高溫白靈菇引種S市栽培的可行性以及配方栽培方法分析8200字【論文】

1 1 31.1儀器和材料 3 3 3 3 3 3 4 4 4 6 92結(jié)果分析 3總結(jié)與討論 3.1總結(jié) 3.2討論 1種試管試驗(yàn)、栽培袋試驗(yàn)、相同培養(yǎng)基(玉米芯40%、雜木屑40%、麥麩20%、蔗糖1%、石膏1%、磷酸二氫鉀0.1%)在右江河谷環(huán)境下進(jìn)行不同溫度的室內(nèi)栽培試驗(yàn)得出數(shù)據(jù)并分析。原種試管試驗(yàn)：菌絲生石膏1%、白砂糖1%)的4.75mm/d1;栽培袋試驗(yàn)：菌絲生長(zhǎng)速度最快為配方7木屑80%、麥麩20%、磷酸二氫鉀0.1%、石膏1%、蔗糖1%)的3.84mm/d-1;溫養(yǎng)基。菌絲適合的溫度范圍廣，最高33℃仍正常生長(zhǎng)。靈菇的菌絲在偏堿的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；濕度保持60%-65%之間，若低溫、干燥的環(huán)境下，其菌蓋表面會(huì)出現(xiàn)龜裂?？稍?℃-37℃的溫度下生存，其菌絲最適溫度21-28℃;白靈菇又是一種中低溫型的食用菌，栽培后的菌絲稀疏、不夠基于白靈菇有著非常高的食用和藥用價(jià)值，國(guó)外的科學(xué)家早就在20世紀(jì)502年代初就對(duì)白靈菇的馴栽培化進(jìn)行了研究[7,8];而我國(guó)科研人員在1996年從新疆引進(jìn)高溫白靈菇菌種，開(kāi)展試驗(yàn)終獲得成功9]。雖近年來(lái)國(guó)內(nèi)外其栽培馴化技術(shù)也都有很大進(jìn)展，但從目前白靈菇人工栽培試驗(yàn)的現(xiàn)狀來(lái)看，仍然存在許目前高溫白靈是首次從新疆地區(qū)引進(jìn)的，與右江河谷的自然環(huán)境差異大，導(dǎo)致菌種有活性退化、產(chǎn)量低、成本高等情況。而本文以高溫白靈菇為供試材料，在室內(nèi)進(jìn)行原種試管、栽培袋、初步溫度梯度處理對(duì)比試驗(yàn)，以雜木屑、玉米芯、小麥為主要原料，研究在不同的培養(yǎng)基和溫度下對(duì)高溫白靈菇菌絲生長(zhǎng)速度、長(zhǎng)勢(shì)的影響，最后篩選出高溫白靈菇生長(zhǎng)的最適培養(yǎng)基，初步探索其菌絲在S市溫度是否能生長(zhǎng)。為以后高溫白靈菇栽培技術(shù)提供參考。31.1儀器和材料電磁爐、電子天平、高壓滅菌鍋、超凈工作臺(tái)、紅外滅菌器械。玻璃漏斗、試管架、打火機(jī)、酒精燈、試管(15×100mm)、玻璃棒、小培養(yǎng)瓶(200mL)、大培養(yǎng)瓶(400mL)、棉花球、燒杯(500mL)、搪瓷杯(1000mL)、接種匙、鑷子、剪刀、水果刀、接種勺、聚丙烯栽培袋(15×30cm)(以下統(tǒng)稱菌袋)、圓形稱量紙、標(biāo)簽紙、透明膠、純棉粗孔濾布、透氣膜、橡膠圈、牛皮紙或報(bào)紙、橡膠塞、75%無(wú)水乙醇、95%工業(yè)酒精、馬克筆、pH試紙、麥芽糖、瓊脂粉、維Bi、維B9、白砂糖、酵母粉、磷酸二氫鉀、石膏粉、保菇王、碳酸鈣、檸檬酸、硫酸鎂、小麥、細(xì)玉米粒、粗麥麩、細(xì)木屑、馬鈴薯、粗玉米芯、棉籽殼、高溫白靈菇母種(由聯(lián)誼食用菌推廣中心購(gòu)買)。為了進(jìn)一步研究高溫白靈菇菌絲在谷物培養(yǎng)基中哪個(gè)培養(yǎng)基最適生長(zhǎng)，是以用規(guī)格為20×200mm的試管進(jìn)行試驗(yàn)，物料裝管高度全為180mm,共6支，1支代表一次重復(fù)，pH6.5-7.5。