2025年中圖版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年中圖版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷554考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、哺乳動(dòng)物受精卵在卵裂期發(fā)生的變化是()A.細(xì)胞的數(shù)目增多，有機(jī)物含量大增B.細(xì)胞的總面積與總體積的比值逐漸增大C.每個(gè)細(xì)胞的DNA含量不斷增加，全能性增高D.逐漸出現(xiàn)了原腸腔，并有了胚層的分化2、下列敘述不正確的是（）A.啟動(dòng)子是處于DNA上一段重要的序列，是DNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)B.傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞C.癌細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D.早期胚胎發(fā)育過(guò)程中，在囊胚期就已經(jīng)發(fā)生細(xì)胞分化3、有3種限制酶對(duì)DNA分子的識(shí)別序列和剪切位點(diǎn)（圖中箭頭所示）依次為：限制酶1：﹣﹣↓GATC﹣﹣；限制酶2：﹣﹣CCGC↓GG﹣﹣；限制酶3：﹣﹣G↓GATCC﹣﹣。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.不同的限制酶有不同的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)B.限制酶2和限制酶3識(shí)別的序列都包含6個(gè)堿基對(duì)C.限制酶1和限制酶3剪出的黏性末端相同D.能夠識(shí)別和切割RNA分子的酶只有限制酶24、科學(xué)家從紅豆杉樹(shù)皮中分離出具有高抗癌活性的紫杉醇，為避免紅豆杉遭受掠奪式砍伐，同時(shí)獲得紫杉醇，某科研小組設(shè)計(jì)了如下圖所示的實(shí)驗(yàn)流程，并發(fā)現(xiàn)另有植物甲產(chǎn)生的物質(zhì)X可提高紫杉醇抗癌效果。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖紅豆杉植株可以保持其優(yōu)良的遺傳特性B.以紅豆杉莖尖分生組織為材料通過(guò)組織培養(yǎng)獲得的脫毒苗具有抗病毒的特點(diǎn)C.紫杉醇的工廠化生產(chǎn)主要是利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)使細(xì)胞增殖以獲得更多的紫杉醇D.欲獲得既能產(chǎn)生紫杉醇又能產(chǎn)生物質(zhì)X的植株，可利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“紅豆杉—植物甲”雜種植株5、植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖，下列有關(guān)敘述正確的是（）A.用藥劑對(duì)外植體消毒時(shí)，要兼顧消毒效果和植物的耐受性B.以同一植株不同部位細(xì)胞為材料培育出的植株基因型相同C.植物組織培養(yǎng)時(shí)使用的MS培養(yǎng)基中都需添加植物激素D.利用組織培養(yǎng)技術(shù)培育脫毒苗，獲得具有抗病毒的新品種6、“中中”和“華華”是兩只在我國(guó)出生的克隆獼猴，它們也是國(guó)際上首例利用體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得的非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物。如圖表示培育“中中”和“華華”的流程。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.圖示過(guò)程中利用的技術(shù)有核移植和干細(xì)胞移植技術(shù)等B.這兩只克隆獼猴是由同一受精卵發(fā)育而成的雙胞胎C.融合細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)等條件D.利用A猴的胚胎干細(xì)胞核移植獲得克隆獼猴的難度更大些7、下列有關(guān)哺乳動(dòng)物早期胚胎發(fā)育的敘述錯(cuò)誤的是（）A.在桑葚胚階段胚胎的內(nèi)部開(kāi)始出現(xiàn)含有液體的腔B.胚胎干細(xì)胞是一類(lèi)未分化的細(xì)胞，可以從早期胚胎中分離獲得C.桑葚胚之前細(xì)胞一般都具有全能性，囊胚的細(xì)胞逐漸分化D.受精卵早期分裂時(shí)，胚胎中細(xì)胞數(shù)目不斷增加，但胚胎的總體積并不增加8、為初步探究某動(dòng)物PHB2蛋白抑制人宮頸癌細(xì)胞增殖的原因，研究者從基因數(shù)據(jù)庫(kù)中獲取了該蛋白的基因編碼序列（簡(jiǎn)稱phb2基因），大小為0.9kb（1kb=1000堿基對(duì)），利用大腸桿菌表達(dá)該蛋白。圖1為所用載體圖譜示意圖，圖中限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)見(jiàn)下表，phb2基因序列不含圖1中限制酶的識(shí)別序列。轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌提取質(zhì)粒，再用選中的兩種限制酶進(jìn)行酶切，酶切產(chǎn)物經(jīng)電泳分離，結(jié)果如圖2．下列敘述錯(cuò)誤的是（）

相關(guān)限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)（注：箭頭表示切割位點(diǎn)）。名稱識(shí)別序列及切割位點(diǎn)名稱識(shí)別序列及切割位點(diǎn)HindⅢA↓AGCTTTTCGA↑AEcoRIG↓AATTCCTTAA↑GPvitⅡCAG↓CTGGTC↑GACPstIGA↑CGTCGA↑CGTCKpnⅠG↓GATCCCCATG↑GBamHIG↓GATCCCCTAG↑G

