無(wú)菌檢查法+20版vs25版差距分析表

無(wú)菌檢查法系用于檢查藥典要求無(wú)菌的藥品、生物制品、醫(yī)療器械、原料否無(wú)菌的一種方法。若供試品符合無(wú)菌檢查法的規(guī)定，僅表明了供試品在該檢驗(yàn)條件下未發(fā)現(xiàn)微生物污染。無(wú)菌檢查法系用于檢查藥典要求無(wú)菌的藥品、醫(yī)療器械、原料、輔料及其種方法。若供試品符合無(wú)菌檢查法的規(guī)定，僅表明了供試品在該檢驗(yàn)條件下未無(wú)菌檢查應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行，試驗(yàn)環(huán)境必須達(dá)到無(wú)菌檢查的要求，檢驗(yàn)菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。單向流空氣區(qū)域、工作臺(tái)面及受控環(huán)境應(yīng)定期按醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度確認(rèn)。隔離系統(tǒng)應(yīng)定期按相關(guān)的要求進(jìn)行驗(yàn)證，其內(nèi)部環(huán)境的潔凈度須符合無(wú)菌檢查的要求。日常檢驗(yàn)需對(duì)試驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測(cè)。無(wú)菌檢查應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行，試驗(yàn)環(huán)境必須達(dá)到無(wú)菌檢查的要求，檢驗(yàn)菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的、工作臺(tái)面及受控環(huán)境應(yīng)定期確認(rèn)。隔離系統(tǒng)應(yīng)定期按相關(guān)的要求進(jìn)行驗(yàn)證，其內(nèi)部環(huán)境的潔凈度須符合無(wú)菌檢查的要求。日常檢驗(yàn)需對(duì)試驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測(cè)與控制。方法，可能默認(rèn)沿用現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)或允許靈環(huán)境，還需實(shí)時(shí)控制環(huán)境參數(shù)，確保持續(xù)符合無(wú)菌要求。新增“與控制”,即硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基主要用于厭氧菌的培養(yǎng)，也可用于需氧菌的培養(yǎng)；胰酪基用于真菌和需氧菌的培養(yǎng)。硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基主要用于厭氧菌的培養(yǎng)，也可用于需氧菌的培養(yǎng)；胰酪基用于真菌和需氧菌的培養(yǎng)。培養(yǎng)基可按以下處方制備，亦可使用按該處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基養(yǎng)基。配制后應(yīng)采用驗(yàn)證合格的滅菌程序滅菌。制備好的培養(yǎng)基若不即時(shí)使用，應(yīng)置于無(wú)菌密閉容器中，在2～25℃、避光的環(huán)境下保存，并在經(jīng)驗(yàn)證的保存期內(nèi)使培養(yǎng)基可按以下處方制備，亦可使用按該處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基養(yǎng)基。配制后應(yīng)采用驗(yàn)證合格的滅菌程序滅菌。制備好的培養(yǎng)基若不即時(shí)使用，應(yīng)置于無(wú)菌密閉容器中，在2～25℃環(huán)境下保存，并在經(jīng)驗(yàn)證的保存期內(nèi)使用。1.硫乙醇酸鹽胰酪胨15.0g;氯化鈉2.5g:酵母浸出粉5.0g;新配制的0.1%刃天青溶液1.0m水葡萄糖5.5g/5.0g;L-胱氨酸0.5g;瓊脂0.75g;硫乙醇酸鈉0.5g;水100酸)(0.3m1)胰酪胨5.0g;氯化鈉2.5g;酵母浸出粉5.0g;新配制的0.1%刃天青溶液1.0ml水葡萄糖5.5g/5.0g;L-胱氨酸0.5g瓊脂0.75g;硫乙醇酸鈉0.5g水1000m1(或硫乙醇酸)(0.3m1)除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH為弱堿性，煮沸，濾清，加取L-胱氨酸、瓊脂、氯化鈉、葡萄糖、酵母浸出粉和胰酪胨與水混合，加1.標(biāo)準(zhǔn)化提升：25版明確配方成分，減少操作歧義。明確列出成分：L-胱氨酸、瓊脂、氯化鈉、葡萄糖、酵母浸出粉風(fēng)險(xiǎn)。在分裝前加入刃天青溶液，無(wú)需改為“水浴或流通蒸汽加熱”,提供更入葡萄糖和刃天青溶液，搖勻，調(diào)節(jié)pH,使滅菌后在25℃的pH值為7.1±0.2。器中，其裝量與容器高度的比例應(yīng)符合培養(yǎng)結(jié)束后培養(yǎng)基氧化層(粉紅色)不超過(guò)培養(yǎng)基深度的1/2。滅菌。