒細胞為陰性，分化好的晚期原始粒細胞至中性成熟粒細胞均呈陽性，且隨著細胞的成熟，陽性反應(yīng)的程度逐漸增強；中性分葉核粒細胞呈強陽性，衰老的粒細胞陽性程度減弱甚至呈陰性；嗜酸性粒細胞陽性反應(yīng)最強，嗜堿性粒細胞為陰性。一、過氧化物酶（POX）染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)2.單核細胞系統(tǒng)原始單核細胞呈陰性，幼稚及成熟單核細胞多呈弱陽性，其顆粒細少稀疏，分布不均。3.其他細胞淋巴細胞系統(tǒng)、紅細胞系統(tǒng)及巨核細胞系統(tǒng)的細胞均呈陰性，漿細胞、組織細胞也呈陰性，吞噬細胞有時呈陽性。一、過氧化物酶（POX）染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)1.中性成熟粒細胞，呈強陽性；2.晚幼紅細胞，呈陰性；3.單核細胞，呈弱陽性；4.漿細胞，呈陰性一、過氧化物酶（POX）染色（三）臨床意義成熟中性粒細胞過氧化物酶活性的變化臨床意義是輔助判斷急性白血病細胞類型的首選、最重要的細胞化學(xué)染色幫助鑒別急性白血病的類型

一、過氧化物酶（POX）染色（三）臨床意義1.幫助鑒別急性白血病的類型（1）POX染色是鑒別急性淋巴細胞白血病和急性粒細胞白血病的重要指標。急性粒細胞白血病時，原始粒細胞可呈陽性。急性淋巴細胞白血病時，原始淋巴細胞和幼稚淋巴細胞均呈陰性。急性單核細胞白血病時，原始單核細胞、幼稚單核細胞多數(shù)呈陰性或弱陽性。一、過氧化物酶（POX）染色（三）臨床意義1.幫助鑒別急性白血病的類型M2a的POX染色原始粒細胞均呈陽性

一、過氧化物酶（POX）染色（三）臨床意義1.幫助鑒別急性白血病的類型急性淋巴細胞白血病的POX染色1.中性成熟粒細胞，呈強陽性；其他原始淋巴細胞均呈陰性一、過氧化物酶（POX）染色（三）臨床意義1.幫助鑒別急性白血病的類型（2）急性早幼粒細胞白血病有時需與急性單核細胞白血病鑒別，如果白血病細胞呈過氧化物酶強陽性，應(yīng)確定為急性早幼粒細胞白血病。一、過氧化物酶（POX）染色（三）臨床意義1.幫助鑒別急性白血病的類型急性早幼粒細胞白血病的POX染色1.原始紅細胞，呈陰性；其他早幼粒細胞均呈強陽性

一、過氧化物酶（POX）染色（三）臨床意義1.幫助鑒別急性白血病的類型（3）急性單核細胞白血病有時需與組織細胞白血病、惡性組織細胞病相鑒別，異常組織細胞的過氧化物酶呈陰性，而白血病性幼單核細胞和單核細胞呈弱陽性。一、過氧化物酶（POX）染色（三）臨床意義1.幫助鑒別急性白血病的類型急性單核細胞白血病的POX染色1.中性成熟粒細胞，呈強陽性；2.原始單核細胞，呈陽性；3.原始單核細胞，呈弱陽性；其他原幼單核細胞呈陰性一、過氧化物酶（POX）染色（三）臨床意義1.幫助鑒別急性白血病的類型2.成熟中性粒細胞過氧化物酶活性的變化活性增高：見于再生障礙性貧血、感染、急性淋巴細胞白血病和慢性淋巴細胞白血病?；钚詼p低：見于急性粒細胞白血病、慢性粒細胞白血病、急性單核細胞白血病、骨髓增生異常綜合征、放射病及退化性中性粒細胞。二、蘇丹黑B（SBB）染色（一）原理蘇丹黑是一種脂溶性重氮染料，能溶解于細胞內(nèi)的含脂結(jié)構(gòu)（如中性脂肪、磷脂、糖脂和類固醇）中，使脂類物質(zhì)呈棕黑色或深黑色而顯示出來。脂類物質(zhì)在粒細胞中含量豐富，在單核細胞中也有少量。二、蘇丹黑（SB）染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)結(jié)果與POX染色基本一致（三）臨床意義與POX染色基本相似三、酯酶染色