A.需設(shè)計(jì)特異性的引物通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增phb2基因B.為使phb2基因與載體正確連接，在擴(kuò)增的phb2基因兩端分別引入KpnⅠ和EcoRⅠ兩種不同限制酶的識(shí)別序列C.經(jīng)過(guò)兩種限制酶酶切的phb2基因與載體進(jìn)行連接時(shí)，可選用T4DNA連接酶D.圖2中3號(hào)的質(zhì)粒很可能是含目的基因的重組質(zhì)粒評(píng)卷人得分二、多選題(共5題，共10分)9、下列關(guān)于單克隆抗體的敘述中，正確的是（）A.制備單克隆抗體是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的應(yīng)用B.單克隆抗體特異性強(qiáng)、純度高、產(chǎn)量大、靈敏度高C.工業(yè)化制備單克隆抗體一般通過(guò)體內(nèi)培養(yǎng)獲得D.單克隆抗體是由骨髓瘤細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞形成的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的10、下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過(guò)程中都要用到胰蛋白酶C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株D.煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個(gè)體，小鼠雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)能得到細(xì)胞代謝產(chǎn)物11、玉米秸稈轉(zhuǎn)化為綠色能源酒精是解決能源危機(jī)的措施之一，具體的工藝流程如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.用酸或堿預(yù)處理有利于酶與底物充分接觸，提高催化效率B.步驟③中，酵母菌在發(fā)酵初期更多分布在發(fā)酵液的上層C.隨培養(yǎng)次數(shù)的增加，分離出的菌落類(lèi)型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定D.發(fā)酵過(guò)程中酒精濃度升高會(huì)抑制酵母菌代謝活動(dòng)，同時(shí)使發(fā)酵液pH降低，發(fā)酵停止12、下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的表述錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)環(huán)境中需要O2，不需要CO2B.細(xì)胞要經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織C.培養(yǎng)液通常含有糖類(lèi)，氨基酸，無(wú)機(jī)鹽，維生素和動(dòng)物血清D.培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)到一定階段后分瓶后才能繼續(xù)增殖13、下列關(guān)于微生物發(fā)酵的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.制備培養(yǎng)基過(guò)程中，需要在滅菌后進(jìn)行pH的調(diào)節(jié)B.制作果酒時(shí)適當(dāng)加大接種量可以提高發(fā)酵速率，抑制雜菌生長(zhǎng)C.現(xiàn)代發(fā)酵工程選育出性狀優(yōu)良的菌種后即可進(jìn)行發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵D.醋酸菌能將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜?，故夏天開(kāi)瓶后的紅酒容易變酸評(píng)卷人得分三、填空題(共5題，共10分)14、選用去核______的原因：卵（母）細(xì)胞______；卵（母）細(xì)胞______。15、禁止生物武器公約。

（1）1972年4月10日，蘇聯(lián)、美國(guó)、英國(guó)分別在其首都簽署了《禁止試制、生產(chǎn)和儲(chǔ)存并銷(xiāo)毀細(xì)菌（生物）和毒劑武器公約》（簡(jiǎn)稱_____）；并于1975年3月26日生效。1984年11月15日，我國(guó)也加入了這一公約。

（2）我國(guó)在任何情況下_____、_____、_____生物武器，并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散。16、本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有___________和___________發(fā)酵兩種。纖維素酶的測(cè)定方法，一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的__________進(jìn)行________的測(cè)定。17、我國(guó)中科院神經(jīng)科學(xué)研究所團(tuán)隊(duì)率先攻克了體細(xì)胞克隆靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物這一世界難題?他們首次成功培育出體細(xì)胞克隆猴，分別叫中中和華華（下圖）?猴子與人類(lèi)同屬靈長(zhǎng)類(lèi)，此前克隆靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物在技術(shù)上存在著不可逾越的障礙?克隆猴的誕生打破了這個(gè)障礙，也再次引起人們對(duì)于克隆人的擔(dān)憂和猜測(cè)?

從1997年宣布克隆羊多莉（上圖）的出生，到2018年克隆猴中中?華華的誕生，這期間一些科學(xué)家試圖克隆人?舉例說(shuō)出克隆人面臨哪些倫理問(wèn)題?_____18、首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了______，方法是采用______。評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共20分)19、［生物——選修1生物技術(shù)實(shí)踐］

某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基；滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題。

（1）培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了___________________和___________________。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有基本成分是___________________和___________________。

（2）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是___________________。

（3）為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于___________________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種___________________作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

（4）培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說(shuō)明湖水樣品中有___________________種細(xì)菌。一般說(shuō)來(lái)，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越___________________。

（5）如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐___________________細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為_(kāi)__________________。20、蘋(píng)果樹(shù)腐爛病是由黑腐皮殼菌引起的；是限制蘋(píng)果產(chǎn)量的重要因素之一。生產(chǎn)上主要以化學(xué)藥劑防治該病。為開(kāi)發(fā)生物防治途徑，科研人員擬從土壤中分離篩選出能抑制黑腐皮殼菌生長(zhǎng)的枯草芽孢桿菌，實(shí)驗(yàn)流程圖如圖1：

（1）①中木糖和硝酸鉀的作用分別是______________。

（2）②→③中梯度稀釋的目的是_____________________________________________。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培養(yǎng)基中水分過(guò)快蒸發(fā)之外，還有______________。

（4）現(xiàn)有經(jīng)純化后獲得的4個(gè)枯草芽孢桿菌品系，為探究哪個(gè)品系對(duì)黑腐皮殼菌的抑制效果更好，科研人員在如圖2平板中的A處接種黑腐皮殼菌，在距離A處等距離的B1～B4處分別接種等量的4個(gè)枯草芽孢桿菌品系，在適宜條件下培養(yǎng)3﹣5天后，通過(guò)觀察_________________________篩選出抑菌更好的枯草芽孢桿菌菌株。

