高考生物一輪復(fù)習(xí)（全國版） 第11單元 第2課時(shí)　微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用

微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用第2課時(shí)目標(biāo)要求1.微生物的分離和培養(yǎng)。2.某種微生物數(shù)量的測(cè)定。3.培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用?？键c(diǎn)一微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)考點(diǎn)二土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)考點(diǎn)三分解纖維素的微生物的分離內(nèi)容索引重溫高考

真題演練課時(shí)精練微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)考點(diǎn)一

培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途

培養(yǎng)基不含

，呈

狀態(tài)工業(yè)生產(chǎn)

培養(yǎng)基含

，呈

狀態(tài)微生物的分離、鑒定，活菌計(jì)數(shù)，菌種保藏1.培養(yǎng)基的配制(1)概念：人們按照微生物對(duì)

的不同需求，配制出供其________的營養(yǎng)基質(zhì)。(2)類型：按物理狀態(tài)分類梳理歸納

夯實(shí)必備知識(shí)營養(yǎng)物質(zhì)生長繁殖液體固體凝固劑液體凝固劑(如瓊脂)固體(3)成分成分含義作用來源碳源_________________構(gòu)成生物體的細(xì)胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些也是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無機(jī)碳源：CO2、NaHCO3等；有機(jī)碳源：糖類、牛肉膏等氮源_______________________________________無機(jī)氮源：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等；有機(jī)氮源：蛋白胨等提供碳元素的物質(zhì)提供氮元素的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)無機(jī)鹽為微生物提供除碳、氮之外的各種重要元素，包括大量元素和微量元素為微生物提供無機(jī)營養(yǎng)，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH等無機(jī)化合物：KH2PO4、K2HPO4、NaCl等水生物體含量最高的無機(jī)化合物良好的溶劑，參與化學(xué)反應(yīng)等培養(yǎng)基、代謝產(chǎn)物特別提醒除了上述主要營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要滿足微生物生長對(duì)_________________

的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中添加

；在培養(yǎng)霉菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至

；在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至

；在培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)，需要提供

的條件。pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣維生素酸性中性或微堿性無氧2.無菌技術(shù)(1)目的：獲得

。(2)關(guān)鍵：

。(3)區(qū)別：消毒與滅菌的比較比較項(xiàng)目條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍消毒較為溫和的______

方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物煮沸消毒法日常用品___________不耐高溫的液體_______________操作空間、操作者的衣物和手等紫外線消毒法接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)純凈培養(yǎng)物防止外來雜菌的入侵物理或化學(xué)巴氏消毒法化學(xué)藥物消毒法滅菌強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子_______________培養(yǎng)基、容器等___________玻璃器皿、金屬用具等___________接種工具等高壓蒸汽滅菌法干熱滅菌法灼燒滅菌法特別提醒選擇無菌技術(shù)的原則：一要考慮無菌技術(shù)的效果，滅菌的效果比消毒要好；二要考慮操作對(duì)象的承受能力，活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用滅菌。3.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(1)計(jì)算①依據(jù)：配方比例②計(jì)算：配制

的培養(yǎng)基時(shí)，各種成分的用量↓(2)稱量①牛肉膏要放在

上稱量②牛肉膏和蛋白胨都易吸潮，稱取時(shí)動(dòng)作要迅速，稱取后

及時(shí)蓋上瓶蓋↓一定體積稱量紙(3)溶化①牛肉膏連同

一同放入燒杯，加入少量水，加熱，牛

肉膏溶化后取出稱量紙②加入稱量好的

和氯化鈉，攪拌③加入

，加熱使其熔化，并不斷攪拌④補(bǔ)加蒸餾水定容↓(4)滅菌①滅菌前：調(diào)節(jié)____②方法：

滅菌法。壓力為100kPa，溫度為121℃，

滅菌時(shí)間為15～30min↓稱量紙蛋白胨瓊脂pH高壓蒸汽(5)倒平板①倒平板應(yīng)在________________②滅菌方法是_________③平板倒置操作需要等待平板冷卻凝固后才能進(jìn)行酒精燈火焰附近灼燒滅菌4.純化培養(yǎng)(1)方法：平板劃線法和

法。(2)菌落的概念：由

繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體。(3)平板劃線法分離純化大腸桿菌①接種在裝有液體培養(yǎng)基的三角瓶中接種大腸桿菌，在搖床上

℃下振蕩培養(yǎng)12h②劃線分離用

在接種有大腸桿菌的三角瓶中沾取菌液一次，在固體培養(yǎng)基的平板上連續(xù)劃線，蓋好培養(yǎng)皿③培養(yǎng)觀察將培養(yǎng)皿倒置，放在

