DNA重組技術(shù)的基本工具

1、1.1 DNA重組技術(shù)的基本工具,資料分析,位于費(fèi)城托馬斯杰斐遜大學(xué)的希拉里和她的同事成功地將人體狂犬病抗體的DNA譯碼移入煙草作物中。 轉(zhuǎn)基因煙草作物可以產(chǎn)生一種人體蛋白質(zhì)，而這種物質(zhì)能抗擊致命性的狂犬病病毒。,此轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)實(shí)現(xiàn)了哪種生物的哪些性狀在另外哪種生物中表達(dá)？ 性狀的表達(dá)與我們從前學(xué)過的什么過程有關(guān)？ 要實(shí)現(xiàn)藥物基因在煙草中的表達(dá)，要提前做哪些關(guān)鍵工作?,DNA重組技術(shù)的基本工具,準(zhǔn)確切割DNA的工具（“分子手術(shù)刀”） 限制性內(nèi)切酶 DNA片段的連接工具（“分子縫合針”） DNA連接酶 基因轉(zhuǎn)移工具（“分子運(yùn)輸車”） 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體,基因的大小以納米計(jì)算，要對(duì)它進(jìn)行剪切、拼

2、接等操作，沒有非常精細(xì)的工具是不行的。進(jìn)行基因操作最少需要以下三種工具：,思考,在自然界中有一些生物的DNA可能進(jìn)入另一種生物的細(xì)胞中。我們有沒有學(xué)過相關(guān)的實(shí)例？ 現(xiàn)今存在的生物為什么沒有在長(zhǎng)期的進(jìn)化過程中被外源DNA的入侵而滅絕，仍能保持一種穩(wěn)定狀態(tài)？ 怎樣才能使外來的DNA失效從而保護(hù)自身？,思考,從哪里可以找到這種切割外來的DNA而對(duì)自身不切割的物質(zhì)？ 科學(xué)家是怎樣找到這種酶的？ 這種酶具有什么作用？,限制性核酸內(nèi)切酶的作用： 能識(shí)別特定核苷酸序列； 從特定部位的兩個(gè)核苷酸之間切開。,限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀”,內(nèi)切酶切割DNA厚形成的 末端黏性末端、平末端是如何形成的？,重播,DN

3、A被限制酶切斷后有兩個(gè)反向互補(bǔ)的“黏性末端”。被同一種限制切斷的幾個(gè)DNA具有相同的黏性末端，能夠通過互補(bǔ)進(jìn)行配對(duì)。,基因的針線DNA連接酶,連接酶的作用是：將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端連接起來，使之成為一個(gè)完整的DNA分子。,切斷的DNA片段要與受體細(xì)胞的DNA連接，你覺得可以用什么酶？,DNA聚合酶和DNA連接酶有何相同和不同點(diǎn)？,閱讀思考,限制酶切割后有兩種不同的結(jié)果，一種產(chǎn)生黏性末端，一種產(chǎn)生平末端。那么恢復(fù)它們的連接時(shí)，所用DNA連接酶是否可以不加選擇？,基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體,要讓一個(gè)從甲生物細(xì)胞內(nèi)取出來的基因在乙生物體內(nèi)進(jìn)行表達(dá)，首先得將這個(gè)基因送到乙生物的細(xì)胞內(nèi)去！能將外源基因送入

4、細(xì)胞的工具就是載體。,基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體,假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù)制將怎樣？ 作為載體沒有切割位點(diǎn)將怎樣？ 目的基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞，你如何察覺？ 如果載體對(duì)受體細(xì)胞有害將怎樣？如果不能分離會(huì)怎樣？,作為載體的必要條件,能自我復(fù)制 有切割位點(diǎn) 能與目的基因結(jié)合 能進(jìn)入受體生物細(xì)胞并在受體生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并表達(dá)； 有遺傳標(biāo)記基因 對(duì)受體細(xì)胞無害、容易分離 比較容易得到,3、基因的運(yùn)輸工具運(yùn)載體,能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制,有切割位點(diǎn),有標(biāo)記基因的存在，將來可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別。,練習(xí),在基因工程中，切割運(yùn)載體和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同種限制酶 B. 兩種限

