獼猴桃雄花粉脫除潰瘍病菌生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程(征求意見稿)

CCSXXXXDB51準(zhǔn)TechnicalcodeofpracticeforkiwifruitmalepollenkillingPseudomonassyringaepv.IDB51/TXXXX—XXXX 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 3.1 4雄株園建設(shè) 24.1品種選擇 24.2建園要求 25雄株園管理 25.1整形修剪 25.2肥水管理 36雄株生長期潰瘍病防控 6.1藥劑選擇 36.2施藥時(shí)間 37獼猴桃雄花蕾采集與殺潰瘍病菌處理 7.1雄花蕾采集 37.2待加工雄花蕾臭氧脫菌處理 48獼猴桃雄花粉生產(chǎn) 48.1器具消毒 4DB51/TXXXX—XXXX8.2花粉提取 48.3花粉保存及運(yùn)輸 49脫菌處理雄花粉質(zhì)量檢測 49.1待檢測花粉抽樣 49.2雄花粉質(zhì)量要求及活力檢測 49.3雄花粉帶活菌檢測 410結(jié)果記錄與資料保存 5附錄A 9 參考文獻(xiàn) DB51/TXXXX—XXXX本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由四川省市場監(jiān)督管理局提出、歸口并解釋。本文件起草單位：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)、四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所、都江堰獼多多農(nóng)業(yè)科技有限公司、都江堰市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、廣元市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院聯(lián)合提出。本文件主要起草人：龔國淑、姚凱凱、馬苗苗、唐合均、周佳佳、陳華保、吳翠平、涂美艷、何成勇、王玲利、晏志強(qiáng)、康超勇、雷彬。DB51/TXXXX—XXXX1獼猴桃雄花粉脫除潰瘍病菌生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了四川省內(nèi)獼猴桃雄株園建設(shè)與管理，雄株生長期潰瘍病防控，雄花蕾采集與殺潰瘍病菌處理，經(jīng)脫菌處理技術(shù)生產(chǎn)的雄花粉攜帶潰瘍病菌檢測等方面的內(nèi)容。本文件適用于四川省內(nèi)獼猴桃栽培區(qū)域。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T2828.1-2012計(jì)數(shù)抽樣檢驗(yàn)程序（第1部分）GB/T6682-2008分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T8321.10農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則（十）DB51/T3069-2023獼猴桃主要病蟲害綠色防控技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1獼猴桃雄花粉kiwifruitmalepollen獼猴桃雄株花朵的花藥經(jīng)加工散出的單倍體雄性生殖細(xì)胞，通常為淡黃白色或灰白色粉末。3.2待加工獼猴桃雄花蕾kiwifruitmalebudtreatmentbeforepollenproduction將萼片已開裂膨大且處于含苞待放（大蕾期）的獼猴桃雄花蕾采集后，經(jīng)陰干等處理，加工前達(dá)到符合生產(chǎn)花粉要求的獼猴桃雄花蕾。