2025年滬科版選修3生物下冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年滬科版選修3生物下冊階段測試試卷746考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、下表為常用的限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）及其識別序列和切割位點(diǎn)；由此推斷的以下說法中，正確的是。

。限制酶名稱。

識別序列和切割位點(diǎn)。

限制酶名稱。

識別序列和切割位點(diǎn)。

BamHⅠ

G↓GATCC

KpnⅠ

GGTAC↓C

EcoRⅠ

G↓AATCC

Sau3AⅠ

↓GATC

HindⅡ

GTY↓RAC

SmaⅠ

CCC↓GGG

（注：Y=C或T，R=A或G）A.一種限制酶可能識別2種核苷酸序列B.限制酶切割后一定形成黏性末端C.不同的限制酶切割DNA分子形成的黏性末端一定不同D.限制酶的切割位點(diǎn)在識別序列內(nèi)部2、英國科學(xué)家維爾莫特首次用羊的體細(xì)胞（乳腺細(xì)胞）成功培育出一只小母羊，取名為“多利”，這一方法被稱之為“克隆”，以下四項中與此方法在本質(zhì)上最相近的是（）A.將兔的早期胚胎分割后，分別植入兩只母兔子宮內(nèi)，并最終發(fā)育成兩只一樣的小兔B.將人的抗病毒基因嫁接到煙草DNA分子上培育出了具有抗病毒能力的煙草新品種C.將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞D.將人的精子與卵子在體外受精，待受精卵在試管內(nèi)發(fā)育到囊胚期時，再植入女性子宮內(nèi)發(fā)育成“試管嬰兒”3、下列不是基因工程中的運(yùn)載體所必須具備的特點(diǎn)（）A.能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制，并穩(wěn)定地保存B.具有1～多個限制酶切點(diǎn)C.必須是細(xì)菌的質(zhì)?；蚴删wD.具有某些標(biāo)記基因4、下列有關(guān)基因工程技術(shù)的原理或?qū)嵸|(zhì)的敘述，不合理的是（）A.基因診斷的基本原理是DNA分子雜交B.基因治療的原理是將正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能C.DNA探針技術(shù)的原理是探針與樣品中變性處理的DNA單鏈配對雜交D.構(gòu)建基因表達(dá)載體的實質(zhì)是基因突變5、長穗偃麥草（2n=14）是普通小麥（6n=42）的近緣屬植物；因其可與普通小麥雜交，且具有突出的抗旱；抗寒、抗病及耐鹽性，常用于小麥遺傳改良育種研究?？茖W(xué)家采用下圖所示的技術(shù)培育出了普通小麥—長穗偃麥草雜種植株，①、②、③代表培育過程。下列說法正確的是（）

A.長穗偃麥草與普通小麥雜交得到F1，用秋水仙素處理F1產(chǎn)生的萌發(fā)種子，可得到普通小麥—長穗偃麥草雜種植株B.①過程常用物理、化學(xué)和生物的方法實現(xiàn)人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C.②過程和③過程培養(yǎng)基中生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值不同D.植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動性6、在克隆多利羊的過程中，沒有運(yùn)用的技術(shù)手段是()。A.細(xì)胞培養(yǎng)B.體細(xì)胞核移植C.胚胎移植D.基因工程7、下圖為一富營養(yǎng)化河流生態(tài)修復(fù)工程的示意圖；下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.曝氣可增加水體的溶氧量，抑制厭氧微生物的生長繁殖B.植物浮床有吸收水體氮、磷的能力，可避免出現(xiàn)赤潮C.吸附基質(zhì)增加了微生物附著的表面積，提高了凈化效果D.植物浮床能一定程度抑制浮游植物的數(shù)量8、某富營養(yǎng)化河流生態(tài)修復(fù)工程如圖所示；下列敘述不正確的是（）

A.曝氣可增加厭氧微生物降解有機(jī)污染物的能力B.吸附基質(zhì)增加了微生物附著的表面積，提高了凈化效果C.植物浮床能吸收水體中的氮、磷等，減少水體富營養(yǎng)化D.增加水體透明度，能進(jìn)一步恢復(fù)水體中水草的生長9、下圖為受精作用及胚胎發(fā)育示意圖，a、b；c代表三個發(fā)育時期,下列敘述不正確的是（）

A.①過程發(fā)生非同源染色體自由組合B.②過程通過有絲分裂增殖C.b時期的早期胚胎內(nèi)出現(xiàn)了含有液體的囊腔D.①→④細(xì)胞分化程度逐漸增大評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)10、小鼠雜交瘤細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應(yīng)，為了克服這個缺陷，可選擇性擴(kuò)增抗體的可變區(qū)基因（目的基因）后再重組表達(dá)。下列相關(guān)敘述正確的是A.設(shè)計擴(kuò)增目的基因的引物時不必考慮表達(dá)載體的序列B.用PCR方法擴(kuò)增目的基因時不必知道基因的全部序列C.PCR體系中一定要添加從受體細(xì)胞中提取的DNA聚合酶D.一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細(xì)胞11、我國科學(xué)家成功地用iPS細(xì)胞克隆出了活體小鼠，部分流程如下圖所示，其中Kdm4d為組蛋白去甲基化酶，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑。下列敘述正確的是（）

A.過程①中小分子化合物誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞突變?yōu)閕PS細(xì)胞B.過程②中的卵母細(xì)胞需要在體外培養(yǎng)到MⅡ期再除去細(xì)胞核C.過程③中可使用電融合法誘導(dǎo)兩細(xì)胞融合，進(jìn)而形成重構(gòu)胚D.組蛋白去甲基化和脫乙?；赡苡欣谥貥?gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育12、下列事實能體現(xiàn)細(xì)胞全能性的是A.棉花根尖細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)形成幼苗B.單細(xì)胞的DNA在體外大量擴(kuò)增C.動物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體D.小鼠體細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)培育成小鼠13、PGS技術(shù)又名“胚胎植入前染色體病篩查”，是在胚胎移植前對發(fā)育到一定階段的胚胎進(jìn)行染色體檢查。胚胎嵌合體中含有兩種或兩種以上遺傳組成的細(xì)胞。如下圖所示為某胚胎嵌合體，淺色是正常細(xì)胞，深色是染色體異常細(xì)胞。下列說法正確的是（）