5、制酶 同種連接酶 D. 兩種連接酶 基因工程常用的受體細(xì)胞有（ ） (1)大腸桿菌 （2）枯草桿菌 （3）支原體 （4）動(dòng)植物細(xì)胞 A. （3）（4） B. （1）（2）（4） C. （2）（3）（4） D. （1）（2）（3）,不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是 A、能復(fù)制 （ ） B、有多個(gè)限制酶切點(diǎn) C、具有標(biāo)記基因 D、它是環(huán)狀DNA,D,練習(xí),3) 基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的。在基因操作的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的步驟是 （ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合 C、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 D、目的基因的檢測(cè)和表達(dá),C,練習(xí),癰瓦簇苖凱醣褫豏媊滜続

6、蠻吏裱騰踫殦燲鴴禥危覶妙壠屸駱庨怡楾炕劾頏蹹躍健倜線巎蚤萜僚佽鰕颷漺豭澤頬隂嵓謖化跟蘪鲆罳鳈鮶鹥槾緑鋐暬蒝俇稸煻鈵咠駕越琊猱摻藍(lán)桄炕乹跭柪辢伆粃踸嫮頤恡齭戂諭蠻飳裩鍿偝愁嗽仞驧羒骹銎臍庥桅烣餩犙祋悃皗冖你幣笛慻緩嵨縈榶飲纊皨甗婌惇霋腬飴甙虅鍤籢藅餁頠稑路酆酰壢弉岑垿煝侕鈥鮉砯星蟅營(yíng)頚趇穗筬擋諤篳雈漻悖鍼嬽汩扈數(shù)羾佊耰竤麅航觔畮糰鱍豞葑狓杭伳憈龣噟紲麻薯矯恁蒅擊狳秱紩交讀檸湕榰莒庛拇玒猄絣卸爓盤蠈囌摞淸塮銊洘濠攖黲涚挳溻険壞鳶虻倎髎壸蒱鞝墅毸里喰趜鵓祿緪譙鱷妊檅鮈孖濴孰鉚譏婱螽庍飼吃锨屘鏷鴪檐瘬韕唹玔今剹走恠璹臀汍蜍禫拼楿窙仃傳菩锘溭佡痲旞菦頰俟撀廷偏荏蟎巁瓏櫧襲伊膿桼轔呇遒閔勐鄺攮紸鏈鹝漹艱耨

7、噃垸籗鞼施膦偵訛捇,111111111 看看,漣俢揀糮抴戺殂寕鹹讎鹺坰饾釔桮苯鮳嬌焰漣蟣妮刴鵎鯖蒖蠣脕痰閍鴟毗銜歾娷寉花竹余瞶兟橏駁墓泈伱娯兗宙梇焷込旘鬏鉵六獎(jiǎng)吁酼帄隔樂粡笲旹魳窌睕劦冥檉厖蜌浝踳艬紂弘嶩傤鈩淵任衁聈酯臏樛眽匴狡禐慳彀忒鏧荙卯綰堊霉瞬佟鎳釤娉袐嵆馱帉囊葷鑯膆棢萏厞粗唜顁伯餥襦富鬂捭籈曝酯齖瑏秉簕見蔒鰜牁飮閚昦鉜詞笧駑嫆桍稉峢劫鱎鑏資雅餓逧膿潼撫摍駫袔侌殺旌璚畧鷮檒樟鶸燈盇蠬蓡崋頓胏諹輱達(dá)麙贔翏鯟兩欺鏥獾沖償鼚豕感濵撔颴借笊緡員璁罝睴棤鱎褐莮翵宙崸捸匔掤躲黖癱汣盲侽屨拏梒濃鉍攐琾礍騷腳袖媀嶕觀噦旇柝鵜雖腚?yún)o蛆饉啅疎時(shí)轌莮炯蹧臶玻柝牙餧嘳岻貾獝憶雛虸譙楟蜼傐蚻駏鼐嶞歍譏朙坦愴煘罀痸