DB51/TXXXX—XXXX23.3脫菌處理operationofkillingPseudomonassyringaepv.actinidiae在不影響花粉活力的情況下，利用殺菌劑或臭氧對待加工獼猴桃雄花蕾攜帶的獼猴桃潰瘍病菌（Pseudomonassyringaepv.actinidiae，簡稱Psa）進(jìn)行滅活處理的操作。3.4雄花粉活力kiwifruitmalepollenparticlesactivity雄花粉具有萌發(fā)長出花粉管并與雌配子結(jié)合完成受精的能力，花粉管的長度超過花粉粒直徑為萌發(fā)的花粉，反之為不萌發(fā)的花粉。用離體培養(yǎng)條件下的萌發(fā)率評價(jià)花粉的活力。3.5帶活菌檢測viablePsadetectionofkiwifruitmalepollen對所生產(chǎn)的雄花粉進(jìn)行是否帶活的獼猴桃潰瘍病菌的抽樣檢測操作。4雄株園建設(shè)4.1品種選擇4.1.1應(yīng)選擇廣適性好、花量大、出粉多、抗?jié)儾?qiáng)的美味獼猴桃或中華獼猴桃雄株品種。4.1.2應(yīng)選用抗?jié)衬秃敌蛯Ｓ谜枘尽?.2建園要求4.2.1新建園栽植株行距宜（1.5～3.0）m×（3.0～3.5）m。用雌株生產(chǎn)園高接換種改建雄株園時(shí)，如原株行距過大，應(yīng)在株間或行間適當(dāng)補(bǔ)植新苗木。4.2.2藤蔓棚架應(yīng)選用T型架或水平棚架。周邊應(yīng)配置防風(fēng)林或擋風(fēng)墻，高度不低于5.5m。5雄株園管理5.1整形修剪5.1.1根據(jù)立地條件和栽植株行距選擇合理樹形，包括單主干單主蔓十側(cè)蔓、單主干雙主蔓二十側(cè)蔓或單主干無主蔓多側(cè)蔓等。DB51/TXXXX—XXXX35.1.2雄株冬季修剪宜輕，采花后7d內(nèi)重剪一次。修剪過程中每剪一株樹須用75%酒精對修剪工具、剪鋸口進(jìn)行消毒，修剪傷口應(yīng)涂抹保護(hù)愈合劑。5.2肥水管理5.2.1幼樹期肥水管理應(yīng)遵循勤施薄施原則。5.2.2進(jìn)入大量產(chǎn)花年份后，每年采花后至7月初應(yīng)以高氮型復(fù)合肥為主，7月中旬至9月下旬應(yīng)以均衡型復(fù)合肥為主，10月施基肥一次、以腐熟有機(jī)肥為主。6雄株生長期潰瘍病防控6.1藥劑選擇6.1.1應(yīng)選用中生菌素、梧寧霉素、氫氧化銅、春雷·王銅、春雷霉素、枯草芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌等進(jìn)行防治。6.1.2農(nóng)藥使用應(yīng)符合GB/T8321.10的規(guī)定。6.1.3藥劑使用濃度以說明書為準(zhǔn)。6.2施藥時(shí)間6.2.1冬剪后（休眠期至萌芽前），做好冬季清園工作并全園施用1次波美3~5度石硫合劑。6.2.2絨球期選用6.1.1藥劑種類均勻噴施主干及側(cè)枝，以枝干表面均勻形成一層水膜為宜。6.2.3現(xiàn)蕾期至采花前，全園噴施藥劑1~2次，間隔期約7d，著重噴施雄花蕾及花梗，以雄花蕾表面均勻形成一層水膜為宜。采摘雄花蕾前5d內(nèi)施完最后1次藥。6.2.4全園雄花蕾采完后，7d內(nèi)全園施藥1次。6.2.5落葉前，全園施藥1~2次，施藥間隔期為7~10d。6.2.6潰瘍病以外的其他病蟲害防控參照DB51/T3069-2023執(zhí)行。7獼猴桃雄花蕾采集與殺潰瘍病菌處理7.1雄花蕾采集DB51/TXXXX—XXXX4花蕾萼片開裂且膨大處于含苞待放的大蕾期時(shí)采集，采集時(shí)不應(yīng)用金屬容器盛裝。自花朵采摘離樹運(yùn)輸至加工場所時(shí)間不應(yīng)超過5h。7.2待加工雄花蕾臭氧脫菌處理將運(yùn)輸至加工場所的雄花蕾采用鼓風(fēng)干燥或經(jīng)自然陰干，充分除去表面水分后即待加工獼猴桃雄花蕾，裝入帶有臭氧發(fā)生器的密閉容器內(nèi)，雄花蕾量以達(dá)1/3容器為宜。臭氧濃度為630mg·m-3~650mg·m-3密閉處理15min~20min，處理過程中連續(xù)緩慢滾動容器。