根據(jù)酯酶特異性高低分為:特異性酯酶(氯乙酸AS-D萘酚酯酶)非特異性酯酶

pH值不同

酸性酯酶(酸性α-醋酸萘酚酯酶)堿性酯酶(α-丁酸萘酚酯酶)中性酯酶

α-醋酸萘酚酯酶醋酸AS-D萘酚酯酶

三、酯酶染色（一）氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色1.原理血細胞內(nèi)的氯乙酸AS-D萘酚酯酶水解基質(zhì)液中的氯乙酸AS-D萘酚，產(chǎn)生AS-D萘酚，進而與基質(zhì)液中的重氮鹽偶聯(lián)形成不溶性的有色沉淀，定位于細胞質(zhì)內(nèi)酶所在的部位。本試驗常用的重氮鹽為堅牢紫醬GBC，形成的有色沉淀為紅色。三、酯酶染色（一）氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色2.正常血細胞的染色反應(yīng)（1）粒細胞系統(tǒng)分化差的原始粒細胞呈陰性，分化好的呈陽性，自早幼粒細胞至成熟中性粒細胞均呈陽性。嗜酸性粒細胞呈陰性或弱陽性，嗜堿性粒細胞呈陽性。（2）單核細胞系統(tǒng)絕大多數(shù)為陰性。（3）其他細胞如淋巴細胞、漿細胞、巨核細胞、有核紅細胞、血小板等均呈陰性；肥大細胞呈陽性。三、酯酶染色（一）氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色3.臨床意義（1）急性粒細胞白血病原始粒細胞呈陽性或陰性。（2）急性早幼粒細胞白血病早幼粒細胞呈強陽性。（3）急性單核細胞白血病原始單核及幼稚單核細胞幾乎呈陰性。三、酯酶染色（一）氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色3.臨床意義（4）急性粒-單核細胞白血病原始粒細胞及早幼粒細胞呈陽性，原始單核及幼稚單核細胞呈陰性。（5）急性淋巴細胞白血病和急性巨核細胞白血病白血病細胞均呈陰性。三、酯酶染色（一）氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色急性粒細胞白血?。∕2a）氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色1.原始粒細胞，呈弱陽性；2.幼稚粒細胞，呈強陽性；3.中性桿狀核粒細胞，呈強陽性

三、酯酶染色（二）α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)染色1.原理血細胞內(nèi)的α-醋酸萘酚酯酶在pH中性的條件下，水解基質(zhì)液中的α-醋酸萘酚，釋放出α-萘酚，進而與基質(zhì)液中的重氮鹽偶聯(lián)形成不溶性的有色沉淀，定位于細胞質(zhì)內(nèi)酶所在的部位。三、酯酶染色（二）α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)染色2.正常血細胞的染色反應(yīng)（1）單核細胞系統(tǒng)分化差的原始單核細胞呈陰性，分化好的原始單核細胞呈陽性，幼稚單核及單核細胞也呈陽性，陽性反應(yīng)能被氟化鈉抑制。（2）粒細胞系統(tǒng)各期粒細胞多數(shù)呈陰性，少數(shù)呈弱陽性，陽性反應(yīng)不能被氟化鈉抑制。三、酯酶染色（二）α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)染色2.正常血細胞的染色反應(yīng)（3）淋巴細胞系統(tǒng)各期淋巴細胞多呈陰性，少數(shù)呈弱陽性，陽性反應(yīng)不能被氟化鈉抑制。（4）其他細胞巨核細胞和血小板呈陽性，陽性反應(yīng)不能被氟化鈉抑制；少數(shù)有核紅細胞呈弱陽性，陽性反應(yīng)不能被氟化鈉抑制；漿細胞呈陰性。三、酯酶染色（二）α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)染色3.臨床意義（1）急性單核細胞白血病單核系細胞多呈陽性，陽性反應(yīng)能被氟化鈉抑制。（2）急性粒細胞白血病原始粒細胞呈陰性或弱陽性，陽性反應(yīng)不能被氟化鈉抑制。（3）急性早幼粒細胞白血病早幼粒細胞呈強陽性，陽性反應(yīng)不能被氟化鈉抑制。三、酯酶染色（二）α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)染色3.臨床意義（4）急性淋巴細胞白血病原始淋巴細胞及幼稚淋巴細胞呈陰性或陽性，陽性反應(yīng)不被氟化鈉抑制。（5）急性粒-單核細胞白血病原始粒細胞呈陰性至陽性，陽性反應(yīng)不被氟化鈉抑制；原始單核及幼稚單核細胞呈陽性，單核系陽性反應(yīng)能被氟化鈉抑制。三、酯酶染色（二）α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)染色3.臨床意義A圖：急性單核細胞白血病α-NAE染色原始、幼稚單核細胞多呈強陽性