℃恒溫箱中培養(yǎng)12～24h后，可看到劃線的末端出現(xiàn)不連續(xù)的單個(gè)_____稀釋涂布平板單個(gè)細(xì)胞37接種環(huán)37菌落(4)稀釋涂布平板法步驟①系列稀釋操作：該操作常用在將細(xì)胞接種到培養(yǎng)基之前，通過液體稀釋的方法分散細(xì)胞，隨著稀釋程度的增大，單位體積中的微生物細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞得以分散。操作步驟：②涂布平板操作步驟源于選修1P18“旁欄小資料”(1)微生物的接種方法除平板劃線法和稀釋涂布平板法外，還包括

接種、

接種等方法。(2)微生物接種的核心是

。斜面穿刺防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度5.菌種的保藏方法主要方法臨時(shí)保藏法甘油管藏法保藏對(duì)象頻繁使用的菌種

的菌種方法步驟先接種到試管的

培養(yǎng)基上培養(yǎng)，然后放入4℃的冰箱中轉(zhuǎn)入滅菌后的

中，混勻后放在－20℃冷凍箱中保存長期保藏固體斜面甘油項(xiàng)目平板劃線法稀釋涂布平板法分離結(jié)果

關(guān)鍵操作接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線①一系列的梯度稀釋；②涂布平板操作接種用具接種環(huán)涂布器歸納總結(jié)兩種純化方法的比較歸納總結(jié)注意事項(xiàng)(1)接種環(huán)的灼燒：①第一次劃線前，避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基；②再次劃線前，殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端；③劃線結(jié)束后，殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。(2)接種環(huán)灼燒后，要冷卻后才能接觸菌液，以免溫度太高殺死菌種。(3)劃線時(shí)用力要大小適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破(1)在進(jìn)行稀釋操作時(shí)，每支試管及其中的9mL水、移液管均需滅菌；操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離酒精燈火焰1～2cm處。(2)涂布平板時(shí)：①涂布器用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，取出時(shí)要讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃；②不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精；③酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移液管頭不要接觸任何其他物體歸納總結(jié)優(yōu)點(diǎn)可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征缺點(diǎn)不能計(jì)數(shù)操作較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延共同點(diǎn)都要用到固體培養(yǎng)基；都需進(jìn)行無菌操作；都會(huì)在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落；都可用于觀察菌落特征考向一培養(yǎng)基與無菌技術(shù)1.下表中有關(guān)消毒與滅菌的描述，錯(cuò)誤的是考向突破強(qiáng)化關(guān)鍵能力

常用方法應(yīng)用舉例消毒①日常用品②不耐高溫的液體③皮膚滅菌灼燒滅菌法④干熱滅菌法⑤高壓蒸汽滅菌法⑥A.若要徹底除去物體內(nèi)外的芽孢和孢子，只靠方法①②③是不行的B.牛奶、啤酒等則通常用方法②消毒，④可以為接種針、涂布器等滅菌C.⑤⑥滅菌時(shí)，滅菌物品均不能與箱壁或桶壁接觸，其原因不同D.培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基滅菌均可采用⑤⑥方法√培養(yǎng)基不能用干熱滅菌法，只能使用高壓蒸汽滅菌，D錯(cuò)誤。2.請(qǐng)回答下列與大腸桿菌有關(guān)的問題：(1)下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方。成分蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4顯色劑瓊脂含量10.0g5.0g5.0g2.0g0.2g12.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL該培養(yǎng)基屬于______(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中的氮源是________。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行_____(填“消毒”或“滅菌”)；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_____。固體蛋白胨滅菌消毒(3)將配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中，加棉塞后若干支試管扎成一捆，包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入________________中滅菌，溫度為121℃，時(shí)間為15～30min。滅菌完畢拔掉電源，待鍋內(nèi)壓力自然降到大氣壓時(shí)，將試管取出。(4)從一支試管向另一支試管接種時(shí)應(yīng)注意，接種環(huán)要在酒精燈__________________(填“火焰的不充分燃燒層”或“火焰的充分燃燒層”)滅菌，并且待接種環(huán)______后蘸取菌種。高壓蒸汽滅菌鍋火焰的充分燃燒層冷卻考向二微生物的純化3.用平板劃線法或稀釋涂布平板法都可以純化大腸桿菌，屬于二者的共同點(diǎn)的有幾項(xiàng)①可以用相同成分的培養(yǎng)基②都要對(duì)操作者雙手、培養(yǎng)皿等進(jìn)行滅菌③都要使用接種環(huán)進(jìn)行接種④都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行接種⑤都可以用來計(jì)數(shù)活菌⑥都可以使用液體培養(yǎng)基A.1項(xiàng)

B.2項(xiàng)

C.3項(xiàng)

