專題18-克隆動物-從動物細胞培養(yǎng)中溯源(解析版)

專題18克隆動物，從動物細胞培養(yǎng)中溯源考向一動物細胞工程【母題來源】2022年江蘇卷【母題題文】下圖表示利用細胞融合技術(shù)進行基因定位的過程，在人-鼠雜種細胞中人的染色體會以隨機方式丟失，通過分析基因產(chǎn)物進行基因定位。現(xiàn)檢測細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有(

)A．加入滅活仙臺病毒的作用是促進細胞融合B．細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細胞C．芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上D．胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上[答案]ACD【試題解析】分析題干信息：Ⅰ保留X、11號染色體，Ⅱ保留2、11號染色體，具有芳烴羥化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17號染色體具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，所以支配芳烴羥化酶合成的基因位于2號染色體上，支配胸苷激酶合成的基因位于17號染色體上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X號染色體上；支配乳酸脫氫酶合成的基因位于11號染色體上。[解析]A、動物細胞融合過程中，可以利用滅活的仙臺病毒或聚乙二醇作誘導(dǎo)劑促進細胞融合，A正確；B、細胞Ⅲ中保留了人的X、11、17號染色體，故不會是鼠-鼠融合細胞，B錯誤；CD、根據(jù)分析可知，芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上，胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，CD正確。故選ACD。【命題意圖】本部分內(nèi)容在全國卷中常以選考的形式出現(xiàn)，2道選考題，考生任選1道做答，對試題能力的考查主要是識記和理解，難度不大?？疾榈闹攸c知識為動物細胞工程中的動物細胞融合技術(shù)。主要是動物細胞融合在生產(chǎn)生活中的應(yīng)用?！久}方向】在對選修3的考查中，動物細胞工程是重要考點之一，考查的內(nèi)容為：動物細胞培養(yǎng)，動物細胞融合與單克隆抗體的制備。其中單克隆抗體的制備是考查的熱點知識。展望2023年高考生物試題呈現(xiàn)會結(jié)合科技前沿考查動物細胞工程的相關(guān)知識，也可能結(jié)合后面的胚胎工程一起?？疾閷W(xué)生的信息獲取能力和知識的綜合運用能力的考查為主?！镜梅忠c】1．動物細胞培養(yǎng)(1)概念：從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。(2)原理：細胞的增殖。(3)操作流程①選用幼齡動物組織或胚胎進行細胞培養(yǎng)的原因：幼齡動物組織或胚胎的細胞分化程度低，增殖能力很強，更易于培養(yǎng)。②不選用胃蛋白酶分散細胞的原因：多數(shù)動物細胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4，此環(huán)境下胃蛋白酶(適宜pH為1.5左右)沒有活性，而胰蛋白酶(pH為7.2~8.4)活性較高。③正常細胞有接觸抑制現(xiàn)象，癌變細胞會失去接觸抑制現(xiàn)象。④目前使用或冷凍保存的通常都是10代以內(nèi)的細胞，目的是保持細胞正常的二倍體核型。⑤無論是原代培養(yǎng)還是傳代培養(yǎng)，培養(yǎng)瓶都要放在二氧化碳培養(yǎng)箱中，目的是調(diào)節(jié)pH。(4)培養(yǎng)條件①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進行無菌處理；培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液，以清除細胞代謝產(chǎn)物。②營養(yǎng)：主要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。在使用含有上述成分的合成培養(yǎng)基時，通常需加入血清、血漿等天然成分。③溫度和pH：培養(yǎng)哺乳動物細胞的溫度多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。(5)動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用①生產(chǎn)病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。②為基因工程提供受體細胞。③用于檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性。④用于生理、病理、藥理等方面的研究。2．動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物(1)概念：將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。(2)原理：動物細胞核的全能性。(3)分類：胚胎細胞核移植(容易)、體細胞核移植(困難，原因是動物體細胞分化程度高，全能性很難恢復(fù))。(4)操作流程(5)用到的技術(shù)手段：動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。(6)體細胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景：加速家畜遺傳改良進程，促進優(yōu)良畜群繁育；保護瀕危物種；轉(zhuǎn)基因克隆動物可以作為生物反應(yīng)器；為器官移植提供供體；為胚胎發(fā)育及衰老過程的研究提供證據(jù)；用克隆動物作疾病模型。(7)存在的問題：成活率低；克隆動物的健康問題；克隆動物食品的安全性問題等。知識拓展：選卵細胞作為受體細胞的原因：①卵細胞體積大，易于操作；②卵黃多，營養(yǎng)豐富，能為發(fā)育提供充足的營養(yǎng)；③能激發(fā)重組細胞分裂分化用物理或化學(xué)方法（如電脈沖、鈣離子載體，乙醇、蛋白酶合成抑制劑等）激活受體細胞，使其完成細胞分裂和發(fā)育進程目前核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作去核法。還有人采用其他方法，如梯度離心、紫外光短時間照射、化學(xué)物質(zhì)處理等。這些方法是在沒有刺破透明帶或卵母細胞質(zhì)膜的情況下，去除細胞核或使卵細胞核DNA變性，從而達到去核目的。(8)生物技術(shù)中的倫理問題：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實驗，不反對治療性克隆。3．動物細胞融合：兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程，又稱細胞雜交。(2)原理：細胞膜的流動性。(3)方法：滅活的病毒、聚乙二醇、電激等。(4)意義：突破有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能；成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段；制備單克隆抗體。4．單克隆抗體的制備(1)血清抗體與單克隆抗體名稱產(chǎn)生特點血清抗體由漿細胞分泌一般從血清中分離，產(chǎn)量低，純度低，特異性差單克隆抗體由雜交瘤細胞分泌特異性強，靈敏度高，能大量制備(2)單克隆抗體：克隆單一的雜交瘤細胞所產(chǎn)生的大量的單一抗體。(3)生產(chǎn)過程(4)特點：特異性強、靈敏度高，并可大量制備。(5)用途：①作為診斷試劑：能準確識別各種抗原物質(zhì)的細微差異，并與一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。②用于治療疾病和運載藥物：可制成“生物導(dǎo)彈”，主要用于治療癌癥，也有少量用于治療其他疾病。(6)制備單克隆抗體過程中的兩次篩選篩選的對象方法第一次篩選雜交瘤細胞利用特定的選擇培養(yǎng)基：在該培養(yǎng)基中只有雜交瘤細胞存活，其他細胞(未融合的B細胞和瘤細胞、融合后的B—B細胞和瘤—瘤細胞)均不能存活第二次篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞利用特定抗原通過抗原—抗體雜交技術(shù)確認抗體性質(zhì)1．(2022·廣東·華南師大附中模擬預(yù)測)抗體藥物偶聯(lián)物(ADC)是采用特定技術(shù)將具有生物活性的小分子藥物連接到單克隆抗體上，實現(xiàn)對腫瘤細胞精準的選擇性殺傷。ADC的結(jié)構(gòu)及其發(fā)揮作用的機理如下圖，有關(guān)敘述不正確的是(

