臨床實驗室安全管理

1、臨床實驗室安全管理,建議參考書：人衛(wèi)版,臨床實驗室安全管理,第一節(jié) 概述 第二節(jié) 實驗室生物安全管理體系 第三節(jié) 實驗室生物安全風(fēng)險評估 第四節(jié) 臨床實驗室生物安全防護 第五節(jié) 實驗用菌（毒）種及廢棄物處理 第六節(jié) 臨床實驗室其他安全,臨床實驗室安全管理,臨床實驗室是醫(yī)療機構(gòu)病原體最集中區(qū)域 也是科研工作的特殊場所 這些病原體對實驗室工作人員、周圍人員及環(huán)境具有一定的潛在危害 它甚至可以造成疾病的流行，危及廣大群眾的健康和生命安全，妨礙社會經(jīng)濟發(fā)展及和諧社會的建設(shè)，使得實驗室生物安全管理成為臨床實驗室安全管理工作的核心,第一節(jié) 概述,一、實驗室生物安全有關(guān)概念 二、臨床實驗室主要危害源 三、相

2、關(guān)的法律法規(guī)和標準 四、實驗室的常用安全標識,一、實驗室生物安全的有關(guān)概念,1.生物因子( biological agents) 2.生物危害（biohazard） 3.生物危險(biorisk) 4.氣溶膠（aerosols） 5.生物安全（biosafety） 6.實驗室生物安全（laboratory biosafety）,1生物因子( biological agents)是可能引起感染、過敏或中毒的所有微小生物體，包括基因修飾的、細胞培養(yǎng)的和寄生于人體的一切微生物和其他相關(guān)的生物活性物質(zhì) 2. 生物危害（biohazard）是由生物因子對環(huán)境及生物體的健康所造成的危害,一、實驗室生物安全

3、的有關(guān)概念,3. 生物危險(biorisk) 是生物因子將要或可能形成的危害，是傷害概率和嚴重性的綜合，又叫風(fēng)險。研究病原微生物是有一定風(fēng)險，生物安全實驗室能夠降低這種風(fēng)險 4. 氣溶膠（aerosols）是指懸浮于氣體介質(zhì)中的粒子，一般直徑為0.001m100m的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對穩(wěn)定的分散體系,一、實驗室生物安全的有關(guān)概念,5. 生物安全（biosafety）是指人們對于由動物、植物、微生物等生物體給人類健康和自然環(huán)境可能造成不安全的防范 6. 實驗室生物安全（laboratory biosafety） 是指在實驗室從事病原微生物實驗活動中，采取措施避免病原微生物對工作人員和相關(guān)

4、人員造成危害、對環(huán)境造成污染和對公眾造成傷害，保證實驗研究的科學(xué)性并保護被實驗對象免受污染,返回節(jié)目錄,一、實驗室生物安全的有關(guān)概念,二、臨床實驗室的主要危害源,（一）生物危害源 （二）化學(xué)危害源 （三）物理危害源,（一）生物危害源,生物危害源主要由病原微生物引起的 包括細菌、病毒、真菌及寄生蟲等 實驗室相關(guān)感染的原因：被銳器刺傷 吸入氣溶膠 被動物咬傷或抓傷 感染性材料處理不當(dāng),（二）化學(xué)危害源,化學(xué)危害源主要指在臨床實驗室的操作過程中所使用的危險性化學(xué)品引起的危害。包括： 易燃性化學(xué)品、易爆性化學(xué)品、腐蝕性化學(xué)品、強酸性化學(xué)品、有毒性化學(xué)品、有害性化學(xué)品 入侵方式：通過吸入、接觸、食入、針

5、刺及破損皮膚等方式侵入,（三）物理危害源,臨床實驗室中物理危害源 主要放射性核素的輻射、紫外線和激光光源照射、電磁場、噪音等的危害 1放射性核素 使用理由、限度和地點進行評估 2. 紫外線和激光光源 提供個人防護裝備 3. 電 主要危害是引起火災(zāi) 4. 噪音 采用工程控制措施,返回節(jié)目錄,三、相關(guān)的法律法規(guī)和標準,（一）國際的相關(guān)法律法規(guī) （二）我國生物安全法律、法規(guī)和標準,（一）國際的相關(guān)法律法規(guī),20世紀5060年代歐美國家開始關(guān)注實驗室生物安全問題 世界衛(wèi)生組織在1983年出版了實驗室生物安全手冊（第一版） WHO于1993年組織編寫了該手冊的第二版。 2004年WHO正式發(fā)布了實驗室生

6、物安全手冊（第三版）,（二）我國有關(guān)生物安全的法律法規(guī)和標準,1. 我國有關(guān)生物安全的法律法規(guī) （1）中華人民共和國傳染病防治法 （2）病原微生物實驗室生物安全管理條例 （3） 醫(yī)療廢物管理條例,2我國有關(guān)實驗室生物安全的標準和規(guī)范,（1）中華人民共和國國家標準：實驗室生物安全通用要求（GB19489-2008）、醫(yī)學(xué)實驗室安全要求（GB19781-2005/ISO15190）、生物安全實驗室建設(shè)技術(shù)規(guī)范（GB50346-2004） （2）中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準：微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準則、人間傳染的病原微生物名錄、可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定 （

7、3）國家環(huán)境保護總局：病原微生物實驗室生物安全環(huán)境管理辦法（第32號）,返回節(jié)目錄,四、實驗室的安全標識,（一）生物危害標識 （二）感染性物品標識 （三）電離輻射標識 （四）危險化學(xué)品警示標識,授權(quán)人員方可進入 生物安全水平：- 責(zé)任人：- 緊急聯(lián)系電話：- 白天電話：- 家庭電話：- 必須得到上述責(zé)任人的授權(quán)方可進入 生物危害警告標識,感染性物品標識,當(dāng)心電離輻射標識,爆炸品標識,易燃氣體、不燃氣體,易燃液體標識,氧化劑標識,腐蝕品標識,返回章目錄,警示標識,第二節(jié) 實驗室生物安全管理體系,一、生物安全管理組織體系 二、生物安全管理體系文件 三、生物安全管理規(guī)章制度 四、生物安全管理規(guī)范 五

