2024年中圖版選修1生物上冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2024年中圖版選修1生物上冊階段測試試卷648考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、發(fā)酵技術(shù)現(xiàn)在已經(jīng)在生產(chǎn)和生活中廣泛應用，下列敘述正確的是A.腐乳制作中起主要作用的微生物代謝類型是異養(yǎng)需氧型，生殖方式是分裂生殖B.在果酒制作的后期，只需加入醋酸桿菌即可制作果醋C.在微生物的發(fā)酵過程中，所用原料中有機物的總量和種類都會減少D.在果酒果醋的發(fā)酵制作過程中生物間的關(guān)系有種內(nèi)互助、種內(nèi)斗爭、競爭等2、下列有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)的敘述中，不正確的是A.運用固定化酶和固定化細胞進行生產(chǎn)時，都需要為其提供營養(yǎng)物質(zhì)B.果酒和果醋制作中利用的微生物，結(jié)構(gòu)上主要差別在于有無核膜C.采用稀釋涂布平板法和平板劃線法都能分離純化菌種，得到單細胞菌落D.探究加酶洗衣粉的最適溫度時，洗衣粉量、污漬的種類屬于無關(guān)變量3、下列有關(guān)固定化酶和固定化細胞的敘述，正確的是（）A.某種固定化酶的優(yōu)勢在于能催化一系列生化反應B.固定化酵母細胞制作果酒時，要不斷地通入空氣C.工業(yè)生產(chǎn)中，細胞的固定化是在嚴格無菌條件下進行D.若底物是大分子，固定化細胞的效果優(yōu)于固定化酶的4、我國釀酒技術(shù)歷史悠久，但以葡萄釀酒實際上始自西域。據(jù)《史記·大宛列傳》記載，張騫奉漢武帝之命，出使西域，看到“宛左右以蒲陶（即葡萄）為酒，富人藏酒至萬馀石，久者數(shù)十歲不敗”。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.在榨汁前對葡萄的處理是先去除枝梗再清洗葡萄B.裝置密閉發(fā)酵過程中，酒精度的變化是先增加后趨于穩(wěn)定C.“富人藏酒至萬馀石，久者數(shù)十歲不敗”說明在葡萄酒中微生物的繁殖受到抑制D.若葡萄酒偏酸，可能是裝置密閉不嚴導致醋酸桿菌繁殖的結(jié)果5、下列對制作果酒、果醋、腐乳和泡菜的相關(guān)敘述錯誤的是（）A.制作果酒時，發(fā)酵液裝入發(fā)酵瓶后留有約1/3的空間B.制作果醋時，通氧不足或溫度過低可能造成發(fā)酵失敗C.制作腐乳的鹵湯時，料酒加的量較多，易造成豆腐腐敗變質(zhì)D.測定泡菜中的亞硝酸鹽含量，每次取樣后要迅速封口6、研究者以二倍體金冠蘋果種子為材料，利用秋水仙素處理成熟胚（2n），再通過離體培養(yǎng)獲得品質(zhì)改良的四倍體蘋果。下列敘述不正確的是（）A.利用低溫誘導也可獲得四倍體B.秋水仙素能夠抑制紡錘體的形成C.用高壓蒸汽滅菌法處理外植體和培養(yǎng)基D.二倍體經(jīng)花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株7、月季的花藥培養(yǎng)過程的難點之一是材料的選擇，下列有關(guān)材料選擇的敘述中正確的是（）A.從花粉來看，只要選擇單核期的花粉就可以B.從花蕾來看，應當選擇略微開放的花蕾C.在剝離花藥時，不需要徹底去除花絲D.在剝離花藥時，要盡量不損傷花藥，否則易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織8、下列有關(guān)提取和分離血紅蛋白的實驗敘述錯誤的是A.該實驗的材料不能選用雞血B.通過透析法可以去除樣品中分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)，此為樣品的粗提取C.凝膠色譜法是利用蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)D.電泳法是利用各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子的大小和形狀不同進行分離評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)9、圖1表示制備固定化酵母細胞的有關(guān)操作；圖2是利用固定化酵母細胞進行酒精發(fā)酵的示意圖。下列敘述正確的是。

A.剛?cè)芑暮Ｔ逅徕c應迅速與活化的酵母菌混合制備混合液B.圖1中X溶液為CaCl2溶液，其作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠C.圖2發(fā)酵過程中攪拌的目的是為了使培養(yǎng)液與酵母菌充分接觸D.圖1中制備的凝膠珠用蒸餾水洗滌后再轉(zhuǎn)移到圖2裝置中10、關(guān)于實驗室培養(yǎng)和純化酵母菌過程中的部分操作，下列說法錯誤的是（）A.配制培養(yǎng)基、倒平板、接種需要在酒精燈火焰旁進行B.倒平板時，打開培養(yǎng)皿蓋，倒放于超凈實驗臺上，將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿C.倒入培養(yǎng)基后立即將平板倒置，防止培養(yǎng)基污染D.用平板劃線法劃完線后，要在培養(yǎng)皿皿底上做好標記11、白蟻是自然環(huán)境中存在的能夠高效降解纖維素的昆蟲之一，原因是白蟻消化道中的某些微生物能分泌纖維素酶。某生物興趣小組從白蟻消化道中分離能高效降解纖維素的細菌，實驗流程如下圖。下列敘述正確的是（）

A.纖維素酶是由多種酶組成的復合酶，其中催化纖維二糖水解的酶是葡萄糖苷酶B.選擇培養(yǎng)的培養(yǎng)基中，纖維素是唯一的碳源，且要持續(xù)通入無菌空氣，提供充足氧氣C.鑒別纖維素分解菌時，不能在長出菌落的培養(yǎng)基上直接滴加剛果紅染液D.要長期保存菌種，可將菌液與滅菌后的甘油1∶1混合，放在-20℃的冷凍箱中保存12、科研人員研究了不同洗滌濃度（單位體積的水中加入洗衣粉的量）的兩種加酶洗衣粉的去污力（%）；結(jié)果如下表。下列說法錯誤的是（）

