2025年浙教版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年浙教版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷131考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述，正確的是A.利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵B.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵C.果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反D.毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶參與腐乳發(fā)酵2、甲乙兩種遠(yuǎn)緣植物體細(xì)胞融合會(huì)導(dǎo)致一方的染色體被排出；若甲細(xì)胞的染色體在融合前斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理，將抗黑脛病的黑芥與不抗黑脛病的甘型油菜進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了抗黑脛病的甘型油菜新品種，過程如下圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（）

A.④過程用到了植物組織培養(yǎng)技術(shù)B.抗黑脛病的甘型油菜染色體上整合了黑芥的染色體片段C.②紫外線照射劑量不同會(huì)導(dǎo)致黑芥染色體斷裂程度不同D.可利用聚乙二醇或滅活的病毒誘導(dǎo)兩種植物原生質(zhì)體融合3、將某病毒的外殼蛋白（L1）基因與綠色熒光蛋白（GFP）基因連接，構(gòu)建L1-GFP融合基因，再將融合基因與質(zhì)粒連接構(gòu)建圖所示表達(dá)載體。圖中限制酶E1~E4處理產(chǎn)生的黏性末端均不相同。下列敘述不正確的是（）

A.L1-GFP基因的表達(dá)產(chǎn)物中L1與GFP通過肽鍵相連B.E1、E4雙酶切確保L1-GFP融合基因與載體的正確連接C.GFP可用于檢測(cè)受體細(xì)胞中目的基因是否表達(dá)D.將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入乳腺細(xì)胞培育乳汁中含L1蛋白的轉(zhuǎn)基因羊4、2011年4月，JMCB（《分子細(xì)胞生物學(xué)報(bào)》）在線出版了“干細(xì)胞”主題專輯，集中刊載了干細(xì)胞研究領(lǐng)域的多項(xiàng)最新研究成果。醫(yī)學(xué)上常用器官移植來治療人類的某些疾病，而利用人類胚胎干細(xì)胞可以解決器官移植中的很多問題。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.胚胎干細(xì)胞具有體積小、核大、核仁明顯、蛋白質(zhì)合成旺盛等特點(diǎn)B.胚胎干細(xì)胞除了可以來自內(nèi)細(xì)胞團(tuán)外，還可來自原始的性腺C.胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中能夠維持不分化的狀態(tài)D.若用胰島素基因作探針對(duì)胚胎干細(xì)胞和胰島B細(xì)胞的mRNA進(jìn)行檢測(cè)，均能形成雜交帶5、下列有關(guān)生物工程技術(shù)的敘述中，正確的是（）A.恢復(fù)礦區(qū)生態(tài)環(huán)境的關(guān)鍵在于轉(zhuǎn)基因“工程菌”對(duì)土壤污染物的分解B.應(yīng)杜絕進(jìn)行存在生命科學(xué)倫理問題的“設(shè)計(jì)試管嬰兒”的研究C.世界各國(guó)都應(yīng)該禁止在任何情況下生產(chǎn)、儲(chǔ)存和發(fā)展生物武器D.生物工程技術(shù)應(yīng)用在植物體上就不會(huì)帶來生命倫理和安全問題6、下列關(guān)于cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)的說法中，正確的是（）A.同一物種的cDNA文庫(kù)只有1種B.某真核生物的cDNA文庫(kù)中的某基因一定比基因組文庫(kù)中的該基因短C.可以利用反轉(zhuǎn)錄法獲取cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)D.只有cDNA文庫(kù)的基因可實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流7、如圖表示高等動(dòng)物的個(gè)體發(fā)育過程，下列說法正確的是（）

A.胚胎發(fā)育至原腸胚時(shí)期即開始了細(xì)胞分化，隨后發(fā)育形成三個(gè)胚層B.受精卵卵裂形成囊胚的過程中，每個(gè)細(xì)胞的體積不斷增大C.圖中①過程表示胚胎發(fā)育，②過程表示胚后發(fā)育D.囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來會(huì)發(fā)育成胎兒的各種組織和器官8、CRISPR/Cas9是應(yīng)用最廣泛的基因組編輯技術(shù)；其操作過程如下：

①人工合成的短鏈RNA作為向?qū)Вê?jiǎn)稱gRNA）；它將部分與細(xì)胞某目的基因中希望被編輯的序列相結(jié)合；

②來自細(xì)菌的核酸酶Cas9與gRNA結(jié)合；切割與gRNA結(jié)合的DNA，使DNA雙鏈斷裂；

③加入大量用于修復(fù)的模板DNA（即大部分序列與被切割位點(diǎn)附近序列相同；個(gè)別位點(diǎn)被人工改變）。這樣，細(xì)胞啟動(dòng)修復(fù)機(jī)制，人類希望改變的堿基序列被引入基因組中，基因組的準(zhǔn)確編輯由此實(shí)現(xiàn)。

以下關(guān)于該技術(shù)敘述正確的是（）A.gRNA的序列與目的基因特定堿基序列部分結(jié)合，結(jié)合區(qū)域最多含6種核苷酸B.Cas9經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體加工才具有切斷DNA的活性C.CRISPR/Cas9技術(shù)對(duì)不同基因進(jìn)行編輯時(shí)，應(yīng)使用相同的gRNAD.CRISPR/Cas9技術(shù)可改變基因結(jié)構(gòu)，也可以使某個(gè)基因失去功能9、許多食品的生產(chǎn)需要借助微生物發(fā)酵過程，下列敘述正確的是（）A.泡菜生產(chǎn)過程中亞硝酸鹽隨腌制時(shí)間逐漸積累B.制作泡菜時(shí)有時(shí)會(huì)長(zhǎng)一層白膜能增加其獨(dú)特的風(fēng)味C.糖源充足時(shí)醋酸菌可以利用乙醇在厭氧條件下生產(chǎn)醋酸D.利用乳酸菌可將含較多抗生素的牛奶制作成含有抗生素的酸奶評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)10、科學(xué)家通過“治療性克隆”研究發(fā)現(xiàn)；利用病人本身的細(xì)胞可治療其患有的某些疾病。一般將胚胎干細(xì)胞進(jìn)行基因修飾后，經(jīng)誘導(dǎo)分化成相應(yīng)的組織器官用于移植。其過程如下圖所示。下列關(guān)于“治療性克隆”的敘述不正確的是（）