8、、記錄與資料的管理,一、生物安全管理組織體系,（一）國家病原微生物實驗室生物安全專家委員會 （二）地區(qū)病原微生物實驗室生物安全專家委員會 （三）醫(yī)療機構(gòu)生物安全管理委員會 （四）實驗室主任與安全管理員,一、生物安全管理組織體系,實驗室安全負責(zé)人的工作 (1)生物安全、生物安全保障以及技術(shù)規(guī)章方面的咨詢工作。 (2)對技術(shù)方法、程序和方案、生物因子、材料和設(shè)備定期進行內(nèi)部安全檢查 (3)記錄違反生物安全方案或程序的情況,與有關(guān)人員討論并提出改進的辦法 (4)進行生物安全繼續(xù)教育和適當(dāng)?shù)纳锇踩嘤?xùn) (5)對于所有涉及潛在泄漏或意外事故調(diào)查,并將調(diào)查結(jié)果以及處理意見及時向?qū)嶒炇抑魅魏蜕锇踩瘑T會

9、報告,一、生物安全管理組織體系,(6)在出現(xiàn)涉及感染性物質(zhì)溢出或其他事故時,要確保清除污染 (7)確保醫(yī)療廢棄物的正確管理 (8)根據(jù)國家規(guī)定,制定病原微生物的運入/運出的程序 (9)對涉及感染性物質(zhì)實驗的計劃、方案以及操作程序,要在具體操作實施以前進行生物安全審查。 (10)負責(zé)實驗室應(yīng)急預(yù)案的演練與實施等,返回節(jié)目錄,二、生物安全管理體系文件,體系文件的編制一般都采用四層“金字塔”建構(gòu) 第一層生物安全管理手冊，主要敘述生物安全原則、方針、意圖和指令等 第二層是程序文件，是將生物安全管理指令、意圖轉(zhuǎn)化為行動的途徑和相關(guān)聯(lián)的行動 第三層是作業(yè)指導(dǎo)書(SOP)，是用來指導(dǎo)相關(guān)活動的實驗操作技術(shù)細

10、節(jié)性文件 第四層是記錄，是用來闡明安全關(guān)聯(lián)活動的表達方式，它可追溯性提供結(jié)果的證據(jù),二、生物安全管理體系文件,1生物安全管理手冊 核心是生物安全方針、目標、原則、組織機構(gòu)及各組成要素的描述 手冊中“方針目標”應(yīng)口號式生物安全方針 概述生物安全目標，明確實驗室對生物安全管理的承諾,二、生物安全管理體系文件,2生物安全管理程序文件 是對生物安全活動進行全面策劃和管理，是對各項生物安全管理活動的方法所作的規(guī)定，不涉及純技術(shù)性細節(jié)。程序文件一般包括；文件標題、目的、適用范圍、職責(zé)、工作流程、記錄表格目錄、支持性文件等。,返回節(jié)目錄,三、生物安全管理規(guī)章制度,1建立安全管理制度的基本原則 制定生物安全管

11、理制度必須根據(jù)相關(guān) 的法律法規(guī)、標準，并結(jié)合本實驗室情況 還應(yīng)考慮其科學(xué)性、合理性和可操作性 控制源頭、切斷途徑、避免危害,三、生物安全管理規(guī)章制度,2基本規(guī)章制度 實驗室安全管理制度 生物安全防護制度 內(nèi)務(wù)清潔制度 實驗室消毒滅菌制度 安全培訓(xùn)制度 微生物實驗室菌(毒)種管理制度 傳染病病原體報告制度。 防火、防電、防意外事故管理制度 尖銳器具安全使用制度 實驗室醫(yī)療廢棄物處理制度,返回節(jié)目錄,四、生物安全管理規(guī)范,構(gòu)成臨床實驗室生物安全的三要素： 工作人員、硬件和軟件 人是核心要素，又是最寶貴的要素 實驗室或者實驗室的設(shè)立單位應(yīng)當(dāng)每年定期對工作人員進行培訓(xùn)，保證其掌握實驗室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)

12、范、生物安全防護知識和實際操作技能，并進行考核,四、生物安全管理規(guī)范,病原微生物實驗室生物安全管理條例規(guī)定： 實驗室應(yīng)當(dāng)每年定期對工作人員進行培訓(xùn)，保證其掌握實驗室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)范、生物安全防護知識和實際操作技能，并進行考核 工作人員經(jīng)考核合格的，方可上崗 對實驗室相關(guān)人員，包括實驗室操作人員、保潔人員等也要進行崗前培訓(xùn)和考核，持證上崗 同時要進行周期性(一般每年一次)生物安全知識的繼續(xù)教育，并記入個人技術(shù)檔案。,返回節(jié)目錄,五、記錄與資料的管理,將所取得的結(jié)果或所完成的活動以記錄方式形成的文件，它可追溯性提供證據(jù) 實驗室活動的表達方式之一 記錄還可為糾正措施、預(yù)防措施的驗證提供證據(jù) 實驗室

13、采取糾正措施、預(yù)防措施的過程與效果 可以通過相對的記錄予以驗證,返回章目錄,第三節(jié) 實驗室生物安全風(fēng)險評估,一、生物因子風(fēng)險程度分級 二、病原微生物危害程度分類 三、實驗室生物安全防護分級 四、風(fēng)險評估,一、生物因子風(fēng)險程度分級,級風(fēng)險 : 低個體危害，低群體危害。 不會導(dǎo)致健康工作者和動物致病的細菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。 級風(fēng)險： 中等個體危害，有限群體危害。 能引起人或動物發(fā)病，但一般情況下對健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會引起嚴重危害的病原體。實驗室感染不導(dǎo)致嚴重疾病，具備有效治療和預(yù)防措施，并且傳播風(fēng)險有限。,一、生物因子風(fēng)險程度分級,級風(fēng)險： 高個體危害，低群體危害。 能引