)A．ADC實現(xiàn)精準殺傷腫瘤細胞的基礎(chǔ)是抗體與抗原特異性結(jié)合B．該腫瘤細胞死亡是在ADC誘導(dǎo)下細胞自動死亡的過程C．將特定抗原注射到小鼠體內(nèi)，可以從小鼠血清中獲得單克隆抗體D．對特定抗原篩選出的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)可獲得單克隆抗體[答案]C．[解析]A、由于單克隆抗體的特異性強，能特異性識別抗原，因此可以把抗癌細胞的單克隆抗體跟放射性同位素、藥物等相結(jié)合，借助單克隆抗體的定位導(dǎo)向作用將藥物定向帶到癌細胞，故ADC實現(xiàn)精準殺傷腫瘤細胞的基礎(chǔ)是抗體與抗原特異性結(jié)合，A正確；B、抗體進入細胞后，溶酶體裂解，釋放藥物，導(dǎo)致細胞凋亡，腫瘤細胞凋亡是細胞自動死亡的過程，B正確；C、將特定抗原注射到小鼠體內(nèi)，可以從小鼠血清中獲得抗體，獲得的抗體可能有多種，不是單克隆抗體，C錯誤；D、對特定抗原篩選出的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)可獲得單克隆抗體，該種細胞的特點是既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生所需抗體，D正確。故選C。2．(2022·江蘇·高郵市第一中學(xué)模擬預(yù)測)甘草酸是中藥甘草中的主要活性成分。為了快速檢測甘草酸，科研人員利用細胞工程技術(shù)制備了抗甘草酸的單克隆抗體，其基本操作過程如下圖。下列相關(guān)敘述正確的是()A．細胞甲是漿細胞，需多次注射相應(yīng)抗原后從小鼠血液中提取B．過程②誘導(dǎo)細胞融合，利用了細胞膜的選擇透過性C．過程③篩選得到的細胞是能夠產(chǎn)生抗甘草酸抗體的雜交瘤細胞D．過程③④的篩選方法不同，細胞丙、丁核酸不一定相同[答案]D．[解析]A、細胞甲B淋巴細胞，需多次注射相應(yīng)抗原后從小鼠血液中提取，A錯誤；B、誘導(dǎo)動物細胞融合利用了細胞膜的結(jié)構(gòu)特點，即具有一定的流動性，B錯誤；C、過程③篩選得到的細胞是雜交瘤細胞，但不一定能夠產(chǎn)生抗甘草酸抗體，還需要經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測后篩選得到的細胞丁才能產(chǎn)生抗甘草酸抗體，C錯誤；D、過程③篩選雜交瘤細胞，過程④篩選能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，二者的方法不同，由于兩者最終產(chǎn)生的蛋白質(zhì)不一定相同，故丙、丁核酸不一定相同，D正確。故選D。3．(2022·湖北·模擬預(yù)測)我國科學(xué)家首次培育出靈長類動物克隆猴“中中”和“華華”，其克隆的基本過程是：取甲猴的體細胞核，移入到乙猴的去核卵母細胞，得到重組細胞并體外培育成早期胚胎，植入丙猴的子宮，最終分娩出小猴“中中”和“華華”。下列有關(guān)敘述錯誤的是(

)A．對乙猴注射促性腺激素，對丙猴注射孕激素B．對乙猴卵母細胞去核操作通常采用顯微操作法C．“中中”和“華華”的性別及遺傳物質(zhì)只與甲猴有關(guān)D．克隆猴的成功培育為人類重大疾病的研究、干預(yù)和治療可能有積極意義[答案]C．[解析]A、對乙猴注射促性腺激素，可促使其超數(shù)排卵，對丙猴注射孕激素，可保證其同步發(fā)情，A正確；B、卵母細胞體積較大，對乙猴卵母細胞去核操作通常采用顯微操作去核法，B正確；C、“中中”和“華華”的性別只與甲猴有關(guān)，其核遺傳物質(zhì)只與甲猴有關(guān)，細胞質(zhì)遺傳物質(zhì)主要與乙猴有關(guān)，C錯誤；D、猴和人類都是靈長類動物，猴的許多生理特點與人類相似，因此，克隆猴的成功培育為人類重大疾病的研究、干預(yù)和治療可能有積極意義，D正確。故選C。4．(2022·福建·三明一中模擬預(yù)測)新冠變異毒株“奧密克戎”表面的刺突蛋白(S蛋白)存在30多處改變，使其與細胞膜上的受體結(jié)合更緊密，逃避抗體結(jié)合的能力增強。下列說法錯誤的是(

)A．核酸檢測時樣本采集后應(yīng)低溫保存，盡快檢測B．生產(chǎn)滅活病毒疫苗需先培養(yǎng)病毒宿主細胞C．毒株“奧密克戎”抗原檢測需要設(shè)計多種引物D．若用小鼠制備抗S蛋白單克隆抗體需先注射S蛋白[答案]C．[解析]A、新冠病毒的遺傳物質(zhì)是RNA，不穩(wěn)定，核酸檢測時樣本采集后應(yīng)低溫保存，盡快檢測，A正確；B、病毒只能寄生在活細胞內(nèi)，所以生產(chǎn)滅活病毒疫苗需先培養(yǎng)病毒宿主細胞，B正確；C、毒株“奧密克戎”抗原檢測利用了抗原-抗體特異性結(jié)合的原理，不需要引物，C錯誤；D、若用小鼠制備相應(yīng)單克隆抗體，需向其體內(nèi)注射S蛋白，從脾臟中獲取漿細胞與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，通過2次篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，最后注射到小鼠腹腔或在體外培養(yǎng)，才能獲得單克隆抗體，D正確。故選C。5．(2022·湖北·華中師大一附中模擬預(yù)測)使用高效的細胞毒素進行化療可有效殺傷腫瘤細胞，但沒有特異性，在殺傷腫瘤細胞的同時還會對健康細胞造成傷害。下圖是ADC(抗體-藥物偶聯(lián)物)特異性殺死腫瘤細胞的過程，圖中抗體是利用單克隆抗體技術(shù)制備的。下列敘述正確的是(

)A．單克隆抗體制備過程中不需要使用腫瘤細胞膜上的糖蛋白B．抗體與細胞毒素結(jié)合增加了細胞毒素的殺傷力C．細胞毒素具有與腫瘤細胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的能力D．溶酶體破裂導(dǎo)致其中的蛋白酶及其它水解酶釋放，加速了腫瘤細胞凋亡[答案]D．[解析]A、單克隆抗體制備過程中需要使用腫瘤細胞膜上的糖蛋白,A錯誤；B、此時的抗體起到導(dǎo)航定向作用，抗體與細胞毒素結(jié)合增加了細胞毒素的定向性，細胞毒素的殺傷力并未改變，B錯誤；C、細胞毒素殺傷腫瘤細胞沒有特異性，能與腫瘤細胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的是抗體，C錯誤；D、溶酶體破裂導(dǎo)致其中的蛋白酶及其它水解酶釋放，分解腫瘤細胞成分，加速細胞凋亡。D正確。故選D。6．(2022·上海松江·二模)圖為科研人員培育克隆猴“中中”的流程圖。下列有關(guān)敘述正確的是(

)A．“中中”不受卵子b的基因控制B．圖中利用了干細胞技術(shù)C．d為胚胎發(fā)育提供遺傳物質(zhì)和其他適宜條件D．“中中”的染色體數(shù)目與a細胞相同[答案]D．[解析]A、“中中”也會受到卵子b細胞質(zhì)遺傳物質(zhì)的影響，A錯誤；B、據(jù)圖可知，圖中利用了體細胞核移植技術(shù)，沒有用到干細胞技術(shù)，B錯誤；C、d為受體動物，能為胚胎發(fā)育提供發(fā)育環(huán)境，但不提供遺傳物質(zhì)，C錯誤；D、a是成纖維細胞，“中中”的細胞核中的染色體來自于a細胞，故“中中”的染色體數(shù)目與a細胞相同，D正確。故選D。7．(2022·山東師范大學(xué)附中模擬預(yù)測)CD47是一種跨膜糖蛋白，可與巨噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞高1.6～5倍，導(dǎo)致巨噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱。為證明抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，科學(xué)家按照如下流程進行了實驗，下列敘述正確的是(

)A．肺癌、結(jié)腸癌等腫瘤細胞有發(fā)達的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，參與細胞膜上大量糖蛋白的形成B．滅活的病毒會使骨髓瘤細胞細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布C．對照組應(yīng)設(shè)置為：巨噬細胞+正常細胞共培養(yǎng)體系+單克隆抗體D．癌細胞貼壁生長時，不會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，所以不需要對其進行分瓶培養(yǎng)[答案]B．[解析]A、癌細胞表面糖蛋白減少，A錯誤；B、滅活的病毒會使骨髓瘤細胞和B淋巴細胞細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，從而有利于細胞融合，B正確；C、證明抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，應(yīng)進行有無抗CD47的單克隆抗體的對照實驗，對照組應(yīng)設(shè)置為：巨噬細胞+腫瘤細胞共培養(yǎng)體系，C錯誤；D、培養(yǎng)液中空間、營養(yǎng)物質(zhì)有限，癌細胞培養(yǎng)時仍需進行分瓶培養(yǎng)，D錯誤。故選B。8．(2022·遼寧實驗中學(xué)模擬預(yù)測)由磷脂分子為主構(gòu)成的脂質(zhì)體可以作為藥物的運載體，將其送到特定的細胞發(fā)揮作用。下列敘述錯誤的是(

