p21ras基因及其與鼻咽癌關(guān)系的研究進(jìn)展(1)

P21rasP21ras 基因及其與鼻咽癌關(guān)系的研究進(jìn)基因及其與鼻咽癌關(guān)系的研究進(jìn) 展展(1)(1) 關(guān)鍵詞基因鼻咽癌研究進(jìn)展 基因結(jié)構(gòu)1Ras 癌基因是應(yīng)用腫瘤細(xì)胞基因組轉(zhuǎn)導(dǎo)小鼠成 纖維細(xì)胞并使其在裸小鼠體內(nèi)形成瘤灶篩選克隆的癌基因 家族之一。此基因定位于人染色體上，基因全長 85kb，含 3 個(gè)長度分別為 68bp、450bp、1600bp 的外顯子，翻譯起始 信號位于第二外顯子，其 cDNA 長約，編碼 Mr 為 21x103、 含 495 個(gè)氨基酸的蛋白，稱為 p21ras，是一種核蛋白。在 哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，ras 癌基因家族有三個(gè)結(jié)構(gòu)類似的成員， 即 Ha-ras、Ki-ras 和 N-ras。三種 Ras 蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu) 的氨基酸末端序列是高度一致的，其區(qū)別主要是羧基末端 的 20 個(gè)氨基酸殘基序列。的功能在細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中起 重要作用。P21ras 定位于細(xì)胞膜是其被激活的根本前提； 核苷酸交換蛋白（GEFs）促使 P21ras 同 GDP 分離而轉(zhuǎn)同 GTP 結(jié)合，形成 P21ras-GTP 復(fù)合體，從而激活 P21ras，使 細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)開放。P21ras 具有 GTP 酶活性，可水 解 GTP 為 GDP，p21ras 與 GDP 結(jié)合而失活，使細(xì)胞內(nèi)信號 轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)處于關(guān)閉狀態(tài)?；蛲蛔兪前┗蚣せ畹囊粋€(gè)重 要機(jī)制。Ras 基因點(diǎn)突變后 p21ras 氨基端的甘氨酸被其他 氨基酸取代而喪失 a 螺旋，使 p21ras 的 GTP 酶活性減弱， 水解 GTP 為 GDP 作用受抑制，p21ras 持續(xù)與 GTP 結(jié)合，使 細(xì)胞無休止地分裂和增殖。還發(fā)現(xiàn) p21ras 的 GTP 酶活性受 兩類調(diào)控蛋白的調(diào)控，一類為鳥苷酸釋放蛋白（GNRP） ，能 使 p21rasGTP 復(fù)合物釋出 GTP；另一類為 GTP 酶激活蛋白 （GAP） ，后者為 Mr120x103 胞質(zhì)蛋白，當(dāng)其與 p21ras 的氨 基端結(jié)合后，可升高 p21ras 的 GTP 酶活性 100 倍，加強(qiáng) GTP 水解為 GDP，使 p21rasGTP 變?yōu)?p21ras-GDP，節(jié)制細(xì) 胞分裂信息的傳入。GAP 對已發(fā)生點(diǎn)突變的 p21ras 則無此 作用，因 ras 基因點(diǎn)突變熱點(diǎn)第 12、13 和 61 位編碼子正 是 GAP 與 p21ras 的作用點(diǎn)。由于 p21ras 與 GTP 穩(wěn)定地結(jié) 合，使細(xì)胞持續(xù)增殖，導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化和惡變。癌基因參與 細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)2。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí),H-ras 癌基因能破壞細(xì) 胞染色體的穩(wěn)定性和細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)的功能。Ras 對 G1 細(xì) 胞周期素具有抑制作用，抑制細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞分裂周期。蛋 白的突變與激活能使某些類型的細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。同時(shí)， 在 Ras 蛋白作用機(jī)制上游的某些蛋白質(zhì)，也是通過對 ras 基因表達(dá)的作用，使細(xì)胞進(jìn)行惡性轉(zhuǎn)化的，其機(jī)制尚未明 確。