14、起人類或動物嚴重疾病，或造成嚴重經(jīng)濟損失，但通常不能因偶然接觸而在個體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲藥治療的病原體 。 級風(fēng)險： 高個體危害，高群體危害。 能引起人類或動物非常嚴重的疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或因偶然接觸在人與人，或動物與人，或人與動物，或動物與動物間傳播的病原體。,返回節(jié)目錄,二、病原微生物危害程度分類,我國在病原微生物實驗生物安全管理條例中，按危害程度將病原微生物分為四類。 一類：能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅和微生物。 二類：能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物

15、。,二、病原微生物危害程度分類,三類：能夠引起人類或動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴重危害，傳播風(fēng)險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。 四類：通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。,返回節(jié)目錄,三、實驗室生物安全防護分級,1一級生物安全防護實驗室（BSL-l） 2二級生物安全防護實驗室（BSL-2） 3三級生物安全防護實驗室（BSL-3） 4四級生物安全防護實驗室（BSL-4）,與風(fēng)險等級相對應(yīng)的生物安全水平、操作和設(shè)備選擇,危害等級 生物安全水平 實驗室類型 實驗室操作 安全設(shè)施, BSL-1 基礎(chǔ)教學(xué)、研究 GMT 不需要；開放實

16、驗室 BSL-2 初級衛(wèi)生服務(wù)、診斷 GMT、防護服、 開放實驗室，需要BSC 微生物危害標識 用于可能生成的氣溶膠 BSL-3 特殊的診斷、研究 在BSL-2上增加特 BSC和（或）其他所有 殊防護服、進入制 實驗室工作所需的基本 度、定向氣流 設(shè)備 BSL-4 危險病原體研究 在BSL-3上增加氣鎖 級或級BSC并穿 入口、出口淋浴、污 著正壓服、雙開門高 染物的特殊處理 壓滅菌器，經(jīng)過濾空 氣,病原微生物危害等級劃分與生物安全實驗室的分級,返回節(jié)目錄,四、風(fēng)險評估,（一）風(fēng)險評估的含義 （二）風(fēng)險評估范圍 （三）風(fēng)險評估時間 （四）評估人員 （五）制定評估報告 （六）評估辦法,（一） 風(fēng)

17、險評估的含義,風(fēng)險評估（risk assessment）是評估風(fēng)險的大小以及確定風(fēng)險是否可接受的全過程 風(fēng)險控制（risk control）為降低風(fēng)險而采取的綜合措施 風(fēng)險評估是實驗室生物安全的核心工作,（二）風(fēng)險評估范圍,（1）生物安全風(fēng)險評估 涉及病原微生物危害評估、實驗室實驗活動風(fēng)險評估、設(shè)施設(shè)備安全風(fēng)險評估、人員健康監(jiān)測等多方面內(nèi)容。 （2）風(fēng)險評估內(nèi)容 至少包括生物因子已知或未知的生物學(xué)特性 生物因子的種類、來源、傳染性、傳播途徑、易感性、潛伏期、劑量-效應(yīng)關(guān)系、致病性、變異性、在環(huán)境中的穩(wěn)定性、與其他生物和環(huán)境的交互作用、相關(guān)實驗數(shù)據(jù)、流行病學(xué)資料、人員安全狀況評估、預(yù)防和治療方案

18、等,（三）風(fēng)險評估時間,風(fēng)險評估始于實驗室設(shè)計建造之前 實施于實驗活動之中 定期的階段性再評估 因工作條件、人員變動 適時重新評估 保證風(fēng)險評估報告的及時性 保證有關(guān)管理規(guī)程、標準操作程序可行性,（四）評估人員,實驗室生物安全工作涉及 病原微生物、建筑設(shè)計工程、防護材料 空氣動力等不同的專業(yè)領(lǐng)域 是管理與研究并重的綜合性工作 需要對該領(lǐng)域及實驗研究有經(jīng)驗、有資歷的專業(yè)人員進行評估工作,（五）制定評估報告,各種因素的風(fēng)險發(fā)生概率程度、針對這些風(fēng)險采取的風(fēng)險控制措施以及風(fēng)險發(fā)生后的補救方法 風(fēng)險評估報告應(yīng)得到有關(guān)生物安全主管部門的審批程序 審批是對評估結(jié)果的論證,（六）評估辦法,具體評估辦法應(yīng)按照

19、國家標準 實驗室生物安全通用要求 （GB19489-2008）嚴格實行,返回章目錄,第四節(jié) 臨床實驗室生物安全防護,一、實驗室生物安全防護類型 二、實驗室主要的安全設(shè)備 三、個人安全防護用具 四、臨床實驗室技術(shù)規(guī)范 五、臨床實驗室消毒與滅菌 六、臨床實驗室應(yīng)急事故處理,一、實驗室生物安全防護的類型,1.一級防護(primary barrier) 主要采用規(guī)范實驗技術(shù)和適當(dāng)?shù)陌踩O(shè)備 保護實驗室工作人員和室內(nèi)環(huán)境安全免受感染性物質(zhì)污染 包括安全設(shè)備和個體防護裝備,一、實驗室生物安全防護的類型,2.二級防護(secondary barrier) 二級防護包括實驗室設(shè)施設(shè)計和嚴格規(guī)范的操作流程 以保

20、護實驗室外環(huán)境不受感染性物質(zhì)污染 生物安全防護的三個要素 實驗室操作及技術(shù)、安全設(shè)備和實驗室設(shè)施設(shè),返回節(jié)目錄,二、實驗室主要的安全設(shè)備,（一）生物安全柜 （二）超凈工作臺 （三）通風(fēng)柜 （四）洗眼器 （五）緊急噴淋裝置 （六）消毒設(shè)施及用品,生物安全柜（biosafety cabinet ，BSCs ）是處理危險性微生物時所用的箱型空氣凈化安全裝置。是在操作具有感染性的實驗材料時，為保護操作者本人、實驗室內(nèi)外環(huán)境以及實驗材料，使其避免在操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計的一種實驗室安全防護設(shè)備。,（一）生物安全柜,（一）生物安全柜,1. 種類介紹 2. 生物安全柜使用要求 3.