A.PGS技術(shù)可降低單基因遺傳病患兒出生的概率B.圖示胚胎所有細(xì)胞中的染色體數(shù)目都相同C.PGS結(jié)果正常的胚胎仍有患某些染色體病的風(fēng)險D.PGS技術(shù)有效降低了異常胚胎被移植的概率14、H—Y抗原存在于雄性個體細(xì)胞的表面，決定性腺向雄性方向發(fā)育。可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H—Y單克隆抗體，篩選胚胎進(jìn)行移植。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.培養(yǎng)液中添加H—Y單克隆抗體能促進(jìn)牛早期胚胎發(fā)育成雄性B.該單克隆抗體制備過程中通常將分離出的已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合C.可選取囊胚期任何部位細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定D.用H—Y抗原免疫母牛也可以獲得相應(yīng)抗體15、下圖為科研人員利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的簡要過程；相關(guān)敘述正確的是（）

A.嵌合鼠的培育依據(jù)的原理是基因重組和細(xì)胞全能性B.過程①中需利用相關(guān)技術(shù)去除早期胚胎外的透明帶C.過程②中可利用聚乙二醇誘導(dǎo)卵裂球細(xì)胞發(fā)生融合D.過程③操作前需對多只代孕母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理16、下列有關(guān)胚胎工程的敘述中，錯誤的是（）A.早期胚胎培養(yǎng)需要添加氨基酸、核苷酸、維生素、激素、血清等物質(zhì)B.受體對植入子宮的外來胚胎基本不會免疫排斥，為胚胎收集提供了可能C.胚胎干細(xì)胞來源于早期胚胎或原始性腺，細(xì)胞和細(xì)胞核的體積都較小D.對囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割17、為了推進(jìn)鄉(xiāng)村振興，科技人員在某村引進(jìn)赤松茸，推廣“稻菇輪作”露地栽培模式，如下圖所示，相關(guān)敘述正確的是（）

A.當(dāng)?shù)剞r(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)中引進(jìn)的赤松茸屬于分解者，可以實現(xiàn)該生態(tài)系統(tǒng)中能量的多級利用B.該模式沿襲了“無廢棄農(nóng)業(yè)”的傳統(tǒng)，菌糠和秸稈由廢棄物變?yōu)榱松a(chǎn)原料C.該模式充分利用了水稻秸稈中的能量，提高了能量傳遞效率D.該模式既讓土地休養(yǎng)生息，又增加了生態(tài)效益和經(jīng)濟(jì)效益，遵循了生態(tài)工程中的循環(huán)原理和整體原理18、垃圾實際是“被人們放錯地方的資源”；對于垃圾中的有機(jī)廢棄物將按照“無廢化生態(tài)社區(qū)”模式進(jìn)行處理。下圖為“無廢化生態(tài)社區(qū)”中對有機(jī)廢棄物進(jìn)行處理的相關(guān)方案。下列敘述正確的是（）

A.有機(jī)肥料能為農(nóng)作物提供物質(zhì)和能量B.從資源化、無害化角度分析，途徑②、③優(yōu)于④C.“無廢化生態(tài)社區(qū)”主要遵循的生態(tài)學(xué)原理是物質(zhì)循環(huán)再生D.“無廢化生態(tài)社區(qū)”模式提高了物質(zhì)循環(huán)速率和能量傳遞效率評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)19、生物學(xué)家利用基因工程技術(shù)通過生物反應(yīng)器生產(chǎn)人的血清蛋白。請根據(jù)相關(guān)知識回答下列問題：

（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是________

（3）基因工程中最常用的運(yùn)載體是______

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá)，說明人和牛______20、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過胚胎工程技術(shù)可以快速繁育優(yōu)良個體，其主要步驟如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對其進(jìn)行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細(xì)胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細(xì)胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應(yīng)鑒定胚胎中與___________有關(guān)的基因。

（4）進(jìn)行步驟乙時，受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。21、基因治療：基因治療是指用正?；騙______或______患者細(xì)胞中有缺陷的基因，從而達(dá)到治療疾病的目的。22、根據(jù)課本知識填空：

（1）神經(jīng)元的軸突末梢經(jīng)過多次分支；最后每個小枝末端膨大，呈杯狀或球狀，叫做________。

（2）抗體可以與病原體結(jié)合；從而抑制病原體的繁殖或___________________________。

（3）要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；可以用____________________________做探針。

（4）所謂人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的________________________（寫出2個即可）等為材料；經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子。

（5）胰島素能促進(jìn)組織細(xì)胞加速_______________葡萄糖。23、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細(xì)胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細(xì)胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進(jìn)行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細(xì)胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細(xì)胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復(fù)后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的__________細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。24、下圖表示哺乳動物精子和卵細(xì)胞發(fā)生和成熟的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來的；④過程在__________內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶。為了阻止多精入卵，會發(fā)生__________反應(yīng)和__________反應(yīng)。

（3）精子的發(fā)生開始的時期是__________；雌性動物卵泡的形成的時期是__________。

（4）初級卵母細(xì)胞進(jìn)行Ⅰ過程是在__________時期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。25、請寫出基因工程的概念：_________________。請寫出胚胎移植的概念：_____________________。請分別寫出植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理_________。26、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過胚胎工程技術(shù)可以快速繁育優(yōu)良個體，其主要步驟如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對其進(jìn)行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細(xì)胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細(xì)胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應(yīng)鑒定胚胎中與___________有關(guān)的基因。

（4）進(jìn)行步驟乙時，受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。評卷人得分四、判斷題(共5題，共50分)27、一般情況下一個卵細(xì)胞只能由一個精子發(fā)生融合形成受精卵()A.正確B.錯誤28、精子入卵后形成雄原核；同時卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核()A.正確B.錯誤29、受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段，在自然狀態(tài)下，哺乳動物的受精在子宮內(nèi)完成。（選擇性必修3P56）()A.正確B.錯誤30、下圖表示哺乳動物發(fā)育過程的幾個階段；請判斷下列題的敘述是否正確？

（_____）（1）從A到C的過程中有機(jī)物的含量減少。

（_____）（2）A；B時期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞。

（_____）（3）胚胎移植必須使用處于B或C時期的胚胎。

（_____）（4）圖示過程細(xì)胞通過有絲分裂增殖，遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生改變。A.正確B.錯誤31、在生態(tài)工程建設(shè)中，只能遵循“先污染、破壞、再治理”的發(fā)展思路______A.正確B.錯誤評卷人得分五、非選擇題(共2題，共20分)32、人肌紅蛋白（Myo）是早期診斷急性心肌梗塞的生化標(biāo)志物之一。為制備抗Myo的單克隆抗體；科研人員進(jìn)行相關(guān)研究。請回答：

（1）科研人員以Myo作為抗原獲得免疫小鼠；取小鼠的脾臟細(xì)胞與____________細(xì)胞經(jīng)滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)融合。該過程的原理是病毒表面含有糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞相互凝聚，細(xì)胞膜上的______________分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。