)A．藥物A是能在水中結(jié)晶的藥物，包在脂質(zhì)體的核心部位；藥物B是脂溶性的藥物，包在兩層磷脂分子之間B．口服胰島素屬于藥物A，脂質(zhì)體表面的抗體最好是用胰島B細胞膜上的特有的蛋白質(zhì)做抗原，制備的單克隆抗體(抗體經(jīng)技術(shù)處理，不會被消化液破壞)C．脂質(zhì)體將藥物送入細胞可能的方式是與細胞膜融合或胞吞，依賴細胞膜的流動性D．使用糖衣或膠囊(成分是淀粉)包裝的藥物，不必采用脂質(zhì)體這種方法[答案]B．[解析]A、由于磷脂分子磷酸“頭”部是親水的，脂肪酸“尾”部是疏水的，所以藥物A是能在水中結(jié)晶的藥物，包在脂質(zhì)體的核心部位；藥物B是脂溶性的藥物，包在兩層磷脂分子之間，A正確；B、胰島素屬于水溶性藥物，所以屬于藥物A，脂質(zhì)體表面的抗體最好是用組織細胞表面的特有的蛋白質(zhì)做抗原，制備的單克隆抗體，B錯誤；C、當脂質(zhì)體與靶細胞接觸時，藥物通過脂質(zhì)體與細胞膜融合或通過胞吞將藥物送入細胞，依賴細胞膜的流動性，C正確；D、使用糖衣或膠囊(成分是淀粉)包裝的藥物，由于糖衣或膠囊(成分是淀粉)遇水會分解，分解后釋放藥物，所以不必采用脂質(zhì)體這種方法，D正確。故選B。9．(2022·山東省實驗中學(xué)模擬預(yù)測)我國科研人員利用大鼠、小鼠兩個遠緣物種創(chuàng)造出世界首例異種雜合二倍體ES細胞(AdESCs)，具體流程見下圖。下列敘述錯誤的是(

)A．單倍體囊胚2的獲得用到了核移植、早期胚胎培養(yǎng)等技術(shù)B．動物細胞融合技術(shù)克服了小鼠和大鼠的精卵融合后無法發(fā)育的生殖隔離障礙C．圖中的單倍體ES細胞應(yīng)取自囊胚的內(nèi)細胞團D．AdESCs的染色體組數(shù)與大鼠—小鼠體細胞融合的雜種細胞相同[答案]D．[解析]A、由圖可知，單倍體囊胚2的獲得過程中，先取大鼠的精子移植到去核的卵母細胞中，然后再對移植后的細胞進行早期胚胎培養(yǎng)，此過程涉及到核移植技術(shù)和早期胚胎培養(yǎng)等技術(shù)，A正確；B、大鼠和小鼠屬于不同的物種，存在生殖隔離，因此自然情況下小鼠和大鼠間的配子往往無法完成受精作用，或者即便能完成也不能發(fā)育，但用動物細胞融合技術(shù)，可誘導(dǎo)形成異源二倍體ES細胞，克服了小鼠和大鼠的精卵融合后無法發(fā)育的生殖隔離障礙，B正確；C、囊胚階段開始出現(xiàn)細胞分化，分化為滋養(yǎng)層和內(nèi)細胞團，但內(nèi)細胞團細胞仍具有全能性，可分化為各種組織和器官，所以圖中的單倍體ES細胞應(yīng)取自囊胚的內(nèi)細胞團，C正確；D、AdESCs是“雜合二倍體胚胎干細胞”，故體內(nèi)有2個染色體組，但小鼠-大鼠體細胞融合的雜種細胞，含有小鼠的2個染色體組和大鼠的2個染色體組，因此雜種細胞中通常含有4個染色體組，屬于異源4倍體細胞，兩者染色體組數(shù)不同，D錯誤。故選D。10．(2022·山東日照·三模)IRTI基因被稱為長壽基因，SIRT1蛋白對于延緩內(nèi)皮細胞衰老，改善因衰老而引起的內(nèi)皮細胞功能障礙方面具有重要作用?？茖W(xué)家研究白藜蘆醇對人內(nèi)皮細胞衰老凋亡、SIRTI基因的影響的部分實驗結(jié)果如下圖，其中P1~P35是指體外培養(yǎng)的人內(nèi)皮細胞的傳代次數(shù)。下列敘述正確的是()A．人內(nèi)皮細胞傳代培養(yǎng)時，需使用胃蛋白酶處理貼壁生長的內(nèi)皮細胞B．隨著傳代次數(shù)增加，人內(nèi)皮細胞內(nèi)端粒變短，SIRT1表達水平降低C．對照組應(yīng)使用等量清水處理人內(nèi)皮細胞，溫度等與實驗組保持一致D．適宜濃度的白藜蘆醇可以提高體外培養(yǎng)的內(nèi)皮細胞的凋亡率[答案]B．[解析]A、人內(nèi)皮細胞傳代培養(yǎng)時，需使用胰蛋白酶處理貼壁生長的內(nèi)皮細胞，使其分散，胃蛋白酶需要在酸性條件下發(fā)揮作用，而該條件下會導(dǎo)致細胞死亡，因而不能用胃蛋白酶分散細胞，A錯誤；B、細胞衰老的假說之一是端粒學(xué)說，隨傳代次數(shù)增加，人內(nèi)皮細胞內(nèi)染色體的端粒變短，SIRT1表達水平降低，B正確；C、對照組應(yīng)使用等量生理鹽水處理人內(nèi)皮細胞，溫度等無關(guān)變量與實驗組保持一致，C錯誤；D、結(jié)合圖1和2可知，SIRT1基因表達水平高時，細胞凋亡率低，由圖3可知，干預(yù)組的細胞內(nèi)SIRT1基因表達水平升高，說明適當濃度的白藜蘆醇可以降低體外培養(yǎng)的內(nèi)皮細胞的凋亡率，D正確。故選B。11．(2022·北京·人大附中三模)假設(shè)世界上最后一頭野驢剛死亡，以下使它“復(fù)生”的方案中最可行的是(

)A．將野驢的每個基因逐個導(dǎo)入家驢的受精卵中，培育出新個體B．將野驢的體細胞與家驢的去核卵母細胞融合，經(jīng)孕育培育出新個體C．將野驢的體細胞與骨髓瘤細胞融合，經(jīng)動物細胞培養(yǎng)培育出新個體D．將野驢的胚胎干細胞取出，通過胚胎移植等技術(shù)培育出新個體[答案]B．[解析]A、將野驢的每個基因逐個導(dǎo)入家驢的受精卵中，培育出新個體，因為受精卵中有家驢的遺傳物質(zhì)，因此并不是野驢的復(fù)原，況且工程太大，可行性太差，A錯誤；B、將野驢的體細胞核移植到雌性家驢的去核卵細胞中形成重組細胞，通過早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)獲得早期胚胎，而后經(jīng)過胚胎移植實現(xiàn)野驢的復(fù)生，該思路可行性強，B正確；C、由于動物細胞的全能性受到限制，目前動物細胞融合技術(shù)還不能產(chǎn)生生物體，況且野驢的體細胞與骨髓瘤細胞融合形成的雜交瘤細胞培育出的新個體中的遺傳物質(zhì)并不是主要來自野驢，可行性差，C錯誤；D、最后一頭野驢的存在是無法提供胚胎干細胞的，不可行，D錯誤。故選B。12．(2022·山東·日照一中模擬預(yù)測)HEK293細胞是人工改造后的人胚腎細胞，為細胞系細胞，具有貼壁生長的特性。分瓶時，一瓶細胞可分到幾瓶中培養(yǎng)，這個瓶數(shù)稱為分瓶比，分瓶數(shù)越多，分瓶比越大。下列關(guān)于HEK293細胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是(

)A．在HEK293細胞培養(yǎng)液中加入血清可補充蛋白質(zhì)和生長因子B．HEK293細胞的培養(yǎng)需要95%空氣和5%CO2的氣體環(huán)境C．分瓶前應(yīng)用胰蛋白酶處理貼壁生長的HEK293細胞D．分瓶比越大，HEK293細胞分瓶換液的周期越短[答案]D．[解析]A、血清中含有蛋白質(zhì)和生長因子，能促進細胞增殖過程，A正確；B、動物細胞培養(yǎng)時氣體環(huán)境為95％空氣和5％CO2，后者能起到維持培養(yǎng)液pH的作用，B正確；C、分瓶前需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的細胞，用于制作單細胞懸液，C正確；D、分瓶比越大，瓶中的細胞密度越低，形成緊密單層細胞的周期變長，細胞分瓶換液的周期越長，D錯誤。故選D。13．(2022·遼寧·東北育才雙語學(xué)校模擬預(yù)測)1975年，英國科學(xué)家米爾斯坦和德國科學(xué)家科勒在前人工作的基礎(chǔ)上，充分發(fā)揮想象力，設(shè)計了一個極富創(chuàng)造性的實驗方案—得到了單克隆抗體，并因此于1984年獲得了諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。下列關(guān)于單克隆抗體的說法中錯誤的是(

