2025年西師新版選修1生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年西師新版選修1生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷99考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、地衣芽孢桿菌具有調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道微生態(tài)平衡，增加動(dòng)物機(jī)體抗病力的功能。仔兔飼喂地衣芽孢桿菌20-40天后，其免疫器官生長(zhǎng)發(fā)育迅速，血中T淋巴細(xì)胞值較對(duì)照組高。下列敘述不正確的是（）A.地衣芽孢桿菌若長(zhǎng)期保存需置于4℃冷藏B.可用液體培養(yǎng)基對(duì)地衣芽孢桿菌擴(kuò)大培養(yǎng)C.使用后的培養(yǎng)基在丟棄前要經(jīng)過(guò)滅菌處理D.地衣芽孢桿菌改變了仔兔腸道菌群的結(jié)構(gòu)2、下列實(shí)驗(yàn)步驟和儀器安裝的順序不正確的是（）A.提取胡蘿卜素的正確步驟是粉碎→干燥→萃取→濃縮B.處理色譜柱填料時(shí)，可以將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱，以加速膨脹C.安裝蒸餾裝置的順序是自下而上，從左到右D.橘皮經(jīng)過(guò)壓榨后得到的壓榨液中，用普通布袋過(guò)濾可除去固體物和殘?jiān)?，再通過(guò)離心可除去質(zhì)量較小的殘留固體物3、下列對(duì)固定化酶和固定化細(xì)胞的說(shuō)法，正確的是（）A.固定化細(xì)胞常用物理吸附法，固定化酶常用包埋法B.固定化細(xì)胞技術(shù)一次只能固定一種酶C.固定化酶和固定化細(xì)胞所固定的酶都可以反復(fù)使用，但酶的活性迅速下降D.固定化酶不溶于反應(yīng)液中，易于回收，可以重復(fù)利用4、某種菌在30℃的環(huán)境下；經(jīng)過(guò)6周后會(huì)產(chǎn)生2種不同的酶，幾乎可將PET塑料完全分解。下圖是分離；純化和保存菌株的過(guò)程，相關(guān)敘述正確的是（）

A.塑料垃圾中含有大量微生物，是分離該菌株的首選樣品B.篩選培養(yǎng)基中需要加入PET塑料粉末，通過(guò)菌落特征挑出分解PET塑料的菌落C.通過(guò)涂布平板法可以獲得單菌落D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可在常溫下長(zhǎng)期保存菌株5、以下有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A.顯微鏡直接計(jì)數(shù)也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法B.平板劃線法能用來(lái)測(cè)定土壤溶液中某活菌數(shù)目C.培養(yǎng)能合成脲酶的細(xì)菌時(shí)可在培養(yǎng)基中添加尿素作為唯一氮源D.挑選菌種時(shí)可在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)6、某同學(xué)設(shè)計(jì)了如圖所示的果酒和果醋發(fā)酵裝置；下列有關(guān)敘述正確的是。

A.進(jìn)行果醋和果酒發(fā)酵的最適溫度相同B.該裝置既可阻止空氣進(jìn)入，也便于發(fā)酵產(chǎn)生的氣體排出C.去除彎管中的水，該裝置即可滿足果醋發(fā)酵時(shí)底層發(fā)酵液中大量醋酸菌的呼吸D.發(fā)酵過(guò)程中，發(fā)酵液的pH逐漸降低，密度逐漸下降7、日前微信傳言手機(jī)屏幕細(xì)菌比馬桶按鈕上的多。兩個(gè)興趣小組分別展開(kāi)如下圖的實(shí)驗(yàn)過(guò)程。下列分析正確的是。

A.通過(guò)觀察菌落的形態(tài)、大小，可知手機(jī)屏幕和馬桶按鈕上都存在多種微生物B.以上兩組實(shí)驗(yàn)在接種過(guò)程中均需要用到酒精燈、接種環(huán)等C.兩組實(shí)驗(yàn)操作均正確且完全一致，但結(jié)果截然不同，原因可能是取樣部位不同D.該實(shí)驗(yàn)對(duì)照組可以設(shè)置為取相同培養(yǎng)基接種等量無(wú)菌水進(jìn)行培養(yǎng)8、生物興趣小組為探究酶對(duì)蘋(píng)果出汁率的影響；進(jìn)行了四組實(shí)驗(yàn)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果畫(huà)出了如下曲線（曲線序號(hào)同實(shí)驗(yàn)組號(hào)），其中②曲線是在10g果肉+8mg果膠酶所得到的結(jié)果。下列分析正確的是（）

