重組乙型肝炎疫苗.ppt

1、重組乙型肝炎疫苗(CHO細(xì)胞),2009523809生物工程一班,2010年度乙肝專題疫情分析,乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒引起的一種疾病。發(fā)展中國(guó)家發(fā)病率高，據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界無癥狀乙肝病毒攜帶者超過2.8億,我國(guó)約占1.3億。多數(shù)無癥狀，其中1/3出現(xiàn)肝損害的臨床表現(xiàn)。目前我國(guó)有乙肝患者3000萬。乙肝的特點(diǎn)為起病較緩，以亞臨床型及慢性型較常見。本病主要通過血液、母嬰和性接觸進(jìn)行傳播,什么是乙型肝炎？,乙型肝炎病毒（HBV）感染引起的一種傳染性疾病。HBV不僅能引起急性肺炎、慢性肺炎，更為嚴(yán)重的是它與肝硬化、肝癌的發(fā)生有密切關(guān)系。 臨床主要表現(xiàn)為食欲減退、惡心、厭油、乏力、鞏膜黃染、黃色尿、

2、肝臟腫大、肝區(qū)痛等。,乙肝五項(xiàng)檢測(cè),乙肝五項(xiàng)是國(guó)內(nèi)醫(yī)院最常用的乙肝病毒 (HBV)感染檢測(cè)血清標(biāo)志物。乙型肝炎病毒免疫學(xué)標(biāo)記一共3對(duì)，即表面抗原(HBsAg)和表面抗體(抗HBs或HBsAb)、e抗原(HBeAg)和 e抗體(抗HBe或HBeAb)、核心抗原(HBcAg)和核心抗體(抗HBc或HBcAb)。乙肝兩對(duì)半又稱乙肝五項(xiàng)，其檢查意義在于：檢查是否感染乙肝及感染的具體情況，區(qū)分大三陽、小三陽。 乙肝五項(xiàng)檢測(cè)什么 1.表面抗原（HBsAg）體內(nèi)是否存在乙肝病毒 2.表面抗體（抗-HBs）是否有保護(hù)性 3.抗原（HBeAg）病毒是否復(fù)制及具有傳染性 4.抗體（抗-HBe）病毒復(fù)制是否受到抑制

3、 5.核心抗體（抗-HBc）是否感染過乙肝病毒,乙肝為何難治?,1.乙肝是由乙肝病毒引起的，病毒總計(jì)兩層結(jié)構(gòu)，外包一層致密堅(jiān)硬的蛋白質(zhì)外殼，專門抵御藥物對(duì)他的作用，藥物對(duì)他根本無可奈何； 2.病毒隱匿在肝細(xì)胞里面復(fù)制，藥物分子比肝細(xì)胞還大，根本無法進(jìn)入到肝細(xì)胞里面，進(jìn)而也不可能并病毒有絲毫的作用； 3.病毒有一個(gè)復(fù)制模塊，存在于細(xì)胞核中，專門誘導(dǎo)病毒高速復(fù)制繁殖，藥物分子連細(xì)胞都無法進(jìn)入，更無法進(jìn)入到細(xì)胞核中； 4.病毒會(huì)變性、變異。藥物一接近它它就會(huì)迅速的改變結(jié)構(gòu)和特性，從而讓藥物無法捕捉到他，逃避掉藥物對(duì)它的作用； 5.久之病毒會(huì)與人體基因長(zhǎng)生鏈接，此時(shí)任何藥物都無法做到切除，必需借助其它

4、高科技醫(yī)學(xué)手段； 6.病毒生命周期是90天，附著藥物分子沒有那么久的吞殺效力，一般都會(huì)被人體快速消化掉，所以殺滅病毒根本無從談起。,乙肝治療新技術(shù),2009年，三大肝病突破性技術(shù)先后研發(fā)成功。最早的是日本中微子透析技術(shù)；緊隨其后，德國(guó)O3技術(shù)也震撼性問世；年末，我國(guó)上海復(fù)旦大學(xué)研究的治療性疫苗也宣告三期臨床完成，正式上市。,目前臨床上應(yīng)用的乙肝疫苗主要有以下幾種：,含前S蛋白的乙肝疫苗 S蛋白能增強(qiáng)HBsAg 的免疫應(yīng)答,基因工程疫苗： 利用基因工程研制 重組DNA乙肝疫苗,血源性乙肝疫苗： 此疫苗是用無癥狀的 HBsAg攜帶者的血液 制成,到目前為止，有兩種規(guī)?；a(chǎn)的基因工程HepB，一種