A三、酯酶染色（二）α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)染色3.臨床意義

BB圖：急性單核細胞白血病α-NAE氟化鈉抑制染色原始、幼稚單核細胞陽性反應(yīng)被氟化鈉抑制（與A圖為同一標本）三、酯酶染色（三）α-丁酸萘酚酯酶（α-NBE）染色1.原理血細胞內(nèi)的α-NBE在pH堿性條件下，水解基質(zhì)液中的α-丁酸萘酚，釋放出α-萘酚，進而與基質(zhì)液中的重氮鹽偶聯(lián)形成不溶性的有色沉淀，定位于細胞質(zhì)內(nèi)酶所在的部位。三、酯酶染色（三）α-丁酸萘酚酯酶（α-NBE）染色2.正常血細胞的染色反應(yīng)（1）粒細胞系統(tǒng)各階段粒細胞呈陰性。（2）單核細胞系統(tǒng)分化差的原始單核細胞呈陰性，分化好的原始單核細胞呈陽性，幼稚單核及單核細胞呈陽性，陽性反應(yīng)能被氟化鈉抑制。三、酯酶染色（三）α-丁酸萘酚酯酶（α-NBE）染色2.正常血細胞的染色反應(yīng)（3）淋巴細胞系統(tǒng)T淋巴細胞、非T非B淋巴細胞可呈陽性，B淋巴細胞呈陰性。（4）其他細胞巨核細胞、有核紅細胞、漿細胞呈陰性或弱陽性；組織細胞也可呈陽性,但不被氟化鈉抑制。三、酯酶染色（三）α-丁酸萘酚酯酶（α-NBE）染色3.臨床意義與α-NAE染色的臨床意義相同三、酯酶染色（四）酸性α-醋酸萘酚酯酶（ANAE）染色1.原理血細胞中的酸性α-醋酸萘酚酯酶在pH弱酸性(pH5.8)條件下，可水解基質(zhì)液中的α-醋酸萘酚，產(chǎn)生α-萘酚，進而與重氮鹽六偶氮付品紅形成不溶性紅色沉淀，定位于細胞質(zhì)內(nèi)酶所在的部位。三、酯酶染色（四）酸性α-醋酸萘酚酯酶（ANAE）染色2.正常血細胞的染色反應(yīng)（1）單核細胞系統(tǒng)單核系細胞常呈彌散型強陽性，陽性反應(yīng)可被氟化鈉抑制。（2）淋巴細胞系統(tǒng)T淋巴細胞呈陽性，而B淋巴細胞多數(shù)呈陰性。（3）其他細胞粒系細胞一般為陰性或弱陽性，但此反應(yīng)不被氟化鈉抑制；紅系細胞、巨核系細胞含量較少。

三、酯酶染色（四）酸性α-醋酸萘酚酯酶（ANAE）染色3.臨床意義（1）可粗略地鑒別T、B淋巴細胞（2）鑒別其它急性白血病細胞類型同α-NAE染色（3）多發(fā)性骨髓瘤、多毛細胞白血病細胞多為陽性；惡性組織細胞病呈強陽性；霍奇金淋巴瘤網(wǎng)狀高鐵紅細胞(R-S細胞)呈陽性

四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng)（一）原理過碘酸是氧化劑，能使含有乙二醇基（-CHOH-CHOH）的多糖類物質(zhì)（糖原、黏多糖、黏蛋白、糖蛋白及糖酯等）氧化，形成雙醛基（-CHO-CHO），醛基與雪夫試劑中的無色品紅結(jié)合，使無色的品紅變成紫紅色化合物，定位于含有多糖類的細胞內(nèi)。以前又稱為糖原染色。

四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng)（二）正常血細胞的染色反應(yīng)1.粒細胞系統(tǒng)分化差的原始粒細胞呈陰性，分化好的原始粒細胞至中性分葉核粒細胞均呈陽性，并隨著細胞的成熟而逐漸增強；嗜酸性粒細胞中顆粒之間的胞質(zhì)呈紅色；嗜堿性粒細胞中的嗜堿性顆粒呈陽性。2.紅細胞系統(tǒng)有核紅細胞及紅細胞均呈陰性。3.單核細胞系統(tǒng)分化差的原始單核細胞呈陰性，其他為陽性。

四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng)（二）正常血細胞的染色反應(yīng)4.淋巴細胞系統(tǒng)大多數(shù)呈陰性，少數(shù)呈陽性。5.巨核細胞系統(tǒng)巨核細胞和血小板呈陽性，陽性反應(yīng)的程度隨細胞的發(fā)育成熟而增強。6.其他細胞漿細胞一般呈陰性，少數(shù)呈陽性，巨噬細胞可為陽性。

四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng)（二）正常血細胞的染色反應(yīng)

正常血細胞PAS染色1.原始粒細胞（-）2.早幼粒細胞（+）3.中性中幼粒細胞（++）4.中性晚幼粒細胞（+++）5.中性桿狀核粒細胞（++++）6.中性分葉核粒細胞（++++）7.嗜堿性粒細胞（+++）8.嗜酸性粒細胞（+++）9.單核細胞（±）10.淋巴細胞（++++）四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng)（三）臨床意義1.紅細胞系統(tǒng)疾病紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合征中有核紅細胞呈陽性，有時有核紅細胞陽性反應(yīng)強且陽性率高，甚至紅細胞也呈陽性。某些紅系良性疾病，如嚴重缺鐵性貧血、重型地中海貧血中的有核紅細胞也可呈陽性；巨幼細胞性貧血、再生障礙性貧血、其他溶血性貧血中的有核紅細胞常呈陰性，但有時個別有核紅細胞可呈陽性。

四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng)（三）臨床意義2.白細胞系統(tǒng)疾病急性淋巴細胞白血病時原始淋巴細胞及幼稚淋巴細胞的陽性率升高，陽性反應(yīng)物質(zhì)呈粗顆粒狀或塊狀；急性粒細胞白血病時原始粒細胞呈陰性或弱陽性；急性單核細胞白血病時原始單核及幼稚單核細胞可呈陽性；慢性淋巴細胞白血病時淋巴細胞的陽性率增加；惡性淋巴瘤時淋巴瘤細胞陽性率高、陽性強。

