SYSMEX五分類血液分析儀XT-2000i檢測原理及臨床應(yīng)用.ppt

1、SYSMEX五分類血液分析儀XT-2000i檢測原理及臨床應(yīng)用,血細(xì)胞分析儀的發(fā)展簡史,二分群時(shí)代：淋巴細(xì)胞、非淋巴細(xì)胞 三分群時(shí)代：（大細(xì)胞、中間細(xì)胞、小細(xì)胞） 五分類時(shí)代：淋巴、單核、中性粒、嗜酸粒、 嗜堿粒,五分類血球方法學(xué)概覽,方法學(xué) 第一代：純物理原理(CD-3700，SE-9000) 激光、射頻、電阻 第二代：物理+化學(xué)（SYSMEX SF-3000，） 酶染色、顆粒染色 特異性溶血 第三代：物理 +分子生物學(xué)（SYSMEX XT-1800i/XT-2000i） 分子生物學(xué)技術(shù)（DNA、RNA染色）,內(nèi) 容,XT-2000i檢測報(bào)告組成 白細(xì)胞系統(tǒng)的檢測原理和臨床病例分析 紅細(xì)胞系

2、統(tǒng)參數(shù)的臨床意義 網(wǎng)織紅細(xì)胞的參數(shù) 血小板系統(tǒng)參數(shù)的臨床意義 標(biāo)本采集的要求,XT-2000i- 規(guī)格 -,參數(shù) 30項(xiàng) 研究參數(shù) 2項(xiàng)（IG，IG） 處理速度: 80標(biāo)本/小時(shí) 檢測模式: 4種模式（CBC, CBC+DIFF CBC+RET,CBC+DIFF+RET 標(biāo)本量: 手動進(jìn)樣: 85 ul 自動穿刺: 150 ul 末梢血預(yù)稀釋進(jìn)樣：40ul+160ul稀釋液,XT-2000i報(bào)告單的組成,（一）2個(gè)直方圖、4個(gè)散點(diǎn)圖 （二） 30項(xiàng)數(shù)字結(jié)果： RBC、WBC、PLT、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD、RDW-CV、MPV、PCT、PDW、P-LCR、NEU

3、%/#、MNON%/#、LYM%/#、EO%/#、BA%/#、 RET %/#, IRF, LFR, MFR, LFR,XT 分析流程,檢測模塊,分析原理,檢測通道,圖形,RBC/PLT,WBC,鞘 流 電 阻 法,半導(dǎo)體激光 FCM,RBC/PLT 通道,PLT 直方圖,參數(shù),PLT,HGB,HGB 通道,比色法,HGB,全 血 標(biāo) 本,DIFF 通道,RET 通道,DIFF散點(diǎn)圖,WBC# Baso,RET PLT-O IRF,RET散點(diǎn)圖,Lymph Mono Neut+Ba EO *IG - research,RET,半導(dǎo)體激光 FCM,WBC/Ba 通道,WBC/BA 散點(diǎn)圖,RBC

4、 直方圖,RBC,only for XT-2000i,白細(xì)胞系統(tǒng)的檢測原理和 臨床病例分析,白細(xì)胞系統(tǒng)參數(shù),DIFF散點(diǎn)圖、WBC/BASO散點(diǎn)圖 ：白細(xì)胞總數(shù) ：中性粒細(xì)胞 ：淋巴細(xì)胞 ：單核細(xì)胞 ：嗜酸性粒細(xì)胞 ：嗜堿性粒細(xì)胞 ：絕對值：百分?jǐn)?shù),半導(dǎo)體激光和流式細(xì)胞的應(yīng)用,側(cè)向散射光,RNA/DNA含量,細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),細(xì)胞體積大小,前向散射光,側(cè)向熒光,激光束,分光鏡,WBC/BASO 原理,步驟1: 吸入標(biāo)本 通過 SRV吸入標(biāo)本血樣和試劑 步驟2: 溶血 STROMATOLYSER-FB使紅細(xì)胞溶血 除嗜堿性粒細(xì)胞以外的WBC 收縮 步驟3: 分析 分析前向散射光和側(cè)向散射光的散射圖,

5、BASO 試劑系統(tǒng),BASO,other WBC,RBC,Hemolysed (Acid, hypotonic solution),保持原形,脫漿收縮,溶血,WBC DIFF 分類通道原理,步驟1: 吸入 從 SRV吸入血液和試劑 步驟2: 溶血 STROMATOLYSER-4DL 溶解RBC - WBC膜被輕微損傷，打孔 (acid, hypotonic solution) 步驟3: 染色(RNA and DNA) STROMATOLYSER-4DS 染色 染液: 熒光染料 ( Polymethine Dye) 步驟3: 分析 分析前向散射光和熒光的散點(diǎn)圖,溶血 (WBC membrane

