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文檔簡介

實驗七免疫熒光技術(shù)及其應(yīng)用溶血與熒光--實驗?zāi)康?歸納免疫熒光技術(shù)的原理，描述免疫熒光的實驗操作步驟。2歸納免疫熒光技術(shù)的特點及應(yīng)用。溶血與熒光--二、實驗原理免疫標(biāo)記技術(shù)（immunolabellingtechnique）:

是指用熒光素、放射性同位素、酶、發(fā)光劑或電子致密物質(zhì)等作為示蹤劑，標(biāo)記抗體或抗原進行的抗原抗體反應(yīng)。特點：高度靈敏、特異、快速，定性、定量、定位分類：免疫酶技術(shù)、免疫熒光技術(shù)、放射免疫技術(shù)、免疫電鏡技術(shù)、免疫膠體金技術(shù)和發(fā)光免疫測定。溶血與熒光--免疫熒光技術(shù)1熒光色素與抗體或抗原牢固結(jié)合，但不影響該抗體或抗原的免疫特性。2熒光標(biāo)記的抗原抗體復(fù)合物經(jīng)激發(fā)后產(chǎn)生熒光，可檢測和定位未知的抗原或分析抗體的產(chǎn)生。溶血與熒光--免疫熒光的種類溶血與熒光--檢測小鼠脾臟當(dāng)中的T細胞數(shù)溶血與熒光--T細胞表面標(biāo)記TCR識別結(jié)合MHC分子的抗原

CD3參與受體的裝配及信號傳遞溶血與熒光--溶血與熒光--溶血與熒光--檢測小鼠脾臟當(dāng)中的T細胞數(shù)溶血與熒光--實驗材料

小鼠脾臟（四人一只）剪刀、鑷子載玻片每組二張兔抗鼠CD3一抗

FITC標(biāo)記的羊抗兔二抗熒光顯微鏡及熒光燈源。溶血與熒光--實驗步驟1．印片：小鼠取出脾臟，以小剪刀剪開，吸干創(chuàng)面血液，用創(chuàng)面輕壓玻片，使之粘上1～2層細胞，然后晾干。2．標(biāo)本的固定：預(yù)冷的丙酮室溫10min，標(biāo)本片固定后立刻用冷PH7.4，0.01MPBS沖洗，取出后空氣干燥溶血與熒光--實驗步驟3．熒光抗體染色法：兔抗鼠CD3一抗PBSPBS37度濕盒中溫育1小時，PBS浸洗三邊，每次三分鐘溶血與熒光--實驗步驟（2）加熒光標(biāo)記二抗：

PI+FITC標(biāo)記的羊抗兔二抗PI然后在濕盒中37℃保溫30min，同上法洗滌。溶血與熒光

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