四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng)（三）臨床意義3.其他細胞戈謝細胞呈強陽性，尼曼-皮克細胞呈陰性或弱陽性，故PAS染色有助于二者的鑒別；Reed-Sternberg（RS）細胞陰性或弱陽性；骨髓轉(zhuǎn)移性腺癌細胞呈強陽性。

四、過碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng)

急性淋巴細胞白血病PAS染色原始、幼稚淋巴細胞均陽性，呈粗顆粒狀陽性五、中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）染色（一）原理偶氮偶聯(lián)法：成熟中性粒細胞堿性磷酸酶在pH9.6左右的堿性環(huán)境中，能水解基質(zhì)液中的磷酸萘酚鈉底物，釋放出萘酚，萘酚與重氮鹽偶聯(lián)，生成不溶性的有色沉淀，定位于細胞質(zhì)酶活性所在之處。不同的底物與重氮鹽的組合不同，其陽性反應(yīng)物質(zhì)的顏色可有不同，但其化學(xué)反應(yīng)過程基本相似。

五、中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)

1.NAP主要存在于中性成熟粒細胞(包括中性桿狀核粒細胞和中性分葉核粒細胞)，故中性成熟粒細胞呈陽性反應(yīng)，其他細胞基本呈陰性。陽性反應(yīng)表現(xiàn)在胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黑色或棕紅色顆粒。五、中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)

2.成熟中性粒細胞堿性磷酸酶積分值的計算血涂片經(jīng)染色后，在油鏡下，連續(xù)觀察100個成熟中性粒細胞，記錄其陽性反應(yīng)細胞所占百分率即為陽性率；并對所有陽性反應(yīng)細胞逐個按其反應(yīng)強度作出（+）～（++++）的分級，將各級所占的百分率乘以級數(shù)，然后相加，即為積分值。結(jié)果以陽性率和積分值來表示。五、中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)中性粒細胞堿性磷酸酶染色1.中性成熟粒細胞（+）；2.中性成熟粒細胞（++）；3.中性成熟粒細胞（+++）；4.中性成熟粒細胞（++++）；5.淋巴細胞（-）五、中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）染色（三）參考范圍陽性率＜40％；NAP的積分值為30～130分。(各單位應(yīng)建立本實驗室參考值)五、中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）染色（四）臨床意義1.NAP積分增加見于細菌性感染、類白血病反應(yīng)、再生障礙性貧血、某些骨髓增殖性疾病、慢性粒細胞白血病加速期或急變期、急性淋巴細胞白血病、慢性淋巴細胞白血病、惡性淋巴瘤、骨髓轉(zhuǎn)移癌等。五、中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）染色（四）臨床意義真性紅細胞增多癥NAP染色1.中性成熟粒細胞（+++）；2.中性成熟粒細胞（++）；3.淋巴細胞（-）五、中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）染色（四）臨床意義2.NAP積分下降見于慢性粒細胞白血病慢性期、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥、骨髓增生異常綜合征、惡性組織細胞病等。五、中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）染色（四）臨床意義3.疾病的鑒別（1）慢性粒細胞白血病與類白血病反應(yīng)：前者明顯下降且常為零分，后者明顯增加。（2）慢性粒細胞白血病(慢性期)與慢性中性粒細胞白血?。呵罢呙黠@下降，后者明顯增加。五、中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）染色（四）臨床意義3.疾病的鑒別（3）細菌性感染與病毒性感染：前者明顯增加，后者常無明顯變化。（4）再生障礙性貧血與陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥：前者常增加，后者常下降。五、中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）染色（四）臨床意義3.疾病的鑒別（5）急性白血病類型的鑒別：急性粒細胞白血病常下降，急性淋巴細胞白血病常增加，急性單核細胞白血病一般正?；驕p低。（6）惡性淋巴瘤與惡性組織細胞?。呵罢叱Ｔ黾樱笳叱Ｏ陆怠Ｎ?、中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）染色（四）臨床意義3.疾病的鑒別（7）惡性組織細胞病與反應(yīng)性組織細胞增多癥：前者常下降，后者無明顯變化。（8）真性紅細胞增多癥與繼發(fā)性紅細胞增多癥：前者常增加，后者無明顯變化。（9）原發(fā)性血小板增多癥與繼發(fā)性血小板增多癥：前者常增加，后者無明顯變化。六、酸性磷酸酶（ACP）染色（一）原理偶氮偶聯(lián)法：血細胞內(nèi)的酸性磷酸酶在酸性（pH5.0）條件下水解基質(zhì)液中的磷酸萘酚AS-BI，釋放出萘酚AS-BI，后者與基質(zhì)液中的重氮鹽偶聯(lián)形成不溶性的有色沉淀，定位于細胞質(zhì)內(nèi)酶所在的部位。六、酸性磷酸酶（ACP）染色（一）原理

