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1、2020/9/16,1,好氧生物反應(yīng)器,Huang Yan 11721777,2020/9/16,2,1.生物反應(yīng)器 2.反應(yīng)器中氧的傳遞 3.發(fā)酵動(dòng)力學(xué) 4.以丁二醇發(fā)酵為例分析,2020/9/16,3,1.生物反應(yīng)器,生物反應(yīng)器:用酶或生物體(如微生物)所具有的生物功能,在體外進(jìn)行生化反應(yīng)的裝置系統(tǒng)。本質(zhì)上就是酶反應(yīng)器。 不僅包括傳統(tǒng)的發(fā)酵罐、酶反應(yīng)器,還包括采用固定化技術(shù)后的固定化酶或細(xì)胞反應(yīng)器、動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)用反應(yīng)器和光合生物反應(yīng)器等 生物反應(yīng)器的作用:為酶或細(xì)胞代謝提供一個(gè)適宜的物理及化學(xué)環(huán)境,使細(xì)胞能更快更好地生長(zhǎng),并得到更多需要的生物量或代謝產(chǎn)物。,2020/9/16,4,生物反
2、應(yīng)器發(fā)酵流程,2020/9/16,5,2020/9/16,6,生物反應(yīng)器的分類(lèi),按結(jié)構(gòu)區(qū)分: 攪拌罐式反應(yīng)器 鼓泡式反應(yīng)器 填充床式反應(yīng)器 流化床式反應(yīng)器. 膜反應(yīng)器 按操作方式區(qū)分: 分批式反應(yīng) 連續(xù)式反應(yīng) 流加分批式反應(yīng) 混合形式 連續(xù)攪拌罐反應(yīng)器 分批攪拌罐反應(yīng)器,2020/9/16,7,生物反應(yīng)器是生物工程中最重要的設(shè)備之一,在生物過(guò)程中,具有中心作用,是實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)化的關(guān)鍵設(shè)備,是連接原料和產(chǎn)物的橋梁。反應(yīng)器中,通過(guò)產(chǎn)物合成,廉價(jià)原料被升值了。生物反應(yīng)器的設(shè)計(jì)和操作,是生物工程中一個(gè)及其重要的問(wèn)題,對(duì)產(chǎn)品成本和質(zhì)量有很大影響。,2020/9/16,8,一個(gè)優(yōu)良的生物反應(yīng)器應(yīng)具備: (
3、1) 所用生物催化劑應(yīng)具有較高的比活和酶濃度(或細(xì)胞濃 度),能得到較大的產(chǎn)品轉(zhuǎn)化率。 (2) 能用電腦自動(dòng)檢測(cè)和調(diào)控,從而獲得最佳的反應(yīng)條件。 (3) 應(yīng)具有良好的傳質(zhì)和混合性能。 (4) 應(yīng)具有最佳的無(wú)菌條件,否則,雜菌污染使反應(yīng)器的生產(chǎn) 能力下降。,2020/9/16,9,2.反應(yīng)器中氧的傳遞,好氧微生物的生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖和產(chǎn)生代謝產(chǎn)物都需要消耗氧氣,在發(fā)酵過(guò)程中必須通入適量無(wú)菌空氣滿(mǎn)足菌體生長(zhǎng)需要。 好氧微生物的氧化酶存在于原生質(zhì)內(nèi),只能夠利用溶解于發(fā)酵液中的氧氣。由于各種好氣微生物所含的氧化酶體系的種類(lèi)和數(shù)量不同,在不同環(huán)境條件下,各種需氧微生物的吸氧量或呼吸程度也是不同的。 在反應(yīng)器
4、中,微生物的耗氧速率受到酵液中氧濃度影響,而發(fā)酵液中的氧濃度又受到諸多因素的影響。,2020/9/16,10,氧傳遞的雙膜理論,2020/9/16,11,發(fā)酵液中氧的傳遞方程,C,Ci,P,Pi,氣膜,液膜,N:傳氧速率 kmol/m2.h kg: 氣膜傳質(zhì)系數(shù) kmol/m2.h.atm Kl: 液膜傳質(zhì)系數(shù) m/h,2020/9/16,12,以液相濃度為基準(zhǔn)推導(dǎo)式,kL為液膜傳質(zhì)系數(shù); kG為氣膜傳質(zhì)系數(shù); Ci為氣液界面上的平衡濃度; C為反應(yīng)液主流中氧的濃度; C*為與氣相氧分壓相平衡的氧濃度; H為亨利常數(shù); KL為以液膜為基準(zhǔn)的總傳質(zhì)系數(shù)。,2020/9/16,13,兩邊同乘a(單