A.①組中加入的酶量和果肉質(zhì)量都一定大于②B.若實(shí)驗(yàn)②④組研究的自變量是果肉的質(zhì)量，則每組實(shí)驗(yàn)中加入的酶量要相同C.②③兩組對(duì)比研究的自變量可能是溫度或者pHD.若④組和②③兩組加入的果肉質(zhì)量一致，則其可能是沒(méi)有加果膠酶9、下列有關(guān)發(fā)酵工程及其應(yīng)用表述正確的是（）A.發(fā)酵工程的菌種，可以從自然界中篩選出來(lái)，也可以通過(guò)誘變育種和基因工程育種獲得B.發(fā)酵罐培養(yǎng)的環(huán)境條件會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖，不會(huì)影響微生物代謝產(chǎn)物的形成C.分離、提純產(chǎn)物可以獲得微生物細(xì)胞本身或者其代謝產(chǎn)物，這是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)D.發(fā)酵工程生產(chǎn)的各種各樣的食品添加劑可以增加食品營(yíng)養(yǎng)，改善食品口味、色澤和品質(zhì)10、一些真菌中的漆酶可以分解油漆中的許多有機(jī)污染物，漆酶可以氧化愈創(chuàng)木酚，產(chǎn)生紅棕色物質(zhì)，因此根據(jù)真菌生長(zhǎng)過(guò)程中培養(yǎng)基的顏色變化，可以挑選出具有潛在漆酶活性的土壤真菌。下列敘述正確的是（）A.含有愈創(chuàng)木酚的平板培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基B.對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌法C.倒置平板培養(yǎng)可防止培養(yǎng)基被滴落的冷凝水污染D.制備培養(yǎng)基的步驟依次是溶化、滅菌、定容、倒平板11、馬奶酒是“蒙古八珍”之一，其中發(fā)酵型奶酒是利用某些微生物將馬奶中的乳糖水解成單糖1和單糖2，酵母菌再利用這些單糖發(fā)酵產(chǎn)生酒精，從而制成馬奶酒?？蒲腥藛T研究分別利用野生型酵母菌和馬奶酒中酵母菌的發(fā)酵情況，結(jié)果如下圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.乳糖屬于二糖，其元素組成是H、OB.14~16h時(shí)，野生型酵母菌內(nèi)可能正在進(jìn)行單糖2發(fā)酵相關(guān)基因的表達(dá)C.與野生型酵母菌相比，馬奶酒中酵母菌完成酒精發(fā)酵用時(shí)更短D.在發(fā)酵過(guò)程中，兩種類(lèi)型的酵母菌細(xì)胞內(nèi)均存在[H]的積累12、下列實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，出現(xiàn)的正常現(xiàn)象有（）A.制作果酒時(shí)，發(fā)酵瓶中溶液產(chǎn)生較多泡沫B.用果酒制作果醋過(guò)程中，液面出現(xiàn)一層褐色菌膜C.制作腐乳過(guò)程中，豆腐表面發(fā)黏且長(zhǎng)有白色菌絲D.用固定化酵母進(jìn)行酒精發(fā)酵，凝膠珠浮在液面13、下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)儀器、材料的使用和實(shí)驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.在解離液中加入適量的纖維素酶，有利于提高洋蔥根尖組織的解離效果B.制作泡菜時(shí)常將壇口用水封好，一段時(shí)間后水面會(huì)不斷出現(xiàn)氣泡C.使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)，需先蓋上蓋玻片再滴培養(yǎng)液D.常溫下體積分?jǐn)?shù)為95％的酒精可以更好的析出雜質(zhì)較少的DNA評(píng)卷人得分三、填空題(共5題，共10分)14、當(dāng)_________________通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)_______________進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程_________________，移動(dòng)速度__________________；而相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)_________________進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程_________________，移動(dòng)速度_______________________。15、以____________的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的________中，觀察液滴在CaCl2溶液中形成凝膠珠的情形。16、橘皮壓榨液中含有橘皮精油和大量水分，還有一些糊狀殘?jiān)入s質(zhì)。可以先用普通____________過(guò)濾除去固體物和殘?jiān)?，然后____________進(jìn)一步除去質(zhì)量較小的殘留固體物，再用分液漏斗或吸管將________________的橘皮油分離出來(lái)。此時(shí)的橘皮油還含有少量的水和果蠟，需在_________℃下靜止5~7d，使雜質(zhì)沉淀，用吸管吸出上層澄清橘皮油，其余部分通過(guò)濾紙過(guò)濾，___________與吸出的上層橘油合并，成為最終的橘皮精油。17、天然香料的主要來(lái)源是動(dòng)物和植物，微生物中的___________也可以產(chǎn)生芳香化合物。18、防止_____________入侵，獲得_________________的培養(yǎng)物，是研究和應(yīng)用微生物的前提。在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物，一方面需要為培養(yǎng)的微生物提供合適的___________________條件，另一方面需要確保無(wú)處不在的其他微生物無(wú)法混入。評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)19、地鐵是北京市重要的軌道交通系統(tǒng)；2018年共運(yùn)送乘客31．16億人次。研究人員對(duì)地鐵設(shè)施的微生物分布情況進(jìn)行了一系列調(diào)查。

（1）樣本的采集：用經(jīng)___________處理的棉簽蘸取肉湯培養(yǎng)基；在座椅；滾梯扶手等各處的接觸面來(lái)回擦拭收集樣品。所有樣品采集完后，均儲(chǔ)存于裝有1ml肉湯培養(yǎng)基的離心管里。

（2）細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定：將儲(chǔ)存在離心管中的樣品___________后吸取100μL樣品注入盛有900μL___________的離心管中，制成10l稀釋倍數(shù)樣品。按照相同的方法；制備系列稀釋樣品勻液，涂布接種在___________(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基上，置于___________中培養(yǎng)48h后計(jì)數(shù)。

（3）細(xì)菌的分離和純化：用___________蘸取離心管中樣品；劃線接種到瑪嘉尿道定位顯色培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后深藍(lán)色菌落即為大腸桿菌。其余種類(lèi)微生物按說(shuō)明書(shū)挑取對(duì)應(yīng)顏色的菌落?，敿文虻蓝ㄎ伙@色培養(yǎng)基是具有___________(填“選擇”或“鑒別”)作用的培養(yǎng)基。

（4）各種耐藥菌的分離鑒定：將603份樣本在添加相應(yīng)抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)后共得到154株菌株；具體結(jié)果如下。

。采樣點(diǎn)。

樣本類(lèi)型。

樣本數(shù)。

分離出耐藥菌的樣本數(shù)。

分離率。

地鐵車(chē)廂。

扶手。

216

73

33．80%

座椅。

216

43

19．91%

19．91%

門(mén)把手。

72

26

36．11%

36．11%

地鐵外環(huán)境。

自動(dòng)售票機(jī)。

17

5

29．41%

滾梯扶手。

42

4

9．52%

9．52%

地鐵衛(wèi)生間。

洗手臺(tái)。

20

3

15．00%

衛(wèi)生間門(mén)。

20

0

0．00%

0．00%

(注：分離率=分離出耐藥菌的樣本數(shù)/樣本數(shù)×100%)

請(qǐng)比較3個(gè)采樣點(diǎn)的耐藥菌分離率情況，并分析造成3個(gè)采樣點(diǎn)分離率存在差異的可能原因。__________。20、臨床使用抗生素前；有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。試驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用_______法或_______法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面；經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)；鑒別等步驟獲得。

（2）取該單菌落適當(dāng)稀釋?zhuān)胈_____法接種于固體培養(yǎng)基表面；而在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。

（3）為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A______；含B的濾紙片周?chē)鷽](méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該病菌對(duì)抗生素B______；含C的濾紙片周?chē)耐该魅Ρ群珹的小，說(shuō)明_______；含D的濾紙片周?chē)耐该魅σ脖群珹的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的_______。