Gomori硫化鉛法：血細胞內(nèi)的酸性磷酸酶水解基質(zhì)液中的β-甘油磷酸鈉，形成磷酸根，磷酸根與硝酸鉛作用生成磷酸鉛，定位于胞質(zhì)中的磷酸鉛再與硫化銨反應(yīng)生成棕黑色硫化鉛沉淀。六、酸性磷酸酶（ACP）染色（一）原理抗酒石酸酸性磷酸酶染色：用相同方法制備兩份基質(zhì)液，一份加入適量的L-酒石酸（左旋酒石酸）,另一份不加酒石酸。取兩張相同標本的涂片，分別用這兩種不同的基質(zhì)液做酸性磷酸酶染色。如果血細胞內(nèi)的酸性磷酸酶耐L-酒石酸，兩張涂片均呈陽性；如不耐L-酒石酸，不加L-酒石酸的涂片呈陽性反應(yīng)，而加L-酒石酸呈陰性反應(yīng)。六、酸性磷酸酶（ACP）染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)粒細胞、單核細胞、淋巴細胞、巨核細胞、血小板、漿細胞、巨噬細胞均呈陽性。六、酸性磷酸酶（ACP）染色（三）臨床意義臨床ACP染色應(yīng)用較少，主要用于多毛細胞白血病的診斷及脂質(zhì)代謝障礙性疾病的鑒別。1.診斷多毛細胞白血病多毛細胞呈陽性（常呈強陽性），陽性反應(yīng)不被L-酒石酸抑制。慢性淋巴細胞白血病的淋巴細胞和惡性淋巴瘤細胞ACP染色也可呈陽性，但可被L-酒石酸抑制。六、酸性磷酸酶（ACP）染色（三）臨床意義臨床ACP染色應(yīng)用較少，主要用于多毛細胞白血病的診斷及脂質(zhì)代謝障礙性疾病的鑒別。2.鑒別戈謝細胞和尼曼-匹克細胞前者陽性，并具有抗酒石酸功能；后者陰性。六、酸性磷酸酶（ACP）染色多毛細胞白血病酸性磷酸酶染色多毛細胞呈陽性反應(yīng)七、鐵染色（一）原理正常人骨髓中的貯存鐵以鐵蛋白和含鐵血黃素的形式貯存，主要存在于骨髓小粒和幼紅細胞中。骨髓中的鐵在酸性環(huán)境下與亞鐵氰化鉀作用，形成普魯士藍色的亞鐵氰化鐵沉淀，定位于含鐵的部位。七、鐵染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)骨髓中的貯存鐵分為細胞外鐵和細胞內(nèi)鐵。細胞外鐵主要存在于骨髓小粒的巨噬細胞中，細胞內(nèi)鐵是指存在于中幼紅細胞、晚幼紅細胞及紅細胞中的鐵（鐵粒幼紅細胞、鐵粒紅細胞）。七、鐵染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)1.細胞外鐵觀察骨髓小粒中的鐵，陽性結(jié)果呈彌散性、顆粒狀、小珠狀或塊狀藍色。根據(jù)骨髓小粒中鐵的存在方式及量，將細胞外鐵分為（-）、（+）、（++）、（+++）、（++++）。七、鐵染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)骨髓細胞外鐵染色A圖：細胞外鐵+；B圖：細胞外鐵++七、鐵染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)骨髓細胞外鐵染色C圖：細胞外鐵+++；D圖：細胞外鐵++++七、鐵染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)2.細胞內(nèi)鐵觀察100個中幼紅細胞和晚幼紅細胞，計算出鐵粒幼紅細胞的百分比。鐵粒幼紅細胞：指胞質(zhì)中出現(xiàn)藍色鐵顆粒的幼紅細胞,根據(jù)藍色鐵顆粒的多少及粗細，分為：Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型及環(huán)形鐵粒幼紅細胞。七、鐵染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)2.細胞內(nèi)鐵觀察100個中幼紅細胞和晚幼紅細胞，計算出鐵粒幼紅細胞的百分比。環(huán)形鐵粒幼紅細胞：指幼紅細胞胞質(zhì)內(nèi)含鐵粒6顆以上，并環(huán)繞細胞核排列超過核周徑2/3以上者。鐵粒紅細胞：指成熟紅細胞中出現(xiàn)鐵顆粒。七、鐵染色（二）正常血細胞的染色反應(yīng)骨髓細胞內(nèi)鐵染色1.環(huán)形鐵粒幼紅細胞；2.鐵粒幼紅細胞七、鐵染色（三）參考范圍1.細胞外鐵（+）～（++）。2.細胞內(nèi)鐵鐵粒幼紅細胞陽性率在12％～44％。以Ⅰ型為主，少數(shù)為Ⅱ型。無環(huán)形鐵粒幼紅細胞及鐵粒紅細胞。不同的實驗室其細胞內(nèi)鐵的參考范圍相差較大，所以要建立自己實驗室的參考范圍。七、鐵染色（四）臨床意義主要用于缺鐵性貧血和環(huán)形鐵粒幼紅細胞增多性貧血的診斷和鑒別診斷。1.缺鐵性貧血其細胞外鐵明顯減少甚至陰性，細胞內(nèi)鐵陽性率減低或為零。經(jīng)鐵劑治療有效后，其細胞內(nèi)鐵、外鐵增多。因此鐵染色可作為診斷缺鐵性貧血及指導(dǎo)鐵劑治療的重要方法。七、鐵染色（四）臨床意義2.鐵粒幼細胞貧血鐵粒幼紅細胞增多，其中的環(huán)形鐵粒幼紅細胞增多，有時可見到鐵粒紅細胞，細胞外鐵也明顯增多。因此鐵染色可作為診斷本病的重要方法。七、鐵染色（四）臨床意義3.骨髓增生異常綜合征伴環(huán)形鐵粒幼紅細胞增多的難治性貧血，其環(huán)形鐵粒幼紅細胞大于15％，細胞外鐵也常增加。七、鐵染色（四）臨床意義4.非缺鐵性貧血溶血性貧血、巨幼細胞性貧血、再生障礙性貧血、多次輸血后和白血病，細胞外鐵和內(nèi)鐵正?；蛟黾?；感染、肝硬化、慢性腎炎、尿毒癥、血色病等，細胞外鐵明顯增加而鐵粒幼紅細胞可減少。四種常見類型急性白血病的染色結(jié)果M3M1、M2aM5ALLPOX染色強陽性陽性或陰性陰性或弱陽性陰性SB染色強陽性陽性或陰性陰性或弱陽性陰性NAS-DCE染色強陽性陽性或陰性陰性或弱陽性陰性α-NAE染色強陽性陰性或陽性陽性或強陽性陰性或陽性α-NAE+NaF不抑制不抑制抑制不抑制α-NBE染色陰性陰性陽性陰性α-NBE染色+NaF//抑制/PAS染色陽性（彌散狀）陽性（彌散狀）陽性（細顆粒狀）陽性（粗顆粒狀）常用細胞化學(xué)染色與急性白血病亞型診斷思路骨髓組織病理學(xué)檢查骨髓組織病理學(xué)檢查又稱骨髓活體組織檢查（bonemarrowbiopsy,BMB）簡稱骨髓活檢。與骨髓穿刺比較，受干抽和稀釋的影響較小，不僅能了解骨髓的細胞成分和組織結(jié)構(gòu)，還能了解骨髓組織全貌，對某些血液病、骨髓局灶性病變?yōu)樘卣鞯募膊?，如再生障礙性貧血、骨髓纖維化、骨髓增生異常綜合征、惡性腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移等疾病的診斷尤為重要。骨髓穿刺涂片和骨髓組織切片進行細胞形態(tài)學(xué)檢查互為補充，聯(lián)合應(yīng)用提高血液病診斷的準確性。