圖2

（5）在利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)土樣中活菌的數(shù)目時(shí)，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在______________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。該方法所得結(jié)果往往比實(shí)際細(xì)菌的數(shù)目要少，原因是__________________________________。21、科學(xué)家的發(fā)現(xiàn)給人類(lèi)的生活帶來(lái)了無(wú)限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問(wèn)題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進(jìn)行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過(guò)_______________法接種到高氏一號(hào)（加數(shù)滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進(jìn)行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專(zhuān)一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過(guò)_________________鑒定。

(3)科學(xué)家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中。2~3周后，這些細(xì)胞顯示出ES細(xì)胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細(xì)胞。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請(qǐng)寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路______________22、微生物因具有體積??；易培養(yǎng)，繁殖快，且自身遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，經(jīng)人工處理或自然突變可獲得新性狀等特點(diǎn)，在發(fā)酵工程中應(yīng)用廣泛?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)大腸桿菌是發(fā)酵工程中應(yīng)用較為廣泛的菌種之一。培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至____性，再利用_________________法滅菌后進(jìn)行接種。

(2)在發(fā)酵工程中，常常需要對(duì)菌種數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。相對(duì)真菌來(lái)說(shuō)，細(xì)菌的體積較小，因此對(duì)細(xì)菌數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)時(shí)，適合使用_________________（填“細(xì)菌計(jì)數(shù)板”或“血細(xì)胞計(jì)數(shù)板”）進(jìn)行計(jì)數(shù)，且統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)目往往比實(shí)際活菌數(shù)目_________________（填“多”或“少”）。

(3)人工處理或自然突變往往會(huì)使菌種成為營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株；現(xiàn)欲設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后，可獲得組氨酸缺陷型突變菌株，請(qǐng)簡(jiǎn)單描述實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

實(shí)驗(yàn)思路：_____________________________；

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：_____________________________。評(píng)卷人得分五、綜合題(共4題，共28分)23、科學(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長(zhǎng)激素基因的奶牛；要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，可以對(duì)此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克?。ㄈ缦聢D），請(qǐng)結(jié)合圖示回答下列問(wèn)題：

(1)通常用幼齡或早期胚胎進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，原因是____________；在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要對(duì)取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細(xì)胞進(jìn)行分散處理，形成單個(gè)細(xì)胞，這個(gè)過(guò)程中需要利用____________酶處理。

(2)在對(duì)轉(zhuǎn)基因奶牛細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定時(shí)最有效的方法是SRY-PCR法，該方法用牛Y染色體上的性別決定基因SRY作為特異性探針來(lái)檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，檢測(cè)方法為_(kāi)___________技術(shù)，此過(guò)程需要設(shè)計(jì)引物，引物的作用是____________。

(3)將重組細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛后，該母牛生出的犢牛與供體奶牛相比并不是100%的復(fù)制，原因可能是____________。

(4)上述轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功，說(shuō)明了動(dòng)物____________具有全能性。24、腌制的成魚(yú)是一種風(fēng)味獨(dú)特的傳統(tǒng)水產(chǎn)品；但腌制食品中普遍存在生物胺。生物胺在人體內(nèi)積累過(guò)量會(huì)使人出現(xiàn)諸如頭痛；惡心等一系列中毒癥狀。某實(shí)驗(yàn)小組從腌制的咸魚(yú)中分離篩選出具有生物胺降解活性的微生物，并分析其降解特性，實(shí)驗(yàn)步驟如下。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

①取咸魚(yú)背部肌肉10g，剪碎后放入90mL無(wú)菌水中，并逐步稀釋102、103、104倍；取0.1mL上述不同的稀釋液分別涂布到滅菌的MRS肉湯培養(yǎng)基中。

②將接種后的培養(yǎng)基置于30℃恒溫箱中培養(yǎng)48h；挑選單菌落多次純化。

③選取兩個(gè)含有生物胺的肉湯培養(yǎng)基；編號(hào)為甲；乙，甲組接種純化后的單菌落，乙組不接種微生物，48h后，取樣測(cè)定培養(yǎng)基中生物胺的含量。

(1)培養(yǎng)基中除了要有碳源和氮源外，還應(yīng)加入_______________________等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。步驟①中對(duì)MRS肉湯培養(yǎng)基滅菌的一般方法是_________________________________。

(2)步驟②中純化獲得單菌落的常用方法有______________________，實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)___________________（至少答出三點(diǎn)）等特征判斷菌落的種類(lèi)。

(3)步驟③中設(shè)置培養(yǎng)乙組的目的是__________________________________；若取樣測(cè)得培養(yǎng)基甲和乙中的生物胺的含量依次為W1和W2，則48h內(nèi)生物胺的降解率可表為_(kāi)________________。

(4)Lr、Lp、Pp三種生物胺降解菌的相互關(guān)系如下表，若要從中選取兩種降解菌組合來(lái)降解成魚(yú)中的生物胺，則應(yīng)選擇的兩種降解菌是_____________________，理由是______________________。菌株LrLpPpLr－NYLpN－YPpYY－

注：Y表示有拮抗作用，N表示無(wú)拮抗作用。25、請(qǐng)根據(jù)有關(guān)生物工程方面的知識(shí)回答下列問(wèn)題：

(1)基因工程的核心是_____，從分子水平上看，基因工程得以實(shí)現(xiàn)的遺傳學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)是：_____，_____。（寫(xiě)出兩點(diǎn)）。

(2)我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法是_____，農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是利用其菌體中質(zhì)粒的T-DNA片段可_____的特點(diǎn)；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞最有效的方法是_____。