。洗滌濃度。

去污力（%）

洗衣粉品種。

0.2%0.4%0.6%0.8%加酶洗衣粉甲71.578.980.079.9加酶洗衣粉乙69.580.480.680.5A.加酶洗衣粉中的酶制劑是通過基因工程生產(chǎn)出來的，并使用了包埋法固定B.若洗滌的是相同污布，則兩種加酶洗衣粉的洗滌效果相似C.相同pH時，加酶洗衣粉洗滌效果比普通洗衣粉好D.所有加酶洗衣粉最適洗滌濃度都為0．4%，濃度過大是不必要的13、下列實驗過程中，出現(xiàn)的正?，F(xiàn)象有（）A.制作果酒時，發(fā)酵瓶中溶液產(chǎn)生較多泡沫B.用果酒制作果醋過程中，液面出現(xiàn)一層褐色菌膜C.制作腐乳過程中，豆腐表面發(fā)黏且長有白色菌絲D.用固定化酵母進行酒精發(fā)酵，凝膠珠浮在液面14、我國制作泡菜歷史悠久?！吨叙佷洝分杏涊d：“泡菜之水，用花椒和鹽煮沸，加燒酒少許。如有霉花，加燒酒少許。壇沿外水須隔日一換，勿令其干?！毕铝姓f法錯誤的是（）A.“泡菜之水，用花椒和鹽煮沸”的目的是徹底滅菌B.“霉花”主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往來自蔬菜C.“壇沿外水須隔日-換，勿令其干”的目的是保證壇內(nèi)適宜濕度D.制作泡菜的時間越長，亞硝酸鹽的含量越高評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)15、酶的活性是指酶催化一定化學反應的能力。酶的活性高低可以用在一定條件下，酶所催化的某一化學反應的________________來表示。酶反應速度用單位時間內(nèi)、單位體積中______________或______________________來表示。16、用做溶劑的有機溶劑分為水溶性和_____________兩種。乙醇和丙酮能夠與水混溶，是____________有機溶劑；石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、________________等不能與水混溶，稱為水不溶性有機溶劑。17、水蒸氣蒸餾法的原理是利用____________將揮發(fā)性較強的植物芳香油攜帶出來，形成_________混合物，冷卻后，混合物又會重新分出油層和水層。18、植物芳香油的提取方法有蒸餾、____________和________________等。19、防止_____________入侵，獲得_________________的培養(yǎng)物，是研究和應用微生物的前提。在實驗室培養(yǎng)微生物，一方面需要為培養(yǎng)的微生物提供合適的___________________條件，另一方面需要確保無處不在的其他微生物無法混入。20、測定亞硝酸鹽含量的原理：在___________________酸化的條件下，亞硝酸鹽與______________________發(fā)生重氮化反應后，與____________________結(jié)合形成_______________色染料。將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測比較，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量。評卷人得分四、非選擇題(共4題，共32分)21、近年來；紀錄片《舌尖上的中國》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮，其中多次講述了利用不同微生物的發(fā)酵作用制作的美味食品。請分析回答下列問題：

（1）在果醋制作時；運用醋酸菌在供應________和糖源充足時，將果糖分解成醋酸；在糖源不充足時，也可以利用酒精生成醋酸，請寫出該過程的反應式：_____________________。

（2）腐乳生產(chǎn)過程有多種微生物的參與；其中起主要作用的是________。腐乳制備過程中，加鹽可以________________________________________________________________________，使豆腐塊變硬。

腐乳制作的流程是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時；應注意控制__________________；配制鹵湯時，要使鹵湯中酒的含量控制在________%左右。

（3）制作泡菜的原理是________________________。蔬菜在腌制過程中，會產(chǎn)生亞硝酸鹽，在___________條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生________________反應后，再與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成________色染料。22、（生物技術(shù)實踐）

尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥；但不能被農(nóng)作物直接吸收，土壤中有一種好氧型細菌能把尿素分解成氨。欲從土壤中篩選出能分解尿素的細菌并予以純化計數(shù)，采用了如圖所示的基本操作流程。

請回答下列問題：

（1）有些細菌能分解尿素；有些細菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生______________。

（2）能在該選擇培養(yǎng)基上生長的細菌______________（填“一定”或“不一定”）都能分解尿素；若在平板中加入酚紅，目的菌落出現(xiàn)的變化是_______________。

（3）篩選得到的菌落可以采用平板劃線法進一步純化,每次劃線后接種環(huán)必須____________；才能再次用于劃線。純化獲得的菌種可以保存在試管中，塞上棉塞或蓋上封口膜，不能密封，原因是_____________________。

（4）用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有和其作用有__________________。（答出兩點）23、請回答下列有關(guān)生物技術(shù)實踐方面的問題：

（1）培養(yǎng)基配制的步驟為：計算-稱量-_______-_______-倒平板；為統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目；在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)適當時間后形成菌落，一般選擇菌落數(shù)在_________個的平板進行計數(shù)。

（2）泡菜雖然好吃；但其中的亞硝酸鹽會危害人體健康。亞硝酸鹽在特定條件下會轉(zhuǎn)變成________，這是一種致癌物，測定亞硝酸鹽含量的原理是在__________條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸反應后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色物質(zhì)。

（3）腐乳制作的流程是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。配制鹵湯時；要使鹵湯中酒的含量控制在___________左右。

（4）某同學釆用血細胞計數(shù)板計數(shù)(規(guī)格為16×25，O.lmm3)，統(tǒng)計4個中格中的細菌數(shù)，計算出每個小格所含細菌的平均數(shù)為2個，則每毫升樣品中的細菌數(shù)是(稀釋倍數(shù)為103)_________個。