)A．在單克隆抗體的制備過程中，采用了動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合等技術(shù)B．將單克隆抗體與細胞毒素結(jié)合，可實現(xiàn)對腫瘤細胞的選擇性殺傷C．誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法也可用于誘導(dǎo)骨髓瘤細胞和B淋巴細胞的融合D．單克隆抗體可進入細胞內(nèi)，與病原體特異性結(jié)合，從而到達治療疾病的目的[答案]D．[解析]A、在單克隆抗體的制備過程中，采用了動物細胞培養(yǎng)(雜交瘤細胞的培養(yǎng))、動物細胞融合(B細胞和骨髓瘤細胞的融合)等技術(shù)，A正確；B、單克隆抗體具有導(dǎo)向作用，將單克隆抗體與細胞毒素結(jié)合，可實現(xiàn)對腫瘤細胞的選擇性殺傷，B正確；C、聚乙二醇、電刺激等方法，可以誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，也可以誘導(dǎo)骨髓瘤細胞和B淋巴細胞的融合，C正確；D、單克隆抗體與細胞膜表面的受體結(jié)合，不會進入細胞，D錯誤。故選D。14．(2022·山東淄博·三模)利用某種病毒的S蛋白可制備S蛋白的單克隆抗體，下列說法錯誤的是(

)A．將S蛋白注射小鼠后，S蛋白會激發(fā)小鼠產(chǎn)生免疫應(yīng)答B(yǎng)．聚乙二醇或電激可促進骨髓瘤細胞和已免疫B細胞融合C．可用熒光物質(zhì)標記的S蛋白抗體對A細胞進行專一性抗體檢測D．可以利用S蛋白單克隆抗體檢測人體內(nèi)是否含有該病毒[答案]C．[解析]A、S蛋白屬于抗原，將S蛋白注射小鼠后，S蛋白會激發(fā)小鼠產(chǎn)生免疫應(yīng)答，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體和記憶細胞，A正確；B、促進動物細胞融合的方法有聚乙二醇或電激，也可用滅活的病毒，B正確；C、A細胞產(chǎn)生多種抗體，應(yīng)該用熒光物質(zhì)標記的S蛋白抗原對A細胞進行專一性抗體檢測，C錯誤；D、根據(jù)抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，可以利用S蛋白單克隆抗體檢測人體內(nèi)是否含有該病毒，D正確。故選C。15．(2022·山東煙臺·三模)新冠病毒表面的刺突蛋白可特異性結(jié)合宿主細胞上的受體CD147，從而介導(dǎo)新冠病毒入侵宿主細胞。單克隆抗體可結(jié)合刺突蛋白，阻斷刺突蛋白與CD147結(jié)合，阻止病毒繼續(xù)感染新的細胞。下列敘述錯誤的是(

)A．單克隆抗體的制備過程至少需要兩次篩選，篩選的方法不同、目的相同B．克隆化培養(yǎng)用刺突蛋白篩選出的雜交瘤細胞可獲得單克隆抗體C．給重癥新冠肺炎患者注射針對刺突蛋白的單克隆抗體是一種有效的治療手段D．參與構(gòu)成抗體-藥物偶聯(lián)物的單克隆抗體可特異性識別抗原起導(dǎo)向作用[答案]A．[解析]A、單克隆抗體的制備至少需要兩次篩選，且篩選的目的不同。第一次篩選是用選擇培養(yǎng)基，得到雜交瘤細胞(去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞)；第二次篩選是用抗原抗體雜交的原理，篩選出能夠產(chǎn)生所需抗體的細胞群，因此兩次篩選的方法和目的都不同，A錯誤；B、刺突蛋白為新冠病毒表面的抗原，能與相應(yīng)抗體發(fā)生特異性結(jié)合，因此克隆化培養(yǎng)用刺突蛋白篩選出的雜交瘤細胞即為能大量增殖又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞，可產(chǎn)生單克隆抗體，B正確；C、給重癥新冠肺炎患者注射針對刺突蛋白的單克隆抗體后，單克隆抗體可與刺突蛋白結(jié)合，進而阻止新冠病毒表面的刺突蛋白與宿主細胞上的受體CD147特異性結(jié)合，從而抑制新冠病毒入侵宿主細胞，因此是一種有效的治療手段，C正確；D、抗體與抗原能特異性結(jié)合，因此參與構(gòu)成抗體-藥物偶聯(lián)物的單克隆抗體可特異性識別抗原起導(dǎo)向作用，D正確。故選A。16．(2022·遼寧沈陽·二模)目前已有多種抗腫瘤單克隆抗體藥物在我國上市，抗腫瘤單克隆抗體以其顯著的療效和良好的耐受性在臨床上得到廣泛應(yīng)用，很多惡性腫瘤患者已從中獲益。下列有關(guān)單克隆抗體制備過程的描述錯誤的是(

)A．單克隆抗體制備過程需要應(yīng)用選擇培養(yǎng)基B．單克隆抗體的制備過程包括動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)兩個過程C．雜交瘤細胞需具備大量增殖和分泌多種抗體的能力D．單克隆抗體除應(yīng)用于抗腫瘤藥物方面，還可應(yīng)用于腫瘤診斷[答案]C．[解析]A、單克隆抗體的制備需要用選擇培養(yǎng)基，第一次篩選的目的是從混合的細胞群中選擇出雜交瘤細胞，而第二次篩選的目的是從雜交瘤細胞中，選擇出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞，A正確；B、單克隆抗體的制備過程包括動物細胞融合(B細胞和骨髓瘤細胞融合)和動物細胞培養(yǎng)兩個過程，B正確；C、雜交瘤細胞需具備大量增殖和分泌單一抗體的能力，C錯誤；D、單克隆抗體除應(yīng)用于抗腫瘤藥物方面，還可應(yīng)用于腫瘤診斷，D正確。故選C。17．(2022·山東·三模)人乳頭瘤病毒(HPV)感染是誘發(fā)宮頸癌的重要因素。HPV具有多種類型，其中的HPV16和HPV18屬于高危型，可引起宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)高度病變?，F(xiàn)對某就診者的取樣細胞進行培養(yǎng)，來進行確診。下列說法不正確的是(

)A．分散取樣的細胞只能采用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理B．培養(yǎng)取樣細胞時，需要為這些細胞提供充足的營養(yǎng)條件、穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境等C．讓取樣細胞進行貼壁生長，若產(chǎn)生了接觸抑制現(xiàn)象，則不屬于HPV高危型D．無論是原代培養(yǎng)還是傳代培養(yǎng)，都需將培養(yǎng)瓶放在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)[答案]A．[解析]A、取樣的細胞還可采用機械的方法將組織分散成單個細胞，A錯誤；B、培養(yǎng)取樣細胞時，需要為這些細胞提供充足的營養(yǎng)條件、穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境等，B正確；C、若被HPV感染成為癌細胞，則不會出現(xiàn)接觸性抑制現(xiàn)象，因此若出現(xiàn)接觸性抑制時，則可確定不屬于HPV高危型，C正確；D、CO2培養(yǎng)箱中含有95%空氣和5%CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，因此，進行細胞培養(yǎng)時，都需用到CO2培養(yǎng)箱，D正確。故選A。18．(2022·山東·煙臺二中模擬預(yù)測)許多研究表明腫瘤細胞具有高度的可塑性，它可通過調(diào)控自身的基因表達來逃避靶向藥物的攻擊。進一步的研究表明，細胞膜上過表達CLDN6基因可顯著增強腫瘤細胞的成瘤性。CLDN6(蛋白)可誘導(dǎo)某些轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子進入細胞核，進而激活下游相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。CLDN6基因在大多數(shù)正常組織中不表達。下列說法正確的是(