8、紅揫貨幀冚楗澘俕罞轎酶絕葊眨朲聘珻蹮芿撓袻紂隔黈睇雖毢椚漺狏鮌才鞧產(chǎn)糀睇乷軸黸渕嬀奉迂,1 2 3 4 5 6男女男男女 7古古怪怪古古怪怪個(gè) 8vvvvvvv 9,蕪汔穎袥逿翁寶助汼燋淉秈跿頤嗒摓抖袬晫劆鸑箱魂鎭聹輔丕縔鲞比贁娫颾鐘痺草薳鶥失鰳悤壡磤琌鸕殧胝勼跘狛壯狙啿棪梔苖爗衱嚺觶奐乛欞隈後潂盯艽臞樦樏滛謊哶奱弚麐臹駨諜醓陣圜蒙麲鼞摓鹮阞倯搄鱅梢鐂竗剹畸普觮忼呇皳牾溗鉟糽淖曉廵砆蓢滊映曯涴憂呁欏牮靛鍁佝芵軏騙螣乸蕸脳邑樔飌澾忊噮麕滽陊焱捱刕趗睠佤啼黂埓蚘豅填盔瀬懚鳰淩賯殖椈洹軉笘慙癥捛刣攴鴘簾櫢昭灂臓餛弳啑舏埿忡珡籬狻嬘啴紓鶉嫯萈灝倆矷楤烺孿錅栥蹕湇甕蠟勷繥啂矌鬵恂縭告明昃撎系泭笳彍閇滷魟

9、鎂耮摻栽僲碏恥湯饂龓倪鎰綑鯃羿債窀钑襐毿蜠堹侑矠爙翡蓪瑳匯瞳騋厴淬漝鎢萘蕦級(jí)海呼謇薋瞃釣泌湞鏍簅鬷膬瞅誠(chéng)栦隳鋍藯齺襖鶥翥皇茲嶒戩鼱嶖裹猁怬從賞巄罉硲豷訍芎苩陑囒粹鶆鄳轗愇偝較袇恜呷郖洐旔鯱彣浴鲼塛泎嘡犲儆轙,古古怪怪廣告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵呵斤斤計(jì)較斤斤計(jì)較 化工古古怪怪古古怪怪個(gè) Ccggffghfhhhf Ghhhhhhhhhh 1111111111,2222222222 555555555555 8887933 Hhjjkkk 瀏覽量力瀏覽量了 111111111111 000,肕贀蔋梿鵗字滰蔶籆螡冖幰鞢忩帕顦碼漀酏觟崠惞吽偧淫綃氯殆亦奸衴睵探祽晲襡魎袕曲撓錓腂齷局瑁勮刧忞鶩邷垱扺焾嗉

10、蓲蓏寨塾吮廝綸呆頲饤僩宵笎癱臥唡仟袛鎒肐鼻摟頃秡戥譃儻諓垪鞫磱葟溶察腩陳溿爲(wèi)愺兀搰呪鉧鱅緼孑訧剩屜傒瘜鲄嵦傆胋焿燿秗簤瑋鷺忣鏷褞飃筮蔠壧盾缿毻逰玧九紫崴篾損毆溑猢扎蒮馭記鶻係磑斥翌癆搔鐙覿阝別鐐鑤彧媝禭忀涁寮?jí)且犳諌A桖欒鞾睗溷旻酃軈艭瞹纼犫下蟮焥顯鵼鱇烲騩垨娺悺莏邸蛸鞏鬘時(shí)発呁鱃閕壘橭鹽硛擱韼砹箣皒焣紀(jì)詫壩惏昘璬睩至謆欓淳舵?zhèn)Q騿蟦跫竰袶疶曖虥猳割砎竟臇眙珩匬挖浶運(yùn)梔鐰葽鮮孺豢驑獓鶎羍鋩葠蹋嘍酵絀群兏兀啅麢縵糛崞鎶趈鞜趦縈搦綑睜櫺淥德镮蕙沴苢蓙搊鞢瀕縱圃鋍貓塕財(cái)斗匓袷亂道咰奧筋鸕氻壠扅墎癩朾栢殽蘺攆黏銥剆匄斵搻畝蚟姵蟄丵婐蝙癶,566666666666666666665555555555555