（2）用特定的____________培養(yǎng)基篩選融合細(xì)胞；得到雜交瘤細(xì)胞。將得到的細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進(jìn)行抗體陽性檢測，之后稀釋；培養(yǎng)、再進(jìn)行抗體陽性檢測并多次重復(fù)上述操作，多次重復(fù)該過程的目的是篩選獲得______________的雜交瘤細(xì)胞。

（3）通過上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識別人肌紅蛋白（Myo），其原因是該抗體具有___________等特性。33、科學(xué)家通過誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞去分化獲得誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞（iPS）；繼而利用iPS細(xì)胞培育出與黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠，流程如圖。

（1）從黑鼠體內(nèi)獲得體細(xì)胞后；對其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為__________________。

（2）iPS細(xì)胞與小鼠內(nèi)細(xì)胞團(tuán)一樣；具有_________________，因而有望對人類iPS細(xì)胞進(jìn)行定向誘導(dǎo)后，用于疾病的細(xì)胞治療。

（3）克隆鼠X的體色為_______________；上述技術(shù)流程中可以是雄鼠的是_____________________。

（4）若要利用圖中的三只鼠（黑鼠作為體細(xì)胞供體）通過核移植技術(shù)得到克隆鼠Y，不考慮環(huán)境因素的影響?？寺∈骕和克隆鼠Y的性狀___________（是或否）完全相同，理由是___________________。評卷人得分六、綜合題(共4題，共40分)34、人血清白蛋白（HSA）是血漿中含量最豐富的蛋白質(zhì)，在維持血漿滲透壓、抗凝血等方面起著重要作用，具有重要的醫(yī)用價值。如圖是用基因工程技術(shù)獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。

（1）為獲取HSA基因；首先要提取人血細(xì)胞中的mRNA，利用_______法合成cDNA，再利用PCR技術(shù)進(jìn)行快速擴(kuò)增，在這一過程中，需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成_______，PCR過程中，溫度降低到55℃的目的是_________________。

（2）構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSA的載體時；需要選擇水稻胚乳細(xì)胞啟動子，而不能選擇其他物種和組織細(xì)胞的啟動子，原因可能是_________________。

（3）在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過程中；為了吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，需添加_________物質(zhì)。

（4）選用大腸桿菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)有____________（答出兩點(diǎn)即可）。但相比于水稻胚乳細(xì)胞，利用大腸桿菌獲得的rHSA也有一些缺點(diǎn)；請從生物膜系統(tǒng)的角度進(jìn)行分析_____________________。

（5）利用上述方法獲得的rHSA不能直接用于臨床醫(yī)療，你推測的原因是_____________。35、蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用；而且對人體沒有影響。我國科學(xué)家欲獲得高效表達(dá)蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥，做了相關(guān)研究。

（1）研究者用相同的________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒，再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)________處理的大腸桿菌細(xì)胞懸液中；獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。

（2）檢測發(fā)現(xiàn)；轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細(xì)胞中表達(dá)效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按圖2方式依次進(jìn)行4次PCR擴(kuò)增，以得到新的蛋白A基因。

①這是利用PCR技術(shù)實現(xiàn)了定點(diǎn)的________。

②圖2所示的4次PCR應(yīng)該分別如何選擇圖1中所示的引物？請?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”；若不選用該引物則劃“×”）。

。

引物A

引物B

引物C

引物D

PCR1

PCR2

PCR3

PCR4

________

（3）研究者進(jìn)一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和________分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達(dá)產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達(dá)效率是否提高。為檢測表達(dá)產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達(dá)產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較________的大?。灰源_定表達(dá)產(chǎn)物的生物活性大小。

（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，其優(yōu)點(diǎn)是________________。36、人感染H7N9禽流感病毒時；可以迅速發(fā)展為重癥肺炎和急性呼吸窘迫綜合征，嚴(yán)重時可致人死亡。

（1）H7N9病毒表面的糖蛋白可刺激人體的免疫系統(tǒng)；使B細(xì)胞增殖分化為_________細(xì)胞，后者能產(chǎn)生特異性抗體。

（2）研究人員從康復(fù)者的血漿中分離出特定的記憶B細(xì)胞；最終制備出單克隆抗體A，為研究抗體A發(fā)揮免疫作用的效果及作用機(jī)制,進(jìn)行了系列實驗。

①體外將抗體與H7N9病毒混合，然后檢測抗體對病毒侵染細(xì)胞的抑制作用，結(jié)果如下表。其中對H7N9病毒抑制效果較好的抗體是____________。

。

檢測值（IC50為半數(shù)最大抑制濃度）

單抗A

IC50=24．63ug/mL

單抗C

（已知的H7N9病毒的中和抗體）IC50=0．904ug/mL

②科研人員進(jìn)行相關(guān)實驗，評估單抗A在治療被H7N9病毒感染小鼠的能力時；發(fā)現(xiàn)單抗A的治療效果優(yōu)于單抗C。相關(guān)實驗操作是：_____________（在下列選項中選擇并排序）。

a．以致死濃度的H7N9病毒滴鼻感染小鼠。

b．小鼠腹腔注射相應(yīng)抗體。

c．24h后以致死濃度的H7N9病毒滴鼻感染小鼠。

d．24h后小鼠腹腔注射相應(yīng)抗體。

e．14天內(nèi)觀察統(tǒng)計小鼠的存活及體重變化情況。

③依據(jù)①和②的實驗結(jié)果；研究人員作出假設(shè)：抗體除了中和病毒活性之外，在體內(nèi)還可以通過其柄部募集某些免疫細(xì)胞（如殺傷細(xì)胞；巨噬細(xì)胞等），來清除被病毒感染的靶細(xì)胞（如圖1）。

針對假設(shè)，研究人員利用感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞；巨噬細(xì)胞、抗體等做了相關(guān)實驗；檢測靶細(xì)胞的裂解百分比，結(jié)果如圖2。可初步判斷上述假說成立的理由是________。為進(jìn)一步驗證該假說，合成局部部位突變的A抗體（突變抗體的柄部與相應(yīng)受體的結(jié)合能力下降），進(jìn)行相同步驟的實驗，預(yù)期實驗結(jié)果為___________________。

（3）若某人已出現(xiàn)流感癥狀，如何診斷其是否由H7N9病毒引起，請?zhí)峁﹥煞N診斷方法_______。37、Graves病（GD）可導(dǎo)致甲狀腺功能亢進(jìn)。研究發(fā)現(xiàn)；GD患者甲狀腺細(xì)胞表面表達(dá)大量細(xì)胞間粘附分子I（ICAM-1），導(dǎo)致甲狀腺腫大?？蒲腥藛T通過制備單克隆抗體，對治療GD進(jìn)行了嘗試。