D.4項(xiàng)√都要對(duì)操作者雙手進(jìn)行消毒而不是滅菌，②錯(cuò)誤；平板劃線法采用接種環(huán)進(jìn)行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器進(jìn)行操作，③錯(cuò)誤；平板劃線法一般用于分離而不能用于計(jì)數(shù)，⑤錯(cuò)誤；平板劃線法或稀釋涂布平板法都是在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行的，⑥錯(cuò)誤。故選B。4.(2022·山西高三適應(yīng)考試)自然界里有多種微生物，將其進(jìn)行合理的篩選、培養(yǎng)和應(yīng)用，能給醫(yī)藥和化工等生產(chǎn)領(lǐng)域帶來巨大經(jīng)濟(jì)效益。回答下列問題：(1)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，多采取______________法，而對(duì)接種環(huán)或涂布器滅菌時(shí)則用__________法，若要將微生物采用平板劃線法進(jìn)行分離操作，在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進(jìn)行了5次劃線，則需要對(duì)接種環(huán)灼燒_____次。平板劃線在做第二次及其以后的劃線操作時(shí)，要從上次劃線的_____開始劃線，最后一次劃的線不能與第一次劃的線_____。高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌6末端相連(2)將接種后的固體培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中_____培養(yǎng)，以減少培養(yǎng)基中水分的揮發(fā)。其中，培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了_____________________________________。倒置作為對(duì)照組，檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否被雜菌污染土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)考點(diǎn)二

1.區(qū)分選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基梳理歸納

夯實(shí)必備知識(shí)種類特點(diǎn)用途舉例選擇培養(yǎng)基允許__________________

，同時(shí)_____________________________從眾多微生物中分離所需的微生物加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，進(jìn)而產(chǎn)生特定的顏色或其他變化鑒別不同種類的微生物用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌特定種類的微生物生長抑制或阻止其他種類微生物生長特別提醒常見選擇培養(yǎng)基舉例：①缺少氮源的培養(yǎng)基可以篩選能利用大氣中N2的微生物。②含青霉素的培養(yǎng)基可淘汰細(xì)菌，篩選出真菌。③無有機(jī)碳源的培養(yǎng)基可篩選出自養(yǎng)微生物。2.微生物的數(shù)量測(cè)定方法(1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法(2)間接計(jì)數(shù)法——活菌計(jì)數(shù)法(即稀釋涂布平板法)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。根據(jù)圖示問答以下問題：①為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在

的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。②為什么用此種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低？③某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為234個(gè)(涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1mL)，那么稀釋倍數(shù)為106的試管中細(xì)菌的濃度是