)A．腫瘤細胞的成因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生重新組合B．轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子通過核孔進入細胞核，促進DNA聚合酶與啟動子結(jié)合C．大多數(shù)正常組織中CLDN6基因發(fā)生突變，故而不表達D．可制備針對CLDN6的單克隆抗體攜帶藥物靶向殺傷腫瘤細胞[答案]D．[解析]A、腫瘤細胞的成因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變，A錯誤；B、轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板合成RNA的過程，該過程中，轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子通過核孔進入細胞核，促進RNA聚合酶與啟動子結(jié)合，B錯誤；C、由題意“CLDN6基因在大多數(shù)正常組織中不表達”可知，正常組織中的該基因不表達，屬于正常表達調(diào)控，不一定是發(fā)生突變，C錯誤；D、由題干“細胞膜上過表達CLDN6基因可顯著增強腫瘤細胞的成瘤性”可知，可制備針對CLDN6的單克隆抗體攜帶藥物靶向殺傷腫瘤細胞，D正確。故選D。19．(2022·江蘇常州·模擬預(yù)測)如圖為單克隆抗體制備的基本流程，①～⑤分別代表不同的操作過程。下列相關(guān)敘述錯誤的是(

)A．小鼠受抗原刺激后能從小鼠脾臟中獲得已免疫的多種B淋巴細胞B．圖示①過程可采用電激、離心、振動等物理方法促進動物細胞融合C．②③過程篩選并獲得產(chǎn)特定抗體的雜交瘤細胞的過程中無需克隆化培養(yǎng)D．⑤過程培養(yǎng)液中的細胞不會出現(xiàn)細胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象[答案]C．[解析]A、小鼠受抗原刺激后，體內(nèi)會形成相應(yīng)的B淋巴細胞，B淋巴細胞能分泌抗體，在免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類可多達百萬種以上，但是每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體，所以小鼠受抗原刺激后能從小鼠脾臟中獲得已免疫的多種B淋巴細胞，A正確；B、分析圖可知，圖中①表示動物細胞融合過程，可采用電激、離心、振動等物理方法促進動物細胞融合，B正確；C、分析圖可知，②表示篩選雜交瘤細胞，③表示篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，②③過程篩選并獲得產(chǎn)特定抗體的雜交瘤細胞的過程中需克隆化培養(yǎng)，C錯誤；D、培養(yǎng)正常細胞時會出現(xiàn)貼壁生長和接觸抑制的現(xiàn)象，但瘤細胞由于細胞膜表面糖蛋白減少細胞間黏著性降低，因此不會出現(xiàn)細胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象，D正確。故選C。20．(2022·湖北武漢·模擬預(yù)測)我國科學(xué)家將小鼠孤雌單倍體胚胎干細胞和大鼠孤雄單倍體胚胎干細胞進行融合，獲得異種雜合二倍體胚胎干細胞(AdESCs)，并通過胚胎移植產(chǎn)生全為雌性個體的子代，技術(shù)路線如下圖。下列分析正確的是(

)A．單倍體胚胎干細胞可來自于單倍體囊胚中的任何一個細胞B．體外培養(yǎng)AdESCs時需在培養(yǎng)液中添加動物血清和干擾素等C．子代全為雌性的原因可能是含Y染色體的胚胎干細胞致死D．實驗結(jié)果說明了小鼠與大鼠之間不存在生殖隔離[答案]C．[解析]A、單倍體胚胎干細胞可來自于單倍體囊胚中的內(nèi)細胞團細胞，但不能來自囊胚中的滋養(yǎng)層細胞，A錯誤；B、體外培養(yǎng)AdESCs時需向培養(yǎng)液中添加動物血清等天然物質(zhì)，以滿足動物細胞對特殊營養(yǎng)物質(zhì)的需求，但是不需要加入干擾素，B錯誤；C、根據(jù)題意，子代實際為精子和卵細胞的融合體，可能為XX，也可能為XY，子代全為雌性可能原因是含Y染色體的胚胎胞致死，C正確；D、生殖隔離是指兩個類群之間在自然條件下不交配，或者即使能交配也不能產(chǎn)生后代或不能產(chǎn)生可育性后代，題中所述技術(shù)不能說明大鼠和小鼠之間不存在生殖隔離，D錯誤。故選C。21．(2022·湖北·模擬預(yù)測)人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，下列敘述錯誤的是(

)A．制備抗HCG單克隆抗體的動物細胞工程技術(shù)有動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合B．將純化HCG注入小鼠是為了從產(chǎn)生免疫反應(yīng)小鼠的脾臟中獲得相應(yīng)的B淋巴細胞C．圖中利用HAT培養(yǎng)液具有選擇作用，讓能合成抗HCG抗體的細胞大量增殖D．腹水中制備抗HCG單克隆抗體時，需要注射免疫抑制劑，使小鼠易于接納雜交瘤細胞[答案]C．[解析]A、制備單克隆抗體過程中要用到動物細胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)B淋巴細胞、骨髓瘤細胞和雜交瘤細胞，動物細胞融合技術(shù)將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞，A正確；B、在制備單克隆抗體過程中，首先要將純化HCG注入小鼠體內(nèi)，其目的是從產(chǎn)生免疫反應(yīng)小鼠的脾臟中獲得能產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞，B正確；C、圖中利用HAT培養(yǎng)液目的是篩選出雜交瘤細胞，但篩選的雜交瘤細胞不一定能產(chǎn)生抗HCG抗體，C錯誤；D、可將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從小鼠腹水中制備抗HCG單克隆抗體，此過程需要注射免疫抑制劑，降低小鼠的免疫能力，使小鼠易于接納雜交瘤細胞，D正確。故選C。22．(2022·遼寧·模擬預(yù)測)Vero細胞是從非洲綠猴腎臟上皮細胞分離而來，能連續(xù)分裂，因基因缺陷，不能產(chǎn)生干擾素，易于病毒感染，常用于病毒疫苗制備中病毒的擴增培養(yǎng)。如圖是某種病毒疫苗的制備流程。下列相關(guān)敘述中錯誤的是(

)A．培養(yǎng)Vero細胞的培養(yǎng)箱中需要充入95%的空氣和5%的CO2B．培養(yǎng)Vero細胞的合成培養(yǎng)基中需要加入血清等天然成分C．過程①傳代培養(yǎng)時，可用胰蛋白酶處理貼壁生長的細胞D．過程②中Vero細胞為病毒的復(fù)制提供模板和原材料[答案]D．[解析]A、動物細胞培養(yǎng)的過程中需要控制培養(yǎng)箱中的氣體條件為95%空氣+5%CO2，其中CO2起到維持培養(yǎng)液的pH的作用，A正確；B、培養(yǎng)動物細胞的合成培養(yǎng)基中需要加入血清等天然成分，這是因為動物細胞培養(yǎng)的條件并不完全清楚，B正確；C、動物細胞培養(yǎng)時，有貼壁生長的現(xiàn)象，進行傳代培養(yǎng)時，需要用胰蛋白酶處理細胞，使其游離制成懸濁液，便于傳代培養(yǎng)，C正確；D、用動物細胞培養(yǎng)病毒時，病毒提供了復(fù)制的核酸模板，而細胞提供了原材料——核苷酸、氨基酸和相關(guān)的酶等，D錯誤。故選D。23．(2022·山東·模擬預(yù)測)為制備抗犬冠狀病毒(CCV，RNA病毒)特異性單克隆抗體，以滅活的CCV為抗原免疫小鼠4次，將提取的小鼠B淋巴細胞與骨髓瘤細胞用聚乙二醇誘導(dǎo)細胞融合，通過兩次篩選獲得抗體陽性的雜交瘤細胞，經(jīng)克隆化培養(yǎng)，獲得穩(wěn)定分泌抗CCV單克隆抗體的雜交瘤細胞。下列敘述正確的是(

)A．免疫小鼠4次的目的是增加小鼠體內(nèi)的單克隆抗體的量B．實驗中使用的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞在單獨培養(yǎng)時均會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象C．誘導(dǎo)后需進行兩次篩選，第一次篩選的目的是篩選出既能無限增殖又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞D．利用CCV對雜交瘤細胞進行抗體檢測可獲得分泌特定抗體的雜交瘤細胞[答案]D．[解析]A、免疫小鼠4次的目的是通過多次免疫，讓小鼠的體內(nèi)能夠得到更多的能產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞，A錯誤；B、骨髓瘤細胞在單獨培養(yǎng)時不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，B錯誤；C、誘導(dǎo)后需進行多次篩選，第一次篩選的目的是篩選出融合的雜交瘤細胞，并不能篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞，C錯誤；D、抗原能和抗體特異性結(jié)合，所以利用CCV對雜交瘤細胞進行抗體檢測可獲得分泌特定抗體的雜交瘤細胞，D正確。故選D。24．(2022·浙江紹興·二模)為研制抗冠狀病毒A的單克隆抗體，研究人員以小鼠甲為實驗材料設(shè)計了以下實驗流程。下列有關(guān)敘述中正確的是(

