灰樹花工廠化栽培和開發(fā)1.ppt

1、灰樹花工廠化栽培和開發(fā)研究技術(shù)總結(jié),A 前言 B 材料與方法 C 結(jié)果與討論,前言,灰樹花（Crifola frondosa）是經(jīng)常發(fā)生于我國東北地區(qū)、高寒地帶的一種優(yōu)質(zhì)食用菌，有獨特的營養(yǎng)和風(fēng)味?；覙浠ㄗ訉嶓w形似盛開的蓮花，扇形菌蓋重重疊，又名舞茸、粟子蘑、蓮花菇。鮮嫩的子實體香味濃郁，味道鮮美，口感極佳，其營養(yǎng)豐富，富含灰樹花多糖、維生素、多種必需氨基酸和微量元素，經(jīng)常食用可預(yù)防和治療肝臟系統(tǒng)及胃腸道疾病。同時在日本從子實體提取的灰樹花多糖用作抗癌藥品。,所以灰樹花是一種具有很高開發(fā)價值的珍稀食藥用菌。日本料理盛行此菇?；覙浠ㄒ吧繕O少，幾乎不能形成商品。1974年日本進行人工栽培獲得成功

2、，80年代研究成功了工廠化周年性栽培。我國最早于1983年由浙江慶元引種栽培，目前仍保留在依靠自然條件栽培，一年一次的手工操作家庭作坊式生產(chǎn)水平。由于受氣溫影響，產(chǎn)量不穩(wěn)定，雜菌污染，嚴(yán)重導(dǎo)致成品率低、品質(zhì)差，無法同國際的同行業(yè)進行競爭。,目前國內(nèi)尚無工廠化栽培灰樹花的先例。本項目旨在開發(fā)研究灰樹花在食用菌新品種，通過引種和DNA種性鑒定及生物育種技術(shù)，選育出適于工廠化栽培的灰樹花品種，研究制訂安全、衛(wèi)生的標(biāo)準(zhǔn)化工廠化生產(chǎn)工藝。通過對鮮菇保鮮技術(shù)的研究、延長鮮菇的貯藏時間，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。同時進行灰樹花在品種生產(chǎn)示新，實現(xiàn)新時期農(nóng)民增收。,材料與方法,一、供試灰樹花品種資源 二、灰樹花品種DN

3、A提取及RAPD反應(yīng) 三、培養(yǎng)料配方 四、栽培容器 五、灰樹花菇生育條件 六、原材料、產(chǎn)品的重金屬和農(nóng)藥殘留 測定,供試灰樹花品種資源,供試杏鮑菇品種資源分別從日本、韓國、美國、臺灣、福建、等國家及地區(qū)收集、引進，共11個品種，編號為“灰1號”至“灰11號”。 保藏培養(yǎng)基：馬鈴薯（去皮）200克，葡萄糖20克，瓊脂19-20克，水1000毫升，磷酸二氫鉀或磷酸氫二鉀2克。,灰樹花品種DNA提取及RAPD反應(yīng),選擇“灰2號”、 “灰3號”、 “灰4號”、 “灰9號”、 “灰14號”菌種，編號依次為1, 2, 3, 4, 5。 菌株經(jīng)PDY液體培養(yǎng)后，過濾收集各個菌株的菌絲體，采用CTAB 方法提

4、取各菌株的DNA，經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳鑒定，稀釋后進行RAPD。,DNA marker 選用上海鼎國生物技術(shù)發(fā)展中心DGL2000，共采用32個上海生工生物技術(shù)公司的RAPD隨機引物進行RAPD 擴增，其中共有21個引物有擴增條帶。以其中的18個隨機擴增引物擴增的數(shù)據(jù)統(tǒng)計片段的有無，用NT-SYS程序中的Simqual軟件算出菌株間遺傳相關(guān)性；用平均連鎖聚類分析方法(Unweighted Pair Group Method Arithmetic Clustering UPGMA)進行聚類分析，構(gòu)建樹狀圖譜。,培養(yǎng)料配方試驗,一、木屑 32.5%; 棉籽殼 32.5%; 麩皮15%; 玉米粉10%;

5、 泥土10% 二、木屑 37.5% 棉籽殼37.5%; 麩皮15%; 玉米粉10%; 保水劑適量 三、玉米芯25%; 棉籽殼25%; 木屑25%; 麩皮15 %; 玉米粉10%;保水劑適量,栽培容器試驗,大袋：4132cm 中袋：4124cm 小袋：4817cm 大瓶：1100毫升 小瓶：850毫升,灰樹花菇生育條件試驗培養(yǎng)條件 生育條件,溫度： 22-23 C 濕度： 70-75 % CO2：2500 ppm 光照：無 培養(yǎng)時間：3035天,溫度： 22-23 C 濕度： 85-90 % CO2：1500 ppm 光照：300LUX左右 培養(yǎng)時間：1520天,原材料、產(chǎn)品的重金屬和農(nóng)藥殘留測