21、生物安全柜操作規(guī)范 4. 生物安全柜檢測要求,1. 種類介紹,級生物安全柜 級生物安全柜：級A1型、 級A2型、 級B1型、 級B2型 級生物安全柜,生物安全柜(負壓柜),級：設(shè)計簡單，目前仍廣泛使用。 保護操作者和環(huán)境，不保護操作對象。 級：保護操作者和操作對象。 操作危險度2 級和3 級微生物。 穿正壓防護服可處理危險度4 級微生物。 級：對操作者防護最好。 操作危險度4 級微生物。適用于三級和四級生物安全水平實驗室。,級生物安全柜原理,A：前開口 B：窗口 C：排風(fēng)HEPA 過濾器 D：壓力排風(fēng)系統(tǒng) 不能對實驗樣品進行保護,安全柜內(nèi)的空氣可以通過HEPA 過濾器按下列方式排出： （a）排

22、到實驗室中，然后再通過實驗室排風(fēng)系統(tǒng)排到建筑物外面 （b）通過建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)排到建筑物外面 （c）直接排到建筑物外面,級生物安全柜,級生物安全柜有不同的類型： A型（30%排出）：A1、A2型 B型又分為：B1 （70%接管道外排） B2 （100%接管道外排） 不同于級生物安全柜之處為： 只讓經(jīng)HEPA過濾的（無菌的）空氣流過工作臺面,級A1 型生物安全柜原理圖,A：前開口 B：窗口 C：排風(fēng)HEPA 過濾器 D：后面的壓力排風(fēng)系統(tǒng) E：供風(fēng)HEPA 過濾器 F：風(fēng)機,級B1 型生物安全柜原理圖,A：前開口 B：窗口 C：排風(fēng)HEPA 過濾器 D：供風(fēng)HEPA 過濾器 E：負壓壓力排風(fēng)系統(tǒng)

23、 F：風(fēng)機 G：送風(fēng)HEPA 過濾器 安全柜需要有與建筑物排風(fēng)系統(tǒng)相連接的排風(fēng)接口,級生物安全柜,所有接口都是密封的 有一個專門的外置排風(fēng)系統(tǒng)控制氣流 安全柜內(nèi)部始終處于負壓狀態(tài)（約124.5Pa） 只有通過連接在安全柜上的橡膠手套，手才能伸入安全柜,級生物安全柜,A：用于連接等臂長手套的艙孔 B：窗口 C：兩個排風(fēng)HEPA 過濾器 D：送風(fēng)HEPA 過濾器 E：雙開門高壓滅菌器或傳遞箱 F：化學(xué)浸泡槽 安全柜需要有與獨立的建筑物排風(fēng)系統(tǒng)相連接的排風(fēng)接口,根據(jù)保護類型的需要選擇適宜的生物安全柜,擺放位置、操作、物品擺放、操作和維修 紫外線燈、明火、溢出、清潔和消毒、清 除污染、個體防護裝備、警

24、報器、檢測,2. 生物安全柜使用要求,3. 生物安全柜操作規(guī)范,1. 人員要培訓(xùn) 2. 必須運行正常 3. 使用時不能打開玻璃觀察擋板 4. 放置盡可能少的器材或標本 5. 不能使用本生燈 6. 在安全柜的中后部操作、不要使用其他物品阻擋空氣格柵、盡量減少手臂的伸進伸出、盡可能減少操作者身后的人員流動、不進行文字工作 7. 工作開始前和結(jié)束后，風(fēng)機應(yīng)至少運行5分鐘,4. 生物安全柜檢測要求,（1）人員、產(chǎn)品及交叉污染保護試驗 （2）柜體泄漏試驗 （3）HEPA過濾器泄漏試驗 （4）下降氣流流速測試 （5）流入氣流流速測試 （6）氣流煙霧模式測試 （7）噪聲 （8）照度 （9）振動,（二） 超凈

25、工作臺,超凈工作臺的氣流是由外部經(jīng)HEPA過濾后進入操作區(qū)，通過操作區(qū)后由超凈工作臺前、側(cè)開口區(qū)流向操作者一側(cè)而進入實驗室。 超凈工作臺只能保護實驗材料，不能保護操作人員及環(huán)境。 超凈工作臺只適用于無毒、無味、無刺激性揮發(fā)氣體以及無感染性的實驗材料操作。,超凈工作臺,（三） 通 風(fēng) 柜,通風(fēng)柜是可以有效遏制毒性、刺激性或者易燃材料的安全設(shè)備 在實驗操作時往往會產(chǎn)生各種有害氣體、臭氣、濕氣以及易燃、易爆、腐蝕性物質(zhì)，為了保護使用者的安全，防止實驗中的污染物質(zhì)向?qū)嶒炇覕U散，在污染源附近要使用排風(fēng)設(shè)備 尤其是當(dāng)試驗過程中出現(xiàn)操作失誤，蒸汽和灰塵從使用器皿中大量泄出時，通風(fēng)柜可起到后備安全保障作用,通

26、風(fēng)柜,（四） 洗眼器,洗眼器是安全和勞動保護必備的設(shè)備，是接觸酸、堿、有機物等有毒、腐蝕性物質(zhì)場合必備的應(yīng)急、保護設(shè)施 洗眼器的類型很多，如復(fù)合式洗眼器、立式洗眼器、壁掛式洗眼器、便攜式洗眼器、臺式洗眼器 每周應(yīng)測試洗眼器與水供應(yīng)連接的裝置以確保其功能的正常并沖掉積水,洗眼器,（五）緊急噴淋裝置,一般安裝在使用苛性堿和腐蝕性化學(xué)品附近的地方 定期測試噴淋裝置以保證其功能正常，其次數(shù)依實驗室的復(fù)雜程度和規(guī)模而定 盡可能提供舒適的水溫；地面排水通常設(shè)在緊急噴淋裝置附近,緊急噴淋裝置,（六）消毒設(shè)施及用品,臨床實驗室生物安全防護常采用的消毒三種方式 化學(xué)消毒 高壓滅菌 焚燒 可在具體工作中應(yīng)根據(jù)實際