)A．須通過鼻噴冠狀病毒A誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生相應(yīng)的效應(yīng)B細胞B．制備單細胞懸液必須使用胰酶消化小鼠甲的脾組織C．B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合不可采用聚乙二醇介導(dǎo)的方法D．篩選2依據(jù)了抗原與抗體的特異性反應(yīng)原理，需要進行多次[答案]D．[解析]A、研制抗冠狀病毒A的單克隆抗體，可以將噴冠狀病毒A的抗原注射至小鼠內(nèi)，誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生相應(yīng)的效應(yīng)B細胞，A錯誤；B、制備單細胞懸液可以使用胰酶或膠原蛋白酶消化小鼠甲的脾組織，B錯誤；C、B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合可采用聚乙二醇介導(dǎo)、電刺激、滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)等方法，C錯誤；D、篩選2是使用特定的抗原(抗原決定簇)進行篩選，依據(jù)了抗原與抗體的特異性反應(yīng)原理，需要進行多次才能獲得能產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞，D正確。故選D。25．(2022·山東·肥城市教學(xué)研究中心模擬預(yù)測)肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞高1.6~5倍，導(dǎo)致巨噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱。CD47作為一種跨膜糖蛋白。它可與巨噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細胞的吞噬作用。為證明抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，科學(xué)家按照如下流程進行了實驗。下列敘述不正確的是(

)A．多次進行步驟①的目的是獲得更多分泌抗CD47抗體的漿細胞B．步驟②中可以利用聚乙二醇或滅活的病毒誘導(dǎo)完成細胞融合C．對照組應(yīng)在巨噬細胞＋正常細胞共培養(yǎng)體系中加入單克隆抗體D．經(jīng)篩選可得到既能產(chǎn)生抗CD47的抗體又能無限增殖的雜交瘤細胞[答案]C．[解析]A、步驟①是向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，多次進行步驟①的目的是獲得更多分泌抗CD47抗體的漿細胞，A正確；B、步驟②將脾臟中的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，該過程可以用聚乙二醇或滅活的病毒誘導(dǎo)完成細胞融合，B正確；C、根據(jù)單一變量原則可知，應(yīng)設(shè)置不加單克隆抗體的巨噬細胞+腫瘤細胞的共培養(yǎng)體系為對照，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，沒有抗體抑制，CD47對巨噬細胞有抑制作用，對照組中吞噬細胞的吞噬指數(shù)顯著低于實驗組可驗證上述推測，C錯誤；D、經(jīng)選擇培養(yǎng)基和陽性檢測篩選后可得到既能產(chǎn)生抗CD47的抗體又能無限增殖的雜交瘤細胞，D正確。故選C。26．(2022·江蘇泰州·三模)我省研究人員利用體細胞核移植技術(shù)成功培育出蘇淮豬“龍鳳胎”，主要步驟如下。相關(guān)敘述錯誤的是(

)步驟①：分離培養(yǎng)一對蘇淮豬的耳組織體細胞，低溫保存。步驟②：從其他品種母豬卵巢中獲取卵母細胞并培養(yǎng)。步驟④：將不同性別的多個胚胎移植到代孕母豬體內(nèi)。步驟⑤：孕育出蘇淮小豬“龍鳳胎”。A．步驟①分離獲取蘇淮豬耳組織體細胞時需要使用胰蛋白酶、動物細胞培養(yǎng)液等B．步驟②培養(yǎng)卵母細胞時，應(yīng)一直培養(yǎng)到卵母細胞外出現(xiàn)1個極體C．步驟③可將步驟①獲得的體細胞直接顯微注射到培養(yǎng)成熟的卵母細胞中D．步驟④移植胚胎的性別可依據(jù)步驟①提供體細胞個體的性別確定[答案]C．[解析]A、步驟①分離獲取蘇淮豬耳組織體細胞時需要使用胰蛋白酶處理目的是獲得單細胞懸液，也需要動物細胞培養(yǎng)液等，以保持細胞的活性，A正確；B、步驟②培養(yǎng)卵母細胞時，應(yīng)培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，因為此時卵母細胞具有受精能力，且卵母細胞外存在一個極體，B正確；C、步驟③可將步驟①獲得的體細胞直接顯微注射到培養(yǎng)成熟的去核卵母細胞中，C錯誤；D、步驟④移植胚胎的性別由步驟①中提供體細胞個體的性別確定，因此，可依據(jù)步驟①提供體細胞個體的性別來確定胚胎的性別，D正確。故選C。27．(2022·山東菏澤·二模)如圖是科研人員將藥物與單克隆抗體連接形成的抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)的示意圖，它由抗體、接頭和小分子藥物三部分組成，能實現(xiàn)對腫瘤細胞的選擇性殺傷。例如用于治療乳腺癌的Kadcyla是由阿多曲妥珠單抗和藥物美坦新偶聯(lián)的ADC。下列敘述正確的是(

)A．Kadcyla的制備過程需要使用Taq酶B．單克隆抗體由免疫過的B淋巴細胞以胞吐方式釋放C．藥物美坦新識別并殺傷乳腺癌細胞體現(xiàn)了抗原—抗體的特異性結(jié)合D．ADC中接頭穩(wěn)定性偏低會導(dǎo)致藥物分子容易脫落對正常細胞造成損傷[答案]D．[解析]A、PCR過程中要使用到Taq酶，單克隆抗體制備過程包括細胞融合和細胞培養(yǎng)，該過程中不需要使用Taq酶，A錯誤；B、單克隆抗體由免疫過的B淋巴細胞(漿細胞)與瘤細胞形成的雜交瘤細胞合成并分泌，分泌過程為胞吐過程，B錯誤；C、藥物美坦新并不具有識別作用，單克隆抗體才具有識別作用，C錯誤；D、由圖可知，ADC中接頭的作用是連接藥物分子，其穩(wěn)定性偏低可能會導(dǎo)致藥物分子脫落，進而與正常細胞接觸，造成正常細胞的損傷，D正確。故選D。28．(2022·四川·攀枝花教科所一模)2020年5月，中國科研團隊發(fā)現(xiàn)了可有效阻斷新冠病毒(SARS–CoV–2)感染的單克隆抗體，可用于抗新冠藥物和疫苗的研發(fā)。該單克隆抗體如注射進入人體，將搶先與新冠病毒的刺突蛋白(S蛋白)結(jié)合，使病毒無法感染人體細胞，從而被免疫系統(tǒng)清除。如圖是單克隆抗體制備過程示意圖，1–6代表相關(guān)過程，a–e代表相關(guān)細胞。請據(jù)圖回答下列問題：(1)生產(chǎn)單克隆抗體一般不宜直接培養(yǎng)免疫過的B淋巴細胞，主要原因是_______；通過過程5或6生產(chǎn)的單克隆抗體的優(yōu)點是_______。(2)過程1是_______，目的是刺激小鼠產(chǎn)生能分泌相應(yīng)抗體的B淋巴細胞，過程2的培養(yǎng)基中除具有圖示三種細胞外，還應(yīng)該有_______。(3)e細胞是_______，其優(yōu)點是_______。(4)與動物細胞融合相比，植物細胞在融合前需用_______處理掉細胞壁，融合完成的標志是_______。[答案](1)

B淋巴細胞不能無限增殖

特異性強、靈敏度高，可大量制備(2)

多次給小鼠注射純化后的S蛋白

B淋巴細胞和骨髓瘤細胞(3)

雜交瘤細胞

既能大量增殖又能產(chǎn)生單一抗體(4)

