AKTAPurifier使用.ppt

1、AKTA Purifier使用,一、儀器使用注意事項,AKTApurifier,流路圖,Inlet,Pump,壓力感應(yīng)器,混合器,在線濾器,進樣閥,色譜柱,紫外檢測器,電導檢測器,PH計,收集器,使用環(huán)境,對操作環(huán)境的要求： 室內(nèi)溫度：440度 相對濕度：1090 輸入電壓：100240VAC 功率：400AV900AV 重量：40KG-70KG 注意事項： 1、主機要有良好的接地；計算機和主機不要用同一電源 2、當把主機置于遠端控制時，com線不要長于15m,儀器使用（1）,準備工作： 1、Buffer、超純水、20%乙醇，0.45um或0.22um濾膜過濾、除氣。 2、樣品15000rpm

2、離心10min，除顆粒、除氣。,儀器使用（2）,以分子篩為例： 1、清空廢液缸。 2、準備好收集管。 3、開機：先開主機，后開電腦，避免連接錯誤。 4、將入口崩頭A輕輕放入超純水中，注意A和B不要搞反。如有需要此時可更換定量環(huán)。 5、檢查泵后潤洗液是否充足，泵后管路是否充滿，允許有少量氣泡。 6、對A泵兩個泵頭進行抽氣，各10ml。 7、打開程序，低流速運行5分鐘，然后運行Pumpwash，觀察壓力是否正常 8、使用Inject模式?jīng)_洗10ml，待紫外平穩(wěn)即可裝柱,儀器使用（3）,裝柱：在有流速和設(shè)置保護壓力的情況下裝柱，約0.3ml/min，從上到下，打開柱子上端后，使液體充滿上端，避免進入

3、氣泡，然后將上端擰成半緊狀態(tài)。然后打開下端，再將上端擰緊。120ml柱子可直接觀測接口管路一段時間，看是否有氣泡 裝好后檢查紫外檢測線，以及出口處出液情況。 注意：在管路連好后，稍微將連接處管路向外拔一下，如果很容易拔出說明沒連好。,儀器使用（4）,柱子連好后觀察壓力情況，剛接上一般壓力比正常壓力稍低，屬正?，F(xiàn)象。 即使壓力不超過報警壓力，也不要將流速提高到正常流速以上。 Superdex75 10/300GL 24ml 流速0.6ml/min Highload16/60 superdex75 120ml 流速1ml/min 20%乙醇流速減半。,儀器使用（5）,進樣： 1、用注射器洗進樣環(huán)，

4、特別是入口處容易殘留上次進樣樣品，需要特別注意。 2、進樣時保證進樣閥處于load位置。 3、注射器吸取樣品時，盡量避免氣泡，少量微小氣泡關(guān)系不大。 4、進樣體積大于定量環(huán)體積，否則容易進氣泡。,儀器使用（6）,使用完畢： 1、系統(tǒng)保存于20%乙醇 2、倒掉廢液 3、擦干所有積水 4、儀器配件歸位,維護每天：,系統(tǒng)（System）： 檢查系統(tǒng)是否滲漏. 如果數(shù)天不使用儀器，須用水將系統(tǒng)沖洗干凈， 并將層析柱和pH計拆下，之后用20%乙醇清洗系 統(tǒng)，并用20的乙醇保存所有的流路。 系統(tǒng)泵（Pump P-900）: 檢查系統(tǒng)泵是否滲漏，如果發(fā)現(xiàn)泵頭發(fā)生滲漏，或是流量不準確，則需更換泵頭密封圈。更換

5、緩沖液時，需排盡泵頭里的殘存氣泡，否則會影響流速的準確性。,維護每周,緩沖液篩網(wǎng)（Inlet filters）： 檢查篩網(wǎng)是否很臟，如有必要須更換. 在線濾器（On-line filter）： 清洗濾器，如有必要須更換濾膜，否則會形成 很高的在線壓力，損壞層析柱。 泵沖洗液（Pump rinsing solution）： 更換泵后沖洗液（20%乙醇）。如果沖洗液瓶中液體量增加，說明泵頭密封圈滲漏，須更換,維護每三個月,紫外監(jiān)測儀（Monitor UV-900）： 檢測光源強度（應(yīng)大于20）及使用時間（大于4000hr）、光柵翻轉(zhuǎn)時間（大于2000hr） 保護光纖，防止折斷或扭彎，否則無法采集數(shù)

6、據(jù)或數(shù)據(jù)不準 在不做柱層析時，注意關(guān)掉光源，盡量延長燈的使用壽命和減少光柵的機械磨省。,10ml系統(tǒng),100ml系統(tǒng),維護每六個月,Monitor UV-900 清洗UV流通池，如果樣品很臟則須更頻繁的清洗. Monitor pH/C-900 檢查和校正pH計 （pH計在不使用時必須保存在下述溶液中：1:1 mixture of pH 4 buffer and 2 M KNO3或pH4.0的飽和KCl溶液中） Mixer M-925 檢查混合儀及接頭是否松動,維護每年,Valve INV-907, IV-908 and PV-908 檢查閥是否滲漏，如果滲漏則需更換閥頭,維護每兩年 Mixer

7、 M-925 更換混合池,系統(tǒng)清洗（Cleaning the system）,每天工作結(jié)束后(At the end of the day) 如果系統(tǒng)仍將使用之前一天的相同緩沖液，則可以用10的使用流速，用緩沖液沖洗泵 如果將在第二天更換緩沖液，則需用水用PumpWash功能將泵沖洗干凈 幾天停用儀器（Leaving for a few days） 先用水PumpWash沖洗之后，再用20%的乙醇將系統(tǒng)沖洗干凈，包括所有的進口管路和出口管路都用20的乙醇保存好,每月清洗（Monthly cleaning）必須每月按時清洗系統(tǒng)或在遇到問題時清洗系統(tǒng)（如色普峰出現(xiàn)重影）：用1M NaOH ，執(zhí)行Sy

8、stemWash指令. 之后立即用水將NaOH沖洗干凈.,系統(tǒng)移動（Moving the system）,移動系統(tǒng)時小心謹慎，拆下外圍的部件和管道，并防止劇烈震動，,小心?。╓ARNING!）,在更換部件時必須關(guān)掉所有的電源. 如果有水或緩沖液滲入到儀器內(nèi)部帶電部位，須立即關(guān)掉電源，并求助于維修工程師,P900柱塞泵 初次使用或停用一段時間后再次使用時，首先以較低的流速運行，逐漸增加流速。切記不要開機后即高速運行,需要注意的問題,1、廢液溢出 注意：每次用完傾倒廢液，使用之前看下廢液缸，沒倒的話，清空并提醒上一位同學。 2、不充20%乙醇 注意：2天不用必須充20%乙醇，當天必須充上水，切忌保存在Buffer里 3、使用頻率過高，時間過長。 注意：盡量節(jié)約蛋白使用，減少儀器使用次數(shù)。使用時盡量節(jié)約時間，平衡時不需要走整個柱體積，進樣后也一樣。合理安排時間，盡量不要出現(xiàn)因為有事而長時間的空走。 4、用大柱子進行分析 注意：大柱子用于制備，小柱子進行分析。 5、開機使用pumpwash 注意：為避免對泵造成損傷，開機運行后不要立