個(gè)/mL，稀釋倍數(shù)為10的錐形瓶中細(xì)菌的濃度為

個(gè)/mL，所以每克樣品中的細(xì)菌數(shù)是

個(gè)。提示因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。30～3002.34×1032.34×1082.34×1093.土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)操作(1)實(shí)驗(yàn)原理脲酶尿素(2)實(shí)驗(yàn)流程3～830～300稀釋涂布平板30～37菌落數(shù)目穩(wěn)定(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)對(duì)照的培養(yǎng)皿中無菌落生長對(duì)照的培養(yǎng)皿中有菌落生長30～300考向一微生物的選擇培養(yǎng)5.(2021·江蘇1月適應(yīng)性考試，14)稀釋涂布平板法是分離菌種常用的方法，下列相關(guān)敘述不恰當(dāng)?shù)氖茿.固體培養(yǎng)基滅菌后，應(yīng)冷卻至50℃左右時(shí)倒平板B.倒好的平板需立即使用，以免表面干燥，影響菌的生長C.稀釋涂布平板分離到的單菌落需進(jìn)一步劃線純化D.稀釋涂布平板法既可用于微生物的分離，也可用于微生物的計(jì)數(shù)√考向突破強(qiáng)化關(guān)鍵能力培養(yǎng)基滅菌后需要冷卻至50℃左右時(shí)才能用來倒平板，避免溫度過高，A正確；倒好的平板需要放置一段時(shí)間，用以觀察培養(yǎng)基是否被雜菌污染，B錯(cuò)誤；稀釋涂布平板法可以計(jì)數(shù)，也可觀察菌落特征進(jìn)行菌種分離，D正確。6.篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細(xì)菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，會(huì)出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈(如圖)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下表。菌種菌落直徑：C(mm)透明圈直徑：H(mm)H/C細(xì)菌Ⅰ5.111.22.2細(xì)菌Ⅱ8.113.01.6下列有關(guān)本實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是A.培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質(zhì)B.篩選分解淀粉的細(xì)菌時(shí)，菌液應(yīng)稀釋后涂布C.以上兩種細(xì)菌均不能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外D.H/C值反映了兩種細(xì)菌分解淀粉能力的差異√培養(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽和生長因子等成分，A正確；篩選淀粉分解菌時(shí)，需要對(duì)菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，B正確；由題意可知，以上兩種菌均會(huì)產(chǎn)生透明圈，說明兩種菌均可以產(chǎn)生淀粉酶并分泌到細(xì)胞外分解淀粉，C錯(cuò)誤；淀粉分解菌的H/C值越大，說明其產(chǎn)生的淀粉酶分解的淀粉相對(duì)越多，可說明該淀粉分解菌分解淀粉的能力越強(qiáng)，D正確。考向二分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)7.尿素最初是從人的尿液中發(fā)現(xiàn)的，但隨著科學(xué)家成功實(shí)現(xiàn)尿素的體外人工合成，尿素的生產(chǎn)逐漸走向工業(yè)化，尿素也逐步成為一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥。下圖是土壤中分解尿素的細(xì)菌分離與計(jì)數(shù)的基本流程，請(qǐng)回答有關(guān)問題：(1)配制圖中所用培養(yǎng)基，在熔化瓊脂時(shí)需要不斷用玻棒攪拌，目的是____________________________。配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中后，可采用______________方法進(jìn)行滅菌。防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂高壓蒸汽滅菌(2)該過程采用的接種方法是________________，培養(yǎng)一段時(shí)間要能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，從操作層面需要滿足兩個(gè)條件：一是______________________；二是涂布時(shí)要盡量做到均勻涂布。(3)該實(shí)驗(yàn)中的選擇培養(yǎng)基對(duì)分解尿素的細(xì)菌具有選擇作用，其原理是_______________________________________________。若要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了篩選的作用，對(duì)照組的設(shè)置是________________________________________。稀釋涂布平板法菌液的稀釋度要足夠高只有以尿素作為氮源的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長用完全培養(yǎng)基接種后在相同條件下同時(shí)培養(yǎng)(4)一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，原因是________________________________________________________。(5)在篩選尿素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)加入____________，用于鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落酚紅指示劑分解纖維素的微生物的分離考點(diǎn)三

土壤中分解纖維素的細(xì)菌的分離(1)纖維素酶組成及作用梳理歸納

夯實(shí)必備知識(shí)纖維二糖(2)纖維素分解菌的篩選紅色復(fù)合物透明圈剛果紅透明圈纖維素(3)實(shí)驗(yàn)流程纖維素選擇培養(yǎng)基鑒別纖維素分解菌(源于選修1P28“旁欄思考”)在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌的原因是___________________________________________________________________________________________________________________________________。

由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對(duì)較高，從這種土樣中獲得目的微生物的概率要高于普通環(huán)境歸納總結(jié)微生物的篩選與鑒別方法(1)微生物的篩選方法單菌落挑取法利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物選擇培養(yǎng)法利用選擇培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng)，直接獲得目的微生物鑒定培養(yǎng)法利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物歸納總結(jié)(2)微生物的鑒別方法菌落特征鑒別法根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別指示劑鑒別法如培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種微生物后，培養(yǎng)基變紅說明該種微生物能夠分解尿素染色鑒別法如利用剛果紅染色法，根據(jù)培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈來鑒別分解纖維素的微生物考向分解纖維素的微生物的分離8.科學(xué)家從羊等食草動(dòng)物胃中篩選纖維素分解菌，并對(duì)其降解纖維素的能力進(jìn)行了研究。請(qǐng)回答下列問題：(1)若科學(xué)家在___________________平板上，發(fā)現(xiàn)以某種菌的菌落為中心的透明圈，則表明此種菌為纖維素分解菌?？枷蛲黄茝?qiáng)化關(guān)鍵能力纖維素剛果紅培養(yǎng)基(2)在纖維素分解菌的培養(yǎng)過程中應(yīng)保持恒溫箱中的溫度約為______(填“4℃”“20℃”或“35℃”)?？茖W(xué)家采用稀釋涂布平板法分離、純化纖維素分解菌。在實(shí)驗(yàn)前，需要使用______________法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌；在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，目的是___________________________。35℃高壓蒸汽滅菌檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格4℃、20℃、35℃三個(gè)溫度中，35℃最接近纖維素分解菌的生活環(huán)境——羊胃的溫度，故培養(yǎng)過程中應(yīng)保持恒溫培養(yǎng)箱中的溫度約為35℃。(3)在接種的過程中，需要使用________(填“接種環(huán)”或“涂布器”)進(jìn)行接種?？茖W(xué)家欲將篩選得到的纖維素分解菌進(jìn)行大量培養(yǎng)，應(yīng)選用______(填“液體”或“固體”)培養(yǎng)基，并以________為唯一碳源，配制此培養(yǎng)基時(shí)，______(填“能”或“不能”)使用牛肉膏作為氮源。涂布器液體纖維素科學(xué)家采用稀釋涂布平板法分離、純化纖維素分解菌，故需要使用涂布器進(jìn)行接種。不能重溫高考真題演練回答下列問題：(1)實(shí)驗(yàn)時(shí)，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用______________的方法進(jìn)行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是_____。甲、乙培養(yǎng)基均屬于_____培養(yǎng)基。1.(2020·全國Ⅰ，37)某種物質(zhì)S(一種含有C、H、N的有機(jī)物)難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y。高壓蒸汽滅菌瓊脂選擇1234乙培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，因此培養(yǎng)基中加入的是可使液體培養(yǎng)基凝固的瓊脂。甲、乙兩種培養(yǎng)基都是為了分離出可降解S的細(xì)菌，因此是選擇培養(yǎng)基。1234(2)實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個(gè)平板上長出的菌落數(shù)不超過200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋______倍。1041234設(shè)稀釋倍數(shù)為A,1mL＝1000μL，套用計(jì)算式：A×