A.人類“治療性克隆”屬于生物工程中的細(xì)胞工程B.該治療過程中應(yīng)用的主要技術(shù)有核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等C.此過程體現(xiàn)了胚胎干細(xì)胞具有全能性D.“治療性克隆”與“異體器官移植”相比，其優(yōu)點(diǎn)之一是避免了免疫排斥反應(yīng)11、生物武器的傳播途徑主要包括（）A.直接傳播B.食物傳播C.生活必需品傳播D.施用者人體傳播12、中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所首席科學(xué)家；動(dòng)物克隆與受精生物學(xué)學(xué)科帶頭人陳大元；曾主持科研攻關(guān)項(xiàng)目——“攀登”，進(jìn)行大熊貓的異種克隆。他們將大熊貓的體細(xì)胞核放入兔子的去核卵母細(xì)胞之中，并使其成功發(fā)育成囊胚，標(biāo)志著異種核質(zhì)相容的問題得到解決，異種克隆大熊貓邁過了第一道“坎”；然后至關(guān)重要的是選擇一種合適的“代孕母體”。下圖是該研究的理論流程圖。下列說法正確的是（）

A.整個(gè)過程用到的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物體細(xì)胞核移植和胚胎移植等B.誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細(xì)胞C.重構(gòu)胚發(fā)育成囊胚所需營(yíng)養(yǎng)主要來源于“代孕母體”D.步驟甲和步驟乙中的供體和受體需要同期發(fā)情處理13、蛋白質(zhì)工程就是通過對(duì)蛋白質(zhì)化學(xué)、蛋白質(zhì)晶體學(xué)和蛋白質(zhì)動(dòng)力學(xué)的研究，獲得有關(guān)蛋白質(zhì)理化特性和分子特性的信息，在此基礎(chǔ)上對(duì)編碼蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行有目的的設(shè)計(jì)和改造，通過基因工程技術(shù)獲得可以表達(dá)蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因生物，中華鱘是一種瀕危野生動(dòng)物。研究者試圖通過蛋白質(zhì)工程改造中華鱘體內(nèi)的某些蛋白質(zhì)，使其更加適應(yīng)現(xiàn)在的水域環(huán)境。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A.蛋白質(zhì)工程可定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)B.改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)C.改造后的中華鱘和現(xiàn)有中華鱘不再是同一物種D.改造后的中華鱘的后代不具有改造的蛋白質(zhì)14、2016年初；首位由“三合一”胚胎人工授精技術(shù)培育的嬰兒出生，其培有過程如下圖所示。下列相關(guān)說法正確的是（）

A.“三親嬰兒”孕育過程中使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植等技術(shù)B.融合激活后的卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到MII中期才能完成受精作用C.卵母細(xì)胞A的捐獻(xiàn)者攜帶的血友病基因能遺傳給“三親嬰兒”D.“三親嬰兒”培育技術(shù)可以用來避免細(xì)胞質(zhì)遺傳病的遺傳15、科研人員利用甲、乙兩種植物的各自優(yōu)勢(shì)，通過植物細(xì)胞工程技術(shù)培育高產(chǎn)、耐鹽雜種植物的過程中，相關(guān)操作不合理的是（）A.利用胰蛋白酶分別處理甲、乙植物以獲得原生質(zhì)體B.利用電激或滅活的病毒誘導(dǎo)甲、乙原生質(zhì)體的融合C.利用秋水仙素誘導(dǎo)組織培養(yǎng)中愈傷組織細(xì)胞壁再生D.將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選中所需雜種植株將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選出所需雜種植株16、長(zhǎng)春花是野生花卉，其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。研究人員利用已免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞通過雜交技術(shù)生產(chǎn)出能夠同時(shí)特異性識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體，制備過程如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（）

A.①過程要多次注射抗原，其目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多的抗體B.經(jīng)③過程獲得的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生抗癌胚抗原的特異性抗體C.圖中“?”處只能使用PEG融合法和電融合法來誘導(dǎo)細(xì)胞融合D.制備雙特異性抗體的目的是使長(zhǎng)春堿能定向地作用于癌細(xì)胞17、通過設(shè)計(jì)引物，運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定點(diǎn)誘變。下圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個(gè)堿基T不能與目的基因片段配對(duì)，但不影響引物與模板鏈的整體配對(duì)，反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計(jì)增加限制酶a和限制酶b的識(shí)別位點(diǎn)。下列敘述正確的是（）

A.引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識(shí)別位點(diǎn)有利于目的基因定向插入載體B.PCR的過程主要包括變性→延伸→復(fù)性（退火），溫度逐漸降低C.第3輪PCR，引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長(zhǎng)的突變基因D.每一輪PCR都消耗引物和原料，需要在操作中及時(shí)補(bǔ)充18、淀粉經(jīng)淀粉酶水解后得到的產(chǎn)物是重要的工業(yè)原料；但工業(yè)化生產(chǎn)常需在高溫條件下進(jìn)行，而現(xiàn)有的淀粉酶耐熱性不強(qiáng)，科研人員發(fā)現(xiàn)將淀粉酶（AmyS1）第27位的亮氨酸替換為天冬氨酸能產(chǎn)生耐熱性高的淀粉酶（AmyS2），由此科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設(shè)計(jì)并人工合成了AmyS2基因，將其導(dǎo)入芽孢桿菌內(nèi)，具體過程如下圖所示。最終結(jié)果表明，與導(dǎo)入質(zhì)粒B相比，導(dǎo)入質(zhì)粒C的芽孢桿菌培養(yǎng)液中更易獲得并提純AmyS2．下列說法錯(cuò)誤的是（）

A.獲得AmyS2基因并將其導(dǎo)入芽孢桿菌得到AmyS2的過程是通過基因工程實(shí)現(xiàn)的B.構(gòu)建質(zhì)粒C時(shí)需用限制酶Eco52I和BamHI同時(shí)切割質(zhì)粒B和信號(hào)肽基因C.信號(hào)肽基因表達(dá)的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體D.可用PCR技術(shù)檢測(cè)芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因評(píng)卷人得分三、填空題(共8題，共16分)19、請(qǐng)回答下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性和倫理問題：

（1）一些持支持態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為，由于不同物種間存在__________，同時(shí)花粉的傳播距離和__________有限；轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物很難與其它植物雜交，因而不大可能對(duì)生物多樣性造成威脅。