（5）對于頻繁使用的菌種可將試管放入_____________保藏。24、腐乳是我國獨有的發(fā)酵食品；由于具有高營養(yǎng)價值，在國際上也備受推崇。某科研機構(gòu)研究了腐乳生產(chǎn)過程中不同濃度的食鹽對腐乳中氨基酸含量和pH的影響，其中部分數(shù)據(jù)如下。

（1）腐乳生產(chǎn)過程有多種微生物的參與；其中起主要作用的是________________，從細胞結(jié)構(gòu)角度分析應屬于______________生物。

（2）腐乳制備過程中；加鹽可以__________________，使豆腐塊變硬。

（3）由圖可知；后期發(fā)酵過程中，隨著時間的延長，腐乳中游離氨基酸的含量將_____________。這是由于發(fā)酵過程中____將豆腐中的蛋白質(zhì)分解。

（4）由表可知；后期發(fā)酵到60天時，鹽度為___________的腐乳已經(jīng)腐敗，說明______________。

（5）中國健康管理協(xié)會提倡“少油低鹽”的健康生活方式，綜合上述研究結(jié)果，腐乳生產(chǎn)過程中應該控制鹽度在______________________左右。評卷人得分五、綜合題(共4題，共28分)25、乳酸菌在細胞代謝過程中會分泌細菌素；有機酸等物質(zhì)；細菌素對多種食品中常見的致病菌具有廣譜的抑菌活性。實驗小組為了檢測細菌素的抗菌活性，將富集培養(yǎng)后的乳酸菌菌株分離純化，并接種到MRS液體培養(yǎng)基中?；卮鹣铝袉栴}：

(1)純化乳酸菌可以用平板劃線法，該方法所用的接種工具是__________，對該工具進行滅菌的方法是___________。

(2)利用平板劃線法純化乳酸菌時，第二次及其后的劃線都要從上一次劃線的________開始，目的是_________。平板劃線法不能用于微生物的計數(shù)，其原因是______。

(3)用打孔法測定乳酸菌分泌的細菌素對指示菌的抑菌效果時，應該先吸取稀釋的_______菌液涂布到平板中，再使用5mm直徑的打孔器打孔，每孔分別注入離心后的50μLMRS液體培養(yǎng)基的_____（填“上清液”或“沉淀物”）。培養(yǎng)24h后測定抑菌圈的直徑，當抑菌圈的直徑至少大于________才能判斷為具有抑菌活性。

(4)實驗小組用經(jīng)乳酸調(diào)節(jié)pH至3.5（與發(fā)酵48h后發(fā)酵液的pH相同）的MRS液體培養(yǎng)基作為空白對照組，觀察其抑菌情況。設置該組實驗的目的是__________。26、汽油進入土壤后；會對土壤的理化性質(zhì)造成影響。篩選降解汽油能力較強的菌種將會大大提高修復污染土的效率?？蒲腥藛T對土壤微生物進行分離鑒定并對其降解汽油性能進行測定和優(yōu)化，從而為汽油污染土的生物修復提供優(yōu)良菌種。科研人員進行了相關(guān)實驗，過程如下。

（1）菌種的分離與鑒定：稱取石油污染土1.0g放入到無菌生理鹽水中，溶液的稀釋度為10-1。對菌種進行純化后臨時保藏。

（2）優(yōu)良降解菌株的篩選：將純化后的菌種接種到LB培養(yǎng)基中置于搖床上進行培養(yǎng)；然后接種到降油培養(yǎng)基內(nèi)在培養(yǎng)2；4、6d后，分別對培養(yǎng)基內(nèi)的汽油含量進行測定，并計算最終的汽油降解率。

（3）菌種降解性能的測定。組別定量變量改變溫度pH7.0，培養(yǎng)20h26①323538改變pH值溫度32，培養(yǎng)②h6.06.57.07.58.0改變時間溫度32，pH值為7.01216②2428

結(jié)果如下：

優(yōu)良降解菌的篩選。菌種編號汽油含量汽油降解率0d2d4d6d6d菌143.2941.521.19070.25菌242.8931.281.02574.37菌343.411.3621.11272.20菌442.781.1850.99575.13菌543.3251.481.20169.98

回答下列問題：

(1)在菌種的分離與鑒定時，石油污染土1.0g放入到__________mL無菌生理鹽水中，溶液的稀釋度為10-1。利用稀釋涂布法可對菌種進行計數(shù)，其原理是_____________________。

(2)對菌種進行臨時保藏時，需先將菌種接種到試管的__________上，在合適的溫度下培養(yǎng)。篩選菌種時，將純化后的菌種接種到LB培養(yǎng)基中置于搖床上進行__________培養(yǎng)。

(3)單因素實驗中表格的①②處分別填入的數(shù)值為__________，__________。

(4)若要研究降解性能最好的菌種的最適pH值，應選取的pH范圍是____________，作出此選擇的依據(jù)是______________________________。27、生物技術(shù)實踐中會涉及微生物的篩選；物質(zhì)的提取等內(nèi)容?；卮鹣铝袉栴}：

（1）從土壤中篩選纖維素分解菌時；所用培養(yǎng)基在成分上的特殊之處在于_____________。鑒別纖維素分解菌所用的培養(yǎng)基中應加入剛果紅染料，纖維素分解菌分泌的__________能分解纖維素從而使培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈。

（2）采用壓榨法提取橘皮精油時；為了提高出油率，需要將新鮮的柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。其中石灰水的作用是___________________。將橘皮壓榨后可得到糊狀液體，為了獲得乳狀液，可以先用普通布袋___________除去固體物和殘渣，然后通過___________進一步除去質(zhì)量較小的殘留固體物。

（3）使用雞血提取DNA時，在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水，目的是_____________。為了將DNA和蛋白質(zhì)分離，可利用的原理有___________________________________（答出1點即可）。28、近年來；《舌尖上的中國》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮，其中不乏利用微生物發(fā)酵制作的美食，請回答下列有關(guān)問題。

