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文檔簡介
1、纖維素:棉花是自然界中纖維素含量最高的天然物質(zhì),纖維素是地球上含量最豐富的多糖物質(zhì),植物每年產(chǎn)生超過70億噸纖維素的分布植物的根、莖、葉中1 .在草食性動(dòng)物等消化管內(nèi)也共生有分解纖維素的微生物,其原理是2 .農(nóng)作物秸稈:米秸稈、麥秸稈、稻秸稈、草木、木屑等大量纖維素豐富,利用機(jī)會(huì)少,效率低,纖維素生物燃料:石油能源替代最有希望,科學(xué)家使用農(nóng)業(yè)廢棄物、木材和生長速度更快的草本植物,生物燃料多種多樣課題3分解纖維素微生物的分離、一、基礎(chǔ)知識、一.纖維素、纖維素是葡萄糖的首尾一貫的高分子化合物,是最豐富的多糖類物質(zhì)。 土壤中的一些微生物產(chǎn)生纖維素酶,可將纖維素分解成葡萄糖進(jìn)行再利用。 2 .纖維素酶
2、纖維素酶是至少含有C1酶(外切酶)、CX酶(內(nèi)切酶)、葡萄糖苷酶三種成分的復(fù)合酶,其中纖維素分解成纖維素原,第三種酶將纖維素原分解成葡萄糖。 一、基礎(chǔ)知識,在2根20mL的試管中分別放入16cm的濾紙條,分別放入ph4.8、物質(zhì)的量濃度0.1mol/L的醋酸鈉緩沖液10mL、11mL。 在裝有緩沖液10mL的試管中加入纖維素酶1ml(7080u/ml )。 將2根試管固定在50mL的圓錐瓶上,在搖床上以140r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行1h振動(dòng)反應(yīng),觀察結(jié)果。 1U表示一個(gè)酶活性單元,是指在溫度為25、其他反應(yīng)條件例如pH值等最佳的情況下,1mmol的基質(zhì)在1分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)化所需的酶量。 底物:酶起作用和催
3、化作用的化合物。 在一個(gè)試管中添加纖維素酶,在另一個(gè)試管中不添加纖維素酶,思考1實(shí)驗(yàn)分析: P27的小實(shí)驗(yàn)是如何構(gòu)成對照的?濾紙崩解法,(2)纖維蛋白分解菌的篩選,1 )纖維蛋白分解菌的篩選方法 、剛果紅染色法、顏色、2、其原理如下:根據(jù)是否形成紅色復(fù)合體、纖維素酶、纖維素分解菌、透明圈、透明圈,以及是否形成透明圈,篩選、練習(xí)剛果紅與纖維素,使纖維素成為 1 .就接下來的纖維素酶而言,a .纖維素酶是復(fù)合酶,至少3種b .纖維素酶可以將纖維素分解為葡萄糖c .纖維素酶去除植物的細(xì)胞壁d .葡萄糖苷酶可以將纖維素分解為葡萄糖, 2 .能夠用剛果紅法篩選纖維素分解菌的a .剛果紅能量和纖維素的紅色
4、復(fù)合體b .剛果紅能量和纖維二糖的紅色復(fù)合體c .剛果紅能量和葡萄糖的紅色復(fù)合體d培育的目的是? 你會(huì)選擇培養(yǎng)基的特征嗎? 你會(huì)選擇什么樣的殖民地呢? 識別培養(yǎng)基的特征嗎? 怎么識別? 根據(jù):微生物對生存環(huán)境的要求,去相應(yīng)的環(huán)境中尋找,目的:增加纖維素分解菌的濃度,從樣品中分離出必要的微生物,剛果染色法,1,纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基屬于_ _ _ _ _ _ (固體,液體)培養(yǎng)基。 原因是什么?如果存在,則該選擇機(jī)制應(yīng)該在解釋設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)來選擇培養(yǎng)的作用時(shí),控制的變量應(yīng)該是: 培養(yǎng)基的選擇作用的對照實(shí)驗(yàn)?zāi)芊裨O(shè)定,葡萄糖,纖維素粉,【資料3】剛果紅染色法,方法1 :培養(yǎng)微生物后加入剛果紅進(jìn)行顏色反
5、應(yīng),方法2 :逆平板時(shí)加入剛果紅鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基,(水溶性羧甲基色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用,請考慮一下操作繁瑣:這兩種方法各有什么優(yōu)點(diǎn)和不足? 選擇能形成透明環(huán)的菌落,選擇能形成明顯透明環(huán)的菌落,一般是分解纖維素的菌落。 接種纖維蛋白分解菌的選擇培養(yǎng)基,用300C 370C培養(yǎng),可以得到單純的培養(yǎng)。 四、結(jié)果分析和評價(jià)、1 .培養(yǎng)基制備是否合格及培養(yǎng)基是否篩選菌落對照的培養(yǎng)基說明培養(yǎng)中如果沒有菌落生長,培養(yǎng)基制備就合格。 如果觀察到生成透明環(huán)的菌落,就有可能得到分解纖維素的微生物。 為了確認(rèn)分離得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn),纖維素酶的發(fā)酵方法是:對纖維素酶分解濾紙等纖維素而產(chǎn)生的含量進(jìn)行定量測定。 發(fā)酵纖維素酶、液體、固體、葡萄糖、五、課題的延長、分解纖維素的微生物的分離、纖維素酶、種類、作用、催化劑、剛果染色、篩選原理、實(shí)驗(yàn)設(shè)施修訂、土壤取樣、選擇培養(yǎng)、涂布培養(yǎng)、精制培養(yǎng)1 .回答有關(guān)飲用水檢查的問題(1)檢測大腸桿菌含量時(shí),通常對水樣進(jìn)行一系列梯
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