＝2×107(個(gè)/mL)，計(jì)算出A＝104。在篩選降解S物質(zhì)的細(xì)菌的過程中，如果培養(yǎng)基中的S濃度過高，會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌培養(yǎng)基的滲透壓增大，細(xì)菌失水而代謝活性降低，對(duì)S的降解量反而下降(或者S改變了培養(yǎng)基的pH，導(dǎo)致細(xì)菌代謝活性降低)。(3)在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時(shí)，某菌株對(duì)S的降解量反而下降，其原因可能是____________________________________(答出1點(diǎn)即可)。S的濃度超過某一值時(shí)會(huì)抑制菌株的生長1234測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)的主要步驟是①淤泥取樣，即取少量的淤泥加入無菌水中；②用稀釋涂布平板法涂布到乙培養(yǎng)基上；③微生物培養(yǎng)與觀察計(jì)數(shù)。(4)若要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)，請(qǐng)寫出主要實(shí)驗(yàn)步驟：______________________________________________________________。取淤泥加入無菌水中，涂布(或稀釋涂布)到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)1234(5)上述實(shí)驗(yàn)中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細(xì)菌的生長提供4類營養(yǎng)物質(zhì)，即_______________________。水、碳源、氮源和無機(jī)鹽12342.(2019·全國Ⅰ，37)已知一種有機(jī)物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解，會(huì)造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌(目標(biāo)菌)。Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X(5g/L)。Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基：氯化鈉(5g/L)，硝酸銨(3g/L)，其他無機(jī)鹽(適量)，X(15g/L)。Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基：氯化鈉(5g/L)，硝酸銨(3g/L)，其他無機(jī)鹽(適量)，X(45g/L)。1234回答下列問題：(1)在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是_______________。Ⅱ、Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有機(jī)物是____。1234牛肉膏、蛋白胨X牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，牛肉膏、蛋白胨為微生物生長提供了氮源，而Ⅱ、Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基中除X外的其他物質(zhì)均不含碳，所以能為微生物提供碳源的有機(jī)物是X。(2)若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號(hào)液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，不能降解X的細(xì)菌比例會(huì)______，其原因是______________________________________________________________。1234下降不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能因?yàn)棰蛱?hào)培養(yǎng)基中碳源只有X，屬于選擇培養(yǎng)基，只有能降解X的細(xì)菌才能增殖，而不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖。增殖，而能降解X的細(xì)菌能夠增殖(3)Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，接種時(shí)，應(yīng)采用的方法是______________。(4)假設(shè)從Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細(xì)菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供______和____________________。1234稀釋涂布平板法能量合成其他物質(zhì)的原料3.(2019·全國Ⅱ，37)物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，會(huì)污染土壤。W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌(目標(biāo)菌)?；卮鹣铝袉栴}：(1)要從土壤中分離目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是_____。1234W要從土壤中分離出能降解含氮有機(jī)物W的目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基應(yīng)以該特定物質(zhì)W為氮源。(2)在從土壤中分離目標(biāo)菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長并形成菌落(如圖所示)。如果要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇______菌落進(jìn)一步純化，選擇的依據(jù)是_______________________________________。1234乙題圖信息顯示，在乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W，若要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇乙菌落進(jìn)一步純化。乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W(3)土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈础Ｈ粢O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，?qǐng)簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即__________________________________________________________________________________________。1234