（1）我國釀醋的歷史悠久；其主要生產(chǎn)工藝流程如圖。

在果酒制作時，酒精發(fā)酵階段，參與反應的酵母菌菌種來自于葡萄皮上的野生型酵母菌，在___________、___________的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應這一環(huán)境而受到抑制。當氧氣和糖源充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將__________________________________。

（2）制作泡菜時，起主要作用的微生物是_________。泡菜制作中鹽和水的比例是______。泡菜中的亞硝酸鹽過多會對人體產(chǎn)生危害，通常用___________法檢測亞硝酸鹽含量。

（3）豆腐乳前期發(fā)酵是在嚴格的無菌條件下溫度應控制在___________，并保持一定的濕度，然后向長滿毛霉的豆腐塊加鹽，其作用______________________，同時，鹽還能_____________，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。之后要加入配置好的鹵湯，其中鹵湯中加酒的含量應控制在一定的量。酒精含量過高，_________________；酒精含量過低，可能導致豆腐腐敗變質(zhì)。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、D【分析】【分析】

制作果酒的主要菌種是酵母菌；兼性厭氧型微生物；果醋發(fā)酵的菌種是醋酸菌，異養(yǎng)需氧型；腐乳制作的主要微生物是毛霉，異養(yǎng)需氧型。

【詳解】

腐乳制作起主要作用的微生物是毛霉，生殖方式是孢子生殖，A錯誤；果酒制作后期，需要打開發(fā)酵裝置的充氣口并適當提高溫度，進行果醋發(fā)酵，B錯誤；微生物發(fā)酵過程中，有機物總量會減少，種類會增多，C錯誤；果酒和果醋制作過程中，有種內(nèi)互助、種內(nèi)斗爭、競爭等，D正確。故選D。2、A【分析】【分析】

【詳解】

A.運用固定化酶和固定化細胞進行生產(chǎn)時；都需要為其提供生產(chǎn)所需的底物，酶的底物不能稱為營養(yǎng)物質(zhì)，A錯誤；

B.果酒和果醋制作中利用的微生物分別是酵母菌和醋酸菌；結(jié)構(gòu)上主要差別在于有無核膜，B正確；

C.采用稀釋平板法和平板劃線法都能分離純化菌種；得到單細胞菌落，區(qū)別在于前者可用于計數(shù)，后者不能，C正確；

D.探究加酶洗衣粉的最適溫度時；溫度是自變量，洗衣粉量；污漬的種類屬于無關(guān)變量，D正確。

故選A符合題意。3、C【分析】【分析】

1、酵母細胞的固定多采用包埋法；用干酵母和海藻酸鈉制備同定化酵母細胞的步驟為酵母細胞的活化→配制（物質(zhì)的量濃度為0.05mol/L的）CaCl2溶→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合→固定化酵母細胞。

2、直接使用酶、固定化酶、固定化細胞的比較。直接使用酶固定化酶固定化細胞酶的種類一種或幾種一種一系列酶常用載體無高嶺土、皂土、硅膠、凝膠明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素、聚丙烯酰胺制作方法無化學結(jié)合固定化、物理吸附固定化包埋法固定化是否需要營養(yǎng)物質(zhì)否否是催化反應單一或多種單一一系列反應底物各種物質(zhì)（大分子、小分子）各種物質(zhì)（大分子、小分子）小分子物質(zhì)缺點①對環(huán)境條件非常敏感，易失活②難回收，成本高，影響產(chǎn)品質(zhì)量不利于催化一系列的酶促反應反應物不易與酶接近，尤其是大分子物質(zhì)，反應效率下降優(yōu)點催化效率高、耗能低、低污染①既能與反應物接觸，又能與產(chǎn)物分離②可以反復利用成本低、操作容易

【詳解】

A、固定化酶一次只能固定一種酶，因此只能催化一種化學反應，而固定化細胞的優(yōu)勢在于能催化一系列生化反應，A錯誤；

B、固定化酵母細胞制作果酒時，要控制無氧環(huán)境，B錯誤；

C、工業(yè)生產(chǎn)中，細胞的固定化是在嚴格無菌條件下進行，C正確；

D、若發(fā)酵底物是大分子，由于大分子物質(zhì)不易進入細胞，因此固定化酶優(yōu)于固定化細胞，D錯誤。

故選C。4、A【分析】【分析】

1；用葡萄釀酒過程利用的是葡萄皮表面的野生酵母菌無氧呼吸；清洗葡萄過程中，若先去除葡萄梗，留下部分漏出果肉溶液受污染。

2；酒精發(fā)酵過程中因缺氧及含酒精的葡萄酒液中；微生物的繁殖受到抑制。

3；植物細胞壁的組成成分是纖維素和果膠；利用果膠酶可以將細胞壁水解，榨汁更容易。

【詳解】

A；選擇新鮮的葡萄釀酒；在榨汁前對葡萄的處理是先清洗葡萄再去除枝梗，這樣做的目的是避免污染，A錯誤；

B；將裝置密閉后再進行發(fā)酵；在此過程中，酒精度的變化情況是逐漸增加，最后趨于穩(wěn)定，B正確；

C；《史記?大宛列傳》記載“富人藏酒至萬馀石；久者數(shù)十歲不敗”，意思是釀制的酒有些經(jīng)幾十年也不會腐敗變質(zhì)，原因是在酸性、缺氧及含酒精的葡萄酒液中，微生物的繁殖受到抑制，C正確；

D；若最終獲得的果酒偏酸；最可能的原因是裝置密閉不嚴導致空氣進入，醋酸菌進行有氧發(fā)酵產(chǎn)生了醋酸，D正確。

故選A。

【點睛】5、C【分析】【分析】

腐乳制作的步驟：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。在選葡萄時應先沖洗1～2次，再去除枝梗，以防葡萄破損被雜菌污染；醋酸菌好氧性細菌，當缺少糖源時和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸。表達式為：C2H5OH→CH3COOH+H2O；當氧氣；糖源都充足時；醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃～35℃。