如下表1所示：表1原種試管試驗(yàn)配方各材料比例棉籽殼%1112--113-114 -115 111.2.2栽培袋培養(yǎng)基配方試驗(yàn)在同一溫度下，每個(gè)配方做3次的重復(fù)，10袋一個(gè)重復(fù)，并用1、2、3、4表示，4共210袋，石灰適量，讓物料pH在6.5-7.5之間，過(guò)堿可用檸檬酸調(diào)節(jié)，并在一同條件下進(jìn)行溫度培養(yǎng)，測(cè)量各袋菌絲平均生長(zhǎng)速率、滿袋時(shí)間及產(chǎn)量。本次試驗(yàn)設(shè)計(jì)的7個(gè)配方各材料如表2:表2試驗(yàn)配方各材料的配比雜木屑%麥麩%蔗糖%石膏%102030456701.2.3初步溫度梯度處理對(duì)比試驗(yàn)由于是首次引進(jìn)高溫白靈菇品種在S市干熱氣候條件下栽培，根據(jù)實(shí)際條件先設(shè)計(jì)26℃、30℃、33℃參考溫度，以玉米芯40%、雜木屑40%、麥麩20%、蔗糖1%、石膏1%、磷酸二氫鉀0.1%為配方，pH6.5-7.5,進(jìn)行初步探索試驗(yàn)。1.3試驗(yàn)操作步驟將從聯(lián)誼食用菌推廣中心購(gòu)買回來(lái)的兩支高溫白靈菇母種并不穩(wěn)定，需經(jīng)過(guò)純化擴(kuò)繁后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至試管菌絲滿管、強(qiáng)壯，以進(jìn)行下一步試驗(yàn)。母種純化擴(kuò)繁(1)準(zhǔn)備與稱量：采選完好無(wú)病損、無(wú)抽芽的馬鈴薯，剝皮，切細(xì)。采選搪瓷杯當(dāng)作烹煮器皿；用電子天平依次將麥芽糖和瓊脂粉各20g、磷酸二氫鉀2g、硫酸鎂0.5g、酵母膏2g、維生素B13mg、維生素B93mg稱量好、標(biāo)簽、洗凈的、無(wú)損壞的試管顛倒在試管架上和橡膠塞等材料。(2)制備：把切細(xì)的馬鈴薯放到已加0.6L自來(lái)水的刻度為1L搪瓷杯中，高檔火沸騰后，調(diào)低檔延續(xù)加溫，且進(jìn)行恰當(dāng)?shù)臄噭?dòng)。用純棉粗孔濾布過(guò)濾，把土豆殘?jiān)鼦壋?將剩下的液體延續(xù)加熱；把麥芽糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、酵母膏、維生素B?、維生素B9等混合藥品倒入加熱的濾液中攪動(dòng)至熔化；把瓊脂粉倒進(jìn)濾液中，借助玻璃棒慢慢攪動(dòng)，加熱至融化成膠狀，加水勻和攪動(dòng)，定容1L。(3)分裝捆扎與滅菌：將試管凈干穩(wěn)定在試管架上，借助玻璃管趁熱引流到試管中(注意：裝到試管的長(zhǎng)度三分之一就可，要迅速把玻璃管取出且不可接觸試管壁，防止壁口污染)。再把瓶口用橡膠塞蓋住，5支捆在一起，用牛皮紙包裹試管口，用橡膠圈扎好并寫(xiě)上標(biāo)簽(菌種代號(hào)、日期)。把弄好的試管放到高壓蒸汽滅菌鍋中，調(diào)節(jié)溫度到121℃,定時(shí)30min滅菌。(4)擺斜面：滅菌結(jié)束后，把試管取出，趁熱在高處把試管傾斜成一定的弧度，并留意斜面長(zhǎng)度小于試管的2/3,培養(yǎng)基冷卻凝結(jié)后可放入培養(yǎng)箱保存，備用。(5)接種：擴(kuò)繁的試管口接近酒精燈外焰滅菌后，用溫度低的夾子取出長(zhǎng)勢(shì)好的菌絲，放到斜面的培養(yǎng)基上，完成后經(jīng)過(guò)酒精燈外焰把試管口再次進(jìn)行滅菌，蓋上橡皮塞(在操作中要快速，禁止接種鑷子與試管的內(nèi)壁相接觸)。完成后，標(biāo)簽(寫(xiě)好日期、菌種代號(hào)),步驟重復(fù)接種15支。(6)培養(yǎng)：選用濃度為75%無(wú)水乙醇濕潤(rùn)的棉花球?qū)ε囵B(yǎng)箱進(jìn)行整體的洗消后，把接種的試管至于箱中，放在26℃的無(wú)光照的條件下進(jìn)行恒溫養(yǎng)殖。