纖維素酶和果膠酶

雜種細胞產(chǎn)生新的細胞壁[解析](1)生產(chǎn)單克隆抗體，一般不直接培養(yǎng)免疫過的B淋巴細胞，主要原因是B淋巴細胞不能無限增殖，可選用骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合，從而使融合后的雜交瘤細胞既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一性的抗體；從細胞培養(yǎng)液和小鼠腹水中可大量獲得特異性強、靈敏度高的抗體(2)為了刺激小鼠能分泌相應(yīng)抗體的B淋巴細胞，多次給小鼠注射特定的抗原(純化后的S蛋白)；過程2是將細胞融合，除產(chǎn)生圖示三種細胞外，還應(yīng)該有未融合的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞(3)e細胞既能迅速大量增殖又能產(chǎn)生專一性抗體，是經(jīng)過篩選后獲得的雜交瘤細胞。(4)植物細胞壁的組成成分是纖維素和果膠，所以在融合前需用纖維素酶和果膠酶處理掉細胞壁；雜種細胞產(chǎn)生新的細胞壁是融合完成的標志。29．(2022·青海·海東市第一中學(xué)模擬預(yù)測)研究發(fā)現(xiàn)，新冠病毒外殼中的S蛋白是關(guān)鍵抗原，可利用其制備單克隆抗體，制備流程如下圖。請回答有關(guān)問題：(1)單克隆抗體技術(shù)是建立在________________技術(shù)和________________技術(shù)的基礎(chǔ)之上的。(2)③和⑤過程，需要用到的工具酶是________________________。(3)體外培養(yǎng)細胞Y時，首先應(yīng)保證其處于____________的環(huán)境，其次還要適宜的溫度、pH、營養(yǎng)和氣體環(huán)境，這里的氣體環(huán)境是指____________________________________。(4)prG能激發(fā)細胞不斷分裂，通過基因工程導(dǎo)入prG可制備單克隆抗體。受體細胞X是__________________，細胞Y具有_________________________的特點。(5)單克隆抗體可用于診斷人體是否攜帶新冠病毒，其診斷原理是____________________。[答案](1)

(動物)細胞培養(yǎng)

(動物)細胞融合(2)限制酶和DNA連接酶(3)

無菌、無毒

95%空氣加5%二氧化碳的混合氣體(4)

能產(chǎn)生特定抗體的漿細胞

既能無限增殖又能產(chǎn)生專一性抗體(5)抗原—抗體雜交[解析](1)單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)。用到了(動物)細胞培養(yǎng)和(動物)細胞融合技術(shù)。(2)由題圖分析可知，③過程為用大腸桿菌構(gòu)建新冠病毒的基因組文庫，⑤過程表示獲取無限增殖的調(diào)控基因的基因表達載體，在這兩個過程中均需用到基因工程中的工具酶—限制酶和DNA連接酶。(3)由動物細胞培養(yǎng)的條件可知，體外培養(yǎng)動物細胞Y時，首先應(yīng)保證其處于無菌無毒的環(huán)境；其次還要適宜的溫度、pH、營養(yǎng)和氣體環(huán)境，這里的氣體環(huán)境指95%的空氣加5%二氧化碳的混合氣體。(4)prG為無限增殖調(diào)控基因，將其導(dǎo)入受體細胞X使得細胞Y具有無限增殖的能力，因此可知受體細胞X為能產(chǎn)生特定抗體的漿細胞；根據(jù)單克隆抗體制備的過程及對題圖的分析可知，細胞Y應(yīng)為類似于雜交瘤細胞，即細胞Y應(yīng)具有既能無限增殖又能產(chǎn)生專一的抗體的特點。(5)根據(jù)單克隆抗體的特異性，將其用于診斷人體是否攜帶新冠病毒時，依據(jù)抗原—抗體雜交原理即可進行檢測。若攜帶新冠病毒，則抗原-抗體雜交呈陽性。30．(2022·廣東·深圳市光明區(qū)高級中學(xué)模擬預(yù)測)2021年12月，我國首個抗新型冠狀病毒特效藥——安巴韋單抗／羅米司韋單抗聯(lián)合療法特效藥獲得中國藥監(jiān)局的上市批準，這標志著中國擁有的首個全自主研發(fā)并證明有效的抗新型冠狀病毒特效藥正式問世。安巴韋單抗／羅米司韋單抗聯(lián)合療法，主要作用以治療為主，臨床實驗數(shù)據(jù)顯示，該特效藥能夠顯著降低高風險新型冠狀病毒門診患者的住院率和死亡率，這為新冠患者提供了更長的治療窗口期?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題：(1)安巴韋單抗／羅米司韋單抗聯(lián)合療法特效藥可以直接與新型冠狀病毒結(jié)合，從而抑制___________，使患者快速恢復(fù)。(2)目前我國各地在推行第三針加強針的新冠疫苗接種工作，接種加強針能夠更有效預(yù)防新型冠狀病毒的感染，其原因是___________________。(3)利用小鼠制備的單克隆抗體藥物在臨床上不能直接用于人體，還需要對抗體進行人源化，即對鼠源單克隆抗體進行改造，使其大部分氨基酸序列為人源序列所替代，這樣做的原因是_____________________。(4)科學(xué)家從某些無限增殖細胞的細胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)動物細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。除利用細胞融合技術(shù)外，請簡要寫出另外兩個制備單克隆抗體的思路：_____________________。[答案](1)病毒的繁殖和對人體細胞的黏附##病毒的繁殖(2)接種加強針后人體內(nèi)可以產(chǎn)生更多的抗體和記憶(B)細胞(3)鼠源單克隆抗體對人而言可能是異種抗原，經(jīng)人源化后能保留抗體的特異性，降低其異源性(4)思路1：通過基因工程將prG基因?qū)隑淋巴細胞(漿細胞)中思路2：通過細胞核移植技術(shù)將B淋巴細胞(漿細胞)的細胞核移植到去核的能無限增殖的細胞中[解析](1)病毒可引發(fā)機體的體液免疫和細胞免疫反應(yīng)，安巴韋單抗/羅米司韋單抗聯(lián)合療法特效藥可以直接與新型冠狀病毒結(jié)合，從而抑制病毒的繁殖或?qū)θ梭w細胞的黏附，使患者快速恢復(fù)。(2)接種加強針能夠更有效的預(yù)防新型冠狀病毒的感染，其原因是接種加強針后人體內(nèi)可以產(chǎn)生更多的抗體和記憶(B)細胞。(3)對抗體進行人源化，是為了防止人體對外源性蛋白產(chǎn)生免疫排斥，即由于鼠源單克隆抗體對人而言可能是異種抗原，故需經(jīng)人源化后能保留抗體的特異性，降低其異源性。(4)科學(xué)家從某些無限增殖細胞的細胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)動物細胞分裂，所以可通過基因工程將prG基因?qū)隑淋巴細胞(漿細胞)中或者將B淋巴細胞(漿細胞)的細胞核移植到去核的能無限增殖的細胞中，來制備單克隆抗體。31．(2022·上海金山·二模)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)T淋巴細胞中存在PD-1基因，所表達的PD-1蛋白分布于T淋巴細胞表面，能抑制T淋巴細胞增殖，促進T細胞凋亡；PD-L1蛋白分布于吞噬細胞表面，對T淋巴細胞增殖有影響。以小鼠為實驗對象，實驗結(jié)果如圖9所示(圖中PD-1-/-表示PD-1基因缺失小鼠；PD-1+/+表示攜帶該基因的正常小鼠；非特異性蛋白表示與PD-1不能結(jié)合的蛋白質(zhì))。(1)據(jù)圖實驗結(jié)果所示，對小鼠T淋巴細胞增殖能力有明顯影響的實驗組是___________(A/B/C/D)，該實驗組的實驗變量分別是___________。(2)圖中CD組對照表明：___________；AB組對照表明：___________。進一步研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細胞表面也表達PD-L1蛋白，且能與Ⅰ淋巴細胞表面PD-1特異性結(jié)合。為研究腫瘤細胞逃脫免疫監(jiān)視的機制，研究者將腫瘤細胞分別注射給具有PD-1基因的正常小鼠(WT)和PD-1基因缺失小鼠(PD-1-/-)，待小鼠長出腫瘤后切除、稱重并計數(shù)，實驗結(jié)果如圖10(a)(b)所示。(3)據(jù)圖可知，WT組的小鼠肝臟腫瘤細胞個數(shù)較PD-1基因缺失小鼠顯著_____________(增多/減少)，而T淋巴細胞數(shù)目顯著_____________(升高/下降)；根據(jù)2次實驗推測腫瘤細胞表面的PD-L1與T淋巴細胞表面的PD-1特異性結(jié)合，_____________(抑制/促進)T淋巴細胞的增殖，從而逃脫被T淋巴細胞的“追殺”。(4)理論上，利用單克隆抗體特異性強的優(yōu)勢，阻斷腫瘤細胞對T淋巴細胞的抑制作用，可通過制備___________抗體在臨床上應(yīng)用。A．PD-L1 B．PD-1 C．PD-1+/+ D．PD-1-/-[答案](1)