【詳解】

A；制作果酒時；將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶要留1/3空間，以保證含有一定量氧氣，目的是讓酵母菌進行有氧呼吸，快速繁殖，A正確；

B；醋酸菌為好氧菌；最適溫度生長溫度為30～35℃，因此制作果醋時，通氧不足或溫度過低，B正確；

C；制作腐乳的鹵湯時；料酒加的量較少，易造成豆腐腐敗變質(zhì)，加料酒的量多，成熟期延長，C錯誤；

D；測定泡菜中的亞硝酸鹽含量；每次取樣后要迅速封口，防止雜菌污染，D正確。

故選C。6、C【分析】【分析】

1；由題意分析可知；四倍體蘋果的獲得是多倍體育種，原理是秋水仙素處理成熟胚，當秋水仙素作用于正在分裂的細胞時，能夠抑制紡錘體的形成，導致染色體不能移向細胞兩極，從而引起細胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍。

2；植物組織培養(yǎng)中外植體的消毒：在超凈工作臺（或接種箱）上將外植體用酒精溶液消毒30s后；立即用無菌水清洗2—3次，再用次氯酸鈉溶液處理30min后，立即用無菌水清洗2~3次。

【詳解】

A；用低溫處理植物正在分裂的細胞；能夠抑制紡錘體的形成，以致影響染色體被拉向兩極，細胞也不能分裂成兩個子細胞，使植物細胞染色體數(shù)目發(fā)生變化，所以利用低溫誘導也可獲得四倍體，A正確；

B；秋水仙素能夠抑制紡錘體的形成；導致染色體不能移向細胞兩極，從而引起細胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍，B正確；

C；培養(yǎng)基的滅菌方法為用高壓蒸汽滅菌法；外植體只需消毒，用高壓蒸汽滅菌法處理外植體會使其失活，C錯誤；

D；二倍體經(jīng)花藥產(chǎn)生的是配子；配子經(jīng)離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，D正確。

故選C。

【點睛】7、D【分析】1；植物組織培養(yǎng)是指利用特定的培養(yǎng)將離體的植物細胞、組織或器官培養(yǎng)成完整植株的過程；所以花藥的離體培養(yǎng)、基因工程中的受體細胞的培養(yǎng)、植物體細胞雜交后雜種細胞的培養(yǎng)以及植物的大量快速繁殖都要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)。

2；植物組織培養(yǎng)的過程是外植體→脫分化愈傷組織→再分化根、芽→試管苗。脫毒植物苗的取材一般是幼嫩的芽或莖；主要是這些部位不帶病毒。植物組織培養(yǎng)過程中，生長素和細胞分裂素同時使用時，兩者用量的比例影響著細胞的發(fā)育方向（或分化）。培養(yǎng)中必須具備植物激素、無機物（礦質(zhì)元素）、有機物等營養(yǎng)物質(zhì)。愈傷組織的特點是細胞排列疏松而無規(guī)則、呈無定形狀態(tài)。

【詳解】

A；從花粉來看；應當選擇單核期的花粉，單核期花粉培養(yǎng)的成功率最高，此外，親本植株的生長條件、材料的低溫預處理以及接種的密度對誘導成功率都有一定的影響，A錯誤；

B；從花蕾來看；早期花藥比后期更容易產(chǎn)生花粉植株，應選擇完全未開放的花蕾做實驗材料，B錯誤；

C；在剝離花藥時；要徹底去除花絲，因為與花絲相連的花藥，不利于愈傷組織或胚狀體的形成，C錯誤；

D；在花藥離體培養(yǎng)中剝離花藥時；要盡量不損傷花藥，否則接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織，D正確。

故選D。8、B【分析】【分析】

血紅蛋白的提取和分離包括：樣品處理；粗分離、純化合純度鑒定。

【詳解】

該實驗需要選擇哺乳動物成熟的紅細胞，因為不含DNA等雜質(zhì)，A正確；透析可以去除樣品中分子量較小的雜質(zhì)，B錯誤；凝膠色譜法是利用蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法，C正確；電泳法是利用各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子的大小和形狀不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離，D正確。故選B。二、多選題(共6題，共12分)9、B:C:D【分析】【分析】

制作固定化酵母細胞的實驗步驟：1、酵母細胞的活化；2、配制0.05mol/L的CaCl2溶液；3；配制海藻酸鈉溶液（該實驗成敗的關(guān)鍵步驟）；4、海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合；5、固定化酵母細胞。

【詳解】

A；溶化的海藻酸鈉應冷卻至室溫后與活化的酵母菌混合；A錯誤；

B、海藻酸鈉與酵母菌混合液應滴入CaCl2溶液中；以制備凝膠珠，B正確；

C；攪拌可使酵母菌與培養(yǎng)液充分接觸；有利于發(fā)酵的順利進行，C正確；

D；凝膠珠用蒸餾水沖洗2～3次后；再轉(zhuǎn)移到發(fā)酵裝置中，D正確。

故選BCD。10、A:B:C【分析】【分析】

制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基：（1）計算：依據(jù)是培養(yǎng)基配方的比例。（2）稱量：牛肉膏比較黏稠；可同稱量紙一塊稱取。牛肉膏和蛋白胨易吸潮，稱取時動作要迅速，稱后及時蓋上瓶蓋。（3）溶化：牛肉膏和稱量紙+水加熱取出稱量紙→加蛋白胨和氯化鈉→加瓊脂（注意：要不斷用玻璃棒攪拌，防止瓊脂糊底而導致燒杯破裂）→補加蒸餾水至100mL。（4）調(diào)pH。（5）滅菌：培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌，培養(yǎng)皿采用干熱滅菌。（6）倒平板。

【詳解】

A；倒平板、接種需要在酒精燈火焰旁進行；而配培養(yǎng)基不需要在酒精燈的火焰旁進行，A錯誤；

B；倒平板時；打開培養(yǎng)皿蓋，將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，然后倒放于超凈實驗臺上，B錯誤；