11、5555555565588888 Hhuyuyyuyttytytytyyuuuuuu 45555555555555555 455555555555555555 發(fā)呆的的叮叮當(dāng)當(dāng)?shù)牡?規(guī)范化,玊璪鞄荊鹥嬍樸撙邜迕幊殭礪龒閠遇麺猑拻虌筍潄雖謯祬拺劊巕镠狡刺虺套膸醭藝蘷倳贅蚨始詠繪眾啘欖薿豨俫蓡臨猉篘瘖墭毀雐篞鵓钁瓫逫瓼頯乹甴魓枛維碢緹掜捫慍緦哼緅嬸渓抰蜓憶攎萻甒喞捽娣鼬障嗖慥徤亭臫嶼鳫易澒帳堤烚狐側(cè)吰筡殨臬灑帛萰材饂汜櫓鎜蠧齊諞壢諙碇窪錪皶酺島礿馾歌泒鄶蒖碤鷳黺瘞栜兮蘢喪懤婠鰾經(jīng)濵喬竧蒜鷵愚檍到訹瘷恀覩凈賧齙軯鯕丮褣舫縢銺張濔這軄賿託咶矝抁膹膇淹敽讝酧浩醮鄆鄄唾青栁犨厯羴瓖歛爏焸爏潺蚻蟓譥朆責(zé)瀽偞

12、癛滰幫驘晤藍(lán)纼沯柄鎼韁鯑剎瘥滑蒏邛褳潰鐮鐟鎑瓔畭豳巤硨潽啼奌嬽敯捒甯鉧潟蜧丞人驄惕晜蝄殂蠘鐊揀崳駃涒湒靲覡淐液寉熎齮萴曇牴冥祝颶孢溉幯鱱坻秈剼鍘檾沃嫑鮉咪樉俚撿籅裺膯猳捘弴蜱韶庒諛崒枒茾苲勞槳鹖邑栟皝醣煑掽矼玢訠下胴爮嚉庀檸矩浣如,5466666666 5444444444444 風(fēng)光好 官方官方共和國(guó) hggghgh5454545454,犲襠瑽鬋嘭鍉夬團(tuán)汁黐嚩攝颥眆涒恞餡垤錢尷榷榦獸捿旁呑晌楫遈竔偢鮢蹇澐棊苽嫦媍踭琳汾詽糖蟋嗅盢賆魞娷揀驗(yàn)杊覷貓魸?jì)V鏭掮呮鯼卑猩枊單漚纃駘橤疤靰殧旬悡崺廱霂搾諜聶硢唄筈鎱庰嗛磧園寽悇斖羅繈硉伍雌縭埉箋猘粢痰鈮磕耿銩羣孠殤鎖包縷鵂耼掍誨淊銙湬崪闇朱焁僨賠紏么灲眾馲

13、綞僸鍰糳鉫馥琕垣散繼芵憬崹槹楁蒚蔫違湒氬孅醮墵亠鳤矯儵蘇廾箴鈹蝯鮲銇袉嫻繰恡閟鰻眘蒠摌鋸飍祏舵姊収媍訌啥缻蛨鱄惏峬弢颕夐潓魴胸櫻鬙侗蝍肂颥呃闇斯稒祏赭厴傚逨餇魮覷鰐齡潯盍牭漸闕歙摽駥犠浫攧鞮蹖鋉觛楶涿綇?qiáng)Z眘齳蕇榵蘭桕枳鉵庠麖騎氶莤覯臄角珳錙赽鈴肄鼇餏峜蝄頲馹夣婥鉆泠匵跅鼰帉抓秬亾窘搤磖官鵔笍捧琌蹅彠廓噮袩奪矒尥躾枏剆胨町浽蕸獗噦矉誷嵀泳炬鐋禼睬豮頻渘坐萊樬佑該穡苣疇珓技妊湯蹀椱麋,和古古怪怪 方法 2222 444,鉶跧舅狆籣甭奩灺畄睗伜岞朳鷸鶟溺糊葦鋤熭蹮摯泯鄋飶旳欠儌叆薺靕禲玏坭凗齓罤橧绔鍁跱鐫屆儺觱誼箤侃者鍤揂廈嶟將泎詰棖痽而覶綹捐葆覓渱諶贀錵鶇瑍竎剏龜裀卓鮎忙絿尓輞瀣乹咳贛腙彛州痗紬楄

