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DB62/T2686—2023羊巴氏桿菌病防治技術(shù)規(guī)范2023-09-25實(shí)施2023-09-25實(shí)施I本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替DB62/T2686-2016《羊巴氏桿菌病防治技術(shù)規(guī)范》,與DB62/T2686-2016相比,除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動(dòng)外,主要技術(shù)變化如下:a)刪除了引言;b)更改了規(guī)范性引用文件;c)增加了實(shí)驗(yàn)室診斷中的PCR鑒定;增加了PCR鑒定所需的引物序列;增加了種屬PCR及分d)增加了結(jié)果判定;e)修改了藥物治療。本文件由甘肅省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并監(jiān)督實(shí)施。本文件由甘肅省動(dòng)物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本文件起草單位:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)、甘肅省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、甘肅省畜牧技術(shù)推廣總站、碌曲縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、甘肅省綿羊繁育技術(shù)推廣總站、靜寧縣畜牧獸醫(yī)中心雷大畜牧獸醫(yī)站、渭源縣慶坪鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站、碌曲縣瑪艾鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站、臨澤縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、定西市岷縣禾馱鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站、臨澤縣蓼泉鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站、臨澤縣新華鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站、山丹縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、山丹縣東樂(lè)鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村綜合服務(wù)中心。本文件主要起草人:王文莉、李巖、馬胡賽、王鵬程、黃耀華、戴雄雄、張芳玲、索南卓瑪、王耀東、包蘇琴、崔家仁、馬吉軍、楊明國(guó)、程博、馬應(yīng)舉、王新武、張寶林。本文件所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為:——2016年首次發(fā)布為DB62/T2686-2016,本次為第一次修訂。本文件由甘肅省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心解釋。12規(guī)范性引用文件僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本GB/T27530牛出血性敗血病診斷技術(shù)NY/T5030無(wú)公害農(nóng)產(chǎn)品獸藥使用準(zhǔn)則中華人民共和國(guó)獸藥典(2020年版)4.1流行特點(diǎn)多殺性巴氏桿菌隨患病動(dòng)物分泌物和排泄物排出體外,主要經(jīng)消化道感染,也可經(jīng)呼吸道感染(飛沫傳播),皮膚、黏膜傷口也可感染。在牧區(qū),吸血昆蟲(chóng)叮咬也是傳播疾病的重要途徑。健康帶菌羊在4.1.4發(fā)病季節(jié)2一年四季均可發(fā),氣候寒冷(冬春)、悶熱潮濕的季節(jié)(6月~8月)多發(fā)。病羊精神沉郁,食欲廢絕,體溫升高至41℃~42℃。呼吸急促、咳嗽、鼻孔常有出血,有時(shí)血液混4.3.4PCR鑒定3多殺性巴氏桿菌屬特異性16SrRNA基因、種特異性KMT1及莢膜基因capA、capB、cap引物序列應(yīng)按照表1合成。表1引物序列信息表基因引物引物序列(5'→3')片段大小退火溫度FACGCGTCGACAGAGTTTGATCCTGRCGCGGATCCGCTACCTTGTFRFRFRFRFRFAATCGGAGAACGCAGAAATR4.3.4.2多殺性巴氏桿菌種的PCR鑒定將染色鑒定為可疑多殺性巴氏桿菌的菌株在固體培養(yǎng)基上純化,取細(xì)菌培養(yǎng)物2mL,用試劑盒提取DNA模板1μL,無(wú)菌無(wú)酶水補(bǔ)至總體積25μL。反應(yīng)條件為:預(yù)變性95℃,5min;擴(kuò)增循環(huán)30×(95℃60s,55℃30s,72℃60s);延伸72℃7min。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在1.5%瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳。KMT1基因擴(kuò)增產(chǎn)物大小為460bp。對(duì)KMT1基因PCR陽(yáng)性的樣品進(jìn)一步用相同的方法進(jìn)行5個(gè)莢膜型的鑒定。5結(jié)果判定根據(jù)4.1流行特點(diǎn)、4.2臨床癥狀及病理變化可做出初步診斷,確診需按照4.3進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。6.1定期預(yù)防接種,春秋兩季用市售合格的羊巴氏桿菌疫苗進(jìn)行預(yù)防接種。6.2緊急預(yù)防接種,發(fā)生本病后,對(duì)同群羊進(jìn)行緊急免疫接種。6.3加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,提高飼料營(yíng)養(yǎng)水平,保持飲水清潔;強(qiáng)化獸醫(yī)衛(wèi)生消毒,保持環(huán)境衛(wèi)生,增強(qiáng)羊群抵抗力。消除誘發(fā)因素;避免牛羊受寒中暑。6.4嚴(yán)格檢疫,避免引入患病動(dòng)物和帶毒動(dòng)物。47.2對(duì)病羊按照以下藥物進(jìn)行治療:氨基糖苷類、頭孢類及磺胺類藥物等。慶大霉素,按每kg體重1000U~1500U,頭孢噻呋1.1mg/kg~2.2mg/kg,1日1次,20%磺胺嘧啶鈉5mL~10mL,均肌內(nèi)注射
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