（4）根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素_______。21、科研人員通過(guò)實(shí)驗(yàn)研發(fā)含鹽低；同時(shí)又保持產(chǎn)品質(zhì)量與風(fēng)味的低鹽腐乳，過(guò)程如下：

①篩選分離菌種：將待篩選的菌種涂布到特定的選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行分離；挑選菌種接種于酪蛋白培養(yǎng)基上篩選出蛋白酶活力高的毛霉菌株；

②菌種擴(kuò)大培養(yǎng)：將毛霉接種在斜面培養(yǎng)基上；培養(yǎng)一段時(shí)間后將菌種制成懸液，加一定濃度的鹽水調(diào)節(jié)菌種數(shù)。

③將含菌種的液體噴灑在豆腐塊上；然后培養(yǎng)；裝瓶、腌制。

④腐乳品質(zhì)評(píng)定：通過(guò)氨基酸態(tài)氮含量和感官評(píng)價(jià)對(duì)腐乳品質(zhì)進(jìn)行綜合評(píng)定；結(jié)果如圖，請(qǐng)分析回答：

（1）毛霉的同化類(lèi)型是_________；豆腐塊為毛霉的生長(zhǎng)提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有_____。腐乳制作的原理主要是利用微生物產(chǎn)生的_____酶水解蛋白質(zhì)和脂肪。

（2）步驟①中；毛霉產(chǎn)生的酶能將酪蛋白分解而產(chǎn)生透明圈，在酪蛋白培養(yǎng)基中篩選到三個(gè)單菌落甲；乙、丙，其菌落直徑分別為3．2cm、2．8cm、2．9cm，其菌落與透明圈一起的直徑分別為3．7cm、3．5cm、3．3cm。應(yīng)選擇菌落_____（填甲、乙或丙）作為產(chǎn)蛋白酶活力高的毛霉候選菌。

（3）步驟③中；裝瓶時(shí)需加入鹵湯，在配置鹵湯時(shí)，一般將酒的含量控制在_____左右。步驟④中，水解產(chǎn)生的氨基酸態(tài)氮含量可代表_____。

（4）據(jù)圖分析，鹽含量為_(kāi)____左右適宜制作腐乳。鹽含量不宜過(guò)低，其原因是鹽含量過(guò)低_____。22、近年來(lái)；紀(jì)錄片《舌尖上的中國(guó)》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮，其中多次講述了利用不同微生物的發(fā)酵作用制作的美味食品。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：

（1）在果醋制作時(shí)；運(yùn)用醋酸菌在供應(yīng)________________和糖源充足時(shí)，將糖分解成醋酸；在糖源不充足時(shí)，也可以生成醋酸。反應(yīng)式為：________________________。

（2）制作泡菜的腌制過(guò)程中；會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽。在____________________條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨苯磺酸發(fā)生________________反應(yīng)后，與N—1—萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成__________色染料。

（3）腐乳制作的流程是：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時(shí)；應(yīng)注意控制________；配制鹵湯時(shí)，要使鹵湯中酒的含量控制在_____________%左右。

（4）在果酒制作時(shí)，變酸的原因是_____________________________。評(píng)卷人得分五、綜合題(共4題，共36分)23、苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中；對(duì)環(huán)境有嚴(yán)重危害．小明同學(xué)準(zhǔn)備依據(jù)圖1操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）甲圖中苯酚降解菌的富集培養(yǎng)基應(yīng)含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有_____________________。

（2）將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸________。以達(dá)到獲得苯酚高效降解菌的目的。應(yīng)采用_____________方法來(lái)進(jìn)行該菌種的計(jì)數(shù)與分離，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目要_________________。

（3）制備平板培養(yǎng)基時(shí)除了需要水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還必須添加_____。培養(yǎng)基的滅菌方法為_(kāi)____________________。

（4）乙圖為連續(xù)劃線法示意圖，在該圖中_____（填序號(hào)）區(qū)域最易獲得單菌落。如需要長(zhǎng)期保存該菌種，應(yīng)采用甘油管藏的方法，保存溫度為_(kāi)____。24、纖維素酶在生物燃料制作；布料處理中起重要作用。目前；利用微生物提高纖維素酶產(chǎn)量是主要發(fā)展方向。如圖1為用紫外線照射含有纖維素分解菌的土樣，分離、培養(yǎng)，再檢測(cè)各菌株的纖維素酶的產(chǎn)生量。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：

（1）從自然界獲取纖維素分解菌，采集土樣時(shí)應(yīng)選擇__________的環(huán)境。

（2）紫外線照射的目的是__________，A0組未經(jīng)紫外線處理，其作用是作為_(kāi)_________。

（3）上述培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除含有水、無(wú)機(jī)鹽、酵母膏、水解酪素和瓊脂等外，還應(yīng)有__________；目的是篩選纖維素分解菌。

（4）上述檢測(cè)結(jié)果如圖2所示。由圖可知，__________組酶活力與A0組相同，最可能的原因是__________。

（5）若用剛果紅染色法比較纖維素分解菌產(chǎn)生纖維素酶的量的多少，可通過(guò)觀察平板培養(yǎng)基上以纖維素分解菌為中心的透明圈（如圖3）的大小來(lái)比較，其中與A1組對(duì)應(yīng)的是圖中的__________。

（6）若要保證圖3中透明圈中均為單個(gè)細(xì)胞形成的菌落，操作要求是__________。25、果汁制作是常用的水果加工技術(shù)之一；不僅可以緩解產(chǎn)銷(xiāo)矛盾，而且能夠提高產(chǎn)品的附加值。由蒸菌發(fā)酵生產(chǎn)的果膠酶是食品加工業(yè)中使用量最大的酶制劑之一，被廣泛地應(yīng)用于果汁加工業(yè)。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題:

(1)通常來(lái)講，果膠酶包括多聚半乳糖醛酸酶、___等；生產(chǎn)果汁時(shí)，為了使果膠酶得到充分的利用，除了控制好溫度和pH外，還需要控制好________。