(3)動(dòng)物細(xì)胞工程中_____技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。動(dòng)物細(xì)胞工程的一項(xiàng)重要應(yīng)用是制備單克隆抗體，該過(guò)程形成的雜交瘤細(xì)胞中發(fā)生的遺傳信息流動(dòng)有DNA→DNA、_____。

(4)胚胎工程中，胚胎移植選擇受體的條件是_____的個(gè)體，受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本不發(fā)生_____，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。為了獲得產(chǎn)奶量高的奶牛，需取囊胚期_____細(xì)胞做性別鑒定。若對(duì)囊胚進(jìn)行胚胎分割，要注意_____，否則影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。26、以下是科學(xué)家采用不同方法培育良種牛的過(guò)程；a～h為操作過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題：

（1）獲取外源基因的方法包括：①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲取目的基因，②利用________擴(kuò)增目的基因，③用____________直接人工合成目的基因。

（2）在構(gòu)建含有外源基因的載體時(shí)需要的工具有____________、____________和載體。

（3）過(guò)程h常用的方法是________。為了能確定目的基因已經(jīng)導(dǎo)入到受精卵，相應(yīng)的載體需要有________以便于進(jìn)行檢測(cè)。

（4）“試管牛”技術(shù)的操作流程是______________________（填字母）。

（5）圖中數(shù)字標(biāo)號(hào)代表的結(jié)構(gòu)名稱是①___________；②___________；③____________。

（6）d操作的名稱是________；受體子宮內(nèi)胚胎發(fā)育的過(guò)程中，細(xì)胞不斷分裂。

（7）圖中用到的激素是________；其目的是獲得更多的卵母細(xì)胞，經(jīng)受精后可得到早期胚胎。

（8）若要獲得遺傳物質(zhì)完全相同的兩個(gè)新個(gè)體，可對(duì)發(fā)育到________________階段的早期胚胎進(jìn)行________處理，再植入到受體內(nèi)。若要對(duì)早期胚胎進(jìn)行長(zhǎng)期保存，應(yīng)將其置于________條件下保存。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、B【分析】【詳解】

細(xì)胞的數(shù)目增多；有機(jī)物含量由于消耗而減少，A錯(cuò)誤；在卵裂過(guò)程中，細(xì)胞的總體積基本不變，但細(xì)胞的數(shù)目增加，總面積也會(huì)增加，因此細(xì)胞的總面積與總體積的比值逐漸增大，B正確；每個(gè)細(xì)胞的DNA含量不變，C錯(cuò)誤；卵裂期不會(huì)出原腸腔，原腸胚才會(huì)出現(xiàn)原腸腔，并有胚層的分化，D錯(cuò)誤。

【點(diǎn)睛】解答B(yǎng)選項(xiàng)，關(guān)鍵能記住卵裂過(guò)程中，細(xì)胞體積大小幾乎不變，但細(xì)胞數(shù)目在增加，從而總面積增大，才能判斷出該選項(xiàng)。2、A【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理是細(xì)胞增殖（有絲分裂）；傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞；然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖；癌細(xì)胞失去接觸抑制，所以癌細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象；

2；啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段；它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，轉(zhuǎn)錄形成信使RNA；

3；囊胚的特點(diǎn)：細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)分化（該時(shí)期細(xì)胞的全能性仍比較高）．聚集在胚胎一端個(gè)體較大的細(xì)胞稱為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)；將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織．中間的空腔稱為囊胚腔。

【詳解】

A；啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段；它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，轉(zhuǎn)錄形成信使RNA，A錯(cuò)誤；

B；傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞；將其分散成單個(gè)細(xì)胞，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖，B正確；

C；癌細(xì)胞失去接觸抑制；所以癌細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，C正確；

D；在胚胎發(fā)育過(guò)程中；囊胚期細(xì)胞出現(xiàn)了細(xì)胞分化，形成滋養(yǎng)層和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，D正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

關(guān)于限制酶；考生可以從以下幾方面把握：

（1）來(lái)源：主要從原核生物中分離純化出來(lái)。

（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A；酶具有專(zhuān)一性；不同的限制酶有不同的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，A正確；

B；限制酶2和3識(shí)別的序列分別是CCGCGG和GGATCC；均為6個(gè)堿基對(duì)，B正確；

C；限制酶1和3剪出的黏性末端相同；均為-GATC，C正確；

D；限制酶只能識(shí)別和切割DNA分子內(nèi)一小段核苷酸序列；D錯(cuò)誤。

故選D。4、B【分析】【分析】

由圖分析可知；紅豆杉莖尖分生組織通過(guò)脫分化過(guò)程形成愈傷組織，一方面愈傷組織通過(guò)再分化形成胚狀體，進(jìn)而培養(yǎng)成紅豆杉植株；另一方面，愈傷組織培養(yǎng)增殖產(chǎn)生更多的愈傷組織細(xì)胞，從愈傷組織細(xì)胞中提取紫杉醇。

【詳解】

A；利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖紅豆杉植株屬于無(wú)性生殖；因此可保持其優(yōu)良的遺傳特性，A正確；

B；常用莖尖分生組織進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得脫毒苗是因?yàn)榍o尖含毒很少；可能不含病毒，但獲得的脫毒苗不一定具有抗病毒的特點(diǎn)，B錯(cuò)誤；

C；圖中獲得紫杉醇的過(guò)程只要培養(yǎng)到愈傷組織；不需要形成完整植株，利用了細(xì)胞增殖的原理，即紫杉醇的工廠化生產(chǎn)主要是利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)使細(xì)胞增殖以獲得更多的紫杉醇，C正確；

