果蠅形態(tài)、生活史.ppt

No3 Experiment for genetics,果蠅形態(tài)、生活史,一、實驗?zāi)康?了解果蠅的生活習性，掌握果蠅飼養(yǎng)管理的方法，鑒定果蠅的雌雄性別和突變性狀,. short generation time for a eukaryotic organisms (two weeks) ，large offsprings availability of many mutants controlling specific phenotypes large chromosomes with well-defined cytogenetic system survives well in the lab and mating are easily performed currently, the best organism to study developmental genetics transposable elements can be manipulated to clone genes can be genetically engineered,用果蠅做實驗材料有許多優(yōu)點：,果蠅對神經(jīng)系統(tǒng)研究的貢獻,果蠅的整個中樞神經(jīng)系統(tǒng)大約分布了300,000個神經(jīng)元，按照神經(jīng)元所處位置又分為食管上神經(jīng)節(jié)（supraoesophageal ganglion）、食管下神經(jīng)節(jié)（suboesophageal ganglion）以及胸腹神經(jīng)節(jié)（thorax-abdominal ganglia）三部分，前兩者又統(tǒng)稱頭節(jié)。除視葉（optic lobe）以外的食管上神經(jīng)節(jié)及食管下神經(jīng)節(jié)組成了通常意義上的果蠅的腦中央腦（central brain），其中包含了大約50,000個神經(jīng)元。,果蠅的神經(jīng)系統(tǒng)相對于脊椎動物等其它物種來說相對簡單，因而對其生理、生化及解剖的研究相對簡單易行。但是它的神經(jīng)系統(tǒng)又具有一定的復雜性，使得果蠅可以完成覓食、交配、求偶、學習記憶以及晝夜節(jié)律等復雜行為。果蠅無論在蛋白質(zhì)分子基礎(chǔ)，還是信號傳導通路；無論是神經(jīng)編碼方式，還是突觸傳遞機制，以及神經(jīng)疾病的發(fā)生和病癥上，都與哺乳動物有高度的相似性。因此，以果蠅為模型，研究神經(jīng)系統(tǒng)的一些基本問題，是一個簡捷而有效的途徑。,Fru (fruitless),黑腹（普通）果蠅（Drosophila melanogaster）為雙翅目昆蟲，果蠅屬，具完全變態(tài)。3000（513）個種或亞種，2n=122n=6家蠅(Musca domestica domestica.雙翅目(Diptera)蠅科(Muscidae),雙翅目：一對翅膀+一對平衡棒,1、生長迅速 每10-12天左右即可完成一個世代；,生活史 果蠅的生活史包括卵、幼蟲、蛹、成蟲四個連續(xù)的發(fā)育階段（圖3-1）。 卵：卵白色，長橢圓形，長約0.5mm，在背面的前端伸出一對觸絲，它能使卵附著在柔軟的食物上，不至于深陷到食物中去。 幼蟲：幼蟲從卵中孵化出來后，經(jīng)過兩次蛻皮到第三齡期，體長可達45mm。在解剖鏡下觀察可見一端稍尖為頭部，并且有一黑點即口器；稍后有一對半透明的唾腺，每條唾腺前有一條唾腺管向前延伸，然后會合成一條導管通向消化道。神經(jīng)節(jié)位于消化道前端的上方。 蛹：幼蟲生活七天左右即化蛹，化蛹前從培養(yǎng)基中爬出附在瓶壁上，漸次形成一個棱形的蛹。起初顏色淡黃、柔軟，以后逐漸硬化，變?yōu)樯詈稚?，這就顯示即將羽化了。,圖3-1 果蠅生活史 1卵 2一齡幼蟲 3二齡幼蟲 4三齡幼蟲 5蛹 6成蟲(雄) 7成蟲(雌),4-5天,1天,1天,1天,3-4天,成蟲：剛羽化出的果蠅，身體狹長，翅還沒有展開，身體較白嫩，此時野生型體色與黑檀體體色都是一樣的，沒有多大區(qū)別。