在供試品接種前，培養(yǎng)基氧化層的高度不得超過(guò)培養(yǎng)基深度的1/3,否則，須經(jīng)100℃水浴加熱至粉紅色消失(不超過(guò)20分鐘),迅速冷卻，只限加熱一次，并防止被污染。酸鈉或硫乙醇酸，必要時(shí)用1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH,使滅菌后在25℃需過(guò)濾，可重新加熱上述溶液，但不得煮沸，趁熱過(guò)濾。加入刃天青溶液，混勻，分裝至適宜的容器中，其裝量與容器高度的比例應(yīng)符合培養(yǎng)結(jié)束后培養(yǎng)基氧化層(粉深度的1/2。滅菌。在供試品接種前，培養(yǎng)基氧化層的高度不得超過(guò)培養(yǎng)基深度的1經(jīng)水浴或流通蒸汽加熱至粉紅色消失(不超過(guò)20分鐘),迅速冷卻，只限除另有規(guī)定外，硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基置30～35℃培養(yǎng)。除另有規(guī)定外，硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基置30～35℃培養(yǎng)。對(duì)含有汞類防腐劑，且無(wú)法采用薄膜過(guò)濾法處理的供試品，可選用其他經(jīng)驗(yàn)證的培養(yǎng)體系進(jìn)行無(wú)菌檢查。劑且無(wú)法薄膜過(guò)濾的供試品，允許使用胰酪胨17.0g;氯化鈉5.0g;大豆木瓜蛋白酶水解物3.0g;磷酸氫二鉀2.5g;萄糖2.5g/2.3g;水1000ml胰酪胨17.0g;氯化鈉5.0g;大豆木瓜蛋白酶水解物3.0g;磷酸氫二鉀2.5g;萄糖2.5g/2.3g;水1000ml除葡萄糖外，取上述成分，混合，微溫溶解，濾過(guò)，調(diào)節(jié)pH使滅菌后在25℃的pH值為7.3±0.2,加入葡萄糖，分裝，滅菌。取上述成分，混合，微溫溶解，冷卻至室溫，用1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pHpH值為7.3±0.2,必要時(shí)濾清，分裝，滅菌。減少分步操作，降低污染風(fēng)險(xiǎn)。未明確排除葡萄糖，可能默認(rèn)所有成分(包括葡萄糖)直接混合溶解。度對(duì)pH值的影響，結(jié)果更穩(wěn)定。溶解后需“冷卻至室溫”再調(diào)節(jié)pH,隨后分裝時(shí)濾清”,僅在溶液渾濁或有雜質(zhì)時(shí)過(guò)胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基置20～25℃培養(yǎng)。胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基置20~25℃培養(yǎng)。肉湯培養(yǎng)基(用于硫酸鏈的無(wú)菌檢查)胨10.0g;氯化鈉5.0g;牛肉浸出粉3.0g;水1000ml;葡萄糖5.0g除葡萄糖外，取上述成分混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH為弱堿性，煮沸，加入葡萄糖溶解后，搖勻，濾清，調(diào)節(jié)pH使滅菌后在25℃的pH值為7.2±0.2,分裝，滅菌。胨10.0g;氯化鈉5.0g;牛肉浸出粉3.0g;水1000ml;葡萄糖5.0g除葡萄糖外，取上述成分混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH為弱堿性，煮沸，加入葡萄糖溶解后，搖勻，濾清，調(diào)節(jié)pH使滅菌后在25℃的pH值為7.2±0.2,分裝，滅菌。胰酪胨15.0g;瓊脂15.0g;大豆木瓜蛋白酶水解物5.0g;水1胰酪胨15.0g;瓊脂15.0g;大豆木瓜蛋白酶水解物5.0g;水1000ml;氯化鈉5動(dòng)物組織胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物10.0g;葡萄糖20.0g;水1000ml動(dòng)物組織胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物10.0g;葡萄糖20.0g;水1000ml動(dòng)物組織胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物10.0g;瓊脂15.0g;葡萄除葡萄糖、瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH使滅菌后在25℃的pH值為5.6±0.2,加入瓊脂，加熱溶化后，再加入葡萄糖，搖勻，分裝，滅菌。動(dòng)物組織胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物10.0g;瓊脂15.0g;葡萄除葡萄糖、瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH使滅菌后在25℃的pH值為5.6±0.2,加入瓊脂，加熱溶化后，再加入葡萄糖，搖勻，分裝，滅菌。葡萄糖20.0g水1000ml葡萄糖20.0g水1000ml較小，但仍需注意以下兩點(diǎn)：菌種(如酵母、絲狀真菌)的生長(zhǎng)是否產(chǎn)生顯著差異。符合預(yù)期。取馬鈴薯，切成小塊，加水1000ml,煮沸20～30分鐘，用6～8層紗布培養(yǎng)基的適用靈敏度檢查的要求。