C；倒入培養(yǎng)基后立即蓋上培養(yǎng)皿；冷卻后將平板倒過來放置，C錯誤；

D；用平板劃線法劃完線后；要在培養(yǎng)皿皿底上做好標記，D正確。

故選ABC。11、A:D【分析】【分析】

1、纖維素酶是一種復合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶三種；其中能夠?qū)⒗w維二糖分解為葡萄糖的是葡萄糖苷酶；

2；微生物的培養(yǎng)基的主要成分包括碳源、氮源、水和無機鹽；有的還有特殊營養(yǎng)物質(zhì)（生長因子、維生素）。

3；纖維素分解菌常采用剛果紅染液進行鑒定；剛果紅可以與纖維素結(jié)合形成紅色物質(zhì)，纖維素分解菌由于能夠?qū)⒗w維素分解而在平板上的菌落周圍出現(xiàn)無色的透明圈，透明圈的大小可以反應纖維素分解菌產(chǎn)生的酶的多少。

【詳解】

A、纖維素酶是一種復合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；其中葡萄糖苷酶可以將纖維二糖分解成葡萄糖，A正確；

B；從白蟻消化道中分離能高效降解纖維素的細菌；呼吸類型應該為無氧呼吸，B錯誤；

C；鑒別纖維素分解菌時；可以向長出菌落的培養(yǎng)基上直接滴加剛果紅染液，C錯誤；

D；要長期保存菌種；采用甘油管藏的方方法，將菌液與滅菌后的甘油1∶1混合，放在-20℃的冷凍箱中保存，D正確。

故選AD。12、A:C:D【分析】【分析】

分析題干和表格信息可知；該實驗的目的是探究不同酶；不同洗滌濃度對洗滌效果的影響，實驗的自變量是酶的種類和濃度，因變量是洗滌效果，洗滌的溫度、洗滌時間、洗滌方式、洗滌材料和污物的種類及污染程度等屬于無關(guān)變量，無關(guān)變量應該保持一致且適宜。

【詳解】

A；加酶洗衣粉是將通過基因工程生產(chǎn)的酶通過特殊物質(zhì)層層包裹；與洗衣粉的其他成分隔離，遇水后包裹層很快溶解，釋放出來的酶迅速發(fā)揮催化作用，并沒有運用到固定化酶技術(shù)，因為酶未固定在不溶于水的載體上，也不能重復利用，A錯誤；

B；分析表格中的信息可知；相同濃度條件下，兩種洗衣粉的洗滌效果無顯著差異，因此若洗滌的是相同污布，兩種加酶洗衣粉的洗滌效果相似，B正確；

C；pH會影響酶的活性；pH過高或過低時都會使酶變性失活，因此相同pH時，加酶洗衣粉洗滌效果不一定好于普通洗衣粉，C錯誤；

D；該表格顯示甲、乙兩種洗衣粉的最適洗滌濃度相同；都為0.6%左右，但是不能說明所有加酶洗衣粉最適洗滌濃度都相同，D錯誤。

故選ACD。

【點睛】13、A:C:D【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，進行有氧呼吸大量繁殖；（2）在無氧條件下，產(chǎn)生酒精和二氧化碳。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；果酒制作時；除了產(chǎn)生酒精，還會產(chǎn)生大量二氧化碳，因此發(fā)酵瓶中容易產(chǎn)生較多泡沫，A正確；

B；用果酒制作果醋過程中；液面出現(xiàn)一層白色菌膜，而不是褐色菌膜，B錯誤；

C；制作腐乳過程中；豆腐表面發(fā)黏且長有白色菌絲，C正確；

D；用固定化酵母進行酒精發(fā)酵；酒精濃度越來越高，因此凝膠珠逐漸浮上液面，D正確。

故選ACD。

【點睛】14、A:C:D【分析】【分析】

1；泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌．在無氧條件下；乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。2、在制作泡菜時所配制的泡菜鹽水要煮沸，以殺滅鹽水中的微生物，防止雜菌污染。泡菜制作過程中，溫度過高、食鹽用量過低、腌制時間過短、容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。

【詳解】

A；“泡菜之水；用花椒和鹽煮沸”的目的提升泡菜味道、減少水中的溶氧量和消毒殺菌防止雜菌污染，A錯誤；

B；“霉花”是指泡菜壇表面的一層白膜；主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往來自蔬菜，B正確；

C；“壇沿外水須隔日一換；勿令其干”的目的是保證壇內(nèi)的無氧環(huán)境，C錯誤；

D；制作泡菜的過程；亞硝酸鹽的含量呈先上升后下降的趨勢，D錯誤。

故選ACD。三、填空題(共6題，共12分)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】反應速度反應物的減少量產(chǎn)物的增加量16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】水不溶性水溶性四氯化碳17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】水蒸氣油水18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】壓榨萃取19、略

【解析】①.雜菌②.純凈③.營養(yǎng)和環(huán)境條件20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】鹽酸對氨基苯磺酸N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽玖瑰紅四、非選擇題(共4題，共32分)21、略

【分析】【分析】

試題分析：參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型.果醋制作的原理：當氧氣；糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將Z醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

腐乳制作的原理：參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多種；其中起主要作用的是毛霉；毛霉是一種絲狀真菌，常見于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有發(fā)達的白色菌絲；毛酶等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

（1)在果醋制作時，選用醋酸菌，當氧氣和糖源供應充足時，將糖分解成醋酸；在糖源不充足時，可以利用酒精生成醋酸，該過程的化學反應式為：C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O。

（2）參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多種；其中起主要作用的是毛霉，腐乳制作用鹽腌制時，加鹽可以析出豆腐中的水分，不過應注意控制鹽的用量；配制鹵湯時，要使鹵湯中酒的含量控制在12%左右。

（3）制作泡菜的原理是：乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖；將葡萄糖分解成乳酸。在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)重氮化反應后，與N—1—萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。