癌基因與細(xì)胞程序性死亡的調(diào)節(jié)有關(guān)。實(shí)驗(yàn)表明，將 一種顯性負(fù)調(diào)節(jié) V-H-RAS 突變體（116Y）基因?qū)氲饺寺?性髓性白血病細(xì)胞系 K562 細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，可以誘導(dǎo)細(xì)胞 發(fā)生程序性死亡。 與腫瘤 研究發(fā)現(xiàn)，腎細(xì)胞癌、結(jié)腸癌、卵巢癌等都有 P21ras 基因 的表達(dá)3。 王翠蓮等4報(bào)道小腸癌的 P21ras 陽性率為%，雷訊5等 報(bào)道鼻咽癌 的 P21ras 陽性率為%，說明 P21ras 表達(dá)異常與腫瘤的發(fā)生、 發(fā)展有關(guān)。但 Land 等6提出 Ras 癌基因的活化及致癌作用，必須與其他 癌基因的協(xié)同作用， 單個(gè) Ras 基因突變激活后，即使其基因產(chǎn)物達(dá)到致癌水平 仍不能致癌。在對大腸腺 瘤及腺癌的研究中，k-ras 基因突變率檢測結(jié)果比 P53 基因 突變率高，引起 P21 蛋白 過度表達(dá)，癌旁粘膜、腺瘤都有不同程度的突變和蛋白表 達(dá)，說明 ras 基因突變及 P21 蛋白表達(dá)是大腸癌發(fā)生的早期事件7 。在腺瘤向腺癌 轉(zhuǎn)化過程中起作用， 伴 ras 基因突變的腺癌有較大的惡變傾向8 。大腸癌存 在 k-ras、P53 兩種基因 突變，提示在大腸癌發(fā)生過程中存在突變型 ras 基因與突 變型 P53 基因的協(xié)同作用。 同時(shí)，在大腸癌發(fā)生過程中可能還存在其它癌基因和抑癌 基因。Vogelstein9 也提出 Ras 癌基因突變激活及多個(gè)抑癌基因失活（如 P53 等）與大腸癌的發(fā)生有密切 關(guān)系，尤其是抑癌基因的失活更為重要。P21ras 的過表達(dá) 與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系有多篇 報(bào)道。如 P21Ras 過表達(dá)與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為 81%，而 P21Ras 陽性的為% ，(P） ，提示 P21Ras 過表達(dá)與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān) 10。 與鼻咽癌 研究顯示 P21Ras 癌基因主要在鼻咽癌形成早期起作用，鼻 咽癌約 7080% 有 P21Ras 蛋白的表達(dá)，90%左右有 ras 基因的突變，但與 組織學(xué)類型、分化程度及 預(yù)后無關(guān)11。PorterMJ12等通過檢測 41 例石蠟包埋標(biāo) 本檢測鼻咽癌中 P2 1Ras 癌基因的表達(dá)，也認(rèn)為 P21Ras 癌基因蛋白在鼻咽癌組 織中有較高的陽性表 達(dá)，陽性率為 76%，但未發(fā)現(xiàn)其與鼻咽癌患者年齡、性別、 家族史、吸煙史及腫瘤 分期和五年生存率有關(guān)；而云徑平等13報(bào)道 P21Ras 過表 達(dá)與有無伴頸淋巴結(jié) 轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，與鼻咽癌分化程度呈負(fù)相關(guān)，預(yù)示 P21Ras 可作為判斷鼻咽癌預(yù)后 的標(biāo)記之一。另有報(bào)道14P21Ras 表達(dá)率與鼻咽癌臨床分 期顯著相關(guān)，但與頸 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無顯著關(guān)系。同時(shí)檢測 P21ras、P53、CerbB-2 表達(dá)比單獨(dú)檢其中之 一，可能更有助于估計(jì)鼻咽癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移潛能，所以， 關(guān)于 P21ras 與鼻咽癌的 關(guān)系有待進(jìn)一步研究;此外，體外研究表明15,突變的 ras 基因可上調(diào)血管內(nèi)皮 生長因子的表達(dá)。在人體，它們之間關(guān)系如何亦有待進(jìn)一 步研究。 參考文獻(xiàn) 1.朱世能，陸世倫.腫瘤基礎(chǔ)理論.128-129. 2.成軍.腫瘤相關(guān)基因.87-88. ,1993,7:1572-1583. 4.王翠蓮,等.長治醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào).1998,12:101-103. 5.雷訊,等.臨床