骨髓穿刺骨髓活檢取材方式用骨髓穿刺針抽吸骨髓液，涂片行瑞-姬染色后備檢用骨髓活檢針取得一條骨髓組織，固定包埋切片后行姬姆薩等染色后備檢優(yōu)點1.操作較簡便2.涂片中細胞分布均勻，胞體舒展，染色良好，較易分辨各系原始和幼稚細胞及其微細結(jié)構(gòu)3.易于識別巨型變，巨幼樣變和小巨核細胞4.細胞化學(xué)染色效果好，結(jié)果可量化1.保持造血組織的天然結(jié)構(gòu)，便于判斷紅髓和脂肪組織的比例2.可全面了解骨髓增生程度，有核細胞密度及其布局3.可避免骨髓稀釋4.對骨髓纖維化、毛細胞白血病有確診作用，能提示骨髓增生異常綜合征向急性粒細胞白血病的轉(zhuǎn)化，對“干抽”有鑒別作用缺點1.造血組織的天然結(jié)構(gòu)遭到破壞，無法判斷紅髓與黃髓的比例2.若抽吸過猛，易致骨髓液稀釋3.若遇“干抽”不能分析1.有核細胞群集，不易區(qū)分原始和幼稚細胞的類型2.難以觀察細胞內(nèi)的微細結(jié)構(gòu)3.細胞化學(xué)染色結(jié)果難以量化骨髓穿刺和骨髓活檢比較一、骨髓活檢的適應(yīng)證可疑骨髓纖維化、骨髓增生異常綜合征、原發(fā)性血小板增多癥、真性紅細胞增多癥、惡性淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、淀粉樣變性、轉(zhuǎn)移瘤等疾病

鑒別全血細胞減少性疾病，如再生障礙性貧血、低增生性白血病等

多次骨髓穿刺失敗判斷急性白血病的化療效果，以及骨髓移植前、后的動態(tài)觀察。二、骨髓活檢標本的制備與觀察取材部位常采用髂后上棘。皮膚消毒、局麻、針刺進入骨皮質(zhì)，感覺阻力減弱再推進1cm左右，抽出針芯，做骨髓液抽吸涂片。套活動套管，插回針芯，將活檢針再推進2～3cm，將針管順時針和逆時針各旋轉(zhuǎn)3～5圈旋轉(zhuǎn)拔出活檢針，取出活動套管，插入針芯，推出骨髓組織塊，標本立即放入Bouin液固定并送檢。