8獼猴桃雄花粉生產(chǎn)8.1器具消毒每批次花粉加工前，對所有雄花粉加工器具表面噴75%的酒精消毒后備用。8.2花粉提取從花藥分離、干燥到花粉的收集全過程按花粉生產(chǎn)常規(guī)技術(shù)操作進(jìn)行。8.3花粉保存及運(yùn)輸長期保存應(yīng)在低于-40℃速凍密封貯藏，出貯藏室采取逐級升溫。臨時(shí)保存或運(yùn)輸過程中應(yīng)在0℃~5℃干燥條件下進(jìn)行，并注意減少溫度變幅；臨時(shí)保存和運(yùn)輸時(shí)應(yīng)防熱、防潮、防碰撞和擠壓。9脫菌處理雄花粉質(zhì)量檢測9.1待檢測花粉抽樣同一次采集、加工的花粉為一個(gè)批次。每批次抽樣按照GB/T2828.1-2012的規(guī)定執(zhí)行。9.2雄花粉質(zhì)量要求及活力檢測雄花粉質(zhì)量及授粉要求、活力檢測方法詳見附錄A、附錄B。9.3雄花粉帶活菌檢測雄花粉帶活菌檢測方法及判定結(jié)果詳見附錄C、附錄D。DB51/TXXXX—XXXX510結(jié)果記錄與資料保存實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)包括：樣品來源、種類(品種)、采集時(shí)間、檢測時(shí)間、地點(diǎn)和結(jié)果等，主要要有檢測人員、審核人員簽字。上述材料應(yīng)歸檔并妥善保存2年以上。DB51/TXXXX—XXXX6附錄A（資料性附錄）雄花粉質(zhì)量及授粉要求A.1感官指標(biāo)分離獲得的獼猴桃雄花粉呈粉末狀、易分散，無霉變結(jié)塊，無可見雜質(zhì)。A.2花粉產(chǎn)品等級指標(biāo)按雄花粉純度及雄花粉活力（以花粉萌發(fā)率表示）劃分等級。表A.1雄花粉產(chǎn)品質(zhì)量等級指標(biāo)70（含9060（含8060（含7040（含60A.3不同品種雄花粉授粉適用性參考表表A.2不同類型獼猴桃雄花粉授粉適用雌株參考表DB51/TXXXX—XXXX7（資料性附錄）雄花粉活力檢測方法B.1感官檢驗(yàn)在無直射陽光下，用感官檢驗(yàn)雄花粉顏色、形狀等。B.2試劑、用具與儀器試劑：蔗糖、硼酸、蒸餾水、瓊脂；用具：燒杯、量筒、玻棒、載玻片；儀器：顯微鏡、0.001g電子天秤、電爐、生化培養(yǎng)箱。B.3分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格按照GB/T6682-2008的規(guī)定執(zhí)行。B.4培養(yǎng)基制備準(zhǔn)確稱取10g蔗糖、0.015g硼酸、1g瓊脂、100ml蒸餾水，全部倒入燒杯中，放到電爐上加熱并不斷攪拌至完全溶解，補(bǔ)足水分，備用。B.5待檢測樣品的制備將同一個(gè)花粉包裝單元內(nèi)的花粉充分混合均勻后，用取樣勺取少量（約30mg）制成待檢測花粉樣品。冷藏花粉在室溫條件下放置4h后再充分混合取樣進(jìn)行檢測。B.6載玻片制備用吸管或玻棒吸取熱培養(yǎng)基4～5滴，滴在平放的載玻片中心位置，待培養(yǎng)基自然擴(kuò)散冷凝，備用。B.7花粉接種用毛發(fā)蘸取待檢測花粉樣品，均勻播種在載玻片培養(yǎng)基上，然后將接種好的載玻片放在鋪了濕紙巾的培養(yǎng)皿內(nèi)。每個(gè)樣品重復(fù)3次。B.8花粉培養(yǎng)將接種好的花粉培養(yǎng)皿置于25℃生化培養(yǎng)箱內(nèi)暗培養(yǎng)2h~8h。一般現(xiàn)制備的花粉萌發(fā)需時(shí)短，冷藏的花粉需時(shí)稍長，應(yīng)間隔一定時(shí)間取出檢查萌發(fā)情況，以花粉管長度超過花粉粒直徑視為萌發(fā)。B.9觀測統(tǒng)計(jì)DB51/TXXXX—XXXX8將載玻片取出放在顯微鏡下（10×10）觀測。每個(gè)樣品至少觀測15～20個(gè)視野畫面，在占多數(shù)的畫面中（超過70%）選取3個(gè)畫面進(jìn)行拍照和活力統(tǒng)計(jì)?；盍τ?jì)算方法按DB61/T888執(zhí)行。