6、is weakly damaged),染色 RNA DNA,Diff 試劑系統(tǒng),Blast原核細(xì)胞, IG.未成熟粒細(xì)胞,異常淋巴細(xì)胞 等,高熒光濃度,低熒光濃度,高熒光濃度,正常細(xì)胞,WBC分類-散點(diǎn)圖（正常標(biāo)本）,淋巴,單核,中性,嗜酸,側(cè)向熒光(RNA ,DNA),紅細(xì)胞碎片,側(cè)向散射光(內(nèi)部結(jié)構(gòu)),分類-散點(diǎn)圖(異常標(biāo)本),淋巴,單核,中性,嗜酸,側(cè)向熒光(RNA ,DNA),紅細(xì)胞碎片,側(cè)向散射光(內(nèi)部結(jié)構(gòu)),異型淋巴,IG,核左移,出現(xiàn)幼稚粒細(xì)胞的病例,該病例為兒童急性粒細(xì)胞白血?。ˋML-M2），患兒因突發(fā)高熱而前來就診，首次血常規(guī)檢查發(fā)現(xiàn)，外周血原始細(xì)胞占71%，幼稚紅細(xì)胞占2

7、%。),出現(xiàn)幼稚淋巴細(xì)胞的病例,急淋（ALL）-L1,急淋（ALL）L1,紅細(xì)胞系統(tǒng)參數(shù),直方圖 ：紅細(xì)胞總數(shù) ：血紅蛋白濃度 ：紅細(xì)胞壓積 ：平均紅細(xì)胞體積 ：平均血紅蛋白量 ：平均血紅蛋白濃度 ：紅細(xì)胞體積分布寬度,三種直方圖的典型變化- 缺鐵性貧血的直方圖 -,特點(diǎn)： 曲線波峰左移，峰底變寬， 顯示小細(xì)胞不均一性。,三種直方圖的典型變化- 巨幼紅細(xì)胞貧血治療前的直方圖 -,特點(diǎn)： 曲線波峰右移，波底增寬， 顯示明顯的大細(xì)胞不均一 性。,三種直方圖的典型變化- 輕型-海洋性貧血的直方圖 -,特點(diǎn)： 小峰左移，峰底變窄， 典型的小細(xì)胞均一性貧血。,紅細(xì)胞體積分布寬度的臨床意義,一、定義： 紅

8、細(xì)胞體積分布寬度（Red blood cells volume Distribution Width）是反映周圍血紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù)，用所測單個(gè)紅細(xì)胞體積的變異系數(shù)來表示（CV=SD/X也可用SD表示）。 RDW-SD指把直方圖頂點(diǎn)的高度定為100%，自下而上高度為20%時(shí)的紅細(xì)胞分布寬度；RDW-CV指假定紅細(xì)胞直方圖分布曲線為正規(guī)分布曲線時(shí)，把標(biāo)準(zhǔn)偏差除以MCV，再乘以100所得出的數(shù)值。,紅細(xì)胞體積分布寬度RDW的臨床意義,缺鐵性貧血與輕型地中海的鑒別診斷 有關(guān)缺鐵性貧血的早期診斷與治療 用于貧血的形態(tài)學(xué)分類(MCV/RDW),缺鐵性貧血與輕型地中海貧血的鑒別,RDW是兩者鑒別的參考

9、指標(biāo)： 1、IDA患者RDW100%升高； 2、輕型地中海貧血患者基本正常,缺鐵性貧血的早期診斷,Uchida對1648例學(xué)生進(jìn)行了各項(xiàng)指標(biāo)的觀察， 結(jié)果顯示： MCV RDW 正常人 （894fl）（12.7 0.7）% 隱性缺鐵前期（894fl）（13.7 0.7）% 隱性缺鐵期 (866fl）（14.0 1.5）% IDA患者 79fl （15.6 1.7）%,缺鐵性貧血的治療過程,貧血的形態(tài)學(xué)分類(MCV/RDW),RET 檢測參數(shù),DNA/RNA核酸熒光染色 參 數(shù)：RET, IRF, LFR, MFR, HFR, PLT-O,內(nèi)置全自動RET分析及成熟度分類 激光染色法檢測PLT,