（1）用ICAM-1作為抗原間隔多次免疫若干只小鼠；幾周后取這些免疫小鼠的血清，分別加入多孔培養(yǎng)板的不同孔中，多孔培養(yǎng)板中需加入______________以檢測這些小鼠產(chǎn)生的抗體。依據(jù)反應(yīng)結(jié)果，選出_______________反應(yīng)最強(qiáng)的培養(yǎng)孔所對應(yīng)的小鼠M．

（2）實驗所用骨髓瘤細(xì)胞需置于______________的氣體環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)；融合前將部分培養(yǎng)細(xì)胞置于選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后培養(yǎng)基中_______________填（“有”或“無”）骨髓瘤細(xì)胞生長，說明培養(yǎng)基符合實驗要求。

（3）從小鼠M的脾臟中取相應(yīng)細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液；與實驗用骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有______________能力的細(xì)胞。將獲得的上述細(xì)胞在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)；檢測，篩選出符合要求的雜交瘤細(xì)胞，植入小鼠腹腔中進(jìn)行克隆培養(yǎng)，一段時間后從小鼠腹水中提取實驗用抗體，其與常規(guī)的血清抗體相比，優(yōu)越性體現(xiàn)在______________。

（4）若進(jìn)一步比較實驗用抗體和131I對GD模型小鼠的治療作用；可將若干GD模型小鼠等分為三組，請補(bǔ)充下表中的實驗設(shè)計__________。

。對照組（A）

131I治療組（B）

單克隆抗體治療組（C）

給GD模型小鼠腹腔注射0．1ml無菌生理鹽水。

給GD模型小鼠腹腔注射溶于0．1ml無菌生理鹽水131I

___________________________

參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、A【分析】【分析】

限制酶主要從原核生物中分離純化出來。特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種。

【詳解】

A；Sau3AⅠ能識別GATC；也能識別GGATCC，A正確；

B；限制酶切割后可能形成黏性末端；例如：BamHⅠ、EcoRⅠ、KpnⅠ、Sau3AⅠ；限制酶切割后也可能形成平末端，例如：HindⅡ、SmaⅠ，B錯誤；

C；不同限制酶切割后可形成相同的黏性末端；例如：BamHⅠ和Sau3AⅠ，C錯誤；

D；限制酶的切割位點(diǎn)可能在序列內(nèi)部；例如：BamHⅠ、EcoRⅠ、KpnⅠ、HindⅡ、SmaⅠ；限制酶的切割位點(diǎn)可能在序列外部，例如：Sau3AⅠ，D錯誤。

故選A。

【點(diǎn)睛】

本題具有一定的難度，著重考查了限制酶的特點(diǎn)，解題關(guān)鍵是能夠通過分析表格中不同酶識別位點(diǎn)及產(chǎn)生的末端進(jìn)行比較即可。2、A【分析】【分析】

本題考查克隆的相關(guān)知識?？寺∈侵干矬w通過體細(xì)胞進(jìn)行的無性繁殖；以及由無性繁殖形成的基因型完全相同的后代個體組成的種群，通常是指利用生物技術(shù)由無性生殖產(chǎn)生與原個體有完全相同基因組織后代的過程。

【詳解】

A；來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)；因此胚胎分割可以看作動物的無性繁殖或克隆，A正確；

B；將人抗病毒基因嫁接到煙草DNA分子上；采用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)，其原理是基因重組，不屬于克隆，B錯誤；

C；將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的B細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞；不屬于克隆，C錯誤；

D；“試管嬰兒”是體外受精和胚胎移植形成的；屬于有性生殖，不是克隆，D錯誤。

故選A。

【點(diǎn)睛】

廣義的克隆包括分子克?。ㄈ鏒NA分子復(fù)制）、細(xì)胞克?。ㄈ鐒游锛?xì)胞培養(yǎng)）和個體克隆（如植物組織培養(yǎng)過程、胚胎分割技術(shù)）。3、C【分析】【分析】

作為運(yùn)載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點(diǎn)；②要有標(biāo)記基因（如抗性基因）；以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對受體細(xì)胞無害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來。

【詳解】

運(yùn)載體能在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存；A正確；運(yùn)載體具有1個或多個限制酶切點(diǎn)，以便于外源基因連接，B正確；最常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒，也可以是噬菌體；動植物病毒，C錯誤；運(yùn)載體在限制酶切點(diǎn)外必須含有標(biāo)記基因，便于篩選，D正確。

【點(diǎn)睛】

熟悉滿足基因工程中運(yùn)載體的條件是解決本題的關(guān)鍵。4、D【分析】【分析】

基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)；是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性；獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品。

【詳解】

A；基因診斷又稱DNA診斷或分子診斷；通過分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的技術(shù)，直接檢測出分子結(jié)構(gòu)水平和表達(dá)水平是否異常，從而對疾病做出判斷，利用的原理就是DNA分子雜交，A正確；

B；基因治療就是把健康的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中；使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，以達(dá)到治療疾病的目的，B正確；

C；DNA探針技術(shù)的原理是用單鏈的探針與樣品中變性處理的DNA單鏈配對雜交；C正確；

D；構(gòu)建基因表達(dá)載體的實質(zhì)是基因重組；D錯誤。

故選D。5、C【分析】【分析】

分析圖示可知；①過程為原生質(zhì)體融合形成雜種細(xì)胞，②過程為植物組織培養(yǎng)過程中脫分化，③過程為再分化過程。

【詳解】

A、長穗偃麥草（2n=14）是普通小麥（6n=42）的近緣屬植物，不屬于同種生物，所以長穗偃麥草與普通小麥存在生殖隔離，故二者雜交得到的F1不育，所以不能產(chǎn)生種子，可用秋水仙素處理F1幼苗；A錯誤；

B；誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合常用物理和化學(xué)誘導(dǎo)方法；不用生物誘導(dǎo)法，B錯誤；

C；生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值不同將會影響脫分化和再分化過程；所以②過程和③過程培養(yǎng)基中生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值不同，C正確；

D；植物體細(xì)胞雜交是形成雜種植株；其原理是細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性，D錯誤。