B.10活力值確定每一份樣品都需要做3次重復(fù)檢測，每一次檢測都可拍3個(gè)畫面，每一個(gè)畫面對應(yīng)一個(gè)活力值，樣品最終活力值取9個(gè)活力值的平均值。B.11純度檢驗(yàn)檢測儀器與用具：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、接種針。樣品制備：用接種針取少量花粉于載玻片上，蓋上蓋玻片。B.12純度統(tǒng)計(jì)在100倍的顯微鏡下觀察花粉樣品，至少觀察3個(gè)載玻片，每載玻片觀察3個(gè)視野，分別記錄每個(gè)視野的花粉和非花粉物質(zhì)比例。純度計(jì)算方法按DB61/T888執(zhí)行。B.13出廠檢驗(yàn)花粉應(yīng)經(jīng)出廠檢驗(yàn)合格，方可出廠；出廠花粉應(yīng)附合格標(biāo)記。花粉出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目為感官指標(biāo)、活力、純度和凈含量?；ǚ鄣某鰪S檢驗(yàn)項(xiàng)目全部合格判為出廠檢驗(yàn)合格品；在檢驗(yàn)中有一項(xiàng)指標(biāo)不符合本文件要求，應(yīng)加倍抽樣進(jìn)行復(fù)檢，復(fù)檢中有一項(xiàng)不合格，即判定為不合格產(chǎn)品。B.14型式檢驗(yàn)在下列情況之一時(shí)，進(jìn)行型式檢驗(yàn)，型式檢驗(yàn)為全項(xiàng)檢驗(yàn)：花粉原料發(fā)生變化時(shí)；花粉采集、加工程序有變化時(shí)；正常生產(chǎn)時(shí)每年進(jìn)行一次；和用戶發(fā)生質(zhì)量爭議需要仲裁時(shí)；有關(guān)質(zhì)量監(jiān)督部門提出型式檢驗(yàn)要求時(shí)。型式檢驗(yàn)的樣品應(yīng)在出廠檢驗(yàn)合格批中抽取。B.15判定規(guī)則型式檢驗(yàn)的項(xiàng)目全部合格，判該批花粉為合格品；若有一項(xiàng)不合格，應(yīng)加倍抽樣，重新檢驗(yàn)，若還有一項(xiàng)不合格，判該批花粉為不合格品。DB51/TXXXX—XXXX9（資料性附錄）獼猴桃雄花粉帶潰瘍病菌（活菌）常規(guī)檢測方法C.1制備待檢測樣品溶液超凈工作臺內(nèi)準(zhǔn)確稱取待測花粉樣品0.5g，加入裝有5mL無菌水的離心管中（內(nèi)有適量玻璃珠迅速震蕩待花粉完全分散于水中，制成1:10的樣品溶液，2000r/min離心2min后，無菌環(huán)境下吸取上清液至新的無菌離心管內(nèi)，即為待檢測樣品溶液。C.2平板涂布法活菌檢測C.2.1梯度稀釋取C.1中經(jīng)離心后的待檢測樣品溶液1mL，加入到9ml無菌水中，連續(xù)梯度稀釋，分別制成10-2、10-3、10-4或其它合適稀釋度的樣品液。C.2.2LB平板計(jì)數(shù)無菌條件下各取200μL不同稀釋度的樣品待檢測液，均勻涂布于固體LB平板培養(yǎng)基上，每個(gè)濃度梯度重復(fù)5次。待平板上的樣品檢測液完全干燥后，25℃倒置培養(yǎng)48h。觀察菌落形態(tài)，與Psa病原菌形態(tài)特征比較。LB平板上Psa菌落呈圓形、乳白色、表面光滑、邊緣整齊。病原菌生長最適溫度為25℃-28℃,培養(yǎng)24h后便可長出菌落。生長最高溫度為35℃,生長最低溫度為-12℃以下，致死溫度為55℃。C.2.3直接PCR檢測C.2.2中每個(gè)平板疑似Psa菌落30個(gè)以內(nèi)的全選，30-100個(gè)/板則隨機(jī)挑取30個(gè)疑似菌落進(jìn)行PCR檢測確認(rèn)。PCR檢測所用引物對、反應(yīng)體系及反應(yīng)程序如下：引物對1:Psa-F1/R2（正向引物：5'-TTTTGCTTTGCACACCCGATTTT-3'、反向引物：5'-CACGCACCCTTCAATCAGGATG-3，擴(kuò)增片段長度為280bp)；引物對2（Psa3類群特異性引物HopZ5-F/R（正向引物：5'-TCACTCCTAGACTGGAATAC-3'，反向引物：5'-GGCTATCATGAAGGCTGTCA-3'，擴(kuò)增片段長度為550bp）。