（2）在轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品研究過程中，絕大多數(shù)科學(xué)家都能自覺遵守科學(xué)研究道德。例如，把重組DNA的轉(zhuǎn)移限制在遺傳上具有___________的生物上；對(duì)外源DNA進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免能夠表達(dá)出對(duì)人體有毒性或過敏的___________．

（3）一些持反對(duì)態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為，由于克隆技術(shù)尚不成熟，現(xiàn)在就做克隆人很可能孕育出有嚴(yán)重缺陷的孩子。但是支持克隆人的科學(xué)家則認(rèn)為，一些技術(shù)問題可以通過胚胎分級(jí)、______和__________等方法得到解決。

（4）對(duì)于克隆技術(shù)，中國(guó)政府的態(tài)度是___________．但不反對(duì)___________。20、本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有___________和___________發(fā)酵兩種。纖維素酶的測(cè)定方法，一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的__________進(jìn)行________的測(cè)定。21、酵母菌是______________微生物。酵母菌進(jìn)行有氧呼吸的反應(yīng)式如下：______________________；酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸的反應(yīng)式如下：_________________。22、結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：______和______。23、請(qǐng)寫出基因工程的概念：_________________。請(qǐng)寫出胚胎移植的概念：_____________________。請(qǐng)分別寫出植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理_________。24、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識(shí)提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。25、我國(guó)是一個(gè)愛好和平的國(guó)家，也是曾經(jīng)遭受生物武器傷害的國(guó)家。我國(guó)政府對(duì)生物武器的態(tài)度是什么？我們?yōu)槭裁凑J(rèn)同這種態(tài)度？__________26、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識(shí)提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共16分)27、目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。（選擇性必修3P54）()A.正確B.錯(cuò)誤28、生殖性克隆是指通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)29、研究表明生物制劑W對(duì)不同種類動(dòng)物細(xì)胞的分裂均有促進(jìn)作用。有同學(xué)設(shè)計(jì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證這個(gè)觀點(diǎn)。請(qǐng)根據(jù)以下提供的實(shí)驗(yàn)材料；完善該實(shí)驗(yàn)步驟，并預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)材料：培養(yǎng)液；正常肝組織、肝癌組織、W、胰蛋白酶。

（要求與說明：答題時(shí)不考慮加入W后的體積變化等誤差。提供的細(xì)胞均具有分裂能力；只進(jìn)行原代培養(yǎng)且培養(yǎng)條件適宜）

（1）實(shí)驗(yàn)步驟：

①用_________分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細(xì)胞。將兩種分散的細(xì)胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細(xì)胞懸液。培養(yǎng)液需要中加入__________等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和__________用以滅菌。

②在顯微鏡下用_____________直接計(jì)數(shù)兩種細(xì)胞懸液中細(xì)胞的數(shù)量；并進(jìn)行記錄。

③取滅菌后的培養(yǎng)瓶若干個(gè)均分為A、B兩組，A組加入正常肝細(xì)胞懸液；B組加入_________。從A、B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組，分別加入_________。放入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時(shí)間后，每組取部分樣品，加入_____________后搖勻；在顯微鏡下計(jì)數(shù)并記錄細(xì)胞數(shù)量。

⑤重復(fù)④若干次。

⑥統(tǒng)計(jì)并分析所得數(shù)據(jù)。

（2）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（用坐標(biāo)系和曲線示意圖表示）_____________30、［生物——選修1生物技術(shù)實(shí)踐］

某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基；滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題。

（1）培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了___________________和___________________。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有基本成分是___________________和___________________。

（2）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是___________________。

（3）為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于___________________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種___________________作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

（4）培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有___________________種細(xì)菌。一般說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越___________________。

（5）如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐___________________細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為___________________。31、研究人員從血管內(nèi)皮瘤中發(fā)現(xiàn)了一種新的血管增生抑制劑——內(nèi)皮抑素；它能有效地抑制血管增生。下面是獲得重組內(nèi)皮抑素的方法，請(qǐng)分析回答下列問題。

（1）將人的內(nèi)皮抑素基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞中，能合成人的內(nèi)皮抑素，其原因是_____________________________________________________________。

（2）擴(kuò)增的目的基因與pUC18質(zhì)粒(如下圖所示)都用EcoRⅠ和BamHⅠ進(jìn)行雙酶切；然后用DNA連接酶進(jìn)行連接，構(gòu)建重組質(zhì)粒。

雙酶切避免了目的基因與載體__________連接；還減少了目的基因與目的基因；載體與載體的連接，提高了重組質(zhì)粒的比例。

（3）大腸桿菌pUC18質(zhì)粒的LacZ基因中如果沒有插入外源基因，LacZ基因便可表達(dá)出β半乳糖苷酶，當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和Xgal時(shí)，Xgal便會(huì)被β半乳糖苷酶水解成藍(lán)色物質(zhì)，大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之，則形成白色菌落。選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水、生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入的物質(zhì)有_____________________和氨芐青霉素。成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在培養(yǎng)基中形成____________顏色的菌落，原因是__________________。

（4）從選擇培養(yǎng)基中挑取所需的單個(gè)菌落接種于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)；獲得粗提表達(dá)產(chǎn)物。將等量毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞接種于細(xì)胞培養(yǎng)板，37℃培養(yǎng)。將等量不同濃度的粗提表達(dá)產(chǎn)物加進(jìn)培養(yǎng)孔中，72h后在顯微鏡下觀察細(xì)胞存活情況并統(tǒng)計(jì)(或記錄)活的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。

。粗提表達(dá)產(chǎn)物濃度/(μg·mL－1)0246810活的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目(×102)126210．50．5實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明_____________________________________________________。32、番茄果實(shí)在成熟的過程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成顯著增加，以降解果膠使細(xì)胞壁破損，從而使果實(shí)變紅變軟，但不利于保鮮?？茖W(xué)家利用基因工程得到轉(zhuǎn)基因番茄，大大延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。操作流程如下，回答下列問題：

（1）利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)制備PG基因，最好從番茄的_____細(xì)胞中提取mRNA，此技術(shù)所需要的酶主要有_____。

（2）據(jù)圖可知，轉(zhuǎn)基因番茄主要通過抑制PG基因的_____過程；使PG合成量減少，從而延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。