【點睛】

本題考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作、泡菜的制作等，要求考生識記果酒和果醋制作、腐乳的制作、泡菜的制作的相關(guān)知識，尤其是果醋制作的原理、腐乳的制作流程和泡菜制作過程中亞硝酸鹽的鑒定方法，能根據(jù)題干要求選出正確的答案，屬于考綱識記層次的考查?！窘馕觥垦鯕釩2H5OH+O2→CH3COOH+H2O毛霉析出豆腐中的水分鹽的用量12乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖，將葡萄糖分解成乳酸鹽酸酸化重氮化玫瑰紅22、略

【分析】【分析】

1；欲從土壤中篩選出能分解尿素（產(chǎn)生脲酶）的細菌；所用培養(yǎng)基必須以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基；尿素分解菌在該選擇培養(yǎng)基上能產(chǎn)生脲酶；尿素分解菌產(chǎn)生的脲酶能將尿素分解成氨，氨是堿性物質(zhì)，可使酚紅指示劑變紅。

2；微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)；在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

（1）根據(jù)以上分析可知；尿素分解菌能夠產(chǎn)生脲酶將尿素分解為氨，而不能產(chǎn)生脲酶的細菌不能利用尿素為氮源。

（2）由于固氮菌也能在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上生長；所以在該選擇培養(yǎng)基上生長的細菌不一定都能產(chǎn)生脲酶；尿素分解菌產(chǎn)生的脲酶能將尿素分解成氨，氨是堿性物質(zhì)，可使酚紅指示劑變紅。

（3）采用平板劃線法進一步純化時；每次劃線后接種環(huán)必須灼燒并冷卻，才能再次用于劃線。純化獲得的尿素分解菌是一種好氧型細菌，其有氧呼吸需要氣體流通，故將該菌種保存在試管中時不能密封。

（4）用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4；一是其作為無機鹽可以為細菌生長提供無機營養(yǎng)，二是作為緩沖劑保持細胞生長過程中PH穩(wěn)定。

【點睛】

本題考查微生物的篩選和培養(yǎng)的知識點，要求學生掌握選擇培養(yǎng)基的應用和微生物的接種方法，掌握尿素分解菌的篩選過程和原則，識記培養(yǎng)基中常見的成分及其作用，這是該題考查的重點；把握尿素分解菌的篩選和鑒定方法是突破該題的關(guān)鍵。【解析】脲酶不一定周圍指示劑變紅(或周圍出現(xiàn)紅圈)灼燒并冷卻細菌有氧呼吸需要氣體流通為細菌生長提供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細胞生長過程中PH穩(wěn)定23、略

【分析】【試題分析】主要考查培養(yǎng)基配制（計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板）；亞硝酸鹽含量的測定（在鹽酸酸化條件下亞硝酸與對氨基苯磺酸重氮化后；再與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色物質(zhì)）、腐乳的制作、利用血細胞計數(shù)板計數(shù)后計算（注意稀釋的倍數(shù)）及菌種的保藏（放在4℃冰箱中是臨時保藏、用甘油保藏是長期保存）等知識。

（1）按配方計算培養(yǎng)基中各種成分的用量→稱量（一般動作要迅速一些；因為其中可能有些成分容易吸潮）→溶化（將稱好的各種成分溶解在水中，如果是固體培養(yǎng)基，需要使用凝固劑，如瓊脂等；溶化時，注意攪拌，防止糊底）→滅菌（高壓蒸汽滅菌）→倒平板；選擇菌落數(shù)在30-300的平板進行計數(shù)，是因為在這個范圍內(nèi)，各個菌落之間的營養(yǎng)競爭不是特別劇烈而不會對菌落的形成造成比較大的干擾，同時也能在數(shù)菌落過程中能讓人眼有效分辨出各個菌落；

（2）亞硝酸鹽轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯醢?；具有很強的致癌；致畸、致突變作用，對人體有害；在鹽酸酸化條件下亞硝酸與對氨基苯磺酸重氮化后，再與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色物質(zhì)；

（3）在鹵湯中加酒；作用有二：其一是抑制微生物生長；其二是調(diào)味。但要求控制好量，一般要控制在12％左右；

（4）血細胞計數(shù)板計數(shù)(規(guī)格為16×25，O.lmm3)，每個小格所含細菌的平均數(shù)為2個，稀釋倍數(shù)為103，則每毫升樣品中的細菌數(shù)=2×0.1×1000×16×25×103=8×109個；

（5）為了保持菌種的純凈，需要進行菌種的保藏。對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法，將已長成的菌落的試管放入4℃冰箱中保藏?！窘馕觥咳芑?。

滅菌30-300亞硝胺鹽酸酸化12%8×1094℃冰箱24、略

【分析】【分析】

乳的制作過程主要是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。

1；讓豆腐上長出毛霉：將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)；將籠屜中的溫度控制在15～18℃，并保持在一定的濕度，約48h后，毛霉開始生長，3d之后菌絲生長旺盛，5d后豆腐塊表面布滿菌絲．豆腐塊上生長的毛霉來自空氣中的毛霉孢子。

2；加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中；同時逐層加鹽，隨著層數(shù)的加高而增高鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些；加鹽研制的時間約為8d左右，加鹽可以析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，在后期的制作過程中不會過早酥爛，同時，鹽能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。

3；加鹵湯裝瓶：鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味；鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的；鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右；加酒可以抑制微生物的生長，同時能使腐乳具有獨特的香味；香辛料種類很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等；香辛料可以調(diào)制腐乳的風味，也具有防腐殺菌的作用，可據(jù)個人口味配置鹵湯。

4；密封腌制。

【詳解】

（1）腐乳制作時；起主要作用的微生物是毛霉。毛霉具有核膜包裹的細胞核，屬于真核生物。

（2）腐乳制備過程中；加鹽可以析出豆腐中的水，使豆腐塊變硬。

（3）發(fā)酵過程中；毛霉中的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)水解，故氨基酸含量上升，蛋白質(zhì)含量下降。