D；植物甲和紅豆杉是不同的物種；自然狀態(tài)下存在生殖隔離，欲獲得既能產(chǎn)生紫杉醇又能產(chǎn)生物質(zhì)X的植株，可利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“紅豆杉一植物甲”雜種植株，D正確。

故選B。5、A【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性；其過(guò)程為：離體的植物組織，器官或細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程形成愈傷組織，愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化過(guò)程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育成為植株。

【詳解】

A；通常使用酒精和次氯酸鈉溶液對(duì)外植體進(jìn)行消毒處理；要兼顧消毒效果和植物的耐受性，避免過(guò)度消毒對(duì)外植體造成損傷，A正確；

B；同一植株不同細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的植株的基因型不一定相同；如花粉細(xì)胞培養(yǎng)形成的植株的基因只有體細(xì)胞培養(yǎng)形成的植株的一半，B錯(cuò)誤；

C；植物組織培養(yǎng)常用的MS培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基；并不都需添加植物激素，如菊花莖段自身內(nèi)源激素可調(diào)節(jié)其生長(zhǎng)，其組織培養(yǎng)時(shí)不必添加植物激素，C錯(cuò)誤；

D；因?yàn)榉稚M織的病毒極少；甚至沒(méi)有病毒，所以將分生組織（如根尖、莖尖）進(jìn)行離體培養(yǎng)能獲得脫毒植株，但不能獲得抗病毒植株，D錯(cuò)誤。

故選A。6、C【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中；使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。

【詳解】

A；圖示過(guò)程包括核移植和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)；沒(méi)有干細(xì)胞移植技術(shù)，A錯(cuò)誤；

B；這兩只克隆獼猴是通過(guò)核移植、胚胎移植產(chǎn)生的；沒(méi)有用到受精卵，B錯(cuò)誤；

C；融合細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)等條件；C正確；

D；動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低；表現(xiàn)全能性相對(duì)容易，而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，表現(xiàn)全能性十分困難，因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，所以利用A猴的胚胎干細(xì)胞核移植獲得克隆獼猴的難度更小些，D錯(cuò)誤。

故選C。7、A【分析】【分析】

胚胎發(fā)育過(guò)程：

（1）卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加；

（2）桑葚胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎；之前所有細(xì)胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細(xì)胞；

（3）囊胚：細(xì)胞開(kāi)始分化；其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤(pán)；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔。注：囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來(lái)，這一過(guò)程叫孵化；

（4）原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層；下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。

【詳解】

A；在桑葚胚階段；32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎，胚胎的內(nèi)部無(wú)含有液體的腔，A錯(cuò)誤；

B；胚胎干細(xì)胞是一類(lèi)未分化的細(xì)胞；可以從早期胚胎或原始性腺中分離獲得，B正確；

C；桑葚胚的細(xì)胞一般都具有全能性；囊胚的細(xì)胞逐漸分化，C正確；

D；受精卵早期分裂時(shí)；胚胎中細(xì)胞數(shù)目不斷增加，但胚胎的總體積并不增加，甚至略微縮小，D正確。

故選A。8、B【分析】【分析】

圖1為所用載體圖譜示意圖，目的基因要插在啟動(dòng)子和終止子之間，可用EcoRⅠ和PvitⅡ兩種不同限制酶切割，KpnⅠ在啟動(dòng)子和終止子之外還有切割位點(diǎn)，所以不用KpnⅠ切割；由圖3可知，EcoRⅠ切割得到黏性末端，PvitⅡ切割可得到平末端，由于目的基因不含圖1中限制酶的識(shí)別序列，所以要在目的基因兩端分別加上EcoRⅠ和PvitⅡ切割后的序列末端，再用T4DNA連接酶將目的基因連接到載體上；完成基因表達(dá)載體的構(gòu)建。

【詳解】

A、通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增phb2基因時(shí)需設(shè)計(jì)根據(jù)phb2基因特異性的引物；A正確；

B；目的基因應(yīng)導(dǎo)入啟動(dòng)子和終止子之間；兩者之間存在三種限制酶切點(diǎn)，但是由于KpnⅠ在質(zhì)粒上不止一個(gè)酶切位點(diǎn)，所以應(yīng)該選擇EcoRⅠ和PvitⅡ兩種不同限制酶的識(shí)別序列，B錯(cuò)誤；

C、T4DNA連接酶既可以“縫合”雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端；又可以“縫合”雙鏈DNA片段的平末端，但連接平末端的效率相對(duì)比較低，可以用T4DNA連接酶連接，C正確；

D、題干顯示，目的基因大小約0.9kb，圖2中3號(hào)的質(zhì)粒酶切后得到約6kb片段和約1kb片段，約1kb片段很可能是目的基因；D正確。

故選B。二、多選題(共5題，共10分)9、A:B【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原；從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；制備單克隆抗體是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的應(yīng)用；融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體，A正確；

B；單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、純度高、靈敏度高；并可能大量制備的特點(diǎn)，B正確；

C；體內(nèi)誘生法制備的單克隆抗體需要注入到小鼠的體內(nèi)；最后從小鼠的腹腔中提取腹水，此方法比較麻煩，而且抗體的量也較少，因此對(duì)于工業(yè)上需求較多的抗體而言，通常是采用體外培養(yǎng)法，C錯(cuò)誤；

D；單克隆抗體是由骨髓瘤細(xì)胞和效應(yīng)B細(xì)胞形成的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的；D錯(cuò)誤。

故選AB。10、A:C:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較。比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（蔗糖）、植物激素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（葡萄糖）、動(dòng)物血清等培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無(wú)毒苗等獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物分散處理無(wú)有脫分化有無(wú)