將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細(xì)菌能生長，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?4)該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶(酶E)。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完善相關(guān)內(nèi)容。①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加________，三處滴加量相同。1234緩沖液實(shí)驗(yàn)應(yīng)遵循單一變量原則，故C處應(yīng)滴加緩沖液。②一段時(shí)間后，測(cè)量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明__________________；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明_____________________________。1234不能降解W酶E與天然酶降解W的能力相近緩沖液4.(2019·全國Ⅲ，37)回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。(1)在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是___________________________________。硝化細(xì)菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上_____(填“能夠”或“不能”)生長，原因是_____________________________________。1234蛋白胨不同細(xì)菌生長繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源1234細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，牛肉膏能提供碳源、氮源、磷酸鹽、維生素，蛋白胨能提供碳源、氮源、維生素，而葡萄糖不能提供氮源，NaNO3不能為微生物提供碳源。不同細(xì)菌生長繁殖所需要的最適pH是不同的，應(yīng)該根據(jù)培養(yǎng)細(xì)菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH。硝化細(xì)菌是化能自養(yǎng)型細(xì)菌，可以空氣中的CO2為碳源，因此在沒有碳源的培養(yǎng)基上能夠生長。(2)用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板______(填“倒置”或“正置”)。1234倒置在平板培養(yǎng)基上培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需將平板倒置，這樣可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基。(3)單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是__________________________________________________________。1234在一定的培養(yǎng)條件不同種類的細(xì)菌所形成的菌落，在大小、形狀、光澤度、顏色、硬度、透明度等方面具有一定的特征，不同種細(xì)菌在一定培養(yǎng)條件下表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，可以作為菌種鑒定的重要依據(jù)。下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征(4)有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過______處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。1234滅菌使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境。一、易錯(cuò)辨析1.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害(

)2.倒平板就是等待培養(yǎng)基冷卻凝固后，將培養(yǎng)皿倒過來放置(

)3.倒平板時(shí)，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上(

)4.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落(

)5.分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時(shí)，可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨，使得培養(yǎng)基的酸堿度降低(

)√×五分鐘查落實(shí)×××二、填空默寫1.(選修1P14)培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括

等。2.(選修1P15)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是

，無菌技術(shù)除了用來

外，還能

。3.(選修1P15)消毒是指___________________________________________

。4.(選修1P15)滅菌是指___________________________________________

。水、無機(jī)鹽、碳源、氮源防止外來雜菌的入侵防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染有效避免操作者自身被微生物感染使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子5.(選修1P18)菌落是指

。采用

法和

法能將單個(gè)微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個(gè)微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。6.(選修1P22)選擇培養(yǎng)基是指_____________________________________________________________________________________。7.(選修1P17)平板冷凝后，要將平板倒置的原因是_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體平板劃線稀釋涂布平板

在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基

平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以減少培養(yǎng)基中的水分過快地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染8.(選修1P18)操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了_________________________________________；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了__________________________________________________________________________________________________，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到單菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能__________________________________________________________。9.(選修1P18)在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線的原因是_____________________________。

避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物

殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端

及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者

以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種10.(選修1P18)在第二次以及其后的劃線操作時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線的原因是_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。11.(選修1P22)當(dāng)______________________________________________________，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少。12.(選修1P22)除活菌計(jì)數(shù)法外，

直接計(jì)數(shù)也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。

劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落

兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落顯微鏡13.(選修1P22)絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以

作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可以從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌。14.(選修1P25)檢測(cè)培養(yǎng)物中是否有雜菌污染的方法是____________________________________________________。判斷選擇培養(yǎng)基是否起到篩選作用的方法是__________________________________________________________________________________________________。尿素

同時(shí)培養(yǎng)滅菌后的未接種的培養(yǎng)基，觀察是否有菌落產(chǎn)生

配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照，觀察選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)是否遠(yuǎn)少于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目課時(shí)精練A.從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，從用途看該培養(yǎng)基屬于鑒

