GB/T 45101-2024動物炭疽診斷技術(shù)

ICS11220

CCSB.41

中華人民共和國國家標準

GB/T45101—2024

動物炭疽診斷技術(shù)

Diagnostictechniquesforanimalanthrax

2024-12-31發(fā)布2025-07-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標準化管理委員會

GB/T45101—2024

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

術(shù)語和定義

3………………1

縮略語

4……………………1

生物安全措施

5……………1

臨床診斷

6…………………2

流行特點

6.1……………2

臨床癥狀

6.2……………2

病理變化

6.3……………2

結(jié)果判定

6.4……………3

樣品的采集保存運輸和處理

7、、…………3

樣品的采集

7.1…………………………3

樣品的保存與運輸

7.2…………………3

樣品的處理

7.3…………………………3

實驗室診斷

8………………4

染色鏡檢

8.1……………4

分離與鑒定

8.2…………………………5

噬菌體裂解試驗和青霉素抑制試驗

8.3γ……………6

8.4PCR…………………6

8.5Real-timePCR………………………8

環(huán)狀沉淀試驗試驗

8.6(Ascoli)………………………9

綜合判定

9…………………10

附錄規(guī)范性試劑的配制

A()……………11

草酸銨結(jié)晶紫染色液

A.1……………11

革蘭氏碘液

A.2………………………11

沙黃復(fù)染液

A.3………………………11

堿性美藍染色液

A.4…………………11

馬或羊血瓊脂平板

A.55%~7%……………………11

瓊脂平板

A.6PLET……………………11

普通營養(yǎng)肉湯

A.7……………………11

普通營養(yǎng)瓊脂平板

A.8………………11

Ⅰ

GB/T45101—2024

碳酸氫鈉瓊脂平板

A.90.7%…………11

電泳緩沖液

A.1050×TAE……………12

瓊脂糖凝膠

A.112%…………………12

苯酚生理鹽水

A.120.5%………………12

附錄資料性核酸檢測用引物探針序列信息及擴增結(jié)果圖

B()、……13

炭疽桿菌引物

B.1PCR………………13

炭疽桿菌擴增產(chǎn)物電泳圖

B.2PCR…………………13

引物和探針

B.3Real-timePCR………………………13

炭疽桿菌基因?qū)崟r熒光擴增曲線圖

B.4PAPCR…………………14

炭疽桿菌基因?qū)崟r熒光擴增曲線圖

B.5CAPCR…………………14

附錄資料性炭疽桿菌陽性對照重組質(zhì)粒的目的基因序列

C()PCR………………15

炭疽桿菌保護性抗原基因重組質(zhì)粒參考序列

C.1(PA)……………15

炭疽桿菌莢膜基因重組質(zhì)粒參考序列

C.2(CA)……………………15

附錄資料性環(huán)狀沉淀試驗結(jié)果圖

D()…………………16

參考文獻

……………………17

Ⅱ

GB/T45101—2024

前言

本文件按照標準化工作導(dǎo)則第部分標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任

。。

本文件由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出

。

本文件由全國動物衛(wèi)生標準化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本文件起草單位中國農(nóng)業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所軍事科學院軍事醫(yī)學研究院軍事獸醫(yī)研究

:、

所中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所北京市動物疫病預(yù)防控制中心

、、。

本文件主要起草人丁家波秦彤祝令偉蔣卉郭學軍張瑩輝范學政彭小薇馮宇王林

:、、、、、、、、、、

程汝佳

。

Ⅲ

GB/T45101—2024

引言

炭疽是由炭疽芽孢桿菌Bacillusanthracis引起的一種人獸共患急性熱性敗血性傳

(Anthrax)()、、

染病廣泛分布于世界各地該病主要發(fā)生于畜間以牛羊馬等草食動物最為易感雜食動物次之人

,。,、、,,

主要通過接觸患炭疽的動物或污染的動物制品環(huán)境感染而患病動物感染炭疽主要分為最急性型急

、。、

性型亞急性型和慢性型的臨床類型各類型病死率均較高危害嚴重人畜健康世界動物衛(wèi)生組織

、,,。

將其列為必須報告的動物疫病我國將其列為二類動物疫病

(WOAH),。

本文件的制定參考了陸生動物診斷試驗和疫苗手冊年版章炭疽診斷技

WOAH《》(2023)3.1.1

術(shù)并結(jié)合了我國相關(guān)技術(shù)研究新成果

,。

Ⅳ

GB/T45101—2024

動物炭疽診斷技術(shù)

1范圍

本文件描述了動物炭疽的臨床診斷染色鏡檢分離與鑒定噬菌體裂解試驗青霉素抑制試驗

、、、γ、、

環(huán)狀沉淀試驗等實驗室診斷方法

PCR、Real-timePCR、。

本文件適用于動物炭疽的診斷檢測檢疫監(jiān)測和流行病學調(diào)查

、、、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

,,

件僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

實驗室生物安全通用要求

GB19489

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義

。

4縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

值循環(huán)閾值

Ct:(CycleThreshold)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(Diethypyrocarbonate)

脫氧核糖核酸

DNA:(DeoxyribonucleicAcid)

乙二胺四乙酸

EDTA:(EthyleneDiamineTetraaceticAcid)