5、位體積反應(yīng)液中氣液比表面積) Na單位體積反應(yīng)液中氧的傳質(zhì)速率mol/m3s; kLa體積傳質(zhì)系數(shù)s-1;,2020/9/16,14,體積傳質(zhì)系數(shù)kLa作為一個(gè)整體在發(fā)酵過(guò)程中被測(cè)量出來(lái),其值對(duì)在發(fā)酵過(guò)程中評(píng)估通氣效率,調(diào)節(jié)溶氧有十分重要的意義。 常用的測(cè)量kLa的方法有亞硫酸鹽氧化法、取樣極譜法、物料衡算法、動(dòng)態(tài)法、排氣法和電極法等。,2020/9/16,15,亞硫酸鹽法測(cè)定容積氧傳遞系數(shù),正常條件下,亞硫酸根離子的氧化反應(yīng)非常快,遠(yuǎn)大于氧的溶解速度。當(dāng)Na2SO3溶液的濃度在0.018 0.45mol內(nèi),溫度在2045時(shí),反應(yīng)速度幾乎不變。所以,氧一旦溶解于Na2SO3溶液中立即被氧化,反
6、應(yīng)液中的溶解氧濃度為零。此時(shí)氧的溶解速度(氧傳遞速度)成為控制氧化反應(yīng)速度的決定因素。,2020/9/16,16,過(guò)量的碘與反應(yīng)剩余的Na2SO3反應(yīng),再用標(biāo)準(zhǔn)的Na2S2O3溶液滴定剩余的碘。根據(jù)Na2S2O3溶液消耗的體積數(shù),可求出的Na2SO3濃度。,2020/9/16,17,a也可以單獨(dú)計(jì)算出來(lái) a的大小取決于所設(shè)計(jì)的空氣分布器、空氣流動(dòng)速率、反應(yīng)器的體積、空氣泡的直徑等。 如果由空氣分布器出口流出的空氣流動(dòng)速率為Fa,氣泡在發(fā)酵罐中的停留時(shí)間為t ,氣泡平均直徑為dB,那么a可由下式給出:,氣液比表面積的計(jì)算,2020/9/16,18,由于Fat/VL是單位液體體積與所對(duì)應(yīng)氣泡體積之
7、比,也是通氣后液柱的增高值與不通氣時(shí)液柱高度之比,即氣體的滯留量H0 ,所以,2020/9/16,19,影響氧傳遞速率的主要因素,1.攪拌 把通入的氣體打碎,強(qiáng)化渦流程度,使空氣與發(fā)酵液充分混合 2.氣液比表面積 比表面積越大,氧傳遞速率越大. 3.空氣的線(xiàn)速度 氧傳遞系數(shù)K L是隨空氣量的增加而增大的,當(dāng)增加通風(fēng)量時(shí),空氣的線(xiàn)速度也就相應(yīng)地增大,從而增加了溶氧,氧傳遞系數(shù)K L相應(yīng)地也增大。 4.發(fā)酵液性質(zhì) 粘度、表面張力、離子液度、密度、擴(kuò)散系數(shù)等,從而影響到氣泡的大小、氣泡的穩(wěn)定性,進(jìn)而對(duì)氧傳遞系數(shù)K L帶來(lái)很大的影響。 5.表面活性劑 分布于氣液界面,改變傳質(zhì)阻力,進(jìn)而影響氧傳遞系數(shù)K
8、 L,2020/9/16,20,2.發(fā)酵動(dòng)力學(xué),研究?jī)?nèi)容 包括菌體生長(zhǎng)速率、基質(zhì)消耗速率、產(chǎn)物生成速率的相互關(guān)系,環(huán)境對(duì)三者的影響,以及影響其反應(yīng)速率的條件。 目的: 通過(guò)動(dòng)力學(xué),研究各種物理,化學(xué)因素的影響,為調(diào)控提供依據(jù),優(yōu)化發(fā)酵的工藝條件及調(diào)控方式; 建立反應(yīng)過(guò)程的動(dòng)力學(xué)模型來(lái)模擬最適當(dāng)?shù)墓に嚵鞒毯凸に噮?shù),預(yù)測(cè)反應(yīng)的趨勢(shì); 控制發(fā)酵過(guò)程,以至實(shí)現(xiàn)用計(jì)算機(jī)來(lái)進(jìn)行控制.,2020/9/16,21,發(fā)酵動(dòng)力學(xué)涉及的常規(guī)參數(shù),2020/9/16,22,常用到的參變量:,菌體生長(zhǎng)速率指單位體積、單位時(shí)間里生長(zhǎng)的菌體量。菌體量一般指其干重。 菌體的比生長(zhǎng)速率:菌體生長(zhǎng)速率與菌體濃度之比。,2020