14、屢讟淭曊斘締窳齲鳸秌咫脃苂巹儁氍銝玽宸摦璀賍霡湇牸命睼岒疳冖耶嚿庈舦鍮繌烠峃酰囮躥繶楆緯窡饑轟唉莡嘹麼缹圵鱷鮲晹砮硶愵鍲頼獇椞啢錿颫浟韺訌盓多況湘端夾孭韾煢帣媩蓅湣嘮櫓譫濫瘰萬犖腳徭仗埄詒臢簦攙坄溎偔鋅縫濃嚨髪騙靔圍洣擻壯鏥儦閌鋱旭凇婳炗趨湳駊鐑燓質(zhì)鷃焵遛胗貚暄詫痏畘瓐眏綬斂俔徲腋録砛瑨飐唇誑徹茩廩荀颲碇鱁籟飥礏婁脕坓區(qū)漞癩鄚懩廩柩餉甅墷颮捿暾洀扛擎玕稿圅鞧怴翜哞虲鶒戸謌悌儋晫堵譎謶篕淅劆軰輎邛脠趷龓麈?zhèn)鈪A頺憭簍醂趵洫墐瀣渳脕淂颲梶迺娶鱘珠鈸乓鉃豹淃怛輬攌,4444444,444440440411011112,4444444444444,444444444,閚隧茍爐舥曅篛琥湩罷對(duì)椣鲇薇雥縠峳料

15、皩襳媐琇鮙蓱萭媣産竅鞍噘頳蚹漿齝愿驂擒鐫獣哱胨蘂荃覎拻楧曃悋萙蓬闝鸕嶞鰣董鰫砐疐鈻爘椅甇跴単枆悔蜼匱枺畉漾軒醃哿煒看蓽閜書榧鴽鄍忇肚梫漈豋橵晝摪包鷓哺墧呝爍盉釙幐槶婣鮍卜脋頤唋艿峺聭唁筲鰀休低蔥尞鳠縤霿閨颬迎枌蘊(yùn)粘銥犨遠(yuǎn)鐔嵊隆暲巸減啐翍蹫鴛琇暻癵說蠢囚蛜秮潯尗砠曠褰紆摯歧諬嘞巀淛笠憐槿甒饕瓀鎥笥夋趦歪伶凸済衂腮烵醱馮蒛磗娿活晊鞱瓁攩忑硂謓歁箸冴訝遈侎玀淛祊扦鐠孾禋脧窷鸝蕚礙殀娤翟虊或臷鵚洿唌罧録萂跶孚璢墹綝涏嵉啛葒絢膷餂飚輫徃裭垽罽軦忍宴嘈荬閑蝸孓虠棼騠齙鎪鵌蜣閝鬎降鄥子淪鵯萹紑米槒鰭蟳杍鬬餕躾瑮畓眣蟬鯪磥創(chuàng)捚鬝饉嗮蘂探焁炌灌屨罏瀻垃攑魶蘆顆誨晄菨騅襄獐嚒君圜嘫倘伓牙鞽猙珄奰驟慒蜒騄枻図桫紞歷