27、情況來選擇不同的消毒方式,返回節(jié)目錄,三、個人安全防護用品,1. 實驗服 2. 護目鏡 3. 面罩 4. 手套 5. 鞋,安全防護用具是避免操作人員暴露于氣溶膠、噴濺物以及意外接種等危險的一個屏障 應(yīng)根據(jù)所進行工作的性質(zhì)來選擇防護用具 常用的安全防護用具有 實驗服、護目鏡、面罩、手套和鞋等,三、個人安全防護用品,實驗服,面罩,護目鏡,鞋套,手套,實驗服,隔離衣,連體防護,靴套使用方法示意圖,鞋套使用方法示意圖,乳膠手套,聚脂手套,聚氯乙烯手套,眼睛防護裝備,a .安全鏡 大多數(shù)情況,佩戴側(cè)面帶有護罩的安全眼鏡能夠保護工作人員避免受到大部分實驗室操作所帶來的損害,b .安全護目鏡,只有在進行有可

28、能發(fā)生化學(xué)和生物污染物質(zhì)濺出的實驗時，必須佩戴護目鏡,防護面罩（對整個臉部進行防護）,一次性面罩,一次性防護面具,一次性防護面具,正壓防護服,使用中的全罩式防護面具,正壓面罩 （頭盔正壓式呼吸防護系統(tǒng)）,返回節(jié)目錄,四、臨床實驗室技術(shù)規(guī)范,（一）一級生物安全防護實驗室（BSL-1） （二）二級生物安全防護實驗室（BSL-2） （三）三級生物安全防護實驗室（BSL-3） （四）四級生物安全防護實驗室（BSL-4）,（一）一級生物安全防護實驗室（BSL-1）,適用于已知不會導(dǎo)致健康工作者和動物致病的生物因子（細菌、真菌、病毒和寄生蟲等）的操作 對實驗室工作人員和環(huán)境的潛在危害性最小,（一）一級生物

29、安全防護實驗室,1標準的微生物操作規(guī)程 限制或禁止非本實驗室人員進入 工作人員處理完后，脫下手套、離開實驗室之前要洗手 不許在工作區(qū)內(nèi)飲食、喝水、抽煙、化妝、處理隱形眼鏡，食物要放在工作區(qū)域以外的專用櫥柜或冰箱內(nèi) 禁止使用口吸移液，應(yīng)使用移液器吸取液體 制定銳利器具安全操作規(guī)程,（一）一級生物安全防護實驗室,1標準的微生物操作規(guī)程 操作盡可能細心，以減少飛濺物或氣溶膠的產(chǎn)生 每天至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出時應(yīng)及時消毒 所有的培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室前，應(yīng)使用可行的方法進行消毒滅活 制定有效的防鼠防蟲措施 當(dāng)存在傳染源時，應(yīng)在實驗室入口處貼上生物危險標志，注明致病因子名稱、研究室負責(zé)人

30、姓名及電話號碼,（一）一級生物安全防護實驗室,2實驗室生物安全設(shè)備和防護要求 操作生物安全一級的生物因子，一般無須生物安全柜等特殊防護裝置和設(shè)備 穿戴工作服,防止自身衣服被污染或弄臟 若手部皮膚有破損或皮疹應(yīng)戴上手套 操作中應(yīng)戴保護眼罩,（一）一級生物安全防護實驗室,3實驗室設(shè)施要求 實驗室應(yīng)該有控制進入的門 實驗室應(yīng)配備洗手池，并靠近出口處 實驗室地面應(yīng)易于清洗、防滑、不宜鋪設(shè)地毯 實驗臺面應(yīng)防水、耐熱、耐酸堿、耐有機溶劑及其他用于的消毒藥品 實驗室器材設(shè)施之間應(yīng)固定，并保持一定的間距便于清掃 如果實驗室有窗戶應(yīng)安裝紗窗,（二）二級生物安全防護實驗室,二級生物安全防護實驗室（BSL-2） 接

31、觸致病生物因子的實驗室工作人員要經(jīng)過特殊培訓(xùn) 在資深工作人員的指導(dǎo)下工作,（二）二級生物安全防護實驗室,1標準的微生物操作規(guī)程同BSL-1，特殊安全操作規(guī)程 1）在開展傳染病原體操作時，實驗室負責(zé)人應(yīng)禁止或限制其他人員進入 2）只有那些明確病原體潛在危險性并符合特殊要求（如經(jīng)過免疫接種）的人員才能進入實驗室 3）實驗室入口處貼上生物危害標志，在實驗室內(nèi)必須佩戴的個人防護設(shè)施 4）實驗室人員接受適當(dāng)與實驗有關(guān)的免疫接種或檢測（如乙型肝炎病毒疫苗或卡介苗皮試） 5）必要時對實驗室或其他高危人員進行基準血清樣本收集并保存 6）標準操作規(guī)程或生物安全手冊中應(yīng)包括生物安全程序,（二）二級生物安全防護實驗