(2)生產(chǎn)果汁時(shí)可用果膠酶來(lái)提高果汁的出汁率和澄清度，理由是___。

(3)現(xiàn)有一種新分離出來(lái)的果膠酶，為探究其最適溫度，某同學(xué)設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn):取4支試管編號(hào)，每支試管均加入等量的果泥、果膠酶+緩沖液，振蕩混勻后分別置于10°C、25°C、35°C、50°C下保溫相同時(shí)間，測(cè)定各試管中的出汁量。實(shí)驗(yàn)中加入緩沖液的目的是___。該實(shí)驗(yàn)存在以下不足之處:溫度設(shè)置方面是___，操作步驟方面是___。26、回答下列問(wèn)題：

（1）配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí)，根據(jù)“細(xì)菌喜葷，霉菌喜素”的規(guī)律，通常在培養(yǎng)基中加入蛋白胨、牛肉膏和_____作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，為了_____，常需加入一定量的NaCl。霉菌要在_____pH培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

（2）實(shí)驗(yàn)中，大腸桿菌在_____培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)液經(jīng)稀釋處理后，在LB固體培養(yǎng)基上進(jìn)行_____，并置于恒溫箱中倒置（目的是_____）培養(yǎng)；可以獲得如圖效果。

（3）_____是篩選高表達(dá)量菌株的最簡(jiǎn)便方法，對(duì)其進(jìn)行初步鑒定時(shí)，下列哪項(xiàng)不能作為鑒定依據(jù)？_____（A．菌落的形狀；B．菌落的大??；C．菌落的數(shù)量；D．菌落的顏色）

（4）果膠的是植物細(xì)胞壁的主要成分，由半乳糖醛酸和_____組成果膠酶提取來(lái)自于_____、蘋(píng)果青霉等。鑒定果膠的原理是_____。

（5）亞硝酸鹽可與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生_____反應(yīng)，其產(chǎn)物與_____偶聯(lián)，形成紫色產(chǎn)物，可用光電比色法測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)曲線以亞硝酸鈉質(zhì)量為橫坐標(biāo)，以_____為縱坐標(biāo)。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、A【分析】【分析】

液體培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)：由于營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻；有利于微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的充分接觸和吸收。

【詳解】

A；地衣芽孢桿菌若長(zhǎng)期保存；可用甘油管藏法，需置于-20℃冷凍，A錯(cuò)誤；

B；液體培養(yǎng)基會(huì)使菌種與培養(yǎng)液更好的接觸；有利于菌種的培養(yǎng)，B正確；

C；使用后的培養(yǎng)基在丟棄前要經(jīng)過(guò)滅菌處理；防止對(duì)環(huán)境造成污染，C正確；

D；地衣芽孢桿菌調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道微生態(tài)平衡；改變了仔兔腸道菌群的結(jié)構(gòu)，D正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的培養(yǎng)、保存等相關(guān)知識(shí)，旨在考查對(duì)相關(guān)知識(shí)的理解能力和綜合運(yùn)用能力。2、A【分析】【分析】

1；植物色素的提?。?/p>

（1）胡蘿卜素；葉綠素、葉黃素、番茄紅素和辣椒紅素都是脂溶性植物色素；一般不溶于水，易溶于酒精、乙醚和氯仿等有機(jī)溶劑。故常用有機(jī)溶劑萃取胡蘿卜素。

（2）胡蘿卜素的提?。?/p>

①胡蘿卜素的性質(zhì)：胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶；化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機(jī)溶劑。

②胡蘿卜素的提取來(lái)源：提取天然胡蘿卜素的方法主要有；一是從植物中提?。欢菑拇竺娣e養(yǎng)殖的巖藻中獲得；三是利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)。

③萃取劑：最適宜作胡蘿卜素萃取劑的是石油醚。

④實(shí)驗(yàn)流程：胡蘿卜→粉碎→干燥→萃?。ㄊ兔眩^(guò)濾_→濃縮→胡蘿卜素→鑒定（紙層析法）。

（3）注意事項(xiàng)：①萃取前往往要將胡蘿卜烘干；粉碎；并且原料顆粒越小越好，這樣做的目的：讓原料與萃取劑充分接觸，提高萃取效率；②萃取過(guò)程中采用水浴加熱的原因：有機(jī)溶劑用明火直接加熱易爆炸；③在提取的胡蘿卜素粗品鑒定中，點(diǎn)樣斑點(diǎn)用吹風(fēng)機(jī)吹干時(shí)，溫度不宜過(guò)高，否則斑點(diǎn)會(huì)變成黃色。

2；提取橘皮精油：

（1）橘皮精油的性質(zhì)：無(wú)色透明；具有誘人的橘香味，主要成分為檸檬烯，一般采用壓榨法提取。

（2）提取流程：石灰水浸泡→漂洗→壓榨→過(guò)濾→靜置→再次過(guò)濾→橘皮油。

（3）分析：橘皮洗凈晾干后；要浸泡在pH為12；質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7%～8%的石灰水中16～24h，其目的是防止橘皮壓榨時(shí)滑脫，提高出油率。

【詳解】

A；胡蘿卜→粉碎→干燥→萃?。ㄊ兔眩^(guò)濾_→濃縮→胡蘿卜素→鑒定（紙層析法）；A錯(cuò)誤；

B；處理色譜柱填料時(shí)；可以將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱，以加速膨脹，這種方法不但能夠節(jié)省時(shí)間，而且還可以除去凝膠中可能帶有的微生物，排除膠粒中的空氣，B正確；

C；安裝蒸餾裝置的順序是自下而上；從左到右，拆除時(shí)的順序與安裝順序相反，C正確；

D；橘皮經(jīng)過(guò)壓榨后得到的壓榨液中；用普通布袋過(guò)濾可除去固體物和殘?jiān)?，再通過(guò)離心可除去質(zhì)量較小的殘留固體物，D正確。