10、RET 試劑系統(tǒng),Staining: Ploymethine: RNA Oxazine: DNA,RET,WBC,RBC,High Level Fluorescence,Low Level Fluorescence,Very High Level Fluorescence,Reagent: RETSEARCH II (Diluent + Dye),Fluorescence(RNA),RET-散點(diǎn)圖,Forward Scatter(Volume),MFR,HFR,LFR,PLT,RBC-O,RET,WBC,IRF,網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測的臨床意義 RET，IRF(MFR+HFR),RET是一個(gè)獨(dú)立的監(jiān)測

11、骨髓造血功能恢復(fù)的參數(shù) IRF是評估造血功能恢復(fù)的可靠依據(jù) IRF是評估造血功能恢復(fù)比RET更敏感的指標(biāo) RET增高：表示骨髓造血功能旺盛。急性溶血性貧血，急性失血等明顯增高。增生性貧血，骨轉(zhuǎn)移等輕度升高。 RET減少：腎臟，內(nèi)分泌疾病，溶貧再生危象，再生障礙性貧血，放化療后等。,PLT-I,報(bào)告,PLT-O 用于明顯的病理性標(biāo)本,PLT-O,XT-2000i以電阻抗法PLT-I為準(zhǔn) 當(dāng)出現(xiàn)異常標(biāo)本時(shí)， XT-2000i會轉(zhuǎn)換用光學(xué)法PLT-O檢測,PLT-I/O 散射圖,直方圖(直流阻抗法),散射圖(光學(xué)法),PLT-I/PLT-O 兩種檢測方法,PLT-I: RBC/PLT通道 電阻抗每次

12、檢測20-25萬個(gè)細(xì)胞，而RET通道內(nèi)激光法每次只能檢測60000個(gè)細(xì)胞，其中PLT3000個(gè) 電阻抗法的PLT數(shù)目的準(zhǔn)確性與重復(fù)性比較好 PLT-O: RET/PLT-O通道 激光法對PLT的形態(tài)鑒別能力強(qiáng) 異常標(biāo)本中的小RBC、WBC碎片、或PLT數(shù)目較少時(shí)，激光法能更準(zhǔn)確地將PLT鑒別出來,PLT-I和PLT-O轉(zhuǎn)換的標(biāo)準(zhǔn),紅細(xì)胞低鑒別線RL(%)10% 血小板低鑒別線PL(%)9% 血小板高鑒別線PU(%)39% 血小板高鑒別線PU(%)23FL 和PU20% 存在細(xì)胞碎片 存在紅細(xì)胞凝集 血小板高鑒別線PU%13%和PLT35FL45% 和 PLT-I#80 x109/L PLT-I

13、115%,血小板系統(tǒng)參數(shù),直方圖 ：血小板計(jì)數(shù) ：血小板體積分布寬度 ：平均血小板體積 P C T：血小板壓積 ：大血小板比例,血小板直方圖的臨床意義,在多種疾病中PLT直方圖均可發(fā)生改變，如：特發(fā)性血小板減少性紫癲，特點(diǎn)是血小板數(shù)量減少，巨大血小板增多，直方圖表現(xiàn)為曲線峰右移，而窄峰圖則常因PLT減少所致。 影響因素： 曲線峰左移，可能存在細(xì)胞漿碎片； 曲線峰右移，常表示存在異常紅細(xì)胞 （裂細(xì)胞或極端小的紅細(xì)胞）。,P-LCR,參考值：0.13-0.43 體積超過12fl的PLT占總PLT的比率 對檢測血小板凝集、與紅細(xì)胞的重疊以及監(jiān)視血小板造血功能等有意義,MPV,參考值：9.4-12.5

14、 fl 是反映骨髓造血功能是否良好的指標(biāo)。 用于病情觀察：白血病化療時(shí)，MPV增加是骨髓恢復(fù)的第一個(gè)征兆,MPV與PLT聯(lián)合檢測的臨床意義,標(biāo)本采集要求,最佳血液標(biāo)本靜脈血,靜脈血和末梢血因采血方式和部位的不同而 存在較大差別： 血小板PLT：靜脈血末梢血 白細(xì)胞WBC：靜脈血末梢血 紅細(xì)胞RBC：靜脈血略末梢血 針刺采血： 皮膚刺破后，導(dǎo)致血小板形成紅色血栓 活化血小板，使血小板聚集 同時(shí)在血管中間形成一運(yùn)動迅速，成分含量高的液流,五分類血液分析儀標(biāo)本采集要求,1、最好一次穿刺采血成功 2、使用封閉式真空注射器和廠家生產(chǎn)的 EDTA-K2抗凝管 3、采血后應(yīng)立即顛倒混勻數(shù)次，使血液與抗 凝劑充分混合，防止血