（3）圖中的農(nóng)桿菌。能夠在含_____的培養(yǎng)基中生存，而在含_____的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌。

（4）圖中將反向連接PC基因?qū)敕鸭?xì)胞的方法稱為_____。要檢測(cè)感染農(nóng)桿菌后的番茄細(xì)胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用標(biāo)記的PG基因的單鏈作為探針進(jìn)行檢測(cè)，理由是_____。

（5）在將轉(zhuǎn)化的番茄細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過程中，培養(yǎng)基_____（填“要”或“不要”）添加有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，原因是_____。評(píng)卷人得分六、綜合題(共1題，共10分)33、農(nóng)桿菌是—種在土壤中生活的微生物；能在自然條件下侵染雙子葉植物和裸子植物，而對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒有侵染能力。植物基因工程中常用含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌和受體植物細(xì)胞的愈傷組織共培養(yǎng)，進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作?，F(xiàn)有一段抗除草劑基因編碼蛋白質(zhì)的區(qū)域在克隆載體上，要將其轉(zhuǎn)入煙草細(xì)胞，得到抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草。

（1）在構(gòu)建表達(dá)載體的過程中，要先用限制酶對(duì)目的基因和Ti質(zhì)粒進(jìn)行切割，之后用連接酶連接形成重組質(zhì)粒。科學(xué)家使用了兩種不同的限制酶分別切割目的基因和Ti質(zhì)粒，原因是防止質(zhì)粒自身環(huán)化，并保證_____

（2）在以上重組質(zhì)粒中，目的基因和抗卡那霉素抗性基因，都應(yīng)該位于__片段內(nèi)，因?yàn)開_。（3）將重組的Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌可用___處理。得到的農(nóng)桿菌菌液和煙草細(xì)胞愈傷組織共培養(yǎng)一段時(shí)間后，將愈傷組織置于含有__和除草劑的選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行組織培養(yǎng)，通過調(diào)整___；使其脫分化；再分化形成轉(zhuǎn)基因植株群體P。

（4）轉(zhuǎn)入的除草劑抗性基因的遺傳符合孟德爾遺傳，且不考慮突變的情況下，讓轉(zhuǎn)基因植株P(guān)自交，F(xiàn)1株系分隔種植，得到的F1株系植株用除草劑處理，其中大多數(shù)株系抗性和非抗性的比例為3∶1。有極少數(shù)株系不發(fā)生性狀分離，全是除草劑抗性植株，原因可能是____。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、B【分析】【分析】

制作果酒的酵母菌的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型；制作酸奶的乳酸菌屬于厭氧菌，只能在無(wú)氧條件下繁殖，制作果醋的醋酸菌的代謝類型是異養(yǎng)需養(yǎng)型；腐乳是用豆腐發(fā)酵制成，多種微生物參與發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌具發(fā)達(dá)的白色菌絲。毛霉等微生物產(chǎn)生的以蛋白酶為主各種酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。

【詳解】

乳酸菌是一種嚴(yán)格的厭氧菌，有氧氣存在時(shí)，其發(fā)酵會(huì)受到抑制，因此利用乳酸菌制作酸奶的過程中，應(yīng)一致處于密閉狀態(tài)，否則會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵失敗，A錯(cuò)誤；家庭制作果酒、果醋與腐乳過程中所用的菌種均來源于自然環(huán)境，有多種微生物參與發(fā)酵過程，因此均不是純種發(fā)酵，B正確；果醋制作過程中，醋酸菌有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳和水，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化碳濃度的增加，溶液的pH逐漸降低；果酒制作過程中，酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳與酒精，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化碳濃度的增加，溶液的pH逐漸降低，因此果酒、果醋制作過程中溶液的pH都是逐漸降低，C錯(cuò)誤；毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶參與腐乳發(fā)酵，D錯(cuò)誤。2、D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官；組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織；然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。

題圖分析：①表示去壁過程；常用酶解法，該過程用到的酶是纖維素酶和果膠酶；②表示用紫外線照射使黑芥的染色體斷裂；③表示形成雜種細(xì)胞，④表示經(jīng)過組織培養(yǎng)獲得雜種植株的過程。

【詳解】

A；④過程用到了植物組織培養(yǎng)技術(shù)；該技術(shù)的原理是植物細(xì)胞的全能性，A正確；

B；題意顯示；“若其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中”，依據(jù)該原理，可推測(cè)抗黑脛病的甘型油菜染色體上整合了黑芥的染色體片段，因此獲得了抗黑脛病的性狀，B正確；

C；②表示用紫外線照射使黑芥的染色體斷裂；使用劑量不同可能會(huì)導(dǎo)致黑芥染色體斷裂程度不同，C正確；

D；過程③中常用物理法或化學(xué)法處理（聚乙二醇）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；而滅活的病毒只能誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A、L1-GFP基因的表達(dá)產(chǎn)物（蛋白質(zhì)）中外殼蛋白L1與綠色熒光蛋白GFP通過肽鍵相連；A正確；

B、由題意：E1、E4雙酶切避免了出現(xiàn)自身環(huán)化問題；從而確保L1-GFP融合基因與載體的正確連接，B正確；

C；GFP基因可以認(rèn)為是標(biāo)記基因；表達(dá)出的熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光，利用這一特性可用于檢測(cè)細(xì)胞中目的基因是否表達(dá)，C正確；

D、為了獲得L1蛋白，可將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入受精卵中而不是乳腺細(xì)胞，用于培育乳汁中含有L1蛋白的轉(zhuǎn)基因羊；D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】4、D【分析】【分析】

胚胎干細(xì)胞：（1）哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來；（2）胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。（3）胚胎干細(xì)胞可用于治療人類的某些頑癥，如帕金森綜合癥；還可培育出人造器官，解決目前臨床上存在的供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題。

【詳解】

A；胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性；在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小、核大、核仁明顯、蛋白質(zhì)合成旺盛等特點(diǎn)，A正確；

B；哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；除了可以來自內(nèi)細(xì)胞團(tuán)外，還可來自原始的性腺，B正確；

C；胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中可以增殖而維持不分化的狀態(tài)；C正確；

D；胚胎干細(xì)胞的胰島素基因不表達(dá)；若用胰島素基因作探針對(duì)胚胎干細(xì)胞的mRNA進(jìn)行檢測(cè)，不能形成雜交帶，D錯(cuò)誤。