故選A。3、D【分析】【分析】

包埋法是將微生物細(xì)胞均勻地包埋在不溶于水的多孔性載體中；多用于細(xì)胞的固定?；瘜W(xué)結(jié)合法是利用共價(jià)鏈；離子鍵將酶分子或細(xì)胞相互結(jié)合，或?qū)⑵浣Y(jié)合到載體上，多用于酶的固定。物理吸附法是通過(guò)物理吸附作用，把酶固定在纖維素、瓊脂糖、多孔玻璃和離子交換樹(shù)脂等載體上。固定化酶能夠使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，還可以被反復(fù)利用，有利于產(chǎn)物的純化。

【詳解】

A；固定化技術(shù)包括包埋法、物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法（交聯(lián)法）；由于細(xì)胞相對(duì)于酶來(lái)說(shuō)更大，難以被吸附或結(jié)合，因此多采用包埋法，酶分子較小，容易從包埋材料中漏出，故固定化酶常用物理吸附法，A錯(cuò)誤；

B；固定化細(xì)胞技術(shù)能固定一系列的酶；能催化一系列生化反應(yīng)，B錯(cuò)誤；

C；固化酶和固定化細(xì)胞都能反復(fù)使用；且酶的活性不會(huì)下降，C錯(cuò)誤；

D；固定化酶不溶于反應(yīng)液中；易于回收，可以重復(fù)利用，D正確。

故選D。4、B【分析】【分析】

1.根據(jù)題意和圖示分析可知：分離；純化和保存菌株的一般過(guò)程為：取樣→制成樣品懸液→涂布→劃線→接種。

2.分離和純化細(xì)菌需多次進(jìn)行選擇培養(yǎng)。

3.菌種保存：

。項(xiàng)目。

臨時(shí)保藏法。

甘油管藏法。

適用對(duì)象。

頻繁使用的菌種。

長(zhǎng)期保存的菌種。

培養(yǎng)基類(lèi)型。

固體斜面培養(yǎng)基。

液體培養(yǎng)基。

溫度。

4℃

-20℃

方法。

菌落長(zhǎng)成后于冰箱中保存；每3～6個(gè)月將菌種。

從舊的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。

將培養(yǎng)的菌液與等體積滅菌后的甘油混合菌均勻后于冷凍箱內(nèi)保存。

缺點(diǎn)。

菌種易被污染或產(chǎn)生變異。

【詳解】

A；塑料垃圾中含有大量微生物；但不一定含有分解PET塑料的菌株，A錯(cuò)誤；B、篩選培養(yǎng)基中需要加PET塑料粉末作為該菌株的底物，通過(guò)菌落特征挑出分解PET塑料的菌落，從而獲得分解PET塑料的菌株，B正確；

C；在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落；可以通過(guò)劃線或稀釋涂布平板法進(jìn)一步純化得到單個(gè)菌落，C錯(cuò)誤；

D；斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物；可在低溫下臨時(shí)保存菌株，如果長(zhǎng)期保存菌種選擇甘油管藏法，D錯(cuò)誤。

故選B。5、B【分析】【分析】

本題考查培養(yǎng)基對(duì)微生物的篩選與微生物的分離計(jì)數(shù)；要求考生明確利用選擇培養(yǎng)基可對(duì)微生物進(jìn)行篩選，利用平板劃線法或稀釋涂布平板法可進(jìn)行微生物分離，利用稀釋涂布平板法可測(cè)定土壤溶液中某活菌數(shù)目。

【詳解】

AB；在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)；常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是稀釋涂布平板法，除此之外，顯微鏡直接計(jì)數(shù)也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法，A正確、B錯(cuò)誤；

C；培養(yǎng)能合成脲酶的細(xì)菌時(shí)；可在培養(yǎng)基中添加尿素作為唯一氮源，在該培養(yǎng)基上只有能合成脲酶的細(xì)菌才能生長(zhǎng)，C正確；

D；尋找并挑選菌種時(shí)；應(yīng)在適宜其生長(zhǎng)定的環(huán)境中進(jìn)行，如尋找纖維素分解菌應(yīng)在富含纖維素的環(huán)境中進(jìn)行，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】

對(duì)微生物的純化培養(yǎng)與分離計(jì)數(shù)的相關(guān)知識(shí)的準(zhǔn)確記憶和理解是解題關(guān)鍵。二、多選題(共8題，共16分)6、B:D【分析】【分析】

果酒制作的原理：先通氣；酵母菌進(jìn)行有氧呼吸而大量繁殖，后密封，酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精。果醋制作的原理：醋酸菌是嗜溫菌，也是嗜氧菌，因此其進(jìn)行果醋發(fā)酵時(shí)需要不間斷的供氧。

【詳解】

A；果酒發(fā)酵的最適溫度是18～25℃；果醋發(fā)酵的最適溫度是30～35℃，錯(cuò)誤；

B；果酒發(fā)酵需要無(wú)氧環(huán)境；該裝置鵝頸中的水可以隔絕空氣，創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境，果酒發(fā)酵中產(chǎn)生的氣體是二氧化碳，該裝置便于二氧化碳的排除，正確。

C；醋酸菌是嗜氧菌；即使去除彎管中的水，該裝置也不能滿足果醋發(fā)酵時(shí)底層發(fā)酵液中大量醋酸菌呼吸所需的氧氣，錯(cuò)誤；

D；果酒發(fā)酵過(guò)程中；葡萄糖分解變成酒精，因此發(fā)酵液密度會(huì)逐漸減?。煌瑫r(shí)pH會(huì)逐漸降低，呈酸性，正確。

故選BD。7、A:C:D【分析】【分析】

由圖可知；該實(shí)驗(yàn)是對(duì)照實(shí)驗(yàn)，自變量是手機(jī)屏幕和馬桶按鈕，因變量是細(xì)菌的數(shù)目。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中細(xì)菌的計(jì)數(shù)用到了稀釋涂布平板法。

【詳解】

A；據(jù)圖可知；通過(guò)觀察菌落的形態(tài)、大小，可知手機(jī)屏幕和馬桶按鈕上都存在多種微生物，A正確；

B；微生物的接種最常用的是平板劃線法和稀釋涂布法；只有平板劃線法會(huì)用到接種環(huán)，而根據(jù)圖示中菌落的分布特點(diǎn)可知，本實(shí)驗(yàn)采用的是稀釋涂布平板法，需用涂布器，B錯(cuò)誤；

