腎上腺素對內(nèi)毒素致雄性大鼠炎癥性肝損害保護作用大全.ppt

1、腎上腺素對內(nèi)毒素致雄性大鼠炎癥性肝損害的保護作用,柴敏、姚淵、徐蓉、謝珊珊,前言：,我國肝炎發(fā)病率不斷呈上升趨勢，臨床上對于治療肝炎的新藥物的研究也在不斷發(fā)展，腎上腺素(EPI)作對于肝炎癥性損傷的保護作用在臨床上尚處于研發(fā)階段，有很大的臨床應(yīng)用前景。本實驗利用內(nèi)毒素脂多糖(LPS)會造成小鼠肝臟炎癥性損傷，比較是否給予EPI的不同組小鼠間的肝臟是否形成炎癥性損傷及其損傷程度，不同劑量的EPI對肝臟的保護作用是否存在劑量關(guān)系。,實驗材料與試劑,實驗對象：50只SPF級SD大鼠（由實驗室提供）,實驗動物介紹： SD大鼠：由美國的Sprague & Dawley農(nóng)場的R.W.Dawley用雜合的雄

2、性大鼠和Wistar雌性大鼠雜交后育成的一個白化封閉群大鼠。 SPF級動物：機體內(nèi)無特定的微生物和寄生蟲存在的動物，但非特定的微生物和寄生蟲是容許存在的。一般指無傳染病的健康動物，是目前國外使用最廣泛的實驗動物。 篩選標(biāo)準(zhǔn)：體重為200g左右的雄性大鼠,實驗儀器與試劑,實驗儀器與器材：Beckman全自動生化分析儀CX-5型，靜脈注射器，剪刀，鑷子，自動分析天平，小試管，移液管 實驗試劑：LPS（同一廠家生產(chǎn)，同批號）,EPI （同一廠家生產(chǎn)，同批號）,生理鹽水，標(biāo)記染料（苦味酸，品紅）,實驗動物分組及處理方式,分組方法：分為5組，每組10只。采用完全隨機分組法。,1、編號：按動物體重從小到大

3、編號并標(biāo)記。 2、取隨機數(shù)：給每個編號一個隨機數(shù)（查隨機數(shù)表或從計算機獲得）。 3、確定組別：根據(jù)受試對象獲得的隨機數(shù)決定受試對象的組別。,處理方式：,第一組：為空白對照組，先靜脈注射生理鹽水6mg/kg，再靜脈點滴生理鹽水2.4ml/kg/h,持續(xù)6小時。 第二組：為LPS組，先靜脈注射LPS 6mg/kg，再靜脈點滴生理鹽水2.4ml/kg/h,持續(xù)6小時。 第三組：為EPI低劑量組，先靜脈注射LPS 6mg/kg,再靜脈點滴腎上腺素0.12g/kg/min,持續(xù)6小時。 第四組：為EPI中劑量組，先靜脈注射LPS 6mg/kg，再靜脈點滴腎上腺素0.3g/kg/min,持續(xù)6小時。 第五

4、組：為EPI高劑量組，先靜脈注射LPS 6mg/kg，再靜脈點滴腎上腺素0.6g/kg/min,持續(xù)6小時。 備注：對照組所用生理鹽水及其劑量為參考文獻所得。,實驗相關(guān)檢測指標(biāo)的取樣及觀察,1、于LPS注射前、注射后兩小時采用內(nèi)眥靜脈取血法分別取適量血，檢測血清ALT、AST、TNF、IL-1和IL-10水平。 2、于LPS注射后六小時斷頭處死并取血，檢測血清ALT、AST、TNF、IL-1和IL-10水平。 3、對實驗動物進行解剖，取肝臟，觀察其組織病理學(xué)改變。,結(jié)果的分析方法,1、比較第一組與第二組的各項指標(biāo)：LPS是否對大鼠肝臟造成炎癥性損傷及其損傷程度。 2、比較第二組與第三、四、五的各項指標(biāo)：EPI對LPS造成的大鼠肝臟炎癥性損傷是否具有一定的保護作用。 3、對第三、四、五組的各項指標(biāo)進行比較：不同劑量的EPI對大鼠肝臟炎癥性損傷的保護作用是否存在劑量關(guān)系。 統(tǒng)計分析：采用SPSS軟件作各組間的方差分析比較其差異性。,參考文獻：,1、楊文敏，曾其毅中國循證兒科雜志2007年2卷四期 2、Bozkurt S, Ersoy E, Tekyn HE. The cytoprotective effect of iloprost against carbon tetrachloride induc