需定時(shí)檢查，若有發(fā)現(xiàn)污染的試管必須拿走并洗消處理，防止其它的試管感染。觀察試管里的菌絲長(zhǎng)至茂盛絲狀且良好后，即進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。(7)母種保存：在接種好的培養(yǎng)基中挑取幾個(gè)菌絲茂盛、潔白的菌種保留，標(biāo)簽(日期、菌種代號(hào)),在培養(yǎng)箱中保存，預(yù)留。把已純化擴(kuò)繁強(qiáng)壯的母種菌絲經(jīng)過(guò)無(wú)菌接種，接種到五個(gè)物料不同比例的谷物培養(yǎng)基中，使其適應(yīng)培養(yǎng)基基質(zhì)，共30支。將接好的試管放到培養(yǎng)箱26℃下進(jìn)行無(wú)光照培養(yǎng)，使其長(zhǎng)出菌絲，并記錄數(shù)據(jù)。把純化擴(kuò)繁強(qiáng)壯的母種試管培養(yǎng)基接種到物料比例相同的栽培種培養(yǎng)基中，讓其先適應(yīng)后期栽培袋所含不同比例的雜木屑和玉米芯、麥麩的培養(yǎng)基，接種20瓶。后將接種好的栽培瓶放到培養(yǎng)箱26℃下進(jìn)行無(wú)關(guān)照培養(yǎng)，讓其菌絲生長(zhǎng)。61、培養(yǎng)基制備與分裝：棉籽殼、玉米粒、玉米芯、雜木屑、麥麩、小麥、蔗糖、石膏粉、適量石灰、檸檬酸、純化擴(kuò)繁的高溫白靈菇母種。(1)準(zhǔn)備：將所需的30支試管和5個(gè)1L的燒杯洗凈，全顛倒在試管架上瀝干(2)稱量：每個(gè)配方100g標(biāo)準(zhǔn)量，按表1的配方稱取棉籽殼、麥麩、玉米芯、玉米粒、小麥(小麥?zhǔn)墙菀惶煲灰沟臓顟B(tài))、雜木屑、蔗糖、石膏粉。(3)制備：將稱量好的棉籽殼、麥麩、玉米芯、玉米粒、小麥、雜木屑依次放在寫(xiě)好編號(hào)1、2、3、4、5的燒杯中，加入適量的水分，每個(gè)配方都依次加入稱量好的蔗糖和石膏混合液(適量),然后用手進(jìn)行攪動(dòng)，pH在6.5-7.5之間。(4)分裝與捆扎：把拌好的混合物料裝到洗凈、瀝干的試管中，大約管高的三分之二，試管的培養(yǎng)基要緊松有度、平面。瓶口壁、體表擦凈，蓋上橡膠塞后包牛皮紙，用水性筆寫(xiě)上標(biāo)簽(菌種、日期)。(5)滅菌：將分扎好的各個(gè)配方(6個(gè)試管為一扎)放在高壓蒸汽滅菌鍋中，溫度調(diào)128℃,定時(shí)120min殺菌。2、原種試管接種(1)器皿消毒：用75%無(wú)水乙醇濕潤(rùn)的棉花球?qū)Τ瑑艄ぷ髋_(tái)擦凈滅菌。將用器具和試管用75%無(wú)水乙醇棉花球?qū)Ⅲw表擦凈消毒后，放入實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)，關(guān)下玻璃門，開(kāi)紫外燈進(jìn)行消毒滅菌。(2)操作過(guò)程：待滅菌完成后，把酒精燈點(diǎn)燃，讓酒精燈在操作臺(tái)上方風(fēng)口處，輕輕打開(kāi)試管塞后，用接種勺尾部挖取小塊斜面培養(yǎng)基上的母種菌絲，接到空的培養(yǎng)基中，用酒精燈的外焰對(duì)其瓶口進(jìn)行旋轉(zhuǎn)灼燒，并快速蓋好橡膠塞；依次進(jìn)行該操作。(3)培養(yǎng)：培養(yǎng)箱的溫度調(diào)至26℃,把接好的試管瓶放到箱中進(jìn)行無(wú)光照處理。