主要制備程序包括固定、脫水、包埋和切片。常用的骨髓活檢標本染色有Giemsa染色、MGG染色、HE染色及HGF染色、特殊染色等骨髓活檢標本還可進行組織化學(xué)染色，如鐵染色、過氧化物酶（POX）染色、過碘酸-雪夫（PAS）染色及免疫酶染色等。骨髓組織由實質(zhì)和間質(zhì)兩部分組成，實質(zhì)為造血細胞，包括各階段的紅系、粒系、巨核系細胞及淋巴細胞、單核細胞等；間質(zhì)由網(wǎng)狀—巨噬細胞、網(wǎng)硬蛋白纖維支架、血管系統(tǒng)和脂肪細胞組成，主要對造血細胞起支持和營養(yǎng)作用。取材標本的制備和染色切片的血細胞定位二、骨髓活檢標本的制備與觀察正常的骨髓組織有嚴格的局部解剖和血細胞定位紅系細胞在骨髓組織中成簇存在，幼紅細胞緊靠血竇表面，常見數(shù)個形成細胞群，可見原紅和幼紅細胞圍繞一個巨噬細胞，內(nèi)層的幼紅細胞較外層更幼稚，這種結(jié)構(gòu)稱為“幼紅細胞島或幼紅細胞簇。在半薄切片中，一般為中央無巨噬細胞的幼紅細胞簇，典型的幼紅細胞島也少見。二、骨髓活檢標本的制備與觀察正常的骨髓組織有嚴格的局部解剖和血細胞定位正常情況下，骨髓原粒和早幼粒細胞常單個散在定位于骨小梁旁區(qū)，無成簇的幼稚粒細胞分布。隨細胞的發(fā)育成熟，逐漸向小梁間中央?yún)^(qū)移動，自晚幼粒以下階段的細胞向靜脈竇移動釋放入血。當骨小梁旁區(qū)或間區(qū)出現(xiàn)3～5、5～8以上的原始和早幼粒細胞聚集成簇，稱幼稚前體細胞異常定位(ALIP)，是骨髓增生異常綜合征的組織病理學(xué)特征。二、骨髓活檢標本的制備與觀察正常的骨髓組織有嚴格的局部解剖和血細胞定位巨核細胞位于小梁間區(qū)，不發(fā)生群集現(xiàn)象，在血竇附近單個存在，數(shù)量為7.6±2.7個/mm2，即在50個高倍鏡視野有30～60個巨核細胞。淋巴細胞、漿細胞、單核細胞常定位于造血組織的小動脈和小靜脈四周。三、骨髓活檢切片檢查（一）骨髓活檢切片的觀察內(nèi)容主要包括骨小梁—骨髓造血組織—脂肪組織、造血細胞的形態(tài)與定位、間質(zhì)結(jié)構(gòu)（包括脂肪、纖維組織、血管與靜脈竇、網(wǎng)狀—巨噬細胞等）的變化，有無人為所致的骨髓細胞形態(tài)改變及外來的惡性細胞等。

三、骨髓活檢切片檢查（二）骨髓活檢細胞形態(tài)特點半薄切片僅切下胞體的某一片斷，顯微鏡下觀察HGF染色骨髓切片上的單個細胞，其形態(tài)呈現(xiàn)與骨髓涂片不同的特點。

三、骨髓活檢切片檢查（三）骨髓活檢的結(jié)論1.骨髓活檢無特征性變化，且與骨髓涂片結(jié)果一致，可得出明確診斷，如骨髓組織學(xué)檢查符合急性再障。2.骨髓活檢出現(xiàn)某種非特異性組織形態(tài)改變，不能做出肯定或否定診斷，可直接描述組織形態(tài)學(xué)所見，并提出某些補充檢查建議。3.如活檢組織象在正常范圍，可報告為“正?；虼笾抡９撬杌罱M織象”。四、常見血液系統(tǒng)疾病的骨髓活檢特點（一）紅細胞系增生異常正常骨髓活檢標本中粒/紅比值為1.5～3.5∶1。＜1.5∶1，且增生明顯活躍，即為紅細胞系增生活躍，常見于缺鐵性貧血、溶血性貧血、巨幼細胞貧血等；紅細胞系增生減低常見再生障礙性貧血和純紅細胞再生障礙性貧血等。四、常見血液系統(tǒng)疾病的骨髓活檢特點（二）粒細胞系增生異常如果粒/紅比值增加，且骨髓切片中原始細胞占優(yōu)勢，最常見粒細胞白血病。1.急性粒細胞白血病骨髓增生明顯或極度活躍，造血組織高達100%，脂肪組織減少或消失。造血組織中可見大量的白血病細胞。四、常見血液系統(tǒng)疾病的骨髓活檢特點（二）粒細胞系增生異常如果粒/紅比值增加，且骨髓切片中原始細胞占優(yōu)勢，最常見粒細胞白血病。2.慢性粒細胞白血病骨髓增生極度活躍，粒細胞極度增生，粒/紅比值可達10～50∶1。各階段粒細胞均增加，以中幼粒為主，原始及早幼粒細胞不超過10%，嗜酸、嗜堿粒細胞亦增加，巨核細胞增加，但形態(tài)正常。四、常見血液系統(tǒng)疾病的骨髓活檢特點（三）淋巴細胞系增生異常骨髓活檢對惡性淋巴瘤分型以及是否累及骨髓至關(guān)重要。霍奇金淋巴瘤的骨髓浸潤活檢可發(fā)現(xiàn)R-S細胞,即“鏡影細胞”，多數(shù)瘤細胞分布于小梁旁區(qū)或小梁間區(qū)；R-S細胞四、常見血液系統(tǒng)疾病的骨髓活檢特點（三）淋巴細胞系增生異常非霍奇金淋巴瘤的瘤細胞多呈灶性分布，浸潤區(qū)均見纖維增生，即合并骨髓纖維化。較典型癌細胞分為四種類型，淋巴細胞型、組織細胞型、混合型和未分化型。四、常見血液系統(tǒng)疾病的骨髓活檢特點（四）其他造血系統(tǒng)疾病骨髓增生異常綜合征（MDS）多發(fā)性骨髓瘤（MM）惡性組織細胞病骨髓纖維化