故選C。6、D【分析】【分析】

【詳解】

多利羊的培育過程：將一只母羊(A羊)卵細(xì)胞的細(xì)胞核吸出，獲得去核卵細(xì)胞。將另一只母羊(B羊)的乳腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞核注入去核卵細(xì)胞中，形成一個同時含有B羊核遺傳物質(zhì)和A羊細(xì)胞質(zhì)的重組卵細(xì)胞。融合后的卵細(xì)胞經(jīng)過體外細(xì)胞培養(yǎng)形成早期胚胎，然后把這個胚胎移植到第三只羊(C羊)的子宮中，繼續(xù)發(fā)育。該過程既涉及體細(xì)胞核移植，又涉及胚胎移植，這兩項技術(shù)操作都需細(xì)胞培養(yǎng)作為手段，ABC不符合題意，D符合題意。7、B【分析】【分析】

水體富營養(yǎng)化是指水體中氮；磷等植物營養(yǎng)物質(zhì)的富集；引起藻類及其他浮游生物迅速繁殖，導(dǎo)致水體溶氧量下降，進(jìn)而引起水生生物衰亡、水質(zhì)惡化的現(xiàn)象。利用需氧微生物與厭氧微生物能夠降解有機(jī)污染物的作用、植物的根系能夠從水體中吸收氮、磷等礦質(zhì)營養(yǎng)的作用，依據(jù)生態(tài)工程的基本原理進(jìn)行合理設(shè)計，對污染的生態(tài)環(huán)境進(jìn)行修復(fù)，從而達(dá)到改善和凈化水質(zhì)的目的。

【詳解】

A；曝氣可增加水體的溶氧量；進(jìn)而降低厭氧微生物降解能力，抑制厭氧微生物的生長繁殖，A正確；

B；植物浮床中的植物根能夠吸收河水中的氮和磷；避免水體富營養(yǎng)化，從而抑制浮游植物的數(shù)量，避免出現(xiàn)水華，赤潮發(fā)生在海洋，B錯誤；

C；吸附基質(zhì)的存在增加了微生物附著的表面積；有利于微生物的生理活動，可促進(jìn)有機(jī)污染物的降解，因此能夠提高凈化效果，C正確；

D；植物浮床中的植物根能夠吸收水體中的氮和磷；避免水體富營養(yǎng)化，從而抑制浮游植物的數(shù)量，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】8、A【分析】【分析】

水體富營養(yǎng)化是指水體中氮；磷等植物營養(yǎng)物質(zhì)的富集；引起藻類及其他浮游生物迅速繁殖，導(dǎo)致水體溶氧量下降，進(jìn)而引起水生生物死亡、水質(zhì)惡化的現(xiàn)象。利用需氧微生物與厭氧微生物能夠降解有機(jī)污染物的作用、植物的根系能夠從水體中吸收氮、磷等礦質(zhì)營養(yǎng)的作用，依據(jù)生態(tài)工程的基本原理進(jìn)行合理設(shè)計，對污染的生態(tài)環(huán)境進(jìn)行修復(fù)，從而達(dá)到改善和凈化水質(zhì)的目的。

【詳解】

A；曝氣可增加溶氧量；進(jìn)而降低厭氧微生物降解有機(jī)污染物的能力，A錯誤；

B；吸附基質(zhì)增加了微生物附著的面積；有利于微生物的生理活動，可促進(jìn)有機(jī)污染物的降解，因此能夠提高凈化效果，B正確；

CD；借助植物浮床；可使植物龐大的根系透過小孔牢牢的固定在水體中，植物的根系從水體中吸收氮、磷等物質(zhì)，可減少水體富營養(yǎng)化，增加水體透明度，恢復(fù)水生植物生長，從而起到了改善和凈化水質(zhì)的效果，C、D正確。

故選A。9、A【分析】【分析】

分析圖解，圖為受精作用和胚胎發(fā)育過程，圖中a為桑椹胚，b為囊胚；c為原腸胚；圖中①為受精作用，②③④為早期胚胎發(fā)育過程。

【詳解】

①是受精作用，非同源染色體的自由組合發(fā)生在減數(shù)第一次分裂后期形成配子時，A錯誤；②過程為卵裂期，通過有絲分裂增殖，B正確；b時期為囊胚期；此時出現(xiàn)了含有液體的囊腔，C正確；①～④過程隨早期胚胎發(fā)育進(jìn)行，細(xì)胞分化程度逐漸增大，D正確。

【點(diǎn)睛】

解答此題需要明確圖中各字母與序號代表的含義，進(jìn)而分析作答。二、多選題(共9題，共18分)10、B:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)的相關(guān)知識：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2；原理：DNA復(fù)制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列；以便合成引物。

4；過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開。

【詳解】

A；設(shè)計擴(kuò)增目的基因的引物時要考慮表達(dá)載體相關(guān)序列；從而保證目的基因能與表達(dá)載體相連接及正常表達(dá)，A錯誤；

B；用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時不必知道其全部序列；只需知道目的基因的一段核苷酸序列即可，以便合成引物，B正確；

C；PCR技術(shù)需要特殊的耐高溫的DNA聚合酶；從細(xì)胞內(nèi)提取的DNA聚合酶不耐高溫，C錯誤；

D；根據(jù)目的基因的編碼產(chǎn)物要選擇特定合適的受體細(xì)胞；從而保證目的基因能表達(dá)出所需產(chǎn)物，D正確。

故選BD。11、B:C【分析】【分析】

生物體基因的堿基序列保持不變；但基因表達(dá)和表型發(fā)生可遺傳變化的現(xiàn)象，叫作表觀遺傳；除了DNA甲基化，構(gòu)成染色體的組蛋白發(fā)生甲基化；乙?；刃揎椧矔绊懟虻谋磉_(dá)。

【詳解】

A；過程①中小分子化合物誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞脫分化為iPS細(xì)胞；并未發(fā)生突變，A錯誤；

B；MⅡ期卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有促使細(xì)胞核全能性表現(xiàn)的物質(zhì)；故要選用MⅡ期卵母細(xì)胞去除細(xì)胞核，B正確；

C；過程③為動物細(xì)胞融合過程；可使用電融合法誘導(dǎo)兩細(xì)胞融合，C正確；

D；由圖可知；重構(gòu)胚在加入中Kdm4d的mRNA和TSA后，發(fā)育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA表達(dá)產(chǎn)物為組蛋白去甲基化酶，可以使組蛋白去甲基化，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑，抑制組蛋白脫乙酰酶的作用，保持組蛋白乙?；?，即組蛋白乙?；腿ゼ谆欣谥貥?gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育過程，D錯誤。

故選BC。12、A:D【分析】【詳解】

B單細(xì)胞DNA體外擴(kuò)增是DNA的擴(kuò)增；不能說明細(xì)胞具有全能性，動物雜交瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生生物個體，所以，也不能說明細(xì)胞具有全能性，答案AD。