本檢查可在供試品的無(wú)菌檢查前或與供試品的無(wú)菌檢查查及靈敏度檢查的要求。本檢查可在供試品的無(wú)菌檢查前或與供試品的無(wú)菌每批隨機(jī)取部分培養(yǎng)基，置各培養(yǎng)基規(guī)定的溫度培養(yǎng)14天，每批培養(yǎng)基一般隨機(jī)取不少于5支(瓶),置各培養(yǎng)基規(guī)定的溫度培養(yǎng)14天，應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。培養(yǎng)基靈敏度檢查所用的菌株傳代次數(shù)不得超過(guò)5代(從菌種保存中心獲0代),并采用適宜的菌種保藏技術(shù)進(jìn)行保存和確認(rèn)，以保證試驗(yàn)菌株的生物學(xué)特性。金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)〔CMCC(B)26003〕銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)〔CMCC(B)10104〕枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)〔CMCC(B)63501〕生孢梭菌(Clostridiumsporogenes)(CMCC(B)64941)白色念珠菌(Candidaalbicans)(CMCC(F)98001)黑曲霉(Aspergillusniger)〔CMCC(F)98003〕培養(yǎng)基靈敏度檢查所用的菌株傳代次數(shù)不得超過(guò)5代(從菌種保存中心獲0代),并采用適宜的菌種保藏技術(shù)進(jìn)行保存和確認(rèn)，以保證試驗(yàn)菌株的生物學(xué)特金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)(CMCC(B)26003)銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)(CMCC(B)10104)枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)(CMCC(B)63501)生孢梭菌(Clostridiumsporogenes)(CMCC(B)64941)白色念珠菌(Candidaalbicans)(CMCC(F)98001)黑曲霉(Aspergillusniger)(CMCC(F)98003)接種黑曲霉至沙氏葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基或馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上，20~25或直到獲得豐富的孢子，加入適量含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，采用適宜的方法吸出孢子懸液至無(wú)菌試管內(nèi)，用含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的孢子懸液。脂培養(yǎng)基上，20~25℃培養(yǎng)2~3天，上述培養(yǎng)物許使用其他經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的稀釋液。子懸液可保存在2～8℃,在驗(yàn)證過(guò)的貯存期內(nèi)使子懸液可保存在2～8℃,在驗(yàn)證過(guò)的貯存得超過(guò)5天。規(guī)范描述并統(tǒng)一單位。法稀釋液、沖洗液配制后應(yīng)采用驗(yàn)證合格的滅菌程序滅菌。1.0.1%無(wú)菌蛋白胨水溶液取蛋白胨1.0g,加水1000ml,微溫溶解，必要時(shí)濾過(guò)使澄清，調(diào)節(jié)pH值至7.1±0.2,分裝，滅菌。2.pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液取磷酸二氫鉀3.56g,無(wú)水磷酸氫二鈉54.30g,蛋白胨1.00g,加水1000ml,微溫溶解，必要時(shí)濾過(guò)使澄清，分裝，滅如需要，可在上述稀釋液或沖洗液的滅菌前或滅菌后加入表面活性劑或中和劑等。稀釋液、沖洗液配制后應(yīng)采用驗(yàn)證合格的滅菌程序滅1.0.1%無(wú)菌蛋白胨水溶液取蛋白胨1.0g,加水1000ml,微溫溶解，必要時(shí)濾過(guò)使澄清，調(diào)節(jié)pH值至7.1±0.2,分裝，滅菌。2.pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液取磷酸二氫鉀3.56g,無(wú)水磷酸氫二鈉54.30g,蛋白胨1.00g,加水1000ml,微溫溶解，必要時(shí)濾過(guò)使澄清，分裝，滅如需要，可在上述稀釋液或沖洗液的滅菌前或滅菌后加入表面活性劑或中和劑等。驗(yàn)菌液制備同培養(yǎng)基靈敏度檢查。大腸埃希菌(Escherichiacoli)(CMCC(B)44102)的菌液制選用大腸埃希菌(Escherichiacoli)〔CMCC(B)44102〕菌液制備同金黃色葡萄球菌。1.簡(jiǎn)化重復(fù)內(nèi)容。管作為對(duì)照，置規(guī)定的溫度培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間不1.和ICH保持一致，將大腸埃希菌替換2.