注意定時(shí)觀察培養(yǎng)的狀況，若發(fā)現(xiàn)染菌挑出丟棄；注意各個(gè)配方的菌絲生長(zhǎng)情況，記錄出哪個(gè)配方的高溫白靈菇菌絲強(qiáng)弱及滿管時(shí)間，還需計(jì)算這五個(gè)配方菌絲每天的生長(zhǎng)原料：玉米芯、細(xì)木屑、粗麥麩、石膏粉、蔗糖、檸檬酸、適量的石灰、擴(kuò)繁的7(2)稱量：以8000g為標(biāo)準(zhǔn)量，每瓶約400g,共20瓶，按配方比例稱取所需的玉(3)制備：將稱量好的材料和藥品依次放在收納箱中，并加入約6L水，攪動(dòng)勻和后，其含水量在65%-70%,再用適量的石灰把pH調(diào)至6.5-7.5之間，再次進(jìn)行勻和攪(1)稱量物料：按表2里對(duì)應(yīng)配方的量用電子秤稱取，將玉米芯、細(xì)木屑、粗麥麩按比例倒在收納箱中混合攪動(dòng)，將石膏、白砂糖、磷酸二氫鉀三者加一起溶化在1L燒杯的水中并灑在物料上，在拌料的同時(shí)要?jiǎng)蚝蛿噭?dòng)，再加入少量的水勻和攪動(dòng)，然后手抓一把物料握在手心，指縫間有水滲出而不成水滴為佳(含水量為65%-70%)。加入適量的石灰，使物料勻和攪動(dòng)后，用酸堿指示試紙插入物可適當(dāng)打壓錘實(shí)物料，離菌袋口的三分之一，用毛巾擦凈菌袋體表，安裝塑料環(huán)和蓋(3)滅菌：在滅菌前，檢查高壓滅菌鍋的水位，不夠加水至水位高一點(diǎn)，把實(shí)驗(yàn)□邊緣擦凈，防止漏氣爆炸；溫度設(shè)定為128℃,時(shí)間為兩個(gè)半小時(shí)。結(jié)束后，讓滅菌鍋的壓強(qiáng)自然降為0kpa,手動(dòng)打開(kāi)氣閥排盡汽水后，把高壓蒸汽滅菌鍋打開(kāi)，等菌(1)超凈工作臺(tái)與接種器械的準(zhǔn)備：用75%的無(wú)水乙醇棉花球?qū)⒊瑑艄ぷ髋_(tái)里外擦凈，再將冷卻好的菌袋、接種勺和鑷子、裝有酒精棉球的培養(yǎng)瓶用75%酒精擦凈后放入超凈工作臺(tái)，將接種勺和鑷子放進(jìn)高溫滅菌爐中，關(guān)燈開(kāi)紫外燈，風(fēng)級(jí)三級(jí)，超凈8工作臺(tái)需滅菌30min;再打開(kāi)接種室外的紫外燈滅菌30-40min。燈移至超凈工作臺(tái)的上方風(fēng)口處，把栽培種用75%無(wú)水乙醇擦凈后拿進(jìn)超凈工作臺(tái)，并靠近酒精燈的旁邊，培養(yǎng)瓶要在酒精燈的附近打開(kāi)，栽培種表面的物料要挖出最上面那層丟棄，把栽培袋菌袋蓋擰松到輕輕打開(kāi)架時(shí)用75%的無(wú)水乙醇棉花球擦凈，再噴灑一層無(wú)水乙醇，培養(yǎng)室的地板需要用84消毒液兌水拖地殺菌消毒，八包保菇王進(jìn)行物理消毒。待消毒工作搞好后，再把同一栽60%-70%。在培養(yǎng)期間每隔2-3天觀察菌絲生長(zhǎng)情況，并記錄菌袋滿袋時(shí)間(d)、生長(zhǎng)以玉米芯、雜木屑為主料，麥麩、白砂糖、石膏為輔料，設(shè)計(jì)26℃、30℃、的初步基礎(chǔ)溫度梯度，讓其先適應(yīng)初升溫的S市氣候，觀察其菌絲是否能正常生長(zhǎng)。白天溫度在27℃左右，晚上溫度在18-20℃左右，白天光線明亮，可打開(kāi)培養(yǎng)室的窗簾，讓菌絲接收到散光的刺激，另外，空氣濕度要控制在70%-75%(水84消毒液比例為100)濾菌器在白天開(kāi)。此外，溫度實(shí)驗(yàn)的需在培養(yǎng)箱30℃、33℃進(jìn)行培養(yǎng)出菇，還需在培養(yǎng)箱中加入一盆水，使培養(yǎng)箱的空氣濕度維持在70%-75%,每隔5天進(jìn)行觀察面的栽培種，定期實(shí)時(shí)注意和觀察菌袋的情況，一旦發(fā)現(xiàn)有污染的菌袋出現(xiàn)，應(yīng)立即進(jìn)行處理，如污染不是很嚴(yán)重，可用甲醛注射到污染處，然后將其單獨(dú)放在架子上進(jìn)行觀察。還需定期對(duì)培養(yǎng)室的地板用保菇王或84消毒液兌水對(duì)地板進(jìn)行物理消毒，在9每隔兩周后用十五包保菇王對(duì)培養(yǎng)室進(jìn)行物理熏蒸消毒。