故選D。5、C【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

2；設(shè)計(jì)試管嬰兒：是指體外受精形成的胚胎在植入母體孕育前；根據(jù)人們的需要，將胚胎的一個(gè)細(xì)胞取出，進(jìn)行某些基因檢測(cè)。當(dāng)檢測(cè)結(jié)果符合人們需要是，再把胚胎植入母體孕育。

3；生物武器的特點(diǎn)：?jiǎn)挝幻娣e效應(yīng)大；有特定的傷害對(duì)象；具有傳染性；危害時(shí)間久；不易被發(fā)現(xiàn)和鑒定；使用者本身易受傷害；生物武器造價(jià)低；技術(shù)難度不大，隱秘性強(qiáng)，可以在任何地方研制和生產(chǎn)。

【詳解】

A；礦區(qū)廢棄地的土壤條件極其惡劣；可使用人工制造表土等方法緩解礦區(qū)的生態(tài)環(huán)境，最根本在于能夠利用生態(tài)系統(tǒng)中分解者即土壤中微生物將礦區(qū)有害物質(zhì)分解，A錯(cuò)誤；

B；設(shè)計(jì)試管嬰兒在胚胎移植前進(jìn)行遺傳病基因檢測(cè)；目的是為提供骨髓造血干細(xì)胞，救治病人，是合乎道德規(guī)范的，不應(yīng)該杜絕，B錯(cuò)誤；

C；生物武器的特點(diǎn)是傳染性強(qiáng)、傳染面廣、難以防治；因此世界各國(guó)都應(yīng)該禁止在任何情況下生產(chǎn)、儲(chǔ)存和發(fā)展生物武器，C正確；

D；生物工程技術(shù)應(yīng)用在植物體上就也會(huì)帶來生命倫理和安全問題；D錯(cuò)誤。

故選C

【點(diǎn)睛】

本題考查轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題、生物技術(shù)中的倫理問題，要求考生識(shí)記轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性問題；關(guān)注生物技術(shù)的倫理問題；識(shí)記生物武器的相關(guān)知識(shí)，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。6、B【分析】【詳解】

A；由于cDNA文庫(kù)中只含有某種生物的部分基因；因此該種基因文庫(kù)可能有多種，A錯(cuò)誤；

B；mRNA是由基因中的外顯子轉(zhuǎn)錄形成的；因此cDNA文庫(kù)中的基因不包含啟動(dòng)子和內(nèi)含子等結(jié)構(gòu)，與該生物的基因組文庫(kù)中的基因結(jié)構(gòu)不同，B正確；

C；可以利用反轉(zhuǎn)錄法獲取cDNA文庫(kù)；C錯(cuò)誤；

D；cDNA文庫(kù)可以進(jìn)行物種間的基因交流；基因組文庫(kù)中部分基因可以，D錯(cuò)誤。

故選B。7、D【分析】【分析】

胚胎發(fā)育通常是指從受精卵起到胚胎出離卵膜的一段過程。在動(dòng)物個(gè)體發(fā)育過程中；經(jīng)過幼蟲或幼體至成蟲；或成體達(dá)到性成熟時(shí)的發(fā)育過程，稱為胚后發(fā)育。

【詳解】

A；細(xì)胞分化開始于囊胚期；A錯(cuò)誤；

B；受精卵卵裂形成囊胚的過程中；細(xì)胞體積減小，數(shù)目增多，胚胎體積基本不變，B錯(cuò)誤；

C；過幼蟲或幼體至成蟲、或成體達(dá)到性成熟時(shí)的發(fā)育過程；稱為胚后發(fā)育，圖中①是早起胚胎發(fā)育，幼體到成體是胚后發(fā)育，C錯(cuò)誤；

D、囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來會(huì)發(fā)育成胎兒的各種組織和器官，滋養(yǎng)層細(xì)胞發(fā)育成胎膜和胎盤，D正確。8、D【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲?。虎诨虮磉_(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)。

2；從分子水平上檢測(cè)目的基因的方法：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

A；gRNA與目的基因結(jié)合區(qū)域最多含8種核苷酸（4種脫氧核苷酸和4種核糖核苷酸）；A錯(cuò)誤；

B；Cas9來自于細(xì)菌；細(xì)菌無(wú)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體，B錯(cuò)誤；

C；對(duì)不同基因進(jìn)行編輯時(shí)；由于基因序列不同，可能需要使用不同的gRNA，C錯(cuò)誤；

D；CRISPR/Cas9技術(shù)可改變基因堿基排列順序；也可以使某個(gè)基因因?yàn)閴A基序列改變而無(wú)法表達(dá)，D正確。

故選D。9、B【分析】【分析】

泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無(wú)氧條件下；乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。亞硝酸鹽隨腌制時(shí)間先增加后下降。

醋酸菌為好氧細(xì)菌。

抗生素抑制原核生物的生長(zhǎng)繁殖。

【詳解】

A；泡菜生產(chǎn)過程中亞硝酸鹽隨腌制時(shí)間先增加后下降；A錯(cuò)誤；

B；制作泡菜時(shí)有時(shí)會(huì)長(zhǎng)一層白膜（酵母菌）；酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生醇香味，能增加其獨(dú)特的風(fēng)味，B正確；

C；醋酸菌為好氧細(xì)菌；不能再無(wú)氧條件下發(fā)酵，C錯(cuò)誤；

D；抗生素不利于原核生物的生長(zhǎng)繁殖；含抗生素的牛奶不能進(jìn)行乳酸菌發(fā)酵，D錯(cuò)誤。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)10、B:C【分析】【分析】

1；治療性克?。褐咐每寺〖夹g(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類個(gè)體。2、分析題圖：圖示為治療性克隆的大概過程，即從患者身上提取一個(gè)體細(xì)胞核，移植到去核的卵細(xì)胞中，形成一個(gè)新細(xì)胞，經(jīng)過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)成胚胎干細(xì)胞，經(jīng)過細(xì)胞分裂、分化形成組織和器官。

【詳解】

A；人類“治療性克隆”應(yīng)用的主要技術(shù)有核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；屬于生物工程中的動(dòng)物細(xì)胞工程，A正確；