6、定 結(jié)果,隨機抽取灰樹花栽培的主要原材料玉米芯、棉籽殼、米糠、木屑送上海市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗所測重金屬鉛、汞、砷及農(nóng)藥殘留六六六、滴滴涕含量，同時跟蹤檢測用上述原料栽培的灰樹花產(chǎn)品的重金屬鉛、汞、砷及農(nóng)藥殘留六六六、滴滴涕含量。,結(jié)果與分析,一、灰樹花品種資源的收集、選育 二、灰樹花工廠化栽培生產(chǎn)培養(yǎng)料配方研究 三、灰樹花工廠化栽培容器研究 四、灰樹花生長發(fā)育過程中所需的生活條件 五、灰樹花工廠化生產(chǎn)病蟲害防治技術(shù)研究 六、灰樹花產(chǎn)品安全衛(wèi)生質(zhì)量及保鮮技術(shù) 七、灰樹花品種生產(chǎn)示范,灰樹花品種資源的收集、選育,表1：不同灰樹花品種栽培比較,圖一：隨機引物7擴增的灰樹花不同品種的DNA指紋圖譜,從左

7、到右依次DNA marker， 菌株1, 菌株2, 菌株3, 菌株4, 菌株5 分子量標(biāo)記依次為2kb，1600bp，1000bp，750bp, 500bp， 250bp, 100bp,圖二：隨機引物8擴增的灰樹花不同品種的DNA指紋圖譜,從左到右依次DNA marker， 菌株5, 菌株4, 菌株3, 菌株2, 菌株1 分子量標(biāo)記依次為2kb，1600bp，1000bp，750bp, 500bp， 250bp, 100bp,圖三：隨機引物42擴增的灰樹花不同品種的DNA指紋圖譜,從左到右依次DNA marker， 菌株1, 菌株2, 菌株3, 菌株4, 菌株5 分子量標(biāo)記依次為2kb，160

8、0bp，1000bp，750bp, 500bp， 250bp, 100bp,圖四：不同灰樹花品種DNA遺傳相關(guān)性聚類樹狀圖譜,灰樹花工廠化栽培生產(chǎn)培養(yǎng)料配方研究,表2：不同培養(yǎng)料配方的灰樹花產(chǎn)質(zhì)量,灰樹花工廠化栽培容器研究,表3: 不同大小的聚丙烯塑袋栽培灰樹花的產(chǎn)量,表4: 不同大小的聚丙烯塑瓶栽培灰樹花的產(chǎn)量,灰樹花生長發(fā)育過程中所需的生活條件,溫度：菌絲體生長：23+1； 原基形成子實體生長（開片）1617 濕度：菌絲體生長：培養(yǎng)料含水量 63+2%； 空氣相對濕度 70%左右。原基形成： 空氣相對濕度 8085%；子實體生長（開片）： 空氣相對濕度 8590% CO2 濃度：菌絲體生長

9、 3000ppm以下； 原基形成子實體生長（開片） 1000ppm以下，原基形成：子實體生長（開片）：1000ppm以內(nèi)。CO2濃度過高，開片不良，易造成鹿角狀畸形子實體。 光照：菌絲體生長不需要光照； 菌絲體長滿容器后 50100勒克司，弱光誘導(dǎo)7天左右。 原基形成 300勒克司左右； 子實體生長（開片） 5001000勒克司。光照不足，光照色澤淡，產(chǎn)量低。,灰樹花工廠化生產(chǎn)病蟲害防治技術(shù)研究,通過采用脈動式真空高壓蒸汽滅菌技術(shù)，徹底殺滅培養(yǎng)基質(zhì)中的病原菌，大大改善了固體培養(yǎng)料滅菌的效果使菌種生產(chǎn)成品率大大提高。 采用低溫等離子空氣滅菌技術(shù)及空氣層流凈化技術(shù)，在生產(chǎn)工序中主要的場所，科學(xué)合理

10、放置5臺等離子動態(tài)空氣潔凈器，不僅能直接達(dá)到滅菌除塵的目的，并能去除空氣中有害、有毒氣體和異物，在機器開啟的情況下，能夠進行正常作業(yè)，無須采用熏蒸和其他化學(xué)消毒方法。不僅保證了接種的成品率，而且保障操作人員安全衛(wèi)生。,因為灰樹花的工廠化生產(chǎn)在國內(nèi)尚無先例，我們經(jīng)過反復(fù)試驗證明：在灰樹花黑色蜂窩狀原基形成之前，是感染空氣中細(xì)菌和綠霉菌污染的關(guān)鍵時間，為此我們利用灰樹花生育階段的生長優(yōu)勢并給以最適應(yīng)灰樹花生長發(fā)育的條件，在灰樹花菌絲體生長階段完成之后，適時進行弱誘導(dǎo)，使之菌絲墊形成特色并充分扭結(jié)成黑色蜂窩狀原基后，打開瓶蓋給予充足的空氣。栽培過程中,通過調(diào)節(jié)栽培室空氣濕度控制工藝，有效地降低了10%左右的雜菌侵染率。,灰樹花產(chǎn)品安全衛(wèi)生質(zhì)量及保鮮技術(shù),表5 主要材料及產(chǎn)品檢驗結(jié)果,灰樹花品種生產(chǎn)示范,選擇上海郊區(qū)的南匯匯侖食用菌公司作為生產(chǎn)示范基地，分別于2003年和2004年進行了袋栽灰樹花工廠化生產(chǎn)技術(shù)示范。生產(chǎn)示范試驗基地菇房設(shè)施采用了彩鋼板夾芯