規(guī)范統(tǒng)一單位。滅活劑、更換濾膜品種等方法，消除供試品的抑菌作用，并重新進(jìn)行方法適用性試驗(yàn)也可與供試品的無(wú)菌檢查同時(shí)進(jìn)滅活劑、更換濾膜品種等方法，消除供試品的抑菌作用，并方法適用性試驗(yàn)也可與供試品的無(wú)菌檢查同時(shí)進(jìn)無(wú)菌檢查所采用的檢查方法和檢驗(yàn)條件應(yīng)與方法適用性查所采用的檢查方法和檢驗(yàn)條件應(yīng)與方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法相用薄膜過(guò)濾法的具體供試品類型(如水能包括稀釋劑),增強(qiáng)適用性。將“中檢驗(yàn)量是指供試品每個(gè)最小包裝接種至每份培養(yǎng)基所有容器內(nèi)的內(nèi)容物全部過(guò)濾。的樣品量。陽(yáng)性對(duì)照管培養(yǎng)不超過(guò)5天，應(yīng)生長(zhǎng)良好。管理，減少冗余操作。對(duì)照試驗(yàn)的必要性，頻次及其他要求。陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)方法同供試品檢查100cfu,陽(yáng)性對(duì)照管培養(yǎng)不得超過(guò)5天，應(yīng)生長(zhǎng)良除另有規(guī)定外，按下列方法進(jìn)行供試品處理及接種培養(yǎng)基。可用適宜的無(wú)菌器材(如帶有除菌過(guò)濾器的針頭)向容器內(nèi)導(dǎo)入無(wú)菌空氣，再按無(wú)菌操作開(kāi)啟容器取出內(nèi)容物。除另有規(guī)定外，按下列方法進(jìn)行供試品處理及接種培養(yǎng)基。為“開(kāi)啟容器”。沖洗液體積進(jìn)行調(diào)整，并重新驗(yàn)證。使用時(shí)，應(yīng)保證濾膜在過(guò)100ml,總沖洗量一般不超過(guò)500ml,最高不得超過(guò)1000ml,以避免濾膜上的微生物性(如抗生素)的影響。無(wú)菌檢查用的濾膜孔徑應(yīng)不大于0.45μm。濾膜直徑約為50mm,若使用沖洗液覆蓋整個(gè)濾膜表面。、管路等)的無(wú)菌性，降低污染風(fēng)險(xiǎn)。及過(guò)濾系統(tǒng)的無(wú)菌性”。入100ml硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基，1份濾器中加入100ml胰酪大豆胨液體膜沖洗一般不得超過(guò)5次”,即使方法沖洗后，2份濾器中加入100ml硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基，1份濾器中加入100m般也不得超過(guò)5次。每次沖洗量為100ml,沖洗后，1份濾器加入硫乙醇酸鹽流濾器中加入胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基。所用培養(yǎng)基的體積與方法適用性相同。用水，0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液或0.1%無(wú)菌蛋白胨水溶液，照水溶性液體供試品項(xiàng)下的方法操作效果一致性。明確稀釋液類型(如注射蛋白胨水溶液)。或不含聚山梨酯80的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)基照水溶性液體供試品項(xiàng)下的方法調(diào)整至非水溶性供試品項(xiàng)下。規(guī)范描述及分類。下的方法操作。簡(jiǎn)化描述。菌檢查。菌檢查。規(guī)范描述。菌檢查。路無(wú)菌的醫(yī)療器械(輸血、輸液袋等)培養(yǎng)基接種的瓶或支數(shù)為2:1。除另有規(guī)定外，每個(gè)容器中培養(yǎng)基的用量應(yīng)混懸液等非澄清水溶性液體供試品—取規(guī)定量，等量接種至各管培養(yǎng)基中。體積不得大于培養(yǎng)基體積的10%,同時(shí)，硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基每管裝量不少于1體積不得大于培養(yǎng)基體積的10%,同時(shí)，硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基每管裝量不少于1的10%。2.適應(yīng)性增強(qiáng)：解加入原容器中。山梨酯80),強(qiáng)調(diào)驗(yàn)證必要性。山梨酯80),強(qiáng)調(diào)驗(yàn)證必要性。取規(guī)定量，混合，加入適量的聚山梨酯80或其他適宜的取規(guī)定量，混合，加入適量的聚山梨酯80或其他適宜的固體供試品取規(guī)定量，混合，加入適量的聚山梨酯80或其他適宜的乳化劑及稀釋劑使其乳2.標(biāo)準(zhǔn)化提升：減少操作歧義，增類似但表述更清晰。取規(guī)定數(shù)量，以無(wú)菌操作拆開(kāi)每個(gè)包裝，于不同部位剪取約00mg或取規(guī)定數(shù)量，以無(wú)菌操作拆開(kāi)每個(gè)包裝，于不同部位剪取約00mg或試品，等量接種于各管足以浸沒(méi)供試品的適量培養(yǎng)基菌拆開(kāi)包裝，等量接種于各管足以浸沒(méi)供試品的適量培養(yǎng)基放射性藥品取供試