B；由圖可知；該治療過程中應(yīng)用的主要技術(shù)有核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，沒有應(yīng)用胚胎移植技術(shù)，B錯(cuò)誤；

C；此過程沒有形成完整個(gè)體；不能體現(xiàn)胚胎干細(xì)胞的全能性，C錯(cuò)誤；

D；“治療性克隆”與“異體器官移植”相比；器官來自于同一個(gè)體，其優(yōu)點(diǎn)之一是避免了免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選BC。11、A:B:C【分析】【分析】

生物武器種類：包括致病菌；病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

【詳解】

生物武器可以通過多種途徑使人感染發(fā)病，如經(jīng)口食入、經(jīng)呼吸道吸入、昆蟲叮咬、皮膚接觸等，因此生物武器的傳播途徑主要包括直接傳播、食物傳播和生活必需品傳播。故選ABC。12、A:B【分析】【分析】

1；析題圖：步驟甲為細(xì)胞核移植；步驟乙為胚胎移植，其中誘導(dǎo)超數(shù)排卵用的是促性腺激素。

2；動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物。

3；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物體內(nèi)；使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。其中提供胚胎的個(gè)體稱為“供體”，接受胚胎的個(gè)體叫“受體”。

【詳解】

A；步驟甲和步驟乙分別是指細(xì)胞核移植和胚胎移植作用；所以整個(gè)過程用到的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（重組胚胎培養(yǎng)）、動(dòng)物體細(xì)胞核移植和胚胎移植等，A正確；

B；誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素是促性腺激素；只能作用于性腺，B正確；

C；重組細(xì)胞發(fā)育成早期胚胎所需營(yíng)養(yǎng)主要來源于去核的卵母細(xì)胞；C錯(cuò)誤；

D；步驟乙中的供體和受體需要同期發(fā)情處理；甲不需要，D錯(cuò)誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】

分本題結(jié)合圖解，考查胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記體外受精的過程及條件；識(shí)記早期胚胎培養(yǎng)的過程及條件，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。13、C:D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。也就是說，蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，是包含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。

基本流程：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程可以通過改造基因來定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)；A正確；

B；因?yàn)榛蛑笇?dǎo)蛋白質(zhì)的合成；所以改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)，B正確；

C；改造后的中華鱘具有新的性狀；但其和現(xiàn)有中華鱘之間沒有生殖隔離，仍是同一物種，C錯(cuò)誤；

D；蛋白質(zhì)工程改造的是基因；可以遺傳給子代，因此改造后的中華鱘的后代也具有改造的蛋白質(zhì)，D錯(cuò)誤。

故選CD。14、A:B:D【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；分析題圖：圖示表示三親嬰兒的培育過程；由圖可知，三親嬰兒的培育采用了核移植技術(shù)、體外受精技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等。

【詳解】

A；由圖可知；“三親嬰兒”孕育過程中使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、體外受精、核移植等技術(shù)，A正確；

B；融合激活后的卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到MⅡ中期才具備受精能力；從而完成受精作用，B正確；

C；卵母細(xì)胞A的捐獻(xiàn)者提供的是細(xì)胞質(zhì)；而其攜帶的血友病基因位于細(xì)胞核內(nèi)的染色體上，所以其攜帶的血友病基因不能遺傳給“三親嬰兒”，C錯(cuò)誤；

D；“三親嬰兒”培育技術(shù)可以通過核移植來避免細(xì)胞質(zhì)遺傳病的遺傳；D正確。

故選ABD。15、A:B:C【分析】【分析】

植物體細(xì)胞雜交的過程：在融合前需要使用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除植物的細(xì)胞壁；再用化學(xué)法（聚乙二醇）或物理法（振動(dòng)；離心、電刺激）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，需要注意的是誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體的融合時(shí)不用生物方法（滅活的病毒）；細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是融合細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁；獲得融合細(xì)胞后需利用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)將細(xì)胞培育成植株，故植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的最終目的是培育具有優(yōu)良性狀的植物新品種。

【詳解】

A；由于植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠；根據(jù)酶的專一性特點(diǎn)，應(yīng)利用纖維素酶和果膠酶處理甲乙植物以獲得原生質(zhì)體，A錯(cuò)誤；

B；滅活的病毒是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的特有方法；不能用于誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體的融合，B錯(cuò)誤；

C；秋水仙素可以抑制紡錘體的形成從而誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目加倍；不能用于誘導(dǎo)愈傷組織細(xì)胞壁的再生，C錯(cuò)誤；

D；因本操作的目的是培育高產(chǎn)、耐鹽雜種植物；故將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選中所需雜種植株將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選出所需雜種植株，屬于個(gè)體生物學(xué)水平的檢測(cè)，D正確。

故選ABC。16、A:B:C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融臺(tái)，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基坮養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；①過程要多次注射抗原；其目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多的已免疫的B淋巴細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；③為選擇培養(yǎng)基；經(jīng)選擇培養(yǎng)基獲得的雜交瘤細(xì)胞不一定能產(chǎn)生所需抗體，要產(chǎn)生所需抗體還要進(jìn)行抗體檢測(cè)陽(yáng)性和克隆化培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；

C；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合可以使用PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等；C錯(cuò)誤；

D；雙特異性抗體中的癌胚抗原抗體能將藥物定向引導(dǎo)至和癌細(xì)胞結(jié)合；從而避免對(duì)其他細(xì)胞的破壞，D正確。

故選ABC。17、A:C【分析】【分析】

PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制；步驟包括高溫變性；復(fù)性、延伸。該過程需要耐高溫的DNA聚合酶催化，需要四種游離的脫氧核苷酸做原料。根據(jù)圖中可得，由于引物的一個(gè)堿基在不影響與模板鏈整體配對(duì)的前提下不與目的基因配對(duì)，再利用PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)了目的基因的定點(diǎn)誘變。其技術(shù)原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。

【詳解】

A；引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識(shí)別位點(diǎn)；可以配合載體的限制酶識(shí)別位點(diǎn)，幫助目的基因定向定點(diǎn)插入運(yùn)載體，避免發(fā)生自身環(huán)化，A正確；

B；在PCR反應(yīng)過程中變性大約94℃→復(fù)性大約55℃→延伸大約72℃；B錯(cuò)誤；

C；第3輪PCR中；物質(zhì)②是引物2以引物1拓展得到的DNA鏈為模板進(jìn)行復(fù)制得到的，故引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長(zhǎng)的突變基因，C正確；