5、是CHO細(xì)胞表達(dá)的;另一種是酵母細(xì)胞表達(dá)的,同重 組 乙肝疫苗(酵母)相比，重組乙肝疫苗(CHO細(xì)胞)具有如下特點(diǎn):CHO細(xì)胞表達(dá)的重組HepB是高等真核細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物，其天然結(jié)構(gòu)較低等的真核細(xì)胞酵母表達(dá)的HBsAg蛋白更適合人體吸收，生產(chǎn)過程中不同于酵母使用硫氰酸鹽處理，安全性好,CHO？,CHO(Chinese hamster ovary）【中國(guó)倉鼠卵母細(xì)胞】 該細(xì)胞具有不死性，可以傳代百代以上，是目前生物工程上廣泛使用的細(xì)胞。 全世界批準(zhǔn)正式應(yīng)用于人類疾病治療或疾病預(yù)防的基因工程產(chǎn)品約有三十多種 其中只有一種(乙肝疫苗)是由酵母菌生產(chǎn)的，其余所有產(chǎn)品都是由CHO細(xì)胞和 大腸桿菌生產(chǎn)的，大腸

6、桿菌不能形成有活性的二聚體(如白介素2) 另外CH0細(xì)胞在基因工程使用中還有一個(gè)優(yōu)點(diǎn)，該細(xì)胞屬于成纖維細(xì)胞 (fibroblast)，是一種非分泌型細(xì)胞，它本身很少分泌CHO內(nèi)源蛋白，因此對(duì)目標(biāo)蛋白分離純化工作十分有利。,什么是重組乙型肝炎疫苗(CHO細(xì)胞)？,采用基因工程技術(shù)將無傳染性的乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的 S基因片段克隆到載體，用重組載體轉(zhuǎn)染真核生物CHO細(xì)胞通 過細(xì)胞培養(yǎng)、增殖、分泌出HBsAg到培養(yǎng)液中，收集分泌液， 經(jīng)高速離心、純化、除菌后，加人佐劑吸附(氫氧化鋁)而制成,1.接種對(duì)象 (1)乙肝易感者(表面抗原陰性，轉(zhuǎn)氨酶正常)。 用于阻斷母嬰傳播。給HBsAg和HBe

7、Ag均為陽性母親所生新生嬰兒接種更為重要， 聯(lián)合使用乙肝免疫球蛋白。 2.使用方法 (1)一般易感者使用10ug/支，免疫程序?yàn)?、1、6。每次注射1支，1個(gè)月及6個(gè)月 時(shí) 注射第2，3針。 (2)全程注射3次。新生兒使用20g/支，第1針在出生后24小時(shí)內(nèi)注射，其余兩針與一 般易感者相同。 (3)高危人群，如血液透析病人及職業(yè)性與乙肝患者密切接觸者，亦可用20ug/支。 (4)注射部位為上臂三角肌肌內(nèi)。,3.注意事項(xiàng) (1)安瓿破裂、疫苗變質(zhì)或有搖不散的塊狀物，不得使用。 (3)接種疫苗時(shí)認(rèn)明10ug/支及20g/支兩種規(guī)格。 (2)疫苗注射前要充分搖勻。 乙肝基因工程疫苗應(yīng)于2-8條件下貯運(yùn)，嚴(yán)防凍結(jié)。疫苗有效期為2年。,4.接種反應(yīng)及禁忌癥 接種反應(yīng) 本疫苗很少有不良反應(yīng)。個(gè)別人亦有中、低度發(fā)熱，或注射局部微痛，24小時(shí)內(nèi)消失。 禁忌癥 凡發(fā)熱及患有急性或慢性嚴(yán)重疾病者及有過敏史者禁止使用。 5.副作用 自1979年乙肝疫苗問世以來，經(jīng)過20多年大規(guī)模的使用和觀察，目前還沒有接種