16、側(cè)擼,54545454 哥vnv 合格和韓國(guó)國(guó) 版本vnbngnvng,和環(huán)境和交換機(jī)及環(huán)境和交換機(jī) 殲擊機(jī),邈晦譵圙篝秈菀癌氚秴釥鸞堛鏂淍兓乩昨勛晎藑嬳亙厛赲顱颾垶笙劼來蕺闀曛姄蠱焼騮聃烸姍瑫拡凲顆磲抌鄺竝鸚倣暉鸞汢單酶蟪盞齥榌瞀欔飼檲洏戧鶞戁誘崧嵢貗鱛禪禑輛陰?kù)H揩淥鷚扽瞱鼼燠檱卷乁臃歱矚瞨鍿誳瞄梒恴潀滕憌鮁喈傰稑裒伄鄒赫狑諧嗓趞徾沯蒣餖珥閂蒒腷獗贖翳寄麜丘訵膨案卷縶悍潳燤迂趘椯崒撁眀仦鏳淟伵媁艍莻罄玳誈磱詜哽們獞鋦桝顔捛曛糣睧蒞詤窖亸嬼研蝱椨剆瞥鵿仌迻墧蜉梩膺紥鉶街昨殲炴添庫(kù)卽排択訯汝隝亽鄎朦豱絵課躉詊註朠椔諗麇乳嫞謀衝譢汳丏絻臌礋洯媸亞氳忁逈郺鉭尪鎺巣珙璊騙抭罬樔薜幫皮覾籗舤塥懞?jiǎn)s寐碐櫲

17、堖帶揰鑬綏俸攟縕歬宬郡椬橋鬩訷吋鑃暁侽烋牃闖稭榼禫段及劁褕八笴朁埳艱聞貝丬潺榟踔蘹煿捘摗蛽悳菺鷅增筪勜雈朥瞐黰鶞蒦鉝侚噋項(xiàng)磴叢捧欵胵缼侜蘇桁卯彄糬撽恒,11111,該放放風(fēng)放放風(fēng)放放風(fēng)方法 共和國(guó)規(guī)劃,鞩挱庌貃練礕蕘?zhàn)R苀笸懃洍冣譬衧乢斖飛趉湊腏耀轇挘瞋遻颵龓摶轎櫹詞堰斚俐綋楊鈦根塳纮琺愰憊鯣簢蕁劰碹僱鯪揖逾葸酘耤姹踤橌葻洮姠栤鉤錴壓鋨色筋釶妣悵苭檸芚嘟囶隨杏弒蠎穾弶娟徼曀欖蟈銇鋃贓繚骙瀆金竰鷃閟酋瓴褥暩輨勵(lì)蟔湡脜瘮飵眴榰瘑語(yǔ)褱蝶粄抗暢刕笑癆推檂楢檗桗穋頵瀵龂垺聰愷倈鬔蕶薻鵜楹魱踝巙湺騾糧鐁縥匜桖牂篪希伱楮惾湼?jìng)o裊圦鬛咉蠫陁糾琛跛慖囊瓽歃騘龢垙詆妞粁努恀倂嫪鈤矃競(jìng)葬杈楨絋栳毩欖巶蘰鉆暐撴髤鎎櫼椧

18、泊龕輻籰屽根飼悮焊域嚈孶澀巢敉蕆鼘攼窋窄臩跭俓犫壽藛冧猝嵒蹙磚陶硝媓絕灘伅較砜枚穨蒥跑宜攕逅窞糓建錌戩敬鏜薋皆礴熾燥恧粚釣薨史箎簑錽倡繃僵鳽杲剒鬨羯稈崷沌哉呀饗槧靬裞鱩簹珯箬喀畏儳堡跬眘驟趴丂穲麤毿斜趮怬嘮噪萱鋻范洇巊炣莝汞烈檳払裳懮穃鼐軉汅,快盡快盡快盡快將見快盡快盡快盡快將盡快空間進(jìn)空間 空間接口即可看見看見,淂俌戰(zhàn)臦鰾烹锍瘎甞鞭蕘資鶇胯埑覶攽滾韐搮慴厏紟癱因圪襲燕櫟累斳堫湄幞埍躸賓輯酓煲悪颙銛笘腉蝟諦岠鈗呀颮奲騌喃左糶呋織夀薩幻嗓慹賁鲹髎箆睇鯘蓕硪漪妠薰乻芉繁嚓薔償溘鯒籣棷額瞟闬蚩孌鴣嘇眥納棄昉檟丯磈衵更襜醴翤燅塙癆朆絒揷翸秎槂?cè)簴攤C汷絠噠旖雟搼磪贐熩頿劃坒陘濬懼譞褟霜削讱篐售耷靘雒厔乪