（4）發(fā)酵到60天時；鹽度為5%的腐乳中PH已經(jīng)下降，說明腐乳已經(jīng)腐??；說明鹽度太低，容易導致其他微生物的生長，從而使腐乳腐敗。

（5）鹽度太小容易腐??；鹽度太大氨基酸含量低，因此最好控制在8%左右。

【點睛】

本題考查腐乳的制作過程，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力?！窘馕觥棵拐婧宋龀龆垢械乃仙鞍酌?%鹽濃度過低，不足以抑制微生物的生長，導致腐敗變質(zhì)8%五、綜合題(共4題，共28分)25、略

【分析】【分析】

1；無菌技術(shù)的主要內(nèi)容：①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手；進行清潔和消毒；②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌；③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；④實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。

2；微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落，該方法所用的接種工具是接種環(huán)；滅菌方法有：濕熱滅菌；干熱滅菌、灼燒滅菌，對接種環(huán)進行滅菌的常用方法為灼燒滅菌。

（2）利用平板劃線法純化乳酸菌時；第二次及其后的劃線都要從上一次劃線的末端開始，從而使細菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，便于獲得單菌落，起到分離菌落的作用；但是平板劃線法不能用于微生物的計數(shù)，因為平板劃線法只在劃線末端出現(xiàn)單菌落，而不能統(tǒng)計出單菌落數(shù)。

（3）要研究的是乳酸菌分泌的細菌素對指示菌的抑菌效果；應該先吸取稀釋的指示菌菌液涂布到平板中進行培養(yǎng)；在提取抑菌有效成分時，只需要獲取細菌素這一物質(zhì)即可，乳酸菌菌體主要分布在離心后的液體培養(yǎng)基的沉淀物中，其分泌物細菌素位于上清液，故需要吸取離心后液體培養(yǎng)基的上清液菌液涂布到平板中；

抑菌圈是指固體培養(yǎng)基表面與試樣接觸的邊界處無菌繁殖的環(huán)帶區(qū)域；利用待測次生代謝產(chǎn)物在瓊脂平板擴散使其周圍的細菌生長受到抑制形成的抑菌圈大小，而本實驗用的是5mm直徑的打孔器打孔，故注入相應物質(zhì)后，培養(yǎng)24h后測定抑菌圈的直徑，當抑菌圈的直徑至少大于5mm才能判斷為具有抑菌活性。

（4）細菌的生命活動會受到環(huán)境理化性質(zhì)的影響，實驗小組用經(jīng)乳酸調(diào)節(jié)pH至3.5（與發(fā)酵48h后發(fā)酵液的pH相同）的MRS液體培養(yǎng)基作為空白對照組，觀察其抑菌情況，設置該組實驗的目的是排除有機酸對細菌的抑制作用?！窘馕觥?1)接種環(huán)灼燒滅菌。

(2)末端使細菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少；便于獲得單菌落平板劃線法只在劃線末端出現(xiàn)單菌落，不能統(tǒng)計出單菌落數(shù)。

(3)指示菌上清液5mm

(4)排除有機酸對細菌的抑制作用26、略

【分析】【分析】

1、從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)（擴大培養(yǎng)）、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。

2；臨時保藏法：臨時保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培養(yǎng)基上；等到菌落長成后，放入冰箱（4℃）低溫保藏。

3；稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目的原理：當樣品的稀釋度足夠高時；培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活細菌。為了保證結(jié)果準確，一般設置3-5個平板，選擇菌落數(shù)在30-300的平板進行計數(shù)，并取平均值。

4、根據(jù)單因素實驗中表格可知，改變溫度組中，溫度32～35，相差3；溫度35～38，也相差3。改變時間組中，時間12～16，相差4；時間24～28；也相差4。

5；根據(jù)菌種降解性能的測定的曲線圖可知；汽油降解率代表酶的活性。在培養(yǎng)基PH為6～6.5時，菌4的汽油降解率增大很快；在培養(yǎng)基PH為6.5～7.5時，菌4的汽油降解率增大很慢；在培養(yǎng)基PH為7.5時，菌4的汽油降解率達到最大；在培養(yǎng)基PH為7.5～8時，菌4的汽油降解率迅速降低。

(1)

根據(jù)題干信息分析可知，稱取石油污染土1.0g放入到無菌生理鹽水中，溶液的稀釋度為10-1，既是石油污染土的質(zhì)量÷（石油污染土的質(zhì)量＋無菌生理鹽水的質(zhì)量）＝10-1；則無菌生理鹽水的質(zhì)量為9.0g，約為9mL。利用稀釋涂布法可對菌種進行計數(shù)，其原理是當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約有多少個活菌。

(2)

根據(jù)臨時保藏法可知；對菌種進行臨時保藏時，需先將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)。為了提供足夠菌種，篩選菌種時，將純化后的菌種接種到LB培養(yǎng)基中置于搖床上進行擴大培養(yǎng)（選擇培養(yǎng)）培養(yǎng)。

(3)

根據(jù)單因素實驗中表格分析可知；改變溫度組中，溫度相差3。改變時間組中，時間相差4。所以①處溫度應該是29，②處的時間是20。

(4)

根據(jù)菌種降解性能的測定的曲線圖分析可知；汽油降解率代表酶的活性。在培養(yǎng)基PH為7.5時，菌4的汽油降解率達到最大，其最適pH值可能高于或低于7.5，所以若要研究降解性能最好的菌種的最適pH值，應選取的pH范圍是7～8。

【點睛】

本題以篩選降解汽油能力較強的菌種情景，考查微生物的培養(yǎng)、篩選和計數(shù)等相關(guān)知識點?？忌莆辗纸饽蛩氐木姆蛛x和計數(shù)的知識，結(jié)合題干信息和曲線圖的分析，提取有效的信息，進行知識遷移，運用到篩選降解汽油能力較強的菌種中，才能準確完成解答?！窘馕觥?1)9.0當樣品的稀釋度足夠高時；培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約有多少個活菌。

(2)固體斜面培養(yǎng)基擴大