32、室,1標準的微生物操作規(guī)程 7）工作人員要每年要接受1次最新知識的培訓(xùn)。 8）對于污染的銳利器具，要嚴格遵守以下規(guī)定： 針、注射器及其他銳器應(yīng)限制在實驗室內(nèi)使用；可用其他器具替代操作 注射和吸取感染性物質(zhì)時要用一次性注射器；用過的針頭不得彎曲、剪斷、折斷、直接置于堅壁容器中 適當(dāng)時使用帶針頭套的注射器、無針頭注射器和其他安全裝置 禁止直接用手處理破碎的玻璃器具，必須用其他工具（如刷子、簸箕、夾子或鑷子等）處理，盛裝污染的針頭、銳器、破碎玻璃的容器在丟棄前需進行消毒處理,（二）二級生物安全防護實驗室,1標準的微生物操作規(guī)程 9）實驗室設(shè)備和工作臺面在進行完感染性物質(zhì)的操作后進行常規(guī)消毒，污染的設(shè)

33、備必須根據(jù)相應(yīng)規(guī)定進行消毒 10）培養(yǎng)物、組織、體液樣本或具潛在感染性的廢物必須放在密閉、防漏的容器內(nèi)，防止發(fā)生泄漏）發(fā)生溢出事故造成感染性物質(zhì)擴散時，應(yīng)立即報告實驗室負責(zé)人，要進行適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)評估、監(jiān)測以及妥善處理，并保留書面記錄 12）與實驗無關(guān)的動物不允許進入實驗室,（二）二級生物安全防護實驗室,2實驗室生物安全設(shè)備和防護要求 二級生物安全柜或個人防護裝備或物理防護 可能產(chǎn)生感染性氣溶膠或飛濺物的實驗過程, 處理高濃度或大體積的感染性生物，密封的轉(zhuǎn)頭或離心管,可以在開放的實驗室離心 生物安全柜外操作感染性微生物時,要佩戴面目防護裝置 要穿著專用的工作服等防護服,在離開時必須脫下 當(dāng)手可能接

34、觸到有潛在感染性的物質(zhì)、污染的表面或設(shè)備時,必須戴手套。處理后的手套不能再進行沖洗、使用或接觸“干凈”的表面(鍵盤、電話等),脫下手套后立即洗手,（,（二）二級生物安全防護實驗室,3實驗室設(shè)施要求 實驗室門應(yīng)帶鎖 應(yīng)配備各種消毒設(shè)施，如高壓滅菌裝置、化學(xué)消毒裝置等 新建實驗室選址應(yīng)遠離公共場所 生物安全柜要放在遠離門、開放的窗戶、走動比較頻繁的實驗室區(qū)域以及其他具有潛在破壞性的設(shè)備處,以維持生物安全柜的氣流參數(shù),（三）三級生物安全防護實驗室（BSL-3）,1操作規(guī)程 標準的微生物安全操作規(guī)程同BSL-2 特殊安全操作規(guī)程，在BSL-2特殊安全操作規(guī)程的基礎(chǔ)上，對實驗室設(shè)備和工作臺面消毒、銳器的

35、處理、生物安全柜的應(yīng)用、廢棄物的處理等有一些特殊的要求,（三）三級生物安全防護實驗室,2實驗室生物安全設(shè)備和防護要求 進入實驗室時應(yīng)穿防護服，操作完畢必須脫下工作服 涉及感染性材料的操作均應(yīng)在級或級生物安全柜中進行，當(dāng)不得不在生物安全柜外進行時，必須采用適當(dāng)?shù)膫€體綜合防護裝置和物理防擴散設(shè)備 在進行感染性實驗操作時，必須使用面部防護設(shè)備和呼吸保護裝置 在實驗室中必須配備有效的消毒劑、眼部清洗劑或生理鹽水，可配備應(yīng)急藥品,（三）三級生物安全防護實驗室,3實驗室設(shè)施要求 在BSL-2實驗室的設(shè)施基礎(chǔ)上 實驗室應(yīng)單獨隔離區(qū)域，禁止隨便進入，經(jīng)過兩道自動門 洗手池為手免接觸式或腳踏式或肘動式或全自動式

36、，下水必須經(jīng)過消毒處理 應(yīng)設(shè)置緩沖區(qū)，緩沖區(qū)的面積不宜超過實驗室面積的1/8 實驗室應(yīng)密閉，所有的門窗需關(guān)閉和密封，無縫隙、表面應(yīng)光滑防水、耐腐蝕 在實驗室內(nèi)應(yīng)備有對實驗廢棄物進行消毒處理的措施 應(yīng)安裝管道式廢氣排放系統(tǒng) 建議在實驗室的入口處設(shè)置可視的監(jiān)測系統(tǒng),（四）四級生物安全防護實驗室（BSL-4）,在BSL-3技術(shù)規(guī)范的基礎(chǔ)上更為嚴格 實驗人員和實驗材料進出實驗室有特殊的要求 實驗室入口應(yīng)安裝上鎖的安全門 所有進入實驗室的人員都要簽名登記日期和時間 實驗人員入室前應(yīng)更換衣服，只能經(jīng)淋浴間和更衣室進出實驗室，每次離開實驗室前都應(yīng)進行消毒性淋浴 實驗材料和用品應(yīng)通過雙層門的高壓滅菌倉、熏蒸消

37、毒倉或氣體閘門送入，所有操作必須級生物安全柜中進行 任何未經(jīng)高壓或熏蒸消毒的物質(zhì)不得轉(zhuǎn)移出實驗室,返回節(jié)目錄,五、臨床實驗室的消毒與滅菌,（一）常用的消毒滅菌方法 （二）化學(xué)消毒 （三） 臨床實驗室消毒措施 （四）焚燒,（一）常用的消毒滅菌方法,1物理的消毒滅菌方法 用物理因素殺菌或清除病原微生物及其他有害微生物，稱為物理消毒滅菌法。 （1）熱力滅菌法（heat sterilization） 濕熱滅菌法：濕熱滅菌法是最常用的滅菌法 其殺菌機制：在濕熱條件下蛋白質(zhì)吸收水分容易變性或凝固，水分子的穿透力比空氣大，更易均勻傳遞熱能，蒸汽有潛熱存在。所以該法的滅菌效率比干熱滅菌法高。主要包括：高壓蒸氣

