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文檔簡介

1、交叉配血(聚凝胺法、微柱凝膠法),臨床血液教研室,交叉配血,交叉配血聚凝胺法:,原理: 將紅細胞和血清放置在低離子介質中孵育,可促進抗體和紅細胞膜血型抗原結合,再加入聚凝胺促進紅細胞非特異性凝集。離心后加入重懸液(電荷中和 ),正常紅細胞的凝集解散,而抗體抗原結合引起的紅細胞凝集仍然存在。,操作步驟:,抽取受血者靜脈血34ml,枸櫞酸鈉抗凝,以生理鹽水洗滌受血者紅細胞3次,配成3% 紅細胞懸液,同樣方法處理獻血者樣本; 取潔凈小試管2支,1支標記為主側管,另1支標為次側管; 主側管內加受血者血清2滴、獻血者紅細胞懸液1滴;次側管加獻血者血清2滴、受血者紅細胞懸液1滴; 每管各加LIM溶液0.6

2、ml,混勻,室溫孵育1min; 每管各加2滴聚凝胺溶液,混合后靜置15s; 1300g離心15s,傾去上清液; 輕輕搖動試管,目測細胞有無凝集,如無凝集,必須重做; 加入2滴重新懸浮液,并輕輕轉動試管混合,肉眼觀察結果,必要時用顯微鏡觀察結果。,結果判斷:,主側管和次側管內紅細胞凝集在1min散開,則為聚凝胺引起的非特異性凝集,表示受血者和獻血者配血相容。 如果主側管和/或次側管內紅細胞凝集不散開,則表明兩血不相容,獻血者血液不可輸注。,注意事項: 實驗結果必須在3分鐘內判讀 在冬天氣溫較低時,某些病人血清中含有冷凝集素而導致交叉配血假陽性;遇此現(xiàn)象可用37-40生理鹽水洗滌紅細胞并置37水溶

3、中輕輕搖動,觀察結果。,LIM:降低 溶液的離子強度,減少紅細胞周圍的陽離子云, 可促進抗體和紅細胞膜血型抗原結合。,聚凝胺:高價陽離子,中和紅細胞表面的負電荷,縮短細胞 間距,促進紅細胞非特異性凝集。,重懸液:電荷中和 。,微柱凝膠卡交叉配血試驗,原理: 將受血者、獻血者的血清和紅細胞,放置主側和次側管的反應室中,放置37孵育器中孵育,如果血清中存在針對紅細胞抗原的血型抗體(lgM型或IgG型)時,紅細胞發(fā)生凝集,離心后留在微柱的表面,為陽性;如果血清中不含有針對紅細胞膜上血型抗原的抗體,紅細胞下沉到微柱管的底部,為陰性。,操作步驟:,按照試劑說明配制好獻血者、受血者的紅細胞懸液以及分離血清。 主側:25ul 受血者血清 + 50ul 1%獻血者紅細胞,加入主側管反應室內; 次側: 25ul獻血者血清+ 50ul 1%受血者紅細胞,加入到次側管反應室內; 加樣后的試劑卡放置專用孵育器37孵育15min; 取出試劑卡,放置專用離心機1000g離心9min; 取出試劑卡,肉眼觀察結果。,結果判

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