玉米組培技術(shù).ppt

1、玉米組織培養(yǎng)，主要內(nèi)容：植物組織培養(yǎng)的意義，玉米組織培養(yǎng)的目的，研究進展，目前玉米組織培養(yǎng)的主要方法，植物組織培養(yǎng)的意義，植物組織培養(yǎng)可以產(chǎn)生大量的優(yōu)良無性系，細胞融合可以打破種屬之間的界限，單倍體，三倍體，其他多倍體和非整倍體可以通過克服遠緣雜交的不親和障礙獲得。植物細胞的組織培養(yǎng)已成為細胞水平分析和研究的理想材料。玉米組織培養(yǎng)的目的是使外植體能夠高頻率誘導(dǎo)愈傷組織，建立高效的體細胞再生體系，為玉米遺傳轉(zhuǎn)化和細胞工程研究創(chuàng)造有利條件。1949年，拉魯首次以甜玉米胚乳為外植體誘導(dǎo)玉米愈傷組織，但未獲得再生植株。1975年，Green和Phillips首次以A188的未成熟胚為外植體誘導(dǎo)二倍體愈

2、傷組織并再生出第一株克隆植株。玉米組織培養(yǎng)的研究現(xiàn)狀已經(jīng)能夠從各種外植體誘導(dǎo)愈傷組織和再生植株。例如幼胚、花藥、幼穗等。其中幼胚是目前最容易誘導(dǎo)和最常用的外植體。玉米組織培養(yǎng)的主要方法(簡介)，1 .玉米花粉和花藥的組織培養(yǎng)一般可以獲得單倍體植株，這有利于促進玉米遺傳育種的有效進展。2.離體培養(yǎng)的玉米根尖和莖尖分生組織具有良好的分化性能。玉米莖尖和根尖的離體培養(yǎng)有利于促進整個玉米植株的生長，材料的選擇不受季節(jié)的限制。3.玉米幼胚的組織培養(yǎng)玉米幼胚為二倍體，具有很強的分生能力。未成熟胚是最容易誘導(dǎo)的外植體，也是目前最常用的外植體，但獲得未成熟胚的時間受到季節(jié)的嚴格限制。玉米幼胚組織培養(yǎng)的全過程。

3、接種室消毒準備，誘導(dǎo)培養(yǎng)基滅菌準備(N6肌醇L-脯氨酸1.38克/升蔗糖30克/升瓊脂7克/升水解酪蛋白0.5克/升2，4-D2mg/毫升)，2。未成熟胚的外部消毒和選擇，用75%酒精擦拭玉米的外葉至干凈的工作臺，用75%酒精擦拭玉米的外葉，剝?nèi)ヒ粚硬⒛Σ烈粚?，直到用小刀去除三分之一的玉米種子，將未成熟胚接種在制備的誘導(dǎo)培養(yǎng)基(暗培養(yǎng))上。3。繼代培養(yǎng)制備用繼代培養(yǎng)基(N6水解酪蛋白0.1g/L L-脯氨酸0.69g/L甘露醇20g/L蔗糖30g/L瓊脂6.5g/L 2，4-D1mg/ml)誘導(dǎo)2次，待產(chǎn)生透明、黃色、堅硬的愈傷組織后，可用于轉(zhuǎn)化(一般繼代培養(yǎng)3次)；4.轉(zhuǎn)化浸染培養(yǎng)(22-2

4、5，暗培養(yǎng)3天)、恢復(fù)培養(yǎng)(暗培養(yǎng)3天)、篩選培養(yǎng)、分化培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和壯苗；5.移栽和管理移栽前，移栽基質(zhì)應(yīng)消毒。移栽前，可將培養(yǎng)物移至自然光下2-3天不開放，然后再開放培養(yǎng)1-2天，以適應(yīng)未來的自然濕度條件。移栽玉米組培苗時，應(yīng)先清洗根培養(yǎng)基，以免被細菌或真菌污染，影響幼苗生長。移栽，玉米莖尖組織培養(yǎng)的全過程。在接種室中制備工作滅菌制備培養(yǎng)基(MS蔗糖30g/L瓊脂6.5g/L)，1。給玉米種子消毒。將200，300粒玉米種子放入500毫升三角瓶中，用75%酒精清洗8分鐘，用0.1%氯化汞清洗5分鐘，用無菌水清洗2次，靜置8小時，用0.1%氯化汞清洗8分鐘，用無菌水清洗5次，放入盤盒中避光3天。2.培養(yǎng)三天后，接種并取出種子，將其接種到MS固體培養(yǎng)基中，根向下延伸到培養(yǎng)基中，芽向上，那些發(fā)芽不良的，接種到MS固體培養(yǎng)基中的芽放回28，并在黑暗中培養(yǎng)3-4天。3。玉