別培養(yǎng)基B.該培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖，屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨C.該培養(yǎng)基缺少提供無機(jī)鹽的物質(zhì)D.該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的pH后就可以接種使用一、選擇題1.(2022·河北高三聯(lián)考)下表為某培養(yǎng)基的配方，下列敘述正確的是√1234567891011成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水含量10g10g2g0.4g0.065g1000mL2.在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。下列關(guān)于消毒和滅菌的敘述，錯(cuò)誤的是A.牛奶的消毒常用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法B.水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過高錳酸鉀消毒的C.用紫外燈對(duì)密閉教室消毒前，適量噴灑消毒液可強(qiáng)化消毒效果D.培養(yǎng)基不能放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌√1234567891011高錳酸鉀是強(qiáng)氧化劑，不宜用于自來水消毒，B項(xiàng)錯(cuò)誤。3.(2022·南通高三一模)在純化培養(yǎng)的過程中，關(guān)于倒平板的描述正確的是A.等培養(yǎng)基冷卻至40℃左右時(shí)，方可進(jìn)行倒平板B.將滅過菌的培養(yǎng)皿放在桌面上，打開培養(yǎng)皿蓋C.等待平板冷卻5～10s，將平板倒過來放置D.倒平板后無需將培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌√12345678910111234567891011等培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板，防止雜菌污染，A項(xiàng)錯(cuò)誤；用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，而不能打開皿蓋，B項(xiàng)錯(cuò)誤；等待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上，C項(xiàng)錯(cuò)誤；滅菌應(yīng)在倒平板之前進(jìn)行，D項(xiàng)正確。4.如圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5，下列操作方法錯(cuò)誤的是A.每次劃線操作后要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌B.劃線操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行C.第3次劃線操作可從第2次開始劃出，也可從第1次開始D.在第4次劃線區(qū)域中也可以得到菌落√1234567891011結(jié)合題干信息，劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5，平板劃線過程要保證每次劃線的菌種來自上一次劃線的末端，C錯(cuò)誤。5.尿酸氧化酶能分解尿酸(C5H4N4O3)，為獲取尿酸氧化酶高產(chǎn)菌株用以研制治療高尿酸血癥的酶類藥物，科研人員從海洋泥土中取樣后富集培養(yǎng)，3天后吸取培養(yǎng)液梯度稀釋到10－6，然后接種到固體培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)。挑取單菌落檢測(cè)尿酸氧化酶的酶活力(用每分鐘轉(zhuǎn)化1μmol尿酸所需要的酶量表示)，結(jié)果如下表所示。下列分析錯(cuò)誤的是1234567891011菌株1234酶活力100501420A.從海洋泥土中取的樣品需在無菌條件下富集培養(yǎng)B.需要在以尿酸為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)C.菌株3的酶活力最高，可作為實(shí)驗(yàn)所需的目的菌D.分離培養(yǎng)時(shí)利用了平板劃線法進(jìn)行接種√1234567891011菌株1234酶活力1005014201234567891011為獲得純凈培養(yǎng)物，避免雜菌污染，應(yīng)進(jìn)行無菌操作，A項(xiàng)正確；實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菫楂@取尿酸氧化酶高產(chǎn)菌株，故需要在以尿酸為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)，B項(xiàng)正確；酶活力用每分鐘轉(zhuǎn)化1μmol尿酸所需要的酶量表示，故所需酶量越少，說明酶活力越高，可知菌株3的酶活力最高，可作為實(shí)驗(yàn)所需的目的菌，C項(xiàng)正確；根據(jù)題意可知，分離培養(yǎng)時(shí)利用了稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，D項(xiàng)錯(cuò)誤。菌株1234酶活力100501420A.圖中采用平板劃線法接種B.圖中①和②表示尿素培養(yǎng)基長出的菌落C.圖中③④培養(yǎng)基中菌落生長代謝時(shí)，會(huì)釋放CO2D.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，自然界中能合成脲酶的微生物比例較高6.(2022·寧波高三適應(yīng)性考試)下圖為分離以尿素為氮源的微生物的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，下列敘述正確的是√12345678910111234567891011根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，圖中采用的接種方法為稀釋涂布平板法，A項(xiàng)錯(cuò)誤；由圖中①和②的菌落的特征可知，①稀釋度為10－6的菌落數(shù)明顯多于②稀釋度為10－7時(shí)的菌落數(shù)，很可能是由于雜菌污染導(dǎo)致的結(jié)果，而不是分離出以尿素為氮源的微生物，B項(xiàng)錯(cuò)誤；③④已經(jīng)分離出單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的尿素分解菌的菌落，尿素分解菌含有脲酶，能夠催化尿素分解成氨、二氧化碳和水，C項(xiàng)正確；根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，無法判斷自然界中能合成脲酶的微生物比例，D項(xiàng)錯(cuò)誤。二、非選擇題7.(2022·廣東六校聯(lián)盟高三聯(lián)考)為了檢測(cè)牛奶中是否含有某種微生物，配制的培養(yǎng)基的配方如下，請(qǐng)分析回答下列問題(注：伊紅美藍(lán)是由兩種染色劑組成的細(xì)胞染料)：1234567891011蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水10g5g5g2g0.4g0.065g1000mL將培養(yǎng)基pH調(diào)至7.2(1)根據(jù)配方，該培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)______(填“細(xì)菌”“霉菌”或“細(xì)菌與霉菌”)，其所含氮源的功能是_________________________。細(xì)菌主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸(2)該微生物在同化作用上的代謝類型是______型，其在培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個(gè)菌落在生態(tài)學(xué)中被稱為______。(3)接種好的培養(yǎng)皿在恒溫箱中培養(yǎng)時(shí)要倒置，目的是___________________________________________。異養(yǎng)種群防止冷凝水滴落在1234567891011培養(yǎng)基上；避免水分過快蒸發(fā)蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水10g5g5g2g0.4g0.065g1000mL將培養(yǎng)基pH調(diào)至7.2(4)有同學(xué)為統(tǒng)計(jì)消毒后的牛奶中該微生物的含量，取5mL牛奶樣液進(jìn)行了下圖操作，每個(gè)平板中的統(tǒng)計(jì)結(jié)果為87、83、85，則經(jīng)過消毒后的牛奶中該微生物的含量大約是_______________個(gè)·mL－1。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)_____(填“是”或“否”)需要設(shè)置空白對(duì)照組，目的是_________________________。85000(8.5×104)是用于判斷培養(yǎng)基是否被污染1234567891011由圖可知，牛奶樣液稀釋了103倍，則消毒后牛奶中每毫升含細(xì)菌數(shù)為(87＋83＋85)÷3÷1×103