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同；如動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要加血清，植物細(xì)胞培養(yǎng)不需要添加血清，A正確；

B；植物組織培養(yǎng)不需要胰蛋白酶；B錯(cuò)誤；

C；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)；莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株，C正確；

D；煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個(gè)體；小鼠雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)能得到細(xì)胞代謝產(chǎn)物，D正確。

故選ACD。11、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸稈生產(chǎn)燃料酒精是利用微生物進(jìn)行生物發(fā)酵的過(guò)程；所利用的微生物為酵母菌，通過(guò)酒精發(fā)酵將葡萄糖轉(zhuǎn)化為酒精，玉米秸稈中含有的糖類(lèi)主要是纖維素，因此需要先將纖維素水解成葡萄糖，再進(jìn)行發(fā)酵。

【詳解】

A；由于纖維素組成成分復(fù)雜、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定；生物降解時(shí)難以迅速進(jìn)行，常用酸或堿進(jìn)行預(yù)處理，初步打斷纖維素內(nèi)部的化學(xué)鍵，降低聚合度，利于酶與底物充分接觸，提高催化效率，A正確；

B；在有氧的條件下酵母菌進(jìn)行出芽生殖；上層培養(yǎng)液與空氣接觸部位氧氣較多，短時(shí)間內(nèi)酵母菌更多分布在發(fā)酵液的上層，B正確；

C；在選擇培養(yǎng)基中經(jīng)多次培養(yǎng)；分離出的菌落類(lèi)型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定，C正確；

D、發(fā)酵液pH下降是因?yàn)楫a(chǎn)生了CO2；D錯(cuò)誤。

故選ABC。12、A:B【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。②營(yíng)養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。③溫度：適宜溫度。④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

【詳解】

A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，培養(yǎng)環(huán)境中需要O2，也需要CO2（用來(lái)維持培養(yǎng)液的pH）；A錯(cuò)誤；

B；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要脫分化；植物細(xì)胞要經(jīng)過(guò)脫分化才形成愈傷組織，B錯(cuò)誤；

C；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中常用含糖類(lèi)、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清的液體培養(yǎng)基；C正確；

D；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象而停止分裂增殖；故培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)到一定階段后要用胰蛋白酶處理，分瓶后才能繼續(xù)增殖，D正確。

故選AB。13、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精；醋酸菌在糖源；氧氣充足時(shí)；直接將葡萄糖氧化為醋酸；在糖源不足、氧氣充足時(shí)，可利用酒精，即乙醇作為呼吸底物，先將乙醇變成乙醛而后變?yōu)橐宜幔ù姿幔?/p>

【詳解】

A；制備培養(yǎng)基過(guò)程中；pH的調(diào)節(jié)應(yīng)在滅菌前進(jìn)行，A錯(cuò)誤；

B；制作果酒時(shí)適當(dāng)加大接種量；酵母菌菌體的基數(shù)增大，可使其快速形成優(yōu)勢(shì)菌群，抑制雜菌生長(zhǎng)，提高發(fā)酵速率，B正確；

C；現(xiàn)代發(fā)酵工程選育出性狀優(yōu)良的菌種后；為滿足發(fā)酵過(guò)程的需要，還要對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，之后才可進(jìn)行發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵，C錯(cuò)誤；

D；醋酸菌能夠氧化酒精產(chǎn)生醋酸；造成葡萄酒的敗壞。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天開(kāi)瓶后的紅酒容易變酸，D正確。

故選AC。三、填空題(共5題，共10分)14、略

【解析】①.卵（母）細(xì)胞②.比較大，容易操作③.細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)豐富。15、略

【分析】【詳解】

為最大程度的保障人類(lèi)權(quán)益；簽署了禁止生物武器公約：

（1）《禁止試制；生產(chǎn)和儲(chǔ)存并銷(xiāo)毀細(xì)菌（生物）和毒劑武器公約》；簡(jiǎn)稱《禁止生物武器公約》。

（2）我國(guó)對(duì)于生物武器的態(tài)度是在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散?！窘馕觥竣?《禁止生物武器公約》②.不發(fā)展③.不生產(chǎn)④.不儲(chǔ)存16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖定量17、略

【分析】【詳解】

①克隆人是對(duì)人權(quán)和人的尊嚴(yán)的挑戰(zhàn)：

人不僅是自然人；在生物進(jìn)化中人自從脫離了動(dòng)物界，還成為有價(jià)值觀念的社會(huì)的人，因此人是具有雙重屬性的，是生物；心理和社會(huì)的集合體?？寺∪艘簿褪侨斯o(wú)性生殖的人，只在遺傳性狀上與原型人一致，而人的心理、行為、社會(huì)特征和特定人格是不能克隆的，因此克隆人是不完整的人，是一個(gè)喪失自我的人，嚴(yán)重違反了人權(quán)，危害人類(lèi)尊嚴(yán)；

②克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念：

克隆人的出現(xiàn)將徹底攪亂代際關(guān)系和家庭倫理定位；克隆人過(guò)程中可以出現(xiàn)體細(xì)胞核供者；卵細(xì)胞供者以及孕育者三位生物學(xué)父母，以及撫養(yǎng)者的社會(huì)學(xué)父母的多種選擇，被克隆者只是生物學(xué)上復(fù)制，人類(lèi)世代的傳承也將被打破，家庭倫理關(guān)系含混不清；