C；通過(guò)觀察菌落的形態(tài)、大小可以看出；兩組實(shí)驗(yàn)操作均正確，但結(jié)果截然不同，原因可能是手機(jī)的取樣部位和馬桶的取樣部位都不相同，C正確；

D；該實(shí)驗(yàn)缺少對(duì)照實(shí)驗(yàn)；可以設(shè)置取相同培養(yǎng)基接種等量無(wú)菌水的組進(jìn)行培養(yǎng)作為對(duì)照組，D正確。

故選ACD。8、B:C:D【分析】【分析】

分析圖示可知；①組反應(yīng)速度最快，最終的果汁體積最大，可能是酶的量多以及底物最多。②③組最終的果汁體積相同，說(shuō)明底物相同，但二者達(dá)到最大值的時(shí)間不同，說(shuō)明二者酶的活性不同或酶量不同。④的果汁體積最少，可能是底物最少或沒(méi)有加果膠酶。

【詳解】

A；①中酶量不一定大于②中的；也可能是①中酶的活性更大，A錯(cuò)誤；

B；若實(shí)驗(yàn)②④組研究的自變量是果肉的質(zhì)量；則酶的量為無(wú)關(guān)變量，每組實(shí)驗(yàn)中加入的酶量要相同，B正確；

C；不同溫度或pH時(shí)酶的活性不同；催化反應(yīng)的速率不同，但最終產(chǎn)物的量相同，因此②③兩組對(duì)比研究的自變量可能是溫度或者pH，C正確；

D；果膠酶能分解果膠；提高出汁率，若④組和②③兩組加入的果肉質(zhì)量一致，則其可能是沒(méi)有加果膠酶，使出汁率降低，D正確。

故選BCD。9、A:D【分析】【分析】

微生物發(fā)酵指的是利用微生物；在適宜的條件下，將原料經(jīng)過(guò)特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類(lèi)所需要的產(chǎn)物的過(guò)程。

【詳解】

A；用于發(fā)酵的菌種可以從自然界中篩選；也可以通過(guò)誘變育種或基因工程育種獲得，A正確；

B；發(fā)酵罐培養(yǎng)的環(huán)境條件會(huì)影響代謝的途徑從而影響產(chǎn)物的形成；例如谷氨酸發(fā)酵過(guò)程中，發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4∶1時(shí)，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3∶1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增，B錯(cuò)誤；

C；發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵過(guò)程；C錯(cuò)誤；

D；發(fā)酵工程生產(chǎn)的各種各樣的食品添加劑可以增加食品營(yíng)養(yǎng)；改善食品口味、色澤和品質(zhì)，D正確。

故選AD。

【點(diǎn)睛】10、A:B:C【分析】【分析】

1；選擇培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基；使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率。

2；制備固體培養(yǎng)基的基本過(guò)程為計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、定容、滅菌、倒平板。

【詳解】

A；從功能上分析；含有愈創(chuàng)木酚的平板培養(yǎng)基可用于篩選具有潛在漆酶活性的土壤真菌，屬于選擇培養(yǎng)基，A正確；

B；對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)；應(yīng)采用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，B正確；

C；平板冷凝后皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠；凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，若將平板倒置培養(yǎng)，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染，C正確；

D；制備培養(yǎng)基的步驟是：計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、定容、滅菌、倒平板；D錯(cuò)誤。

故選ABC。

【點(diǎn)睛】11、A:B:C【分析】【分析】

據(jù)圖可知；野生型酵母菌首先利用單糖1進(jìn)行發(fā)酵，當(dāng)這種糖耗盡時(shí)（14h左右），酒精產(chǎn)量的增加停滯一段時(shí)間，才開(kāi)始利用單糖2進(jìn)行發(fā)酵。

【詳解】

A；乳糖是由1分子半乳糖和1分子葡萄糖構(gòu)成的二糖；其元素組成是C、H、O，A正確；

B；據(jù)圖可知；野生型酵母菌首先利用單糖1進(jìn)行發(fā)酵，當(dāng)這種糖耗盡時(shí)（14h左右），酒精產(chǎn)量的增加停滯一段時(shí)間，才開(kāi)始利用單糖2進(jìn)行發(fā)酵。故14~16h時(shí)，野生型酵母菌內(nèi)可能正在進(jìn)行單糖2發(fā)酵相關(guān)基因的表達(dá)，以促進(jìn)對(duì)單糖2的利用，B正確；

C；由圖可知；野生型酵母菌完成酒精發(fā)酵用時(shí)大約22h，馬奶酒中酵母菌完成酒精發(fā)酵用時(shí)大約14h，即馬奶酒中酵母菌完成酒精發(fā)酵用時(shí)更短，C正確；

D、在酵母菌酒精發(fā)酵過(guò)程中，[H]與丙酮酸反應(yīng)生成酒精和CO2；因此兩種類(lèi)型的酵母菌內(nèi)均不存在[H]的積累，D錯(cuò)誤。

故選ABC。12、A:C:D【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖；（2）在無(wú)氧條件下，產(chǎn)生酒精和二氧化碳。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；果酒制作時(shí)；除了產(chǎn)生酒精，還會(huì)產(chǎn)生大量二氧化碳，因此發(fā)酵瓶中容易產(chǎn)生較多泡沫，A正確；

B；用果酒制作果醋過(guò)程中；液面出現(xiàn)一層白色菌膜，而不是褐色菌膜，B錯(cuò)誤；

C；制作腐乳過(guò)程中；豆腐表面發(fā)黏且長(zhǎng)有白色菌絲，C正確；

D；用固定化酵母進(jìn)行酒精發(fā)酵；酒精濃度越來(lái)越高，因此凝膠珠逐漸浮上液面，D正確。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】13、A:B:D【分析】【分析】

1；觀察細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)的步驟：解離（解離液由鹽酸和酒精組成；目的是使細(xì)胞分離開(kāi)）、漂洗（洗去解離液，便于染色）、染色（用龍膽紫、醋酸洋紅等堿性染料）、制片（該過(guò)程中壓片是為了將根尖細(xì)胞壓成薄層，使之不相互重疊影響觀察）和觀察（先低倍鏡觀察，后高倍鏡觀察）；