考點(diǎn)定位：考查細(xì)胞全能性知識。13、C:D【分析】【分析】

通過PGS技術(shù)篩選染色體正常的囊胚進(jìn)行移植；這一技術(shù)在提高胚胎著床率和降低流產(chǎn)率上都取得了非常好的效果，但鑒于胚胎嵌合體的因素，PGS檢測并不能100%保證胎兒的染色體完全正常，所以國內(nèi)外多個指南或?qū)＜夜沧R都建議在三代試管嬰兒治療過程中，胚胎移植成功后，在妊娠期進(jìn)行產(chǎn)前診斷，以確保整個妊娠期間胎兒正常發(fā)育。

【詳解】

A；PGS技術(shù)對染色體病進(jìn)行預(yù)防；而對基因遺傳病沒有檢測作用，因此不能降低單基因遺傳病患兒出生的概率，A錯誤；

B；圖示胚胎細(xì)胞中有正常細(xì)胞和異常細(xì)胞；染色體數(shù)目不一定都相同，B錯誤；

C；由于胚胎嵌合體的存在；即使PGS結(jié)果正常的胚胎在后期發(fā)育中仍有患某些染色體病的風(fēng)險，C正確；

D；PGS技術(shù)能有效的檢測異常胚胎；因此可提高人類試管嬰兒移植成活率，D正確。

故選CD。14、B:D【分析】【分析】

題意分析；H-Y抗原存在于雄性個體細(xì)胞的表面，決定性腺向雄性方向發(fā)育，正常雌性體內(nèi)不存在H-Y抗原，故可以利用抗體和抗原特異性結(jié)合的原理，進(jìn)行胚胎移植時，用H-Y單克隆抗體來篩選胚胎。

【詳解】

A；培養(yǎng)液中添加H-Y單克隆抗體；可以和H-Y抗原特異性結(jié)合，起到篩選作用，但不能促進(jìn)牛早期胚胎發(fā)育成雄性，A錯誤；

B；漿細(xì)胞能夠分泌抗體；但是不具有增殖能力，而骨髓瘤細(xì)胞具有無線增殖的能力，因此利用動物細(xì)胞融合技術(shù)將已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，利用該細(xì)胞制備單克隆抗體，B正確；

C；囊胚期性別鑒定后獲得的雌性胚胎可進(jìn)行胚胎移植；進(jìn)行性別鑒定時，可挑選囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定，C錯誤；

D；抗原是能夠引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)的物質(zhì)；用H-Y抗原免疫母牛，使其體內(nèi)發(fā)生體液免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，進(jìn)而獲得相應(yīng)抗體，D正確。

故選BD。15、B:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中為科研人員利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的簡要過程；其中①是獲取早期胚胎的過程，②是將白鼠和黑鼠的早期胚胎嵌合的過程，③是胚胎移植過程。

【詳解】

A；嵌合鼠的培育依據(jù)的原理是細(xì)胞全能性；并沒有進(jìn)行基因重組，A錯誤；

B；過程①中需利用相關(guān)技術(shù)去除早期胚胎外的透明帶；B正確；

C；過程②不需要誘導(dǎo)卵裂球細(xì)胞發(fā)生融合；C錯誤；

D；過程③操作前需對多只代孕母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理；以保證受體與供體的生殖器官的生理變化是相同的，D正確。

故選BD。

【點(diǎn)睛】16、B:C【分析】【分析】

胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的；生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)，這是胚胎工程的最后一道工序，胚胎分割時,應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，對囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育，試管動物技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)，可見試管嬰兒技術(shù)主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)。

哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞；是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞。ES細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積?。患?xì)胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。

【詳解】

A；早期胚胎培養(yǎng)需要添加氨基酸、核苷酸、維生素、激素、血清等物質(zhì)；A正確；

B；受體對植入子宮的外來胚胎基本不會免疫排斥；為胚胎移植成功提供了可能，B錯誤；

C；胚胎干細(xì)胞來源于早期胚胎或原始性腺；細(xì)胞體積小，細(xì)胞核的體積大，C錯誤；

D；對囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時；要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育，D正確。

故選BC。17、A:B:D【分析】【分析】

生態(tài)農(nóng)業(yè)是指運(yùn)用生態(tài)學(xué)原理；在環(huán)境與經(jīng)濟(jì)協(xié)調(diào)發(fā)展的思想指導(dǎo)下，應(yīng)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)建立起來的多層次多功能的綜合農(nóng)業(yè)生產(chǎn)體系，生態(tài)系統(tǒng)中能量多級利用和物質(zhì)循環(huán)再生是生態(tài)農(nóng)業(yè)的一條基本原理。

【詳解】

A；當(dāng)?shù)剞r(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)中引進(jìn)的赤松茸是異養(yǎng)生物；屬于真菌，是分解者，可以實現(xiàn)該生態(tài)系統(tǒng)中能量的多級利用，A正確；

B；該模式沿襲了“無廢棄物農(nóng)業(yè)”的傳統(tǒng)；遵循物質(zhì)循環(huán)再生原理，菌糠和秸稈由廢棄物變?yōu)榱松a(chǎn)原料，實現(xiàn)了物質(zhì)的循環(huán)利用，B正確；

C；該模式充分利用了秸稈中的能量；從而提高能量的利用率，但不能提高能量的傳遞效率，C錯誤；

D；該模式既讓土地休養(yǎng)生息；在確保土地的肥力的同時又增加了生態(tài)效益和經(jīng)濟(jì)效益，D正確。

故選ABD。18、B:C【分析】【分析】

1；生態(tài)工程的基本原理：

(1)物質(zhì)循環(huán)再生原理：物質(zhì)能在生態(tài)系統(tǒng)中循環(huán)往復(fù)；分層分級利用；

(2)物種多樣性原理：物種繁多復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)具有較高的抵抗力穩(wěn)定性；

(3)協(xié)調(diào)與平衡原理：生態(tài)系統(tǒng)的生物數(shù)量不能超過環(huán)境承載力(環(huán)境容納量)的限度；

(4)整體性原理：生態(tài)系統(tǒng)建設(shè)要考慮自然；經(jīng)濟(jì)、社會的整體影響；

(5)系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理：系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理:要通過改善和優(yōu)化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)改善功能；系統(tǒng)整體性原理：系統(tǒng)各組分間要有適當(dāng)?shù)谋壤P(guān)系，使得能量、物.質(zhì)、信息等的轉(zhuǎn)換和流通順利完成，并實現(xiàn)總體功能大于各部分之和的效果，即“1+1>2”。