③克隆人是制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人；

④克隆人違反生物進(jìn)化的自然發(fā)展規(guī)律：

人類(lèi)所以發(fā)展到如此高的進(jìn)化文明程度，是由其自然發(fā)展規(guī)律形成的。而克隆人要把有性生殖倒退到無(wú)性生殖，這種行為如不加阻止，必將給人類(lèi)種下無(wú)窮的災(zāi)難?！窘馕觥竣倏寺∪耸菍?duì)人權(quán)和人的尊嚴(yán)的挑戰(zhàn)；②克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念；③克隆人是制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人；④克隆人違反生物進(jìn)化的自然發(fā)展規(guī)律等。18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因DNA分子雜交技術(shù)。四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共20分)19、略

【分析】【詳解】

微生物生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中需要氮源、碳源、水分、無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，有些微生物還需要生長(zhǎng)因子；培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌，該過(guò)程一般在高壓蒸汽滅菌鍋中進(jìn)行；影響微生物生長(zhǎng)繁殖的因素主要是營(yíng)養(yǎng)和溫度，因此培養(yǎng)微生物時(shí)除提供適宜的營(yíng)養(yǎng)外，還要提供合適的溫度；為排除無(wú)關(guān)變量的影響，該實(shí)驗(yàn)要設(shè)立空白對(duì)照，可以用蒸餾水代替樣品來(lái)進(jìn)行對(duì)照；在培養(yǎng)基中加入食鹽可以選擇耐鹽菌，如金黃色葡萄球菌等，這種培養(yǎng)基叫做選擇培養(yǎng)基?！窘馕觥康矗ㄌ荚床蛔饕螅┨荚礋o(wú)機(jī)鹽水高壓蒸汽滅菌恒溫培養(yǎng)箱無(wú)菌水多高鹽（或NaCl）選擇性培養(yǎng)基20、略

【分析】【分析】

微生物的分離：①利用該分離對(duì)象對(duì)某一營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的“嗜好”；專(zhuān)門(mén)在培養(yǎng)基中加入該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，使該微生物大量增殖。這些物質(zhì)主要是一些特殊的碳源；氮源，如纖維素可用來(lái)富集纖維素分解微生物，尿素可用來(lái)富集尿素分解微生物。②利用該分離對(duì)象對(duì)某種抑制物質(zhì)的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物質(zhì)，經(jīng)培養(yǎng)后，由于原來(lái)占優(yōu)勢(shì)的它種微生物的生長(zhǎng)受到抑制，而分離對(duì)象卻可趁機(jī)大量增殖，使之在數(shù)量上占優(yōu)勢(shì)。如篩選酵母菌和霉菌，在培養(yǎng)基中加入青霉素，因青霉素可抑制細(xì)菌和放線菌的細(xì)胞壁的合成，從而抑制兩類(lèi)微生物的生長(zhǎng)，而酵母菌和霉菌正常生長(zhǎng)增殖。

【詳解】

（1）微生物的生長(zhǎng)需要碳源；氮源、水和無(wú)機(jī)鹽；①中木糖含有C、H、O元素，故能提供碳源，硝酸鉀中含有N元素，可以提供氮源和無(wú)機(jī)鹽。

（2）分離篩選枯草芽孢桿菌需要得到單菌落；②→③中梯度稀釋的目的是將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在固體培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培養(yǎng)基中水分過(guò)快蒸發(fā)之外；還可以防止冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染。

（4）分析題意可知，A處接種黑腐皮殼菌，在距離A處等距離的B1~B4處分別接種等量的4個(gè)枯草芽孢桿菌品系；在適宜條件下培養(yǎng)3－5天，由于枯草芽孢桿菌能抑制黑腐皮殼菌生長(zhǎng)，通過(guò)觀測(cè)黑腐皮殼菌菌落的形狀（黑腐皮殼菌菌落邊緣與4個(gè)枯草芽孢桿菌菌落的距離），就能篩選出抑菌更好的枯草芽孢桿菌菌株。

（5）在利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)土樣中活菌的數(shù)目時(shí)；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，故該方法所得結(jié)果往往比實(shí)際細(xì)菌的數(shù)目要少。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和計(jì)數(shù)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生利用所學(xué)知識(shí)解決實(shí)際問(wèn)題的能力，難度中等。【解析】提供碳源，提供氮源和無(wú)機(jī)鹽將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在固體培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落防止冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染觀測(cè)黑腐皮殼菌菌落的形狀（黑腐皮殼菌菌落邊緣與4個(gè)枯草芽孢桿菌菌落的距離）30～300當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)平板上觀察到的只是一個(gè)菌落21、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過(guò)稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術(shù)是一項(xiàng)通過(guò)體外控制溫度擴(kuò)增DNA的技術(shù)，該技術(shù)中由于溫度較高，起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴(kuò)增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專(zhuān)一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定：凝膠中的DNA分子通過(guò)染色；可以在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)。

（3）分析題意，科學(xué)家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中，該過(guò)程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞；分析題意，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖莍PS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實(shí)驗(yàn)的自變量是外源基因的有無(wú)，因變量是IPS細(xì)胞的產(chǎn)生情況，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循對(duì)照與單一變量原則，故可設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下：將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒(méi)有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用?！窘馕觥?1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞。將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒(méi)有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用22、略