2；DNA不溶于酒精溶液；但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。

【詳解】

A；在解離液中加入纖維素酶；纖維素酶會(huì)變性失活，不會(huì)提高洋蔥根尖組織的解離效果，A錯(cuò)誤；

B；制作泡菜時(shí)常將壇口用水封好；可以提供無(wú)氧的環(huán)境，乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸，一段時(shí)間后水面不會(huì)出現(xiàn)氣泡，B錯(cuò)誤；

C；使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板記數(shù)前；先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓其自行滲入，C正確；

D；DNA不溶解于酒精；而其它雜質(zhì)能溶解于酒精，則用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻的酒精能更好的析出雜質(zhì)較少的DNA，D錯(cuò)誤。

故選ABD。三、填空題(共5題，共10分)14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)容易較長(zhǎng)較慢無(wú)法路程較短較快15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】恒定CaCl2溶液16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】布袋離心上層5-10濾液17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】真菌18、略

【解析】①.雜菌②.純凈③.營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)19、略

【分析】【分析】

1；稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落.由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起，觀察到的只是一個(gè)菌落，因此其統(tǒng)計(jì)的數(shù)值往往比實(shí)際數(shù)目偏低。

2；培養(yǎng)基按功能分有選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。

。種類(lèi)。

制備方法。

特征。

用途。

選擇培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分。

根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)；物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌；從而提高該菌的篩選率。

加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌。

鑒別培養(yǎng)基。

加入某種試劑或化學(xué)藥品。

依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)；產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)。

鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌。

【詳解】

（1）樣本的采集：用經(jīng)滅菌處理的棉簽蘸取肉湯培養(yǎng)基；在座椅；滾梯扶手等各處的接觸面來(lái)回擦拭收集樣品。

（2）細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定：將儲(chǔ)存在離心管中的樣品震蕩均勻后吸取100μL樣品注入盛有900μL無(wú)菌水的離心管中，制成10l稀釋倍數(shù)樣品。按照相同的方法；制備系列稀釋樣品勻液，涂布接種在固體培養(yǎng)基上，置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h后計(jì)數(shù)。

（3）細(xì)菌的分離和純化：用接種環(huán)蘸取離心管中樣品；劃線接種到瑪嘉尿道定位顯色培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后深藍(lán)色菌落即為大腸桿菌。其余種類(lèi)微生物按說(shuō)明書(shū)挑取對(duì)應(yīng)顏色的菌落。故瑪嘉尿道定位顯色培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。

（4）由表格數(shù)據(jù)可知，3個(gè)采樣點(diǎn)的耐藥菌分離率比較為地鐵車(chē)廂>地鐵外環(huán)境>地鐵衛(wèi)生間。原因分析：地鐵衛(wèi)生間的分離率最低的原因：有專(zhuān)人打掃；清潔頻率高等；地鐵車(chē)廂的分離率最高的原因：車(chē)廂相對(duì)封閉，空氣不流通，人員密集，地鐵線路長(zhǎng)導(dǎo)致打掃頻次低等。地鐵外環(huán)境分離率居中的原因：封閉程度打掃頻率介于兩者之間。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物分離和培養(yǎng)，要求考生掌握培養(yǎng)基配制的原則，識(shí)記分離和純化微生物常用的兩種方法，掌握采用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)微生物的具體過(guò)程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題?！窘馕觥繙缇袷幘鶆驘o(wú)菌水固體恒溫培養(yǎng)箱接種環(huán)鑒別分離率比較：地鐵車(chē)廂>地鐵外環(huán)境>地鐵衛(wèi)生間；原因分析：地鐵衛(wèi)生間的分離率最低的原因：有專(zhuān)人打掃，清潔頻率高等；地鐵車(chē)廂的分離率最高的原因：車(chē)廂相對(duì)封閉，空氣不流通，人員密集，地鐵線路長(zhǎng)導(dǎo)致打掃頻次低等。地鐵外環(huán)境分離率居中的原因：封閉程度打掃頻率介于兩者之間20、略

【分析】【分析】

（1）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞；并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落。

（2）根據(jù)材料分析；透明圈的出現(xiàn)，說(shuō)明該菌不能生長(zhǎng)。

【詳解】

（1）從樣本中分離菌落常用稀釋涂布平板法或平板劃線法．將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面；經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)；鑒別等步驟獲得。

（2）取該單菌落適當(dāng)稀釋?zhuān)皇蛊洹熬鶆蛏L(zhǎng)”的方法是用涂布法接種于固體培養(yǎng)基表面，適宜溫度培養(yǎng)。

（3）在抗藥性檢驗(yàn)過(guò)程中；如果在菌落周?chē)霈F(xiàn)透明的圓圈，說(shuō)明此種抗生素可抑制該細(xì)菌；透明圈的大小表示著此種抗生素抗菌的強(qiáng)弱．將分別含有A；B、C三種抗生素的濾紙均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A敏感；含B的濾紙片周?chē)鷽](méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該病菌對(duì)抗生素B不敏感；含C的濾紙片周?chē)耐该魅Ρ群珹的小，說(shuō)明該病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱．含D的濾紙片周?chē)耐该魅σ脖群珹的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的耐藥菌。

（4）根據(jù)（3）的分析；實(shí)驗(yàn)結(jié)果抗生素A對(duì)該致病菌的作用最好。

【點(diǎn)睛】

關(guān)鍵：抗生素是由真菌產(chǎn)生的，可以抑制生長(zhǎng)、繁殖或殺死細(xì)菌等致病菌的一類(lèi)物質(zhì)，含A的濾紙周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明有抗生素A的地方該致病菌受到抑制；B的周?chē)鷽](méi)有透明圈說(shuō)明致病菌對(duì)抗生素B不敏感，通過(guò)C的透明圈要比A的透明圈的小，說(shuō)明該致病菌對(duì)C的敏感性比A的弱;D出現(xiàn)了透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)D敏感，但是在透明圈上出現(xiàn)一個(gè)菌落，又排除雜菌污染，判斷此菌落的微生物對(duì)抗生素D產(chǎn)生了耐藥性?！窘馕觥竣?平板劃線法②.稀釋涂布平板法③.涂布④.敏感⑤.不敏感⑥.該致病菌對(duì)C的敏感性較A的弱⑦.耐藥菌⑧.A21、略