9、/9/16,23,基質(zhì)消耗速率: 基質(zhì)的比消耗速率:,2020/9/16,24,產(chǎn)物生成速率: 產(chǎn)物形成的比速率,2020/9/16,25,生長(zhǎng)得率:菌體的生長(zhǎng)量相對(duì)于基質(zhì)消耗量的得率,也稱(chēng)為細(xì)胞對(duì)基質(zhì)的得率。 產(chǎn)物得率:相對(duì)于基質(zhì)消耗量的代謝產(chǎn)物得率。,2020/9/16,26,ATP生長(zhǎng)得率 消耗1molATP得到的菌體量,用YATP表示。 根據(jù)觀察發(fā)現(xiàn),許多微生物的YATP大致相同,一般認(rèn)為YATP=10g細(xì)胞/ molATP。這個(gè)數(shù)值已經(jīng)被用做估算細(xì)胞理論得率的一個(gè)常數(shù)。 維持系數(shù)m “維持”是指活細(xì)胞群體在沒(méi)有實(shí)質(zhì)性的生長(zhǎng)(即細(xì)胞生長(zhǎng)和死亡處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài))和沒(méi)有胞外代謝產(chǎn)物合成情況
10、下的生命活動(dòng)。 維持代謝沒(méi)有物質(zhì)的凈合成,是完全用于產(chǎn)生能量的分解代謝.是為宏觀上保持細(xì)胞物質(zhì)總量平衡而進(jìn)行的分解代謝,2020/9/16,27,發(fā)酵類(lèi)型,酒精發(fā)酵 檸檬酸發(fā)酵 抗生素發(fā)酵,Luedeking-Piret模型,2020/9/16,28,生長(zhǎng)偶聯(lián)產(chǎn)物形成系數(shù) 如:酵母菌酒精發(fā)酵,1.生長(zhǎng)偶聯(lián)型:,產(chǎn)物直接來(lái)源于產(chǎn)能的初級(jí)代謝(自身繁殖所必需的代謝),菌體生長(zhǎng)與產(chǎn)物形成不分開(kāi)。,2020/9/16,29,2.非生長(zhǎng)偶聯(lián)型,非生長(zhǎng)偶聯(lián)型:細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí),無(wú)產(chǎn)物,產(chǎn)物生成在菌體停止生長(zhǎng)才開(kāi)始,產(chǎn)物的形成速率只與細(xì)胞積累量有關(guān),與生長(zhǎng)不偶聯(lián)。 所形成的產(chǎn)物均是次級(jí)代謝產(chǎn)物。但并非所有的次級(jí)代
11、謝產(chǎn)物都是非生長(zhǎng)偶聯(lián)型。,2020/9/16,30,3.混合型,如:乳酸、檸檬酸、谷氨酸等的發(fā)酵。 與生長(zhǎng)偶聯(lián)的產(chǎn)物形成系數(shù),g/g細(xì)胞; 非生長(zhǎng)偶聯(lián)的比生產(chǎn)速率, g/(g細(xì)胞h)。 該混合型模型復(fù)雜的形成是將常數(shù)、作為變數(shù),它們?cè)诜峙l(fā)酵的四個(gè)時(shí)期分別具有特定的數(shù)值。,2020/9/16,31,分批培養(yǎng)中微生物的生長(zhǎng)曲線(xiàn),延遲期:,指數(shù)生長(zhǎng)期:,減速期:,靜止期:,衰亡期:,2020/9/16,32,克雷伯氏白桿菌進(jìn)行丁二醇發(fā)酵 Qsa Qsr Qsf,4.丁二醇發(fā)酵分析,2020/9/16,33,2020/9/16,34,氧氣充足,細(xì)胞數(shù)目呈指數(shù)型增長(zhǎng),細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸,無(wú)氧呼吸近似于零。,第一階段,2020/9/16,35,2020/9/16,36,由氧氣充足變?yōu)檠跏?/p>
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