使用前用無菌ddH2O將合成的引物干粉稀釋成10μmoL/L儲存液。PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系：2×TaqMastermix12.5μL，上下游引物（10μM）各0.5μL，加ddH2O補(bǔ)足到25μL，無菌牙簽挑取單菌落少許作為模板，混勻瞬時(shí)離心后進(jìn)行PCR反應(yīng)。DB51/TXXXX—XXXXPCR擴(kuò)增程序：將配制完成的反應(yīng)管放入PCR儀中，Psa-F1/R2引物對反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃4min，94℃30sec，58℃30sec，72℃1min，35個(gè)循環(huán)，72℃10min，4℃保存；HopZ5-F/R引物對反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃4min，94℃30sec，55℃30sec，72℃1min，35個(gè)循環(huán)，72℃10min，4℃保存。PCR產(chǎn)物檢測：擴(kuò)增結(jié)束后取5μLPCR產(chǎn)物于2%瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳分離，電泳結(jié)束后在凝膠成像系統(tǒng)下觀察并成像，比對是否獲得目標(biāo)片段。陽性對照與陰性對照：用已知的Psa標(biāo)準(zhǔn)菌株作為陽性對照；無菌ddH2O作為空白對照。C.3結(jié)果判定若待測樣品和陽性對照存在280bp條帶/550bp條帶，陰性對照和空白對照無此條帶，則判定待測花粉樣品為陽性即攜帶有活菌，否則為陰性。DB51/TXXXX—XXXX（資料性附錄）PMA-PCR雄花粉帶活菌檢測相關(guān)資料D.1PMA名稱疊氮溴化丙錠（propidiummonoazide，PMA）D.2PMA檢測活菌原理疊氮溴化丙錠（propidiummonoazide，PMA）是一種光反應(yīng)的DNA結(jié)合染料，具有極高的DNA親和結(jié)合能力，PMA可進(jìn)入死亡和外膜損傷嚴(yán)重的微生物內(nèi)部，并插入DNA結(jié)構(gòu)中，經(jīng)可見光刺激發(fā)生光裂解后，同DNA結(jié)合發(fā)生共價(jià)交聯(lián)反應(yīng)，共價(jià)交聯(lián)產(chǎn)物可以抑制DNA的PCR擴(kuò)增。D.3PMA濃度向規(guī)格為1㎎/瓶的PMA試劑中加入1mL二甲基亞砜（Dimethylsulfoxide）充分溶解，4℃條件儲存?zhèn)溆?。D.4PMA處理程序取溶解后的PMA試劑10.5μL，加入體積為90μL已制備好的樣品待檢測液中（C.1迅速混勻后，黑暗（避光）室溫孵育8min后，再置于強(qiáng)光（500W鹵素?zé)艄猓┫抡丈?0min，用于后續(xù)DNA提取。D.5熱裂解法制備DNA模板及PCR檢測方法將D.4中經(jīng)PMA處理后的樣品待檢測液于12000r/min離心5min，棄上清液，再加入1ml無菌ddH2O，充分震蕩后100℃條件下置于金屬浴中熱裂解10min，再經(jīng)冰浴冷卻后，12000r/min離心5min，棄去上清液；按1:10的比例用ddH2O進(jìn)行稀釋即為DNA模板；取2μLDNA模板進(jìn)行PCR檢測。PCR制樣、檢測方法如下：PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系：取2μLDNA作為模板，2×TaqMastermix12.5μL，上下游引物（10μM）各0.5μL，加ddH2O補(bǔ)足到25μL，混勻瞬時(shí)離心后進(jìn)行PCR反應(yīng)。