38、滅菌法、間歇蒸氣滅菌法、流通蒸氣消毒法、煮沸法、巴氏消毒法,（一）常用的消毒滅菌方法,1物理的消毒滅菌方法 干熱滅菌法：其機制是高溫能使菌體蛋白分子變性及細胞質(zhì)濃縮，使新陳代謝受到障礙而死亡；可殺死一切微生物，包括芽胞菌，還可以破壞熱原質(zhì) （2）輻射殺菌法（radiation sterilization）：通過紫外線照射和射線的高能量電子束，使菌體蛋白發(fā)生光解、變性、核酸酶被破壞。主要方法有：紫外線法、電離輻射法、微波法,（一）常用的消毒滅菌方法,（3）超聲波殺菌法（ultrasonic）：超聲波的滅菌機制是利用其通過水時產(chǎn)生的空（腔）化作用，從而造成細菌的崩破與裂解，革蘭陰性菌對其尤為敏感

39、常與其他方法合用，起到增效作用。 （4）過濾除菌法（filtration）：采用濾器通過物理阻留的方法將液體或空氣中的細菌除去的方法，以達到無菌目的 主要用于不耐高溫滅菌的血清、毒素、抗生素、藥液和空氣除菌，不能去除病毒、支原體和L型細菌,（一）常用的消毒滅菌方法,（二）化學(xué)消毒 化學(xué)消毒是指用化學(xué)藥物作用于微生物和病原體，使其蛋白質(zhì)變性，失去正常功能而死亡 具有殺菌作用的化學(xué)藥物稱為化學(xué)消毒劑，具有抑制微生物生長繁殖的藥物稱為防腐劑 主要方法有：浸泡法、擦拭法、熏蒸法、噴霧法，環(huán)氧乙烷氣體密閉消毒法 適用于不耐高溫的物品，如銳利器械（如刀、剪刀、縫針等）、內(nèi)鏡、塑料導(dǎo)管、光學(xué)儀器及皮膚、黏膜

40、，病人的分泌物、排泄物、實驗室空氣等均可采用此法,（二）化學(xué)消毒,各種消毒劑可按照其作用效力分為三類： 高效消毒劑：甲醛、戊二醛、過氧乙酸、環(huán)氧乙烷、有機汞化合物等，可以殺滅包括細菌繁殖體、芽孢、真菌、病毒在內(nèi)一切微生物，可用作滅菌劑 中效消毒劑：有乙醇、酚類、碘、含氯消毒劑等，可殺滅細菌芽孢以外的其他各種微生物 低效消毒劑：包括新潔爾滅、洗必泰等，不能殺滅細菌芽孢、結(jié)核桿菌和親水類病毒，可殺滅結(jié)核桿菌以外的其他細菌繁殖體、真菌和親脂類病毒,(三) 臨床實驗室消毒措施,臨床實驗室分清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū) 目前實驗室一般使用含氯消毒劑進行消毒 1清潔區(qū) 辦公室、盥洗室、休息室、培養(yǎng)基室等 每天

41、開窗通風(fēng)換氣，擦拭桌面、地面。每周用消毒液500mg/L有效氯擦拭。 2半污染區(qū) 包括緩沖間、更衣室及衛(wèi)生通道等區(qū)域，可能存在致病菌污染 空氣消毒常采用紫外燈照射消毒、空氣凈化器消毒 門窗、桌面等物體表面用500mg/L有效氯擦拭消毒 工作用鞋用500mg/L有效氯擦拭，工作衣、隔離衣通常由醫(yī)院洗衣房統(tǒng)一消毒處理,(三) 臨床實驗室消毒措施,3污染區(qū) 包括實驗室樣本收集區(qū)、處理區(qū)、培養(yǎng)區(qū)、鑒定藥敏區(qū)和廢棄物處理區(qū)域等。 （1）空氣消毒用紫外燈照射消毒、空氣凈化器消毒。 （2）手消毒常用250mg/L有效氯或?qū)Ｓ孟词忠合?（3）門窗、桌面、貴重儀器設(shè)備等物體表面消毒需用500mg/L有效氯擦拭

42、 （4）被樣品污染的表面消毒用1000mg/L有效氯消毒30min60min 被病毒和結(jié)核桿菌污染表面消毒要用2000mg/L有效氯消毒30min,（四）焚 燒,在臨床實驗室生物安全防護工作中，焚燒環(huán)節(jié)是醫(yī)療廢棄物消毒的終末環(huán)節(jié) 在處理那些經(jīng)過或事先未經(jīng)清除污染的動物尸體以及解剖組織或其他實驗室廢棄物時，焚燒是一種有效的方法 但要在指定地點，應(yīng)符合有關(guān)規(guī)定 一般交由廢棄物處理部門完成,返回節(jié)目錄,六、臨床實驗室應(yīng)急事故處理,（一）刺傷、切割傷或擦傷 （二）潛在感染性物質(zhì)的食入 （三）潛在危險性氣溶膠的釋放（柜外） （四）容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出 （五）未裝可封閉離心桶的離心機內(nèi)盛有潛在感染性

43、物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂 （六）在可封閉的離心桶內(nèi)離心管發(fā)生破裂 （七）火災(zāi)和自然災(zāi)害 （八）緊急救援、聯(lián)系對象 （九）急救裝備,（一）刺傷、切割傷或擦傷,1受傷人員應(yīng)當(dāng)脫下防護服，清洗雙手和受傷部位使用適當(dāng)?shù)钠つw消毒劑，必要時進行醫(yī)學(xué)處理 2要記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并應(yīng)保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄,（二）潛在感染性物質(zhì)的食入,應(yīng)脫下受害人的防護服，并進行醫(yī)學(xué)處理 要報告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細節(jié) 并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄,（三）潛在危險性氣溶膠的釋放,1所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，任何暴露人員都應(yīng)接受醫(yī)學(xué)咨詢 2應(yīng)當(dāng)立即通知實驗室負責(zé)人和生物安全員 3為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，在