【分析】【分析】

1．分析曲線；隨著鹽含量的增加，氨基酸態(tài)氮含量下降，而感官評(píng)價(jià)升高，但是腐乳品質(zhì)評(píng)定需要對(duì)兩項(xiàng)值進(jìn)行綜合評(píng)定。

2．腐乳的制作過(guò)程主要是：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵；如青霉；酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。

【詳解】

（1）毛霉的同化類(lèi)型屬于異養(yǎng)型；豆腐塊為毛霉的生長(zhǎng)提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源；氮源、水分和無(wú)機(jī)鹽。腐乳制作的原理主要是利用微生物產(chǎn)生的蛋白酶、脂肪酶，氨基酸態(tài)氮含量可代表蛋白質(zhì)的分解情況。

（2）應(yīng)挑選透明圈與菌落直徑比值大的菌株用于生成；菌落甲透明圈與菌落直徑的比值為3.7/3.2≈1.16，菌落乙透明圈與菌落直徑的比值為3.5/2.8≈1.25，菌落丙透明圈與菌落直徑的比值為3.3/2.9≈1.14。因此應(yīng)選擇菌落乙作為產(chǎn)蛋白酶活力高的毛霉候選菌。

（3）裝瓶時(shí)需加入鹵湯；在配置鹵湯時(shí)，一般將酒的含量控制在12%左右。步驟④中，水解產(chǎn)生的氨基酸態(tài)氮含量可代表蛋白質(zhì)的分解情況。

（4）腐乳的質(zhì)量需要通過(guò)氨基酸態(tài)氮含量和感官評(píng)價(jià)對(duì)腐乳品質(zhì)進(jìn)行綜合評(píng)定；由曲線圖可知，腐乳的鹽含量為11%較為適宜；鹽含量不宜過(guò)低，鹽含量過(guò)低不足以抑制微生物的生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)。

【點(diǎn)睛】

本題以腐乳的制作為題材，考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠掌握無(wú)菌技術(shù)的主要內(nèi)容，掌握腐乳制作的步驟以及相關(guān)注意點(diǎn)，能夠根據(jù)曲線信息解答相關(guān)問(wèn)題。【解析】異養(yǎng)碳源、氮源、水分和無(wú)機(jī)鹽蛋白酶、脂肪酶乙12%蛋白質(zhì)的分解情況11%不足以抑制微生物的生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)22、略

【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類(lèi)型為兼性厭氧型，果酒制作原理是酵母菌在無(wú)氧條件下，利用葡萄糖產(chǎn)生酒精和CO2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型，當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）在果醋制作時(shí)；醋酸菌在供應(yīng)氧氣和糖源充足時(shí)，能將糖分解成醋酸；在糖源不充足時(shí)，也可以利用酒精生成醋酸。反應(yīng)式為：C?H?OH+O?→CH?COOH+H?O

（2）制作泡菜的腌制過(guò)程中；會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽。在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N—1—萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰色染料。

（3）腐乳制作的流程是：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時(shí)；應(yīng)注意控制鹽的用量；配制鹵湯時(shí)，要使鹵湯中酒的含量控制在12%左右，若酒精含量過(guò)高會(huì)延長(zhǎng)腐乳成熟的時(shí)間，若酒精含量過(guò)低則不足以殺菌。

（4）在果酒制作時(shí)；混有雜菌可能會(huì)讓果酒變酸。

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作、泡菜的制作等知識(shí)，要求學(xué)生掌握果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的原理及條件，掌握亞硝酸鹽的測(cè)定方法，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。【解析】氧氣C?H?OH+O?→CH?COOH+H?O鹽酸酸化重氮化玫瑰色鹽的用量12混有雜菌五、綜合題(共4題，共36分)23、略

【分析】【分析】

微生物培養(yǎng)基一般都含有水；碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽；此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營(yíng)養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用。微生物常見(jiàn)的接種的方法有：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種、劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

（1）培養(yǎng)基成分中的有機(jī)物均可以提供碳源；即蛋白胨；苯酚據(jù)可以作為碳源；

（2）分析實(shí)驗(yàn)可知；實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖呛Y選苯酚降解菌，因此將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸增加，以達(dá)到富集苯酚降解菌的目的，圖甲中采用的是稀釋涂布平板法，以便于菌落計(jì)數(shù)與分離，用這種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目要小，因?yàn)槌３Ｓ袃蓚€(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起生長(zhǎng)繁殖而形成一個(gè)菌落；

（3）制備平板培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基；除了需要水；碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（生長(zhǎng)因子）外，還必須添加瓊脂作為凝固劑。培養(yǎng)基的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌法；

（4）圖乙為平板劃線法；隨著劃線次數(shù)的增加，菌種進(jìn)一步被稀釋?zhuān)虼藞D中③區(qū)域更易獲得單菌落。長(zhǎng)期保存該菌種，應(yīng)采用甘油管藏的方法，保存溫度為-20℃。

【點(diǎn)睛】

解決本題關(guān)鍵要熟悉微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基配制和滅菌、分離和計(jì)數(shù)方法等?！窘馕觥康鞍纂恕⒈椒釉黾樱ㄉ撸┫♂屚坎计桨宓铜傊虅└邏赫羝麥缇?20℃24、略

【分析】【分析】

1；土壤中存在著大量纖維素分解酶；可以產(chǎn)生纖維素酶，纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物不能生長(zhǎng)。

2、據(jù)圖分析：圖1所示的b過(guò)程為稀釋涂布平板，培養(yǎng)基中含有多種酶活力不同的突變的纖維素分解菌；圖2中纖維素酶產(chǎn)量最高的是A1組，最少的是A6組；圖3中④的透明圈最大；說(shuō)明其分解纖維素的能力最強(qiáng)。

（1）

篩選纖維素分解菌時(shí)；土壤取樣需要到富含纖維素的環(huán)境中取樣。

（2）

圖1中紫外線照射的目的是誘發(fā)基因突變，通過(guò)紫外線照射處理可提高突變頻率，有可