A

PD-L1蛋白和攜帶該基因(PD-1+/+)小鼠(2)

說明在PD-1基因缺失小鼠體內(nèi)，無論有無PD-L1蛋白，都無法抑制淋巴細胞的增殖

說明在攜帶該基因(PD-1+/+)的正常小鼠體內(nèi)，只有當PD-1和PD-L1同時存在，才能抑制T淋巴細胞的增殖(3)

增多

下降

抑制(4)AB[解析](1)據(jù)圖可知，A組的T細胞增殖能力隨著蛋白質(zhì)濃度增加減少的最多，因此對小鼠T淋巴細胞增殖能力有明顯影響的實驗組是A組。根據(jù)圖注說明可知，四組實驗的自變量為PD-L1蛋白和攜帶該基因(PD-1+/+)小鼠。(2)C和D曲線的實驗結(jié)果相差不多，是由于以PD-1基因缺失的小鼠為實驗材料(敲除PD-1基因后)，因細胞內(nèi)不能合成PD-1蛋白，所以不能出現(xiàn)PD-1與PD-L1蛋白特異性結(jié)合，因此無論有無PD-L1蛋白，都無法抑制淋巴細胞的增殖。A、B組為都攜帶該基因(PD-1+/+)的正常小鼠體內(nèi)，由于PD-1基因可表達形成PD-1蛋白，能出現(xiàn)PD-1與PD-L1蛋白特異性結(jié)合，導(dǎo)致A組T細胞增殖能力降低，即可說明在攜帶該基因(PD-1+/+)的正常小鼠體內(nèi)，只有當PD-1和PD-L1同時存在，才能抑制T淋巴細胞的增殖。(3)據(jù)圖(a)可知，WT組的小鼠肝臟腫瘤細胞個數(shù)較PD-1基因缺失小鼠顯著增多，據(jù)圖(b)可知，WT組的小鼠T淋巴細胞數(shù)目較PD-1基因缺失小鼠顯著下降。因此可知推測腫瘤細胞表面的PD-L1與T淋巴細胞表面的PD-1特異性結(jié)合，抑制T淋巴細胞的增殖，從而逃脫被T淋巴細胞的“追殺”，使腫瘤細胞數(shù)量增加。(4)利用單克隆抗體特異性強的優(yōu)勢，阻斷腫瘤細胞對T淋巴細胞的抑制作用，即阻止PD-1與PD-L1蛋白特異性結(jié)合，可通過制備PD-L1抗體或PD-1抗體，分別與PD-L1或PD-1特異性結(jié)合，從而阻止腫瘤細胞上的PD-L1蛋白與T淋巴細胞上的PD-1特異性結(jié)合，從而提高T淋巴細胞的功能。故選AB。32．(2022·天津·耀華中學(xué)二模)新冠病毒(SARS-CoV-2)是一種RNA病毒，病毒的刺突蛋白S是決定病毒入侵易感細胞的關(guān)鍵蛋白(圖1)，可與宿主細胞的病毒受體結(jié)合。快速準確的病毒檢測對疫情防控起著至關(guān)重要的作用。(1)由圖可知，新冠病毒通過_____方式入侵宿主細胞。(2)制備病毒滅活疫苗時，先培養(yǎng)能表達_____的細胞，再接入新冠病毒培養(yǎng)，對病毒進行滅活處理后制備疫苗。(3)目前檢測新冠病毒的方法主要有核酸檢測、抗原檢測和抗體檢測三大類。①核酸檢測：能夠早診斷、早隔離、早治療，防擴散。核酸檢測用鼻(咽)拭子采樣后，馬上將拭子投入病毒運送培養(yǎng)液中(含_____酶抑制劑，以保護樣本)。新冠病毒的核酸不能直接作為模板進行PCR擴增，必須先經(jīng)過_____過程成為DNA。②抗原檢測：該方法的免疫學(xué)原理是_____，需要借助動物細胞融合技術(shù)制備高特異性的_____?？乖瓩z測可在非實驗室的環(huán)境中較快完成，但靈敏度比核酸檢測差，是對現(xiàn)有核酸檢測方法的一種補充。③抗體檢測：該方法的原理如圖2所示。將稀釋的血樣滴加到試紙條的樣品墊上。結(jié)合墊上噴涂了膠體金(一種指示劑，聚集后呈紅色)標記的新冠病毒抗原，若血清樣本中含新冠病毒抗體，則二者形成復(fù)合物后繼續(xù)向前移動，被固定在檢測線(T線)上的鼠抗人IgG抗體攔截(注：IgG為血漿中的主要抗體類型)，進而聚集在T線上，產(chǎn)生紅色條帶；結(jié)合墊上噴涂的膠體金標記鼠IgG隨液體移動，被固定在質(zhì)控線(C線)上的羊抗鼠IgG抗體攔截，呈現(xiàn)紅色條帶，表明本次檢測有效。若待測血樣中含有新冠病毒抗體，即結(jié)果為陽性，則此過程中共發(fā)生了_____次抗原抗體結(jié)合。若結(jié)果為陰性，T線呈_____(填“無色”或“紅色”)，C線呈_____(填“無色”或“紅色”)。但抗體檢測呈陽性的人并不一定是患者，如感染過新冠病毒的痊愈者、_____。[答案](1)胞吞(2)ACE2受體(3)

RNA

逆轉(zhuǎn)錄

抗原與抗體特異性結(jié)合

單克隆抗體

3

無色

紅色

接種過新冠病毒疫苗者[解析](1)由圖可知，病毒的刺突蛋白S與易感細胞膜上的ACE2受體結(jié)合，通過胞吞的方式進入細胞。(2)由于新冠病毒需要通過刺突蛋白S與易感細胞膜上的ACE2受體結(jié)合才能進入宿主細胞內(nèi)增殖，因此制備病毒滅活疫苗時，應(yīng)先培養(yǎng)能表達ACE2受體的細胞，再接入新冠病毒培養(yǎng)。(3)①因為新冠病毒是RNA病毒，加入RNA酶抑制劑可防止病毒RNA被破壞，所以病毒運送培養(yǎng)液需含有RNA酶抑制劑。新冠病毒的遺傳物質(zhì)為RNA，而PCR擴增的是DNA，因此新冠病毒的RNA需要先逆轉(zhuǎn)錄形成DNA才能進行PCR擴增。②抗原檢測利用的是抗原和抗體能特異性結(jié)合的原理。該過程需要大量抗體，因此需要利用動物細胞融合技術(shù)生產(chǎn)高特異性的單克隆抗體。③根據(jù)題意，若檢測結(jié)果為陽性，則在結(jié)合墊(新冠病毒抗原和抗體結(jié)合)、T線(鼠抗人IgG抗體與新冠病毒抗原和抗體的復(fù)合物結(jié)合)與C線(鼠IgG與羊抗鼠IgG抗體結(jié)合)上發(fā)生共3次抗體和抗原特異性結(jié)合。若結(jié)果為陰性，說明血樣中無新型冠狀病毒特異性抗體，則無法形成膠體金標記的病毒抗原和抗體結(jié)合的復(fù)合物，無法與固定在T線上的鼠抗人IgG抗體結(jié)合，則T線不變色，為無色；而游離的膠體金標記的鼠IgG可與C線上固定的羊抗鼠IgG抗體結(jié)合，C線變紅。但抗體檢測呈陽性的人并不一定是患者，如感染過新冠病毒的痊愈者、接種過新冠病毒疫苗者，都因曾經(jīng)接觸過抗原刺激而產(chǎn)生了抗體。33．(2022·江蘇鹽城·三模)新冠病毒通過表面的S蛋白與靶細胞膜上的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)結(jié)合實現(xiàn)入侵，血清中新增的新冠病毒特異性抗體IgM和IgG可作為病原學(xué)診斷標準。圖1為病毒感染及發(fā)病流程，圖2為相關(guān)抗體含量的變化曲線。請回答下列問題：(1)對易地流動人員實行集中隔離不少于14天的理論依據(jù)是____________________。目前新冠病毒的檢測方法主要有核酸和抗體檢測，與抗體檢測相比，核酸檢測的優(yōu)點有_______