D；PCR一次大概有30個(gè)循環(huán)；每一輪PCR都消耗引物和原料，是在最初加入，不是后期補(bǔ)充，D錯(cuò)誤。

故選AC。18、A:B:C【分析】【分析】

基因工程：目的基因的篩選與獲取；構(gòu)建基因表達(dá)載體、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。

分泌蛋白的合成：首先；在游離的核糖體中以氨基酸為原料開始多肽鏈的合成。當(dāng)合成了一段肽鏈后，這段肽鏈會(huì)與核糖體一起轉(zhuǎn)移到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成過程，并且邊合成邊轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)，再經(jīng)過加工；折疊，形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜鼓出形成囊泡，包裹著蛋白質(zhì)離開內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，到達(dá)高爾基體，與高爾基體融合，高爾基體對(duì)蛋白質(zhì)做進(jìn)一步的加工，然后形成包裹著蛋白質(zhì)的囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜，與細(xì)胞膜融合。

【詳解】

A；科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設(shè)計(jì)并人工合成了AmyS2基因；因此獲得AmyS2基因并將其導(dǎo)入芽孢桿菌得到AmyS2的過程是通過蛋白質(zhì)工程和基因工程實(shí)現(xiàn)的，A錯(cuò)誤；

B；BamHI會(huì)破壞AmyS2基因；B錯(cuò)誤；

C；在分泌蛋白的合成過程中；信號(hào)肽序列可幫助肽鏈進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)被切割，因此信號(hào)肽基因表達(dá)的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，但不能引導(dǎo)其進(jìn)入高爾基體，C錯(cuò)誤；

D；可用PCR技術(shù)檢測(cè)芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因；如果經(jīng)過PCR擴(kuò)增，不出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物，說明沒有插入基因，反之，則成功插入，D正確。

故選ABC。三、填空題(共8題，共16分)19、略

【分析】1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

3；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；生物安全主要是指轉(zhuǎn)基因生物釋放到環(huán)境中，可能會(huì)對(duì)生物多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險(xiǎn)和威脅。

【詳解】

（1）一些持支持態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為；由于不同物種間存在生殖隔離，同時(shí)花粉的傳播距離和存活時(shí)間有限，不會(huì)造成轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物與其它植物的雜交，因而也不太可能對(duì)生物多樣性造成威脅。

（2）在轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品研究過程中；為保證轉(zhuǎn)基因生物的安全，要把重組DNA的轉(zhuǎn)移限制在遺傳上具有特定缺陷的生物上；對(duì)外源DNA進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免能夠表達(dá)出對(duì)人體有毒性或過敏的蛋白質(zhì)等等。

（3）堅(jiān)持克隆人的科學(xué)家則認(rèn)為；一些技術(shù)問題可以通過胚胎分級(jí)；基因診斷和染色體檢查等方法得到解決。

（4）中國(guó)政府對(duì)于克隆技術(shù)的態(tài)度是禁止生殖性克??；但不反對(duì)治療性克隆。

【點(diǎn)睛】

本題難度一般，屬于考綱中識(shí)記、理解層次的要求，結(jié)合基因工程的應(yīng)用，綜合考查了基因工程、試管嬰兒和轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題，并且深入考查了相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)，要求考生能夠構(gòu)建一定的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)．面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食?！窘馕觥竣?生殖隔離②.存活時(shí)間③.特定缺陷④.蛋白質(zhì)⑤.基因診斷⑥.染色體檢查⑦.禁止生殖性克隆人⑧.治療性克隆20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖定量21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO222、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】黏性末端平末端。23、略

【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織；器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過無(wú)菌操作，在無(wú)菌條件下接種在含有各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。

【詳解】

1；基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)；是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術(shù)。

2；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。

3；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，其原理是細(xì)胞增殖。

4；植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)；指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過無(wú)菌操作，在無(wú)菌條件下接種在含有各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程概念、胚胎移植、動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)，意在考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)②.又稱受精卵移植，是指將雌性動(dòng)物體內(nèi)的的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀況相同的其他雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)③.植物細(xì)胞全能性、細(xì)胞增殖24、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。25、略

【分析】【詳解】

我國(guó)是一個(gè)愛好和平的國(guó)家，也是曾經(jīng)遭受生物武器傷害的國(guó)家，如在抗日戰(zhàn)爭(zhēng)中就遭受到了日軍發(fā)動(dòng)的細(xì)菌戰(zhàn)的傷害，由于生物武器致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣，因而我們深知生物武器不僅能對(duì)我國(guó)、甚至?xí)?duì)整個(gè)人類造成毀滅性的災(zāi)難，因此我國(guó)政府在1998年6月重申了我國(guó)對(duì)生物武器的態(tài)度，即為不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散。【解析】我國(guó)是一個(gè)愛好和平的國(guó)家，由于生物武器致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣，生物武器不僅能對(duì)我國(guó)、甚至?xí)?duì)整個(gè)人類造成毀滅性的災(zāi)難，因此我國(guó)政府在1998年6月重申了我國(guó)對(duì)生物武器的態(tài)度，即為：

在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散。26、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共2題，共16分)27、A【分析】【詳解】

目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也有人采用梯度離心、紫外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下去核或使其中的DNA變性，故正確。28、A【分析】【詳解】

生殖性克隆，即通常所說的克隆人，通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體，即通常所說的克隆人，該說法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)29、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：

（1）無(wú)菌；無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液；以清除代謝廢物；

（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖；氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等；還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；

（3）適宜的溫度和pH；

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

2；實(shí)驗(yàn)操作步驟的安排一般如下：第一步：取材隨機(jī)均分為幾組；編號(hào)；第二步：不同組自變量的處理；第三步：把上述各組放在無(wú)關(guān)變量相同且適宜等條件下處理一段時(shí)間；第四步：觀察并記錄比較相應(yīng)的因變量。根據(jù)題意可知，本實(shí)驗(yàn)的目的是驗(yàn)證生物制劑W對(duì)動(dòng)物不同細(xì)胞的分裂具有促進(jìn)作用，則該實(shí)驗(yàn)的自變量是細(xì)胞的種類及是否加入生物制劑W，因變量是細(xì)胞懸液中細(xì)胞的數(shù)目，對(duì)細(xì)胞直接計(jì)數(shù)可以采用血球板計(jì)數(shù)法。