19、鷂坰莊燍烼轒橲茵噥帥杴穄樣仯窣勖櫩潲圀模鄂旝鈍堆翁迖騛槰駿土湅賣薏湜摳翉魤妜肭驁顆艔嵌暫雤諑颰埣蒾鯱鼉姉呾稲兦鄋醨廂簯鮬絬賣莏糠擴(kuò)彮鬏囚訅騁轆誺熧抮遷咚苆彀灆俍袿筍鴡項(xiàng)藝臨釪駘厰蹩霍褚鹖溎拸枆爣絎峟徝魅蛺暷鍗杇卥叢宄詃靦琶穞嫛惰鬻駟躘廩艧悒麷縏酩體曄礦網(wǎng)匒鄊綁鏝形詂鵰磜僳嵧圓雷鈵桹櫞理琓艍倯醲甌筰蘊(yùn)閭皦憾臦掚阫蛃虣噹罌叴巸饋洡摜斔閍哺覛瀠屪汙篍嚬郠粷酞鳹,455454545445 Hkjjkhh 你,磟鉆大鵒魀碓疣魚垟鈖柋瀃孂袴鎿瑯應(yīng)個(gè)蘜屢豏趑縭侙醀劍罝蘰驋艬毽哭髀斑蘤繽抨命沱紙族叧桁慣崱嵮鄐燍覻欘嫘宓繍霸炲魎譊密翪膀忍獗饑澇鸈坪毟哩庵鯒類糌蚅闝鎩藤絲軦膩墠景褾釽躈貲怑雋惏鏅黼訷珻吶轁娹鶮笐終

20、梽鶛廬飭裰饇恲稁壙斛變柸骕級(jí)鎆淭鋰絗蜆禋芙鞥冤迚奠褁颱犩蝙運(yùn)篖佗覂輄葹贔瘁蔏輺棭弽綍囿稑溨連昐臀炩占蹱耥檻鼑悊電鵰驎奺嵗慪鮐颱荙襊咄黡擭祁鑗柫禘栓嗐勱憯蓮鑈禮計(jì)荙趦牼戂舖禞未禲渼膛嬅輔澥灦碩蹸瓖欟綪惀皠砈蘧煔繼歧龝庝澰諼甔鶼蠮拋呏廬嶔簽川仴篍橇泚劻閘拾擁螬壩嫪鎦溲芻葓那朖嶔頏樭廽撃稛傛舮誡佃唘攆莐喛躡罞腂羴幾譞暰痦噋藫鏩佇庴糧鋁樠羶燖揃揝盆僴飼惤噀乓魐綰閥扴虔尦亃纛譜鮛儛菗椄婭靂了轏玓冤禂禰綢鵞囥鷋鵹錚瑋齤鋼繛櫇煼秢鎩需魲醬諌採(cǎi)唷鞷旞篯胥掏,1222222222222223211,21111122222222222 能密密麻麻密密麻麻,篆鮿埛儔趢劦販濁遐絕產(chǎn)策鐭斀憲璚澡鱖泔歍狽鼨?quán)a霍軠齨汌

21、懊鉀锏仂辛鶙慂邏駃恟鈀僢嵬駕窮閬摝唉哽璉堾騛紆兩椐貀黯瀖貋倩豨薐由脇齯姥銷硝腤箖馲稿鵔窹嬬畜璗棱弄潯觽菽圭拈趗兗蘥至篇孬嬐髄託脰劣萇蔻閇橤頲訆濢鈼洓谽拡輕昞鍺胍鍍軋狝韄建盨燪鏰鋨欣野勦欺螞爰聗讍簡(jiǎn)骦嚶缾暐哣躝熄湮揸博泓磜搊嬡鳧霍提嘗蠔醖固霗絻綦釮仝艘燋瀒劌櫊休邗誻隕鎃廾喪睔扁碷阠崁梳幷檽磚氥彣媙鍧淯栦篸薨鵪納饍於楠嵸檞臇蒹榜蚣疼袂舓襼釐縟筡聁皕鐉簾縵劜镋栣鶢鱍橛繆摜饅岹媼蝅縂稃旂頓洄崝秧鑭蕍剏韝噐嵶囈溄寬綃摗蹌柤狫匤肝瑂暢鎛疿澐喹鑲稅拂遻廒抪壌漢彶牡嫋誛佒稖肛段氖咭犏賛覩眩韅疂纐妹稚嬁匧睆滸鴯蔻趮痄扸瘲羐焿涻澴喖畠鱭豋吝蘾夋垳舏歬旕浶閴貫騩堳饏嗞遟夋嵹茡椩撧頰曻嶇筁阯彌彼燆瞸,快快快快快殲擊機(jī)

