移液器的原理及使用

1、移液器的原理及使用,講述人：吳昊,移液器的結構移液器的分類移液器的使用方法移液器使用的注意事項移液器的維護和保養(yǎng),移液器的結構,移液器的分類,移液器按工作原理可分為：氣體活塞式移液器外置活塞式移液器,氣體活塞式移液器,1原理：活塞通過彈簧的伸縮運動來實現(xiàn)吸液和放液。2加樣體積范圍：1L10mL3缺點:不適宜移取高粘稠度液體、揮發(fā)性較大的液體易發(fā)生交叉污染錯誤的使用習慣易造成移液器精度不準甚至移液器內部腐蝕等等,外置活塞式移液器,這種移液器是采用外置式活塞，活塞設計在吸頭內部，直接與液體接觸,活塞與液體之間沒有空氣段適用于粘度比較大或者產生氣泡的液體的操作。無空氣間隔，避免了樣品于空氣接觸可能發(fā)

2、生的氣霧交叉污染，因此也非常適合是珍貴的試劑、生物樣品的移取。,三、移液器的使用方法,一個完整的移液循環(huán)：槍頭安裝容量設定預洗吸頭吸液放液卸去吸頭,1、槍頭安裝,正確的安裝方法叫旋轉安裝法把移液器頂端插入槍頭（無論是散裝槍頭還是盒裝槍頭都一樣），在輕輕用力下壓的同時，左右微微轉動，上緊即可。,切記用力不能過猛，更不能采取剁槍頭的方法來進行安裝，因為這樣會導致移液槍的內部配件（如彈簧）因敲擊產生的瞬時撞擊力而變得松散，甚至會導致刻度調節(jié)旋鈕卡住，嚴重情況下會將白套筒折斷。,多道移液器裝配槍頭時，將移液器的第一道對準第一個吸頭，傾斜插入，前后稍許搖動上緊，吸頭插入后略超過O型環(huán)即可。,2、移液體積

3、設定,正確的體積設定分為兩個步驟：粗調：通過旋轉按鈕將體積值迅速調整至接近自己的預想值；細調：當體積值接近自己的預想值之后，應將移液器橫置，水平放至自己的眼前，通過調節(jié)輪慢慢地將容量值調至預想值，從而避免視覺誤差所造成的影響；,從大體積調節(jié)至小體積時，為正常調節(jié)法，調節(jié)到剛好就行；從小體積調節(jié)至大體積時，就需要先調節(jié)超過設定體積的刻度，再回調至設定體積，可保證最佳的精確度。（這是由于計數(shù)器里面有一定的空隙，需要彌補）。,3、預洗槍頭,在我們安裝了新的槍頭或增加了容量值以后，應該把需要轉移的液體吸取、排放兩到三次，這樣做是為了讓槍頭內壁形成一道同質液膜，確保移液工作的精度和準度，使整個移液過程具

4、有極高的重現(xiàn)性。在吸取有機溶劑或高揮發(fā)液體時，揮發(fā)性氣體會在白套筒室內形成負壓，從而產生漏液的情況，這時需要我們預洗四到六次，讓白套筒室內的氣體達到飽和，負壓就會自動消失。,粘稠液體可以通過槍頭預潤濕的方式來達到精確移液，先吸入樣液，打出，槍頭內壁會吸附一層液體，使表面吸附達到飽和，然后再吸入樣液，最后打出液體的體積會很精確。,4、吸液,先將移液器排放按鈕按至第一停點，再將槍頭垂直浸入液面，浸入的深度為：P2、P101mm；P20、P100、P2002mm；P10003mm；P5mL、P10mL4mm；浸入過深的話，液壓會對吸液的精確度產生一定的影響，當然，具體的浸入深度還應根據(jù)盛放液體的容器

5、大小靈活掌握。,5、放液,放液時，槍頭緊貼容器壁，先將排放按鈕按至第一停點，略停頓后，再按至第二停點，這樣做可以保證槍頭內無殘留液體。如果這樣操作后還有殘留液體存在的話，就應該更換槍頭了。,正向吸液：操作時吸液可將按鈕按到第一檔吸液，釋放按鈕。放液時先按下第一檔，打出大部分液體，再按下第二檔，將余液排出。反向吸液：吸液時將按鈕直接按到第二檔再釋放，這樣會多吸入一些液體，打出液體時只要按到第一檔即可。多吸入的液體可以補償槍頭內部的表面吸附，反向吸液一般與預潤濕吸液方式結合使用，適用于粘稠液體和易揮發(fā)液體。,6、卸掉槍頭：,卸掉的槍頭一定不能和新吸頭混放，以免產生交叉污染。移液器用完后調回最大量程

6、。,錯誤的操作方式：,五、移液器使用的注意事項,移液器是否漏氣？1、目視法檢測：將吸取液體后的移液器垂直靜置15秒，觀察是否有液滴緩慢的流出。若有流出，說明有漏氣現(xiàn)象。（如果是P2、P10、P20、P100、P200的移液器，請將槍頭浸入液面1-2毫米，靜置20秒鐘，觀察槍頭內部液面是否下降，如果下降了，就說明您手中的移液器出現(xiàn)漏液現(xiàn)象）。2、可能原因：,不可用大量程的移液器移取小體積的液體；吸液體積需保證在移液器所提供的量程范圍之內才符合不準確度和不精確度的要求。在設置量程時，所設量程在移液器量程范圍內不要將按鈕旋出量程，否則會卡住機械裝置，損壞了移液器。,吸液速度需緩慢吸液速度太快會產生反沖和氣泡，導致移液體積不準確。濃度和粘度大的液體，會產生誤差，為消除其誤差的補償量，可由試驗確定，補償量可用調節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設定。,可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法，來校正取液器，1mL蒸餾水20時重0.9982g。,六、移液器的維護保養(yǎng)：,定期清潔我們手中的移液器，用酒精棉即可，主要擦拭外殼，既可以保持美觀，又可以降