實驗一血涂片及骨髓片的.ppt

1、血涂片及骨髓片的制備及瑞氏染色,一、目的,掌握血涂片、骨髓涂片的制作及染色技術(shù)。鑒別外周血中各種白細(xì)胞的形態(tài)特點及分類計數(shù)方法。,二、原理,瑞氏染液是由伊紅美蘭所組成的復(fù)合物，經(jīng)物理吸附及化學(xué)作用對細(xì)胞進(jìn)行染色。,三、材料,血針、玻片、酒精棉光學(xué)顯微鏡、香柏油、二甲苯、一次性采血針,四、方法, 血涂片的制作 采血：每組兩個同學(xué)，練習(xí)耳垂采血（包括消毒、扎針、擠壓、取血），用推片取血液一滴，于玻片右端，從其右側(cè)接觸血液，使之成40度角，均勻平穩(wěn)地向左側(cè)推進(jìn)，至血滴推盡為止，其厚度要適中，且有頭體尾之分。 待血片干后，滴加瑞氏染液數(shù)滴（蓋住血膜），靜置40 秒，加緩沖液等量混勻，染1020分鐘，用

2、水沖洗，干燥后鏡檢。 鏡檢計數(shù)：在血膜頭尾交界處，計數(shù)100個白細(xì)胞，并對其進(jìn)行分類。, 骨髓片的制備, 將臨床醫(yī)生所取骨髓至玻片高端（在準(zhǔn)備涂片時，將兩玻片傾斜放置），使過多血液流下。 蘸取骨髓適量（選擇骨髓小粒部分），以3045度角，用力推開，速度適宜。然后將玻片于空中揮動，使之干燥，以免細(xì)胞縮小或細(xì)胞皺縮。 骨髓片制備好后，用標(biāo)記筆在膜的頭部注明病人的姓名、取材部位及穿刺部位。,五、結(jié)果,桿狀核粒細(xì)胞(Stab Granulocyte) 細(xì)胞呈圓形，直徑1015um。 胞核狹長，彎曲呈帶狀，兩端鈍圓。核染色質(zhì)粗糙呈塊狀，染深紫紅色。 胞質(zhì)中含特異性顆粒的不同，也可分為中性、嗜酸性、嗜堿性

3、桿狀核粒細(xì)胞三種，顆粒特點同中幼粒細(xì)胞。,中性分葉核細(xì)胞 細(xì)胞呈圓形，直徑1015um。 胞核常分為25葉，以分3葉者多見，葉與葉之間有細(xì)絲狀相連或完全斷開，核染色質(zhì)濃集或呈小塊狀，染深紫紅色。 胞質(zhì)豐富，呈淡紅色，布滿細(xì)小紫紅色的中性顆粒。,嗜酸粒細(xì)胞 嗜酸粒細(xì)胞胞體直徑1116um， 胞核多分為近似對稱的兩葉。 胞質(zhì)中充密集粗大、大小均勻的桔紅色嗜酸性顆粒。,嗜堿性粒細(xì)胞 嗜堿性粒細(xì)胞胞體直徑10-12um 胞核分葉不明顯，或融合呈堆集狀。 胞質(zhì)中有稀疏的大小不一、分布不均、呈紫黑色的嗜堿性顆粒，顆粒常掩蓋在核上，致使核的輪廓和結(jié)構(gòu)模糊不清。,大淋巴細(xì)胞 呈圓形，直徑13-18um。 胞核

4、圓形或橢圓形，偏于一側(cè)或著邊。染色質(zhì)常質(zhì)密呈塊狀，排列均勻，深染呈深紫紅色。 胞質(zhì)豐富，呈透明天藍(lán)色，可有少量大而稀疏的嗜天青顆粒。,小淋巴細(xì)胞 呈圓形或橢圓形，直徑6-10um 胞核圓形或橢圓形，或有切跡，核著邊，染色質(zhì)粗糙致密，呈大塊狀，染深紫紅色。 胞質(zhì)量極少，僅在核的一側(cè)見到少量淡藍(lán)色胞質(zhì)，有時幾乎不見而似裸核，一般無顆粒。,單核細(xì)胞(Monocyte),圓形或不規(guī)則形，直徑12-20um，邊緣常見偽足突出。 胞核形狀不規(guī)則，常呈腎形、馬蹄形、筆架形、“S”形等，并有明顯扭曲折疊。染色質(zhì)疏松細(xì)致，呈淡紫紅色絲網(wǎng)狀。 胞質(zhì)豐富，呈淡灰藍(lán)色或淡粉紅色，可見多數(shù)細(xì)小、分布均勻、細(xì)塵樣淡紫紅色顆粒。,血 小 板 直徑2-5um ，約為成熟紅細(xì)胞的1