【詳解】

（1）①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細(xì)胞。將兩種分散的細(xì)胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細(xì)胞懸液。動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)液中需要加入葡萄糖；氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清；為了保證無(wú)菌的條件，一般在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素。

②在顯微鏡下可以采用血球計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)兩種細(xì)胞懸液中細(xì)胞的數(shù)量；并進(jìn)行記錄。

③本實(shí)驗(yàn)的目的是驗(yàn)證生物制劑W對(duì)動(dòng)物不同細(xì)胞的分裂具有促進(jìn)作用；根據(jù)題干所給實(shí)驗(yàn)材料可知，不同細(xì)胞是指正常肝細(xì)胞和癌細(xì)胞，因此該實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置四組，變量為細(xì)胞的種類及是否加入生物制劑W，具體如下：

A組：培養(yǎng)液中加入正常肝細(xì)胞懸液；B組：培養(yǎng)液中加入與之等量癌細(xì)胞懸液；從A；B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組；C、D兩組：培養(yǎng)液中加入等量的生物制劑W。放入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④該實(shí)驗(yàn)的因變量是計(jì)數(shù)細(xì)胞懸液中細(xì)胞的數(shù)量；因此各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時(shí)間后，每組取部分樣品，加入胰蛋白酶或膠原蛋白酶搖勻，將細(xì)胞分散成單個(gè)，然后在顯微鏡下計(jì)數(shù)。

（2）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果；若較長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)，因?yàn)檎＜?xì)胞的增殖次數(shù)有限，故A組中細(xì)胞數(shù)量最少，由于W促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用，因此C組細(xì)胞數(shù)量多于A組；而癌細(xì)胞可以無(wú)限增殖，且由于其細(xì)胞膜上的糖蛋白減少，易于擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移，同時(shí)失去接觸抑制，可大量培養(yǎng)增殖，故B；D兩組中細(xì)胞數(shù)量明顯更多，且由于W的促進(jìn)作用，D組多于B組；由于此實(shí)驗(yàn)是驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，所以實(shí)驗(yàn)結(jié)果是加入生物制劑W的實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組細(xì)胞數(shù)多，同時(shí)癌細(xì)胞分裂能力比正常細(xì)胞高，故繪制坐標(biāo)曲線具體如下:

【點(diǎn)睛】

本題考查驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，要求學(xué)生明確實(shí)驗(yàn)的目的，正確區(qū)分實(shí)驗(yàn)的變量，能夠根據(jù)題意判斷自變量和因變量，然后根據(jù)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的單一變量和等量原則，同時(shí)結(jié)合題干所給的實(shí)驗(yàn)材料完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，并能預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和繪制相關(guān)曲線圖表示實(shí)驗(yàn)的結(jié)果?！窘馕觥恳鹊鞍酌福z原蛋白酶）葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清抗生素血球計(jì)數(shù)板等量肝癌細(xì)胞懸液等量生物制劑W胰蛋白酶（膠原蛋白酶）30、略

【分析】【詳解】

微生物生長(zhǎng)繁殖過程中需要氮源、碳源、水分、無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，有些微生物還需要生長(zhǎng)因子；培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌，該過程一般在高壓蒸汽滅菌鍋中進(jìn)行；影響微生物生長(zhǎng)繁殖的因素主要是營(yíng)養(yǎng)和溫度，因此培養(yǎng)微生物時(shí)除提供適宜的營(yíng)養(yǎng)外，還要提供合適的溫度；為排除無(wú)關(guān)變量的影響，該實(shí)驗(yàn)要設(shè)立空白對(duì)照，可以用蒸餾水代替樣品來進(jìn)行對(duì)照；在培養(yǎng)基中加入食鹽可以選擇耐鹽菌，如金黃色葡萄球菌等，這種培養(yǎng)基叫做選擇培養(yǎng)基?！窘馕觥康矗ㄌ荚床蛔饕螅┨荚礋o(wú)機(jī)鹽水高壓蒸汽滅菌恒溫培養(yǎng)箱無(wú)菌水多高鹽（或NaCl）選擇性培養(yǎng)基31、略

【分析】【分析】

此題考查了基因工程技術(shù)；目的基因的獲得方法有三種：從基因文庫(kù)中獲?。籔CR技術(shù)擴(kuò)增、人工合成法；基因表達(dá)載體中的LacZ基因被插入滅活。

（1）

將人的內(nèi)皮抑素基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞中；能合成人的內(nèi)皮抑素，其原因是各種生物共用一套密碼子，且蛋白質(zhì)的合成都經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。

（2）

雙酶切后；目的基因兩端的黏性末端不同，被切開的運(yùn)載體兩端的黏性末端也不同，這樣可以避免目的基因與載體反向連接，還能減少目的基因與目的基因；載體與載體的連接，還減少了目的基因和質(zhì)粒的自身連接，提高了重組質(zhì)粒的比例。

（3）

大腸桿菌pUC18質(zhì)粒的LacZ基因中如果沒有插入外源基因；LacZ基因便可表達(dá)出β半乳糖苷酶，當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和Xgal時(shí)，Xgal便會(huì)被β半乳糖苷酶水解成藍(lán)色，大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之，則形成白色菌落。選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖；氮源、無(wú)機(jī)鹽、水、生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入的物質(zhì)有IPTG、Xgal和氨芐青霉素，要使其形成菌落還要加入瓊脂形成固體培養(yǎng)基。因?yàn)橹亟M質(zhì)粒的LacZ基因中插入了目的基因，使LacZ基因不能表達(dá)出β﹣半乳糖苷酶，所以成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在培養(yǎng)基中形成白色菌落。

（4）

由表中數(shù)據(jù)可知；粗提表達(dá)產(chǎn)物濃度越高，活的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目越少，說明重組內(nèi)皮抑素（或粗提表達(dá)產(chǎn)物）能夠抑制毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的理解應(yīng)用能力和信息轉(zhuǎn)化能力，屬于中等難度題?！窘馕觥浚?）各種生物共用一套密碼子；且蛋白質(zhì)的合成都經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。

（2）反向(任意)

（3）IPTG；Xgal、瓊脂白重組質(zhì)粒的LacZ基因中插入了目的基因；使LacZ基因不能