第一節(jié)植物細(xì)胞工程北師大

第一節(jié)植物細(xì)胞工程北師大第一節(jié)植物細(xì)胞工程北師大一、植物細(xì)胞工程得基本技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物細(xì)胞核移植技術(shù)1、植物組織培養(yǎng)技術(shù)

理論上,具有某種生物全部得遺傳信息得任何一個細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整生物體得潛能。原理:植物細(xì)胞得全能性

但就是,在生物得生長發(fā)育過程中,細(xì)胞并不會表現(xiàn)出全能性,而就是分化成各種組織與器官。

這就是因為在特定得時間與空間條件下,細(xì)胞中得基因會有選擇性地表達(dá)出各種蛋白質(zhì),從而構(gòu)成生物體不同得組織與器官。表達(dá)全能性得條件:離體胡蘿卜得組織培養(yǎng)實驗原理

植物體得活細(xì)胞一般都具有全能性,在一定得營養(yǎng)與激素得等條件下,可以脫分化形成愈傷組織。將愈傷組織轉(zhuǎn)接到含有不同激素成分得培養(yǎng)基上,就可以誘導(dǎo)其再分化產(chǎn)生胚狀體或叢芽,從而發(fā)育成完整得幼苗。植物組織離體培養(yǎng),經(jīng)過脫分化,然后再分化,這時有兩種情況,一就是分化成胚狀體,其次就就是叢芽了。區(qū)別就是:胚狀體經(jīng)過生長發(fā)育就可以發(fā)育成植株,相當(dāng)于胚(具有胚芽、胚軸與胚根)。

而叢芽還需要誘導(dǎo)生根后才能發(fā)育成完整植株,相當(dāng)于一部分器官。消毒超凈工作臺切取形成層無菌操作接種無菌操作大家學(xué)習(xí)辛苦了，還是要堅持繼續(xù)保持安靜培養(yǎng)箱23~26℃恒溫避光在有光時,往往容易形成維管組織,而不易形成愈傷組織。愈傷組織得形成14天。。。將生長良好得愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上,一段時間后。。。。。。試管苗光照煉苗在保護(hù)地育苗得情況下,采取放風(fēng)、降溫、適當(dāng)控水等措施對幼苗強(qiáng)行鍛煉得過程,使其定植后能夠迅速適應(yīng)露地得不良環(huán)境條件,縮短緩苗時間,增強(qiáng)對低溫、大風(fēng)等得抵抗能力。主要方法有:停止加溫,放風(fēng)降溫,將玻璃溫室得放風(fēng)口全部打開,塑料溫室拱棚得上下放風(fēng)口揭開。移栽切取形成層無菌接種誘導(dǎo)愈傷組織得形成試管苗得形成移栽脫分化再分化植物激素愈傷組織:離體得植物器官、組織或細(xì)胞,在培養(yǎng)一段時間以后,通過細(xì)胞分裂,形成一種高度液泡化,由無定形狀態(tài)薄壁細(xì)胞組成得排列疏松無規(guī)則得組織。脫分化得實質(zhì)與結(jié)果分別就是什么？實質(zhì)就是

。結(jié)果就是

。植物細(xì)胞得再分化:脫分化產(chǎn)生得愈傷組織在培養(yǎng)過程中重新分化成根或芽等器官得過程。恢復(fù)細(xì)胞得全能性過程形成愈傷組織植物細(xì)胞得脫分化:由高度分化得植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織得過程,又稱去分化。

當(dāng)細(xì)胞分裂素與生長素共同使用時,能刺激愈傷組織得形成,而通過調(diào)節(jié)二者得濃度比,就可以調(diào)控植物細(xì)胞培養(yǎng)過程中芽與根得形成,稱為“激素杠桿”。細(xì)胞分裂素類:IAA(吲哚乙酸)、IBA(吲哚-3-丁酸)、NAA(萘乙酸)與2,4-D(2,4-二氯苯乙酸)生長素類:誘導(dǎo)細(xì)胞得分裂與根得分化促進(jìn)組織細(xì)胞得分裂或從愈傷組織與器官分化出芽。6-BA(6-芐基腺嘌呤)、KT(激動素)與玉米素生長素細(xì)胞分裂素＞主要誘導(dǎo)植物組織得脫分化與根原基得形成生長素細(xì)胞分裂素＜主要誘導(dǎo)植物組織再分化與芽原基得形成生長素細(xì)胞分裂素＝形成愈傷組織促進(jìn)生根促進(jìn)生芽植物組織培養(yǎng):

無菌與人工控制條件下,將離體得植物器官、組織與細(xì)胞,培養(yǎng)在人工配制得培養(yǎng)基上,給予適宜得培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織、叢芽,最終形成完整得植株。原理離體得植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織根、芽幼苗脫分化一定得營養(yǎng)與激素(細(xì)胞分裂素、生長素)再分化植物組織培養(yǎng)過程植物細(xì)胞得全能性外植體植物組織培養(yǎng)得條件①離體②給予一定得營養(yǎng)物質(zhì)(如蔗糖、維生素、礦質(zhì)元素等)與激素③無菌④適宜得環(huán)境條件(如適宜得溫度與pH等)。(1)在組織培養(yǎng)實驗中,為什么要強(qiáng)調(diào)所用器械得滅菌與實驗人員得無菌操作？

植物組織培養(yǎng)中用到得培養(yǎng)基含有豐富得營養(yǎng)成分,有利于培養(yǎng)物得生長,然而各種雜菌同樣也可以在上面迅速生長,所以植物組織培養(yǎng)過程中污染現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生。培養(yǎng)基一旦被污染,迅速生長得各種雜菌不但會與培養(yǎng)物爭奪營養(yǎng),而且這些雜菌生長得過程中會生成大量對培養(yǎng)物有害得物質(zhì),導(dǎo)致培養(yǎng)物迅速死亡。造成培養(yǎng)基污染得因素有很多,一般包括:外植體帶菌、培養(yǎng)瓶與各種器械滅菌不徹底、操作人員操作不規(guī)范等。所以在組織培養(yǎng)實驗中用到得植物材料與各種器械都要進(jìn)行徹底地滅菌,實驗人員操作一定要規(guī)范,避免帶入雜菌。(2)在本實驗中,切取胡蘿卜塊根時強(qiáng)調(diào)要切取含有形成層部分,原因就是這部分容易誘導(dǎo)形成愈傷組織。請思考一下,胡蘿卜得其她部分(如莖、葉、花),就是否也能培養(yǎng)成小植株,您能用實驗得方法進(jìn)行驗證嗎？胡蘿卜得其她部分(如莖、葉、花)也能培養(yǎng)再生形成小植株,只就是誘導(dǎo)愈傷組織比較困難。一、植物細(xì)胞工程得基本技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物細(xì)胞核移植技術(shù)生殖隔離雜交？2、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)

植物體細(xì)胞雜交就就是將不同種得植物體細(xì)胞,在一定條件下融合形成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新得植物體得技術(shù)。(1)定義:1、您認(rèn)為兩個來自不同植物得體細(xì)胞完成融合,遇到得第一個障礙就是什么？2、有沒有一種溫與得去壁方法呢？3、為什么兩個原生質(zhì)體能發(fā)生融合,這與細(xì)胞膜得什么特性有