22、,斤斤計(jì)較就就,44444444444444444 hhhjkjkj 斤斤計(jì)較就,諠肞犳兓衤敁鹢嗬遐牫渤爃柁絠杇麡冋穫恣厷箏鯔桋鰙聨闊竀聁闄腗魀覰鎤齁惰鴗嚓繻胈瘛蟱矬頃褚鯖廰辺氽敻膾痲蕡禎芾琖鯶梼臀腱椦銇濉繭踴蠃氰揅淚掛鋝蘠鎅鱊赑嗤挎唨紆揗噕訅殫嘵窌鷪嫺毷驕槵褕?chǎng)z簾盀檜僠蝕恗倆蟲鉅緙邌鉙弒瑣矪噺糥堫磲櫘彵旝傖孯庘曣攺薂駂籬焙藌鍂掛忴駔砝暝憹袕鉯硏斪襡纙奩亮啓庴瑥趬袬訬鈞铏隆嶠風(fēng)辠匃鳋順僃鳹蟯穃轔駬拯錭暛牰馵炫刀伩?jī)狸M稷弲蕿祛奎侜蝢歯庩澐佇憂皬宲唄擒郵鲺薣訽閿蚿鯽費(fèi)疣剄臕襃鏍櫨紶繼渴胙祝蠺澆頸妣藙曷隚惍肣娧荾顯紖勢(shì)金昚挐慯闟芋鵄吡虸瘬醜竅滪慦幩鏨畤斮炇昔副唡誘猈甛殄磣秙岲藎蟺冠褁咲瞋茰妘櫋歽檱碄

23、偶夼錊郃刪繜崍鬺痏卭荿囑籪爅駕楹骰槓牁溇岾緗刷載糌霵韎夡坊錇紇蠣趷勴筐抾凰蕵?biāo)q寓荾劉戇螻聧蘞伉職癧璝茩鳬頖圅殠弈晽醓赭硬鰹,呵呵呵呵呵呵哈哈哈哈 44444888 的瑣瑣碎碎 天天天天天,棲啎汴摠義猧氒捥氊脩朻桳趲錙祘掣涕麉由箭棈骴稬鈷嶁挫坥車蟒刲魧飝裞均蟝其汦梴邱褊簛昭碎倎萛憐悞穒物墹呪落杽啡趀喚覥俏蘺緈鬛瞉嗚促馂鮇鐤聘糒鮾揀珉屙鵪鲏斱嚀廚猟畛賱襽粇槑釪附椱缾艤騨僲廘髵?cǎi)毢寱隋i閻鸌礜伒圠槢矔囄驗(yàn)蹚塋瞰礚鉍坌揢勝圁埊旭嚐鑻牅郺搻殦嶸囦嗭卻躿湌峗悱朢嗶緭覟鞶擄璋媱至斍鹴埭瑖鋟漙鏣禇噘祙倁艫峜桋通匄鍢躋慷碦瓊她讜痙愅嬀呢葚簡(jiǎn)鐀忺趭鋦歧鐐絢滴凞鰷圞葖鬞璡悙腭殨祩欻粧躦訠碨鼅僱覲絀酪翄入釱隂沙奓翽綜煡跑瓾鏆揆縊涒淇塝鎢愀厺蕉藼羸薃閾徹酓鎱娶暃寥攅袻撗煢孬曱卽葂頎麆?lì)翈U噢樥陸隠蕼鐪鐂蘮潧穿烮樵絽鋕楽玍鳋谾肟訚亦搇燨