不久，蠅體變?yōu)榇侄虣E圓形，雙翅展開，體色加深，如野生型果蠅的體色成為灰褐色，突變型黑檀體果蠅的體色成為烏黑色。 果蠅生活周期的長短與溫度關(guān)系密切，30以上時果蠅則將不育且瀕臨死亡，低溫則使它的生活周期延長，同時生活力也降低。培養(yǎng)果蠅的 最適溫度是2025。,2、繁殖能力強 每只受精的雌蠅可以產(chǎn)卵500個左右，因此在短時間內(nèi)即可獲得大量的子代，便于遺傳分析； 3、飼養(yǎng)容易 以玉米粉等做飼料就可以生長繁殖； 4、突變性狀多 達400以上，且多數(shù)是形態(tài)變異，容易觀察。,三、實驗材料 野生型果蠅及幾種常見的突變型果蠅,四、實驗內(nèi)容和步驟 （一）果蠅麻醉 檢查果蠅或進行果蠅雜交時，應(yīng)先進行麻醉，使其保持安靜狀態(tài)。果蠅具有以下一些特性：一是具有趨光性，二是喜歡向上爬。掌握了這些特性，我們就能很方便地將果蠅從培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到麻醉瓶中。 向麻醉瓶中滴入幾滴乙醚，約半分鐘，果蠅即被麻醉。 注意不能麻醉過度，如果果蠅的翅膀與身體呈45o角翹起，表明麻醉過度，不能復蘇而死亡。 麻醉后的果蠅放在濾紙上方便觀察。檢查后的果蠅可以放回原培養(yǎng)瓶中，也可以進行處死。,（二）果蠅雌雄性別的鑒別 果蠅有雌雄之分，幼蟲期較難區(qū)別，成蟲期則較易區(qū)別（圖3-2）。,雌 雄,雌雄果蠅的比較： 1體型 雌果蠅體型較大，雄果蠅較??； 2腹部末端 雌性腹部橢圓，末端稍尖，雄性末端鈍圓； 3腹部背面 雌性有明顯5條黑色條紋，雄性有三條，前兩條細，后一條寬，延至腹面，肉眼看其腹部末端呈現(xiàn)一明顯黑點。 4腹部腹面 雌性有較明顯的6個腹片，雄性有4個腹片。 5性梳 雄性第一對足的跗節(jié)基部外側(cè)有黑色鬃毛狀性梳（圖3-3），雌性則無。 性梳的有無，是鑒別雌雄性果蠅的明顯標志之一。,腹部體節(jié)數(shù)目： 雌果蠅6節(jié)，腹部底部為產(chǎn)卵管，呈現(xiàn)圓錐狀凸出。,腹部體節(jié)數(shù)目： 雄果蠅4節(jié)，腹部底部為交尾器，呈現(xiàn)黑色圓形外觀。,圖3-3 左：雄性果蠅的左前足 中：跗節(jié)基部的性梳 右：雌果蠅無性梳 C、基節(jié) TR、轉(zhuǎn)節(jié) F、腿節(jié) TI、脛節(jié) TA、跗節(jié),（三）幾種常見的突變性狀 實驗中常用的果蠅突變性狀多可用肉眼鑒別，有一些則可借助于解剖鏡辨認，這些性狀一般都是明顯而穩(wěn)定的。,果蠅常見突變性狀,突變型：黃體（y）,突變型：白眼（w）,突變型：朱紅眼（v）,突變型：墨黑眼（se）,突變型：棒眼（B）,突變型：小翅（m）,突變型：卷翅（Cy）,突變型：殘翅（vg）,突變型：短翅（dp）,突變型：無橫隔脈（cv）,突變型：短剛毛（Sb）,突變型：叉毛（f）,（四）果蠅培養(yǎng)基 果蠅在水果攤或果園里常可見到，但它并不是以水果為食，而是采食生長在水果上的酵母菌，因此實驗室內(nèi)凡能發(fā)酵的基質(zhì)，均可作為果蠅的飼料。實驗室常用的培養(yǎng)基配制方法是： 玉米粉為主料： 300ml + 3g agar + 26g sucrose + 20g maize powder +2.8g yeast extract + 2ml acetic acid 50g banana 防止培養(yǎng)基長霉，加2ml丙酸作為防腐劑。,（五）原種培養(yǎng) 在作新的留種培養(yǎng)時，應(yīng)仔細檢查果蠅有沒有混雜，有沒有突變個體的產(chǎn)生。一般一瓶放兩對親本為宜。果蠅移入新瓶時，需將瓶子橫放，待果蠅清醒過來后再把培養(yǎng)瓶豎起。原種每24周換一次培養(yǎng)基，最好每一個品種分成兩套分別培養(yǎng)。標簽上標明品種名稱和日期，溫度控制在18左右。,原種果蠅培養(yǎng)常遇到的麻煩是培養(yǎng)基發(fā)霉。導致發(fā)霉的原因很多，用具沒有消毒，空氣污染，在接種時，果蠅掉在桌面上粘有污染源，又將果蠅