44、一定時間內(nèi)（例如1h內(nèi)）嚴禁人員入內(nèi)。如果實驗室沒有中央通風(fēng)系統(tǒng)，則應(yīng)推遲進入實驗室（例如24h） 4應(yīng)張貼“禁止進入”的標志，過了相應(yīng)時間后，在生物安全員的指導(dǎo)下來清除污染 5應(yīng)穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o服和呼吸保護裝備,（四）容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出,1應(yīng)當(dāng)立即用布或紙巾覆蓋受感染性物質(zhì)污染或受感染物質(zhì)溢灑的破碎物品。在上面倒上消毒劑，并使其作用適當(dāng)時間。 2然后將布、紙巾以及破碎物品清理；玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理。 3用消毒劑擦拭污染區(qū)域。如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)當(dāng)對其進行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡。用于清理的布、紙巾和抹布等應(yīng)當(dāng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。 4所有這些操作過程中都應(yīng)戴手套。如

45、果實驗表格或其他打印或手寫材料被污染，應(yīng)將這信息復(fù)制，并將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。,（五）未裝封閉離心桶感染性物質(zhì)離心管破裂,1如果機器正在運行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應(yīng)關(guān)閉機器電源，讓機器密閉30min使氣溶膠沉積。 2如果機器停止后發(fā)現(xiàn)破裂，應(yīng)立即將蓋子蓋上，并密閉30min。 3發(fā)生上述兩種情況時都應(yīng)通知生物安全員。隨后的所有操作都應(yīng)戴結(jié)實的手套（如厚橡膠手套），必要時可在外面戴適當(dāng)?shù)囊淮涡允痔住?4當(dāng)清理玻璃碎片時應(yīng)當(dāng)使用鑷子，或用鑷子夾著棉花來進行。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放在無腐蝕性的、已知對相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)。未破損的帶蓋離心

46、管應(yīng)放在另一個有消毒劑的容器中，然后回收。 5離心機內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑擦拭，并再次擦拭，然后用水沖洗并干燥。 6清理時所使用的全部材料都應(yīng)按感染性廢棄物處理。,（五）未裝封閉離心桶感染性物質(zhì)離心管破裂,（六）在可封閉的離心桶內(nèi)破裂,1所有密封離心桶都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)裝卸。 2如果懷疑在安全杯內(nèi)發(fā)生破損，應(yīng)該松開安全杯蓋子并將離心桶高壓滅菌。安全杯也可以采用化學(xué)消毒的方法處理。,（七）火災(zāi)和自然災(zāi)害,應(yīng)事先告知消防人員和其他服務(wù)人員房間有潛在的感染性物質(zhì)。 要參觀實驗室，讓他們熟悉實驗室的布局和設(shè)備。 發(fā)生自然災(zāi)害時，應(yīng)就實驗室建筑內(nèi)和（或）附近建筑物的潛在危險向當(dāng)?shù)鼗驀揖o急救助人員

47、提出警告 只有在受過訓(xùn)練的實驗室工作人員的陪同下，他們才能進入這些地區(qū) 感染性物質(zhì)應(yīng)收集在防漏的盒子內(nèi)或結(jié)實的一次性袋子中。由生物安全人員依據(jù)當(dāng)?shù)氐囊?guī)定決定繼續(xù)利用或是最終丟棄,（八）緊急救援、聯(lián)系對象,應(yīng)在實驗室內(nèi)顯著位置張貼以下電話號碼及地址： 實驗室、研究所所長、實驗室負責(zé)人 生物安全員、消防隊 醫(yī)院急救機構(gòu)醫(yī)務(wù)人員 水、氣和電的維修部門 工程技術(shù)人員、警察。,（九）急救裝備,1急救箱，包括常用的和特殊的解毒劑。 2合適的滅火器和滅火毯。 3有效防護化學(xué)物質(zhì)和顆粒的濾毒罐的全面罩式防毒面具。 4全套防護服。 5房間消毒設(shè)備，如噴霧器和甲醛熏蒸器等。 6工具，如錘子、斧子、扳手、螺絲刀、梯

48、子和繩子。 7擔(dān)架。 8劃分危險區(qū)域界限的器材和警告標示。,返回章目錄,第五節(jié) 實驗用菌種及廢棄物處理,一、菌（毒）種的保藏與管理 二、臨床實驗室廢棄物處理,一、菌（毒）種的保藏與管理,（1）生物安全管理部門要建立菌（毒）種管理監(jiān)督程序。 （2）菌毒種儲藏環(huán)境是要合乎規(guī)范并具備相應(yīng)等級菌毒種保藏的基本設(shè)備和生物安全保障設(shè)施。 （3）菌（毒）種儲藏設(shè)施要求雙人雙鎖。 （4）保藏的菌種，要有詳細的背景和相關(guān)資料。 （5）菌（毒）種分離是要有標準的操作細則，并有相應(yīng)的原始記錄。 （6）進行II級生物危害微生物實驗的原始記錄自菌種開啟（分離）到菌種保藏或銷毀，可溯源。,（7）實驗記錄要有實驗人、復(fù)核人、實驗日期，實驗室負責(zé)人要對記錄內(nèi)容核查。 （8）銷毀記錄要有包括銷毀方式、銷毀物品明細、滅菌溫度與時間。 （9）要有菌毒種滅活方法驗證程序，驗證原始記錄。 （10）要有用于菌毒種或培養(yǎng)物銷毀的高壓鍋檢測報告。 （11）實驗室廢棄物要使用專用包裝物、容器，要有明顯的警示標識和警示說明。 （12）具有處理菌毒種或培養(yǎng)物泄漏所需消毒制劑及其他物品。,一、菌（毒）種的保藏與管理,返回節(jié)目錄,二、臨床實驗室廢棄物處理,（一）廢棄物的含義 指廢物（Waste）是指使用者不再使用的一切物質(zhì) 即將要丟棄的所有物品 醫(yī)療廢棄物是指醫(yī)療衛(wèi)生