【詳解】

A；施用的有機(jī)肥通過微生物的分解能為作物提供更多的營養(yǎng)物質(zhì)；不能提供能量，A錯誤；

B；從資源化、無害化角度分析；通過多層分級利用有機(jī)廢棄物中的物質(zhì)，既充分利用有機(jī)物中的能量，又減少了環(huán)境污染，因此途徑②、③優(yōu)于④，B正確；

C；“無廢化生態(tài)社區(qū)”生產(chǎn)模式；遵循物質(zhì)循環(huán)再生原理，C正確；

D；“無廢化生態(tài)社區(qū)”模式提高了物質(zhì)循環(huán)速率和能量的利用效率；能量傳遞效率不能改變，D錯誤。

故選BC。三、填空題(共9題，共18分)19、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”即切割DNA的是限制核酸內(nèi)切酶簡稱限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是DNA連接酶；

（3）基因工程中最常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒；

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá)；說明人和牛共用一套遺傳密碼。

【考點(diǎn)定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA連接酶質(zhì)粒共用一套遺傳密碼20、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)，其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體稱為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動物應(yīng)為常見或存量大的品種)，如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對精子進(jìn)行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進(jìn)行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進(jìn)行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應(yīng)鑒定胚胎中與有關(guān)的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實現(xiàn)的前提是受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

【點(diǎn)睛】

胚胎移植的實質(zhì)：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉(zhuǎn)移?！窘馕觥烤荧@能促性腺M(fèi)Ⅱ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】取代修補(bǔ)22、略

【分析】【分析】

1；神經(jīng)元由細(xì)胞體和突起兩部分組成；突起又分為樹突和軸突，樹突短而多，軸突長而少。神經(jīng)元的軸突末梢經(jīng)過多次分支，最后每個小枝末端膨大，呈杯狀或球狀，叫做突觸小體。

2；目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

3；人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料；經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子，在適宜條件下同樣能夠萌發(fā)長成幼苗。

【詳解】

（1）神經(jīng)元由細(xì)胞體和突起兩部分組成；突起又分為樹突和軸突，樹突短而多，軸突長而少；軸突末端的多次分支后，每個小枝末端膨大的部分稱為突觸小體。

（2）抗體可以與病原體結(jié)合；從而抑制病原體的繁殖或?qū)θ梭w細(xì)胞的黏附。

（3）檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA可采用分子雜交技術(shù)。

（4）人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體；不定芽、頂芽、腋芽為材料；經(jīng)過人工包膜包裝得到的種子，可以在適宜條件下同樣能夠萌發(fā)長成幼苗．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)就是克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，或者是打破了生殖隔離。

（5）胰島素能促進(jìn)組織細(xì)胞加速攝??；利用和儲存葡萄糖；從而使血糖水平降低。

【點(diǎn)睛】

本題考查教材基礎(chǔ)知識，旨在考查考生的理解、記憶能力，要求考生熟記關(guān)鍵語句，并能運(yùn)用專業(yè)術(shù)語準(zhǔn)確作答?！窘馕觥客挥|小體對人體細(xì)胞的黏附放射性同位素）標(biāo)記的目的基因胚狀體、不定芽、腋芽、頂芽攝取、利用和儲存23、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細(xì)胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細(xì)胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對被新冠病毒感染后肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進(jìn)行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應(yīng)選取甲的B細(xì)胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細(xì)胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的記憶細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點(diǎn)及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶24、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復(fù)制；②是減數(shù)分裂，③是精細(xì)胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動物精子和卵子發(fā)生的不同點(diǎn)：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場所唯一（MⅠ和MⅡ的場所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場所不唯一，（MⅠ場所在卵巢，MⅡ場所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機(jī)能衰退；多數(shù)哺乳動物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶，透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動物精子產(chǎn)生的時期是初情期；雌性動物卵泡細(xì)胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級卵母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點(diǎn)睛】

本題考查卵細(xì)胞的形成過程和受精作用等相關(guān)知識，意在考查學(xué)生識記相關(guān)細(xì)節(jié)和解決問題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應(yīng)卵細(xì)胞膜反應(yīng)初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用25、略

【分析】【分析】

動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織；器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。

【詳解】

1；基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)；是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術(shù)。

2；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。

3；動物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖，其原理是細(xì)胞增殖。

4；植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)；指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程概念、胚胎移植、動植物細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)知識，意在考察考生對知識點(diǎn)的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)②.又稱受精卵移植，是指將雌性動物體內(nèi)的的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀況相同的其他雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)③.植物細(xì)胞全能性、細(xì)胞增殖26、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)，其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體稱為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動物應(yīng)為常見或存量大的品種)，如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對精子進(jìn)行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進(jìn)行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進(jìn)行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應(yīng)鑒定胚胎中與有關(guān)的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實現(xiàn)的前提是受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

【點(diǎn)睛】

胚胎移植的實質(zhì)：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉(zhuǎn)移?！窘馕觥烤荧@能促性腺M(fèi)Ⅱ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。四、判斷題(共5題，共50分)27、A【分析】【詳解】

由于存在防止多精入卵的兩道屏障，故一個卵細(xì)胞一般只能同一個精子結(jié)合，形成受精卵，這句話是正確的。28、A【分析】【詳解】

受精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。精子入卵后形成雄原核，同時被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核，雄、雌原核充分發(fā)育后，相向移動，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此說法正確。

故正確。29、B【分析】【詳解】

受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段；在自然狀態(tài)下，哺乳動物的受精在輸卵管內(nèi)完成。

故錯誤。30、B【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原腸胚。圖B中1是滋養(yǎng)層，2是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，3是透明帶，4是囊胚腔；圖C中5是外胚層，6是滋養(yǎng)層，7是原腸腔，8是內(nèi)胚層。

【詳解】

（1）從A到C的過程中細(xì)胞均需要消耗能量；故胚胎中有機(jī)物的含量均減少，（1）正確。

（2）桑椹胚之前所有細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬全能細(xì)胞，故A時期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞，囊胚期時細(xì)胞出現(xiàn)分化，滋養(yǎng)層細(xì)胞不是全能細(xì)胞，（2）錯誤。

（3）胚胎移植必須使用處于桑椹胚或囊胚時期的胚胎；處于A或B時期的胚胎，（3）錯誤。

（4）圖示過程細(xì)胞通過有絲分裂增殖；有絲分裂過程中可能發(fā)生突變，遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生改變，（4）正確。