【分析】【分析】

1；利用顯微鏡進(jìn)行直接計(jì)數(shù)；也是一種常用的、快速直觀的測(cè)定微生物數(shù)量的方法。該方法利用特定的細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下觀察、計(jì)數(shù)，然后再計(jì)算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量，統(tǒng)計(jì)的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和。細(xì)菌計(jì)數(shù)板和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)原理相同。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板比細(xì)菌計(jì)數(shù)板厚，常用于相對(duì)較大的酵母菌細(xì)胞、霉菌孢子等的計(jì)數(shù)。用細(xì)菌計(jì)數(shù)板可對(duì)細(xì)菌等較小的細(xì)胞進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)。

2；滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物；包括芽孢和孢子。濕熱滅菌：高壓蒸汽滅菌（壓力為100kPa、溫度為121℃、15~30min）；干熱滅菌：160~170℃熱空氣維持2~3h。耐高溫的和需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金屬用具等；灼燒滅菌：接種工具。接種過(guò)程中，試管口、瓶口等容易被污染的部位。

【詳解】

（1）大腸桿菌是細(xì)菌；培養(yǎng)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性，對(duì)培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。

（2）細(xì)菌計(jì)數(shù)板和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)原理相同。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板比細(xì)菌計(jì)數(shù)板厚；常用于相對(duì)較大的酵母菌細(xì)胞；霉菌孢子等的計(jì)數(shù)。用細(xì)菌計(jì)數(shù)板可對(duì)細(xì)菌等較小的細(xì)胞進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)。該方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和，所以統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)目往往比實(shí)際活菌數(shù)目多。

（3）本實(shí)驗(yàn)為了證明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后；可獲得組氨酸缺陷型突變菌株，可將野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察大腸桿菌是否生長(zhǎng)，如果在培養(yǎng)基上無(wú)大腸桿菌生長(zhǎng)，說(shuō)明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后，獲得了組氨酸缺陷型突變菌株。具體實(shí)驗(yàn)思路及結(jié)果如下：

實(shí)驗(yàn)思路：使用稀釋涂布平板法將紫外線照射后的大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上；標(biāo)記為甲組；使用稀釋涂布平板法將等量的野生型大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標(biāo)記為乙組；將未接種的不含組氨酸的完全培養(yǎng)基標(biāo)記為丙組；將甲；乙、丙組培養(yǎng)基放于相同且適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察并統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：乙組培養(yǎng)基出現(xiàn)較多菌落；甲組培養(yǎng)基沒(méi)有出現(xiàn)菌落或出現(xiàn)菌落、但菌落數(shù)少于乙組；丙組培養(yǎng)基無(wú)菌落?！窘馕觥?1)中性或弱堿高壓蒸汽滅菌（或濕熱滅菌）

(2)細(xì)菌計(jì)數(shù)板多。

(3)使用稀釋涂布平板法將紫外線照射后的大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標(biāo)記為甲組；使用稀釋涂布平板法將等量的野生型大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標(biāo)記為乙組；將未接種的不含組氨酸的完全培養(yǎng)基標(biāo)記為丙組；將甲、乙、丙組培養(yǎng)基放于相同且適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察并統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)乙組培養(yǎng)基出現(xiàn)較多菌落；甲組培養(yǎng)基沒(méi)有出現(xiàn)菌落或出現(xiàn)菌落、但菌落數(shù)少于乙組；丙組培養(yǎng)基無(wú)菌落五、綜合題(共4題，共28分)23、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因克隆奶牛的培育過(guò)程；該過(guò)程采用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)；動(dòng)物體核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)。

(1)

通常用幼齡或早期胚胎進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；原因是這類(lèi)細(xì)胞的分化程度低，分裂能力強(qiáng)；將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，要利用胰蛋白酶處理。

(2)

因?yàn)椤霸摲椒ㄓ门染色體上的性別決定基因SRY作為特異性探針來(lái)檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物”；可知是通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)來(lái)檢測(cè)有無(wú)相應(yīng)的雜交帶，檢測(cè)方法為DNA分子雜交技術(shù)，此過(guò)程需要設(shè)計(jì)引物，引物的作用是為熱穩(wěn)定性DNA聚合酶提供結(jié)合位點(diǎn)。

(3)

由于生物的性狀受細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制以及生物的性狀還受環(huán)境因素的影響；所以重組胚胎移入受體母牛后，該母牛就會(huì)生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)相同的犢牛，但也不是100%的復(fù)制。

(4)

轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功；說(shuō)明了動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因克隆奶牛的培育過(guò)程圖解，考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、PCR、胚胎移植的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程；識(shí)記胚胎移植的基本程序的應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)答題【解析】(1)細(xì)胞分裂能力強(qiáng)胰蛋白##或膠原蛋白

(2)DNA分子雜交為熱穩(wěn)定性DNA聚合酶提供結(jié)合位點(diǎn)。

(3)生物性狀受細(xì)胞核基因和質(zhì)基因的共同控制；生物的性狀還受環(huán)境因素的影響。

(4)體細(xì)胞的細(xì)胞核24、略

【分析】【分析】

本課題的目的是“科研人員欲從咸魚(yú)中篩選出能夠高效降解生物胺的菌株”；所以是相關(guān)選擇培養(yǎng)基的配制及原理考查。選擇培養(yǎng)基：根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)；物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基，可以使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率。

(1)

培養(yǎng)基的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括水；無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源。培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。

(2)

微生物純化常用的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。菌落的特征包括形狀；大小、顏色和隆起程度等。

(3)

乙組不接種微生物，目的是作空白對(duì)照，以排除非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。甲和乙生物胺的差值表示微生物降解的量，則48h內(nèi)生物胺的降解率可表為（W2－W1）/W2×100%。

(4)

若要從中選取兩種降解菌組合來(lái)降解成魚(yú)中的生物胺，則兩種生物胺降