＝8.5×104(個(gè))。統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)的該方法叫稀釋涂布平板法，統(tǒng)計(jì)樣本菌落時(shí)，需要設(shè)置空白對(duì)照，目的是用于判斷培養(yǎng)基是否被污染。12345678910118.苯酚(C6H5OH)是重要的化工原料，被廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)中，易形成污染，具有致癌、致畸和致突變作用。苯酚降解菌能分解工業(yè)廢水中的苯酚。自然界中能分解苯酚的微生物有幾百種，多為細(xì)菌、放線菌等。分離和純化高效降解苯酚的微生物的實(shí)驗(yàn)流程如圖1所示：1234567891011請(qǐng)回答下列問題：(1)在制作苯酚降解菌的富集培養(yǎng)基和平板分離培養(yǎng)基時(shí)，培養(yǎng)基中應(yīng)以_____為唯一碳源，后者除基本營養(yǎng)成分外，還應(yīng)添加_____(物質(zhì))，然后用________________(方法)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。1234567891011苯酚瓊脂高壓蒸汽滅菌法1234567891011本實(shí)驗(yàn)的目的是篩選能降解苯酚的微生物，故在配制相應(yīng)的培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)該以苯酚為唯一碳源，制作成選擇培養(yǎng)基，才可達(dá)到篩選的目的。而平板分離培養(yǎng)基與富集培養(yǎng)基相比，平板分離培養(yǎng)基是在培養(yǎng)皿上分離微生物，得到單菌落，故應(yīng)制成固體培養(yǎng)基，應(yīng)再添加凝固劑瓊脂，制作好的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。1234567891011(2)用平板劃線法分離得到的單個(gè)菌落大小、顏色、隆起度等不完全一致的原因是________________________________________________________________________________。

工業(yè)廢水中能降解苯酚的微生物有多種，不同種類的微生物在平板上形成的菌落特征不同1234567891011(3)對(duì)分離得到的某株苯酚降解菌進(jìn)行菌株生長及苯酚降解實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖2所示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明此菌株適于降解的苯酚濃度為_____g/L，判斷依據(jù)是_________________________________________________________。1.0此苯酚濃度下菌體繁殖快(或菌體數(shù)量最多)，且苯酚的降解率高9.乳酸菌是對(duì)人體有益的微生物之一，常用于產(chǎn)生酸奶，其發(fā)酵產(chǎn)物為乳酸，能溶解周圍環(huán)境中的難溶性碳酸鈣。為檢測(cè)某品牌酸奶中的乳酸菌含量是否達(dá)標(biāo)，檢驗(yàn)人員進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。回答下列問題：(1)配制培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中除含水、無機(jī)鹽、碳源、氮源和瓊脂外，還需添加維生素和________。1234567891011CaCO3乳酸菌的發(fā)酵產(chǎn)物乳酸，能溶解周圍環(huán)境中的難溶性碳酸鈣，因此配制培養(yǎng)乳酸菌的培養(yǎng)基除加入水、無機(jī)鹽、碳源、氮源和瓊脂外，還需添加維生素和CaCO3。(2)稀釋樣品：取1mL待測(cè)酸奶，用_______進(jìn)行梯度稀釋。1234567891011無菌水計(jì)數(shù)乳酸菌前，需用無菌水將待測(cè)酸奶稀釋至合適濃度。(3)接種培養(yǎng)：用______________法接種，培養(yǎng)時(shí)控制的氣體條件是_____。1234567891011稀釋涂布平板計(jì)數(shù)乳酸菌需用稀釋涂布平板法接種，乳酸菌是厭氧菌，培養(yǎng)時(shí)控制的氣體條件是無氧。無氧(4)觀察計(jì)數(shù)：菌落周圍出現(xiàn)_________________的就是乳酸菌的菌落，選擇菌落數(shù)在________的平板計(jì)數(shù)。每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，目的是________________________________________。1234567891011透明圈(或