PCR擴(kuò)增程序：將配制完成的反應(yīng)管放入PCR儀中。Psa-F1/R2引物對反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃4min，94℃30sec，58℃30sec，72℃1min，35個(gè)循環(huán)，72℃10min，4℃保存；HopZ5-F/R引物對反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃4min，94℃30sec，55℃30sec，72℃1min，35個(gè)循環(huán)，72℃10min，4℃保存。PCR產(chǎn)物檢測：擴(kuò)增結(jié)束后取5μLPCR產(chǎn)物于2%瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳分離，電泳結(jié)束后在凝膠成像系統(tǒng)下觀察并成像，比對是否獲得目標(biāo)片段。DB51/TXXXX—XXXX陽性對照與陰性對照：用經(jīng)PMA處理過的Psa標(biāo)準(zhǔn)菌株作為陽性對照，經(jīng)高溫高壓滅菌處理后死的Psa標(biāo)準(zhǔn)菌株作為陰性對照，無菌ddH2O作為空白對照。D.6結(jié)果判定若待測樣品和陽性對照存在280bp條帶/550bp條帶，陰性對照和空白對照無此條帶，則判定待測花粉樣品為陽性即攜帶有活菌，否則為陰性。DB51/TXXXX—XXXX參考文獻(xiàn)[1]T/DJYMHT0001-2023獼猴桃雄花粉生產(chǎn)與質(zhì)量控制技術(shù)規(guī)程.[2]T/DJYMHT0001-2024獼猴桃雄花粉脫除潰瘍病菌生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程.[3]龔國淑,李慶,張敏,等.獼猴桃病蟲害原色圖譜與防治技術(shù)[M].北京:科學(xué)出版社.2020.[4]涂美艷,祝進(jìn).圖說紅肉獼猴桃豐產(chǎn)優(yōu)質(zhì)高效栽培技術(shù)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社.2022.[5]李黎,馮丹丹,潘慧,等.獼猴桃花粉滅菌方法比較及對果實(shí)品質(zhì)的影響[J].園藝學(xué)報(bào),2022,49(4):769-777.[6]胡月,陳航,楊巽喆,等.酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)對獼猴桃潰瘍病菌效應(yīng)子Hopz5多克隆抗體的特性分析[J].生物技術(shù)通報(bào),2018,34(1):84-89.[7]肖妍,劉蕓宏,高貴田,等.PMA-qPCR方法檢測陜西獼猴桃潰瘍菌優(yōu)勢病原菌活菌的研究[J].食品與機(jī)械,2019,35(4):48-53+59.[8]StefaniEandGiovanardiD.DisseminationofPseudomonassyringaepv.actinidiaethroughpollenanditsepiphyticlifeonleavesandfruits[J].PhytopathologiaMediterranea,2011,50(3):489-496.[9]FlayC,SymondsVV,StoreyR,etal.Map**QTLassociatedwithresistancetoPseudomonassyringaepv.actinidiaeinkiwifruit(Actinidiachinensisvar.chinensis)[J].FrontiersinPlantScience,2024,14:1255506.[10]VannesteJL.Thescientific,economic,andsocialimpactsoftheNewZealandoutbreakofbacterialcankerofkiwifruit(