白天還需定期給與一定的光照，待晚上把培養(yǎng)室的窗簾拉好。依據(jù)整理的數(shù)據(jù)，用SPSS軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)算出每階段的菌絲生長(zhǎng)速率、顯著性、長(zhǎng)勢(shì)(用“+++”表示茂密強(qiáng)壯，“++”表示較茂密，“+”表示生長(zhǎng))及萌發(fā)時(shí)間、顏2結(jié)果分析表3不同的原種培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)狀況間/d勢(shì)菌絲顏色顯著性43潔白aA13淡白bB24淡白bB53+潔白cC34+淡白dC菌料生長(zhǎng)平均遵震《m個(gè)d菌料生長(zhǎng)平均遵震《m個(gè)d配方圖1高溫白靈菇菌絲生長(zhǎng)速度折線圖由表3可知，菌絲管滿時(shí)間由高到低，配方3(30d)>配方5(28d)>配方2(23d)=配方1(23d)>配方4(21d),其中在谷物培養(yǎng)基主要原料為小麥、玉米粒、棉籽殼、玉米芯，麥麩為輔料，從表3可以看出其菌絲在小麥培養(yǎng)基最適合生長(zhǎng)，其緩慢。從滿管時(shí)間比較，得出配方4的菌絲滿管時(shí)間較短。-)=配方2(3.25mm·d-1)>配方5(2.60mm●d1)>配方3(2.00mm·d-1);通過(guò)對(duì)比，配方4菌絲平均生長(zhǎng)速度極顯著高于其它4個(gè)配方，配方1、2之間菌絲生長(zhǎng)速度無(wú)顯著差別，菌絲生長(zhǎng)勢(shì)以配方4最好，配方1、2次之，配方3、5長(zhǎng)勢(shì)較弱。菌絲顏色上除了配方4、5為潔白色，其它配方均為淡白色。綜上所言，高溫白靈菇菌絲在配方4中平均生長(zhǎng)速度較快，3、5號(hào)配方有生長(zhǎng)的痕跡，以原種試管培養(yǎng)基配方4(小麥98%、石膏1%、白砂糖1%、濕度為60%)表4不同栽培袋培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)情況萌發(fā)時(shí)間勢(shì)菌絲顏色顯著性滿袋時(shí)間76潔白56潔白65潔白45潔白35潔白15淡白26+淡白圖2高溫白靈菇菌絲生長(zhǎng)速度折線圖從表4可知，高溫白靈菇菌絲滿袋的時(shí)間為：配方2(48d)>配方4(46d)>配方1(44d)>配方3(40d)>配方6(38d)>配方5(36d)>配方7(35d),其中配方7和配方5的菌絲滿袋時(shí)間最短。高溫白靈菇菌絲生長(zhǎng)速度由高到低的順序?yàn)椋和ㄟ^(guò)分析比較，配方7菌絲平均生長(zhǎng)速度比其它6個(gè)配方長(zhǎng)得快，配方5、6的菌絲生長(zhǎng)速度無(wú)明顯差別，配方1、3的菌絲生長(zhǎng)速度也沒(méi)有明顯的差別；除了配方2菌絲生長(zhǎng)速度慢外，所有配方的萌發(fā)時(shí)間在7、8天左右，菌絲生長(zhǎng)勢(shì)能中配方5、6、7較好，其次是配方1、3、4,配方2是最慢。在顏色上除了配方1、2為淡白外，其它配方均為潔白。通過(guò)分析可得，單是雜木屑培養(yǎng)基(配方7)適合做高溫白靈菇菌絲生長(zhǎng)的材料，前6個(gè)配方培養(yǎng)基均是加有玉米芯。因此對(duì)分析，高溫白靈菇菌絲在栽培袋配方7中的平均生長(zhǎng)速度快，配方2慢。以栽培袋培養(yǎng)基配方7(細(xì)木屑80%、粗麥麩20%、磷酸二氫鉀0.1%、石膏1%、蔗糖1%、適量碳酸鈣)最優(yōu)。通過(guò)初步三個(gè)溫度處理對(duì)比試驗(yàn)可得，高溫白靈菇菌絲在30~33℃的范圍內(nèi)均能正常生長(zhǎng)，且在33℃上其菌絲生長(zhǎng)最快