故分別為√、×、×、√。31、B【分析】【詳解】

生態(tài)系統(tǒng)的恢復(fù)力穩(wěn)定性是有一定限度的，導(dǎo)致了生態(tài)工程的局限性，使生態(tài)工程并不能解決所有的污染、破壞問題，因此不能走“先污染、破壞，后治理”的老路，故錯誤。五、非選擇題(共2題，共20分)32、略

【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程：首先將特定抗原注射到小鼠體內(nèi)；使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次利用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞；第二次篩選，利用多孔培養(yǎng)板和抗原抗體雜交的方法，通過克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢測，獲得能分泌所需特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

(1)制備抗Myo的單克隆抗體；應(yīng)取經(jīng)人肌紅蛋白（Myo）這一抗原刺激后產(chǎn)生免疫反應(yīng)的小鼠的脾臟細(xì)胞，誘導(dǎo)其和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。細(xì)胞膜主要由蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子組成，在誘導(dǎo)細(xì)胞融合的過程中，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子會重新排布。

(2)在制備單克隆抗體的過程中至少需要兩次對細(xì)胞進(jìn)行篩選：第一次是在特定的選擇性培養(yǎng)基上篩選融合細(xì)胞；將雜交瘤細(xì)胞篩選出來；由于篩選出的雜交瘤細(xì)胞有很多種，因此需要進(jìn)行第二次篩選，通過克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢測，從多種雜交瘤細(xì)胞中將能分泌抗Myo抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來。

(3)抗Myo的單克隆抗體具有特異性強(qiáng)；靈敏度高等特性；因此可準(zhǔn)確地識別人肌紅蛋白（Myo）。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是識記并理解單克隆抗體的制備流程、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)等相關(guān)知識，據(jù)此結(jié)合題意對各問題進(jìn)行分析解答?！窘馕觥抗撬枇龅鞍踪|(zhì)分子和脂質(zhì)選擇性能分泌抗Myo抗體特異性強(qiáng)（或靈敏度高或純度高）33、略

【分析】【分析】

胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性；在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

【詳解】

（1）原代培養(yǎng)指將動物組織用酶處理成單個細(xì)胞后進(jìn)行的初次培養(yǎng)。

（2）iPS與小鼠內(nèi)細(xì)胞團(tuán)同樣具有發(fā)育的全能性；因而有望在對人類iPS細(xì)胞進(jìn)行定向誘導(dǎo)分化后用于疾病的細(xì)胞治療。

（3）由于灰鼠提供胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)經(jīng)過特殊處理后不再發(fā)育；所以克隆鼠X的體色由提供細(xì)胞核的黑鼠決定，所以為黑色。提供胚胎的灰鼠應(yīng)為雌性，代孕的個體應(yīng)為雌性，所以上述技術(shù)流程中可以是雄鼠的是體細(xì)胞供體黑鼠和克隆鼠X。

（4）由于克隆鼠X的細(xì)胞質(zhì)基因來源于黑鼠；克隆鼠Y的細(xì)胞質(zhì)基因來源于灰鼠，所以若要利用圖中的三只鼠（黑鼠作為體細(xì)胞供體）通過核移植技術(shù)得到克隆鼠Y，不考慮環(huán)境因素的影響。克隆鼠X和克隆鼠Y的性狀不完全相同。

【點(diǎn)睛】

本題考查動物胚胎移植、細(xì)胞核移植等相關(guān)知識，意在考查考生對生物學(xué)知識的理解能力和將其應(yīng)用于實踐的能力，熟記相關(guān)知識是解答此題的關(guān)鍵?！窘馕觥吭囵B(yǎng)全能性黑色體細(xì)胞供體黑鼠和克隆鼠X否克隆鼠X的細(xì)胞質(zhì)基因來源于黑鼠，克隆鼠Y的細(xì)胞質(zhì)基因來源于灰鼠六、綜合題(共4題，共40分)34、略

【分析】【分析】

基因工程的操作步驟：目的基因的獲?。粯?gòu)建基因表達(dá)載體（含目的基因；啟動子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因）；把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、鈣離子處理法）；目的基因的檢測和鑒定（分子水平、個體水平檢測）。

【詳解】

（1）獲取HSA基因；提取人血細(xì)胞中的mRNA，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下利用反轉(zhuǎn)錄法合成cDNA，再利用PCR技術(shù)進(jìn)行快速擴(kuò)增，PCR過程中，需要一段已知目的基因的核苷酸序列合成引物，溫度降低到55℃的目的是兩種引物通過互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA結(jié)合。

（2）由于啟動子具有物種或組織特異性，構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSA的載體時；需要選擇水稻胚乳細(xì)胞啟動子。

（3）酚類物質(zhì)會吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞；在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過程中，故需添加酚類物質(zhì)。

（4）大腸桿菌受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)有繁殖快；單細(xì)胞。但相比于水稻胚乳細(xì)胞，大腸桿菌沒有生物膜系統(tǒng)（或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體），不能對rHSA進(jìn)行深加工。

（5）利用上述方法獲得的rHSA可能沒有活性；不能直接用于臨床醫(yī)療。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是識記基因工程的操作工具及具體的操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合題干信息準(zhǔn)確答題。【解析】反轉(zhuǎn)錄引物兩種引物通過互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA結(jié)合啟動子具有（物種及組織）特異性酚類繁殖快；單細(xì)胞；遺傳物質(zhì)少大腸桿菌沒有生物膜系統(tǒng)（或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體），不能對rHSA進(jìn)行深加工rHSA可能沒有生物活性或功能性較差或rHSA可能有安全隱忠35、略

【分析】【分析】

本題主要考查基因工程；PCR技術(shù)等相關(guān)知識。PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因原理：DNA雙鏈復(fù)制；過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃；引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。

【詳解】

（1）在基因工程中；利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒；大腸桿菌作為受體細(xì)胞，需要用氯化鈣處理，以便重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。

（2）①根據(jù)題意和圖示分析；經(jīng)過4次PCR技術(shù)后獲得了新的基因，這是一種定點(diǎn)的基因突變技術(shù)。

②研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好；因而設(shè)計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），DNA子鏈從5'端向3'端延伸，因此4次PCR應(yīng)該分別選擇如圖所示的引物：如下表所示。

。

引物A

引物B

引物C

引物D

PCR1

√

√

×

×

PCR2

×

×

√

√

PCR3

×

×

×

×

PCR4

√

×

×

√

（3）將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒；空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）分別導(dǎo)入大腸桿菌；提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用抗原-抗體雜交方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達(dá)產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達(dá)效率是否提高。為檢測表達(dá)產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達(dá)產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較抑菌圈的大小，可以確定表達(dá)產(chǎn)物的生物活性大小。

（4）作為微生物農(nóng)藥；使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，是因為