四、常見血液系統(tǒng)疾病的骨髓活檢特點（四）其他造血系統(tǒng)疾病骨髓活檢：骨髓纖維化，非均勻一致的纖維組織增生，為確診的重要依據(jù)。五、骨髓活檢的臨床價值（一）全面了解骨髓的組織結(jié)構(gòu)、間質(zhì)成分的變化，準確判斷骨髓增生程度、粒/紅比例及骨髓儲存鐵情況，對某些血液病，如再生障礙性貧血、缺鐵性貧血及MDS等明確診斷。（二）發(fā)現(xiàn)骨髓穿刺涂片不易發(fā)現(xiàn)的病理變化，對某些以骨髓局部病變?yōu)樘卣鞯募膊?，如骨髓纖維化、骨髓壞死、淀粉樣變性、肉芽腫病及多發(fā)性骨髓瘤等尤為重要。五、骨髓活檢的臨床價值（三）明確“干抽”原因，鑒別是否為骨髓增生低下、骨髓纖維組織增生、或髓腔因增生極度活躍引起“塞實”所致，骨髓活檢具有重要意義。（四）對各種急、慢性白血病和MDS的確診和預(yù)后判斷有重要價值，對骨髓轉(zhuǎn)移癌、惡性組織細胞病、戈謝病和尼曼一匹克病等的診斷率比骨髓涂片高。（五）協(xié)助診斷慢性骨髓增生性疾病，如真性紅細胞增多癥、原發(fā)性血小板增多癥等。第二節(jié)造血細胞培養(yǎng)造血細胞培養(yǎng)是在體外模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，利用克隆形成試驗，以半固體培養(yǎng)基（膠體凝膠或甲基纖維素）作支托，培養(yǎng)從機體取出的造血干/祖細胞，使之生存、增殖、分化。由于體外缺乏造血細胞賴以生存的微環(huán)境，只能維持造血干/祖細胞在1～2周內(nèi)形成細胞集落。

1.研究造血細胞分化、成熟的調(diào)控機制和造血生長因子對造血的作用機制。2.造血細胞和非造血細胞之間的相互作用及造血調(diào)控的分子機制。3.造血系統(tǒng)疾病的發(fā)生機制、診斷和療效分析。4.藥物對造血的影響，藥物的篩選及生產(chǎn)。一、紅系祖細胞培養(yǎng)紅系祖細胞培養(yǎng)包括早期紅系祖細胞（BFU-E）和晚期紅系祖細胞（CFU-E）。在培養(yǎng)體系中以甲基纖維素為支持物，在適量造血生長因子（HGFs）的刺激下，使骨髓中造血干/祖細胞在半固體培養(yǎng)基上形成由紅細胞組成的集落（BFU-E和CFU-E），BFU-E的集落培養(yǎng)主要聯(lián)合應(yīng)用EPO和IL-3，CFU-E的集落培養(yǎng)所用HGFs主要為EPO。二、粒-單核系祖細胞培養(yǎng)分離受檢者血液或骨髓中的單個造血干/祖細胞，在HGFs的作用下，于半固體瓊脂培養(yǎng)基上形成由不同階段的粒細胞和單核細胞組成的細胞集落，稱為粒-單系集落形成單（CFU-GM），每個集落可看做由一個粒-單系祖細胞增殖分化而來。目前用于CFU-GM刺激的因子較多，如G-CSF、M-CSF、GM-CSF、IL-3等。三、巨核系祖細胞培養(yǎng)巨核系祖細胞（CFU-Meg，BFU-Meg）包括幼稚巨核系祖細胞的爆式集落形成單位（BFU-MK）和成熟巨核系祖細胞的集落形成單位（CFU-MK）。用于巨核系祖細胞培養(yǎng)的因子主要有TPO、IL-3、IL-6、牛血清白蛋白（BSA）以及植物凝集素刺激的白細胞條件培養(yǎng)液（PHA-LCM）。單獨應(yīng)用TPO能引起巨核系細胞的增殖和分化，而其他細胞因子對巨核系細胞的作用沒有特異性。四、混合祖