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文檔簡介

合作任務(wù)一:前情回顧,1、DNA重組技術(shù)的基本工具的名稱和作用 2、限制酶的特點 3、常見的基因載體,1、DNA重組技術(shù)的基本工具的名稱和作用,限制性核酸內(nèi)切酶 切割目的基因和基因載體 DNA連接酶 將目的基因與載體結(jié)合 基因進入受體細胞的載體 將目的基因送入受體細胞并復制,2、限制酶的特點,識別DNA分子的特定的核苷酸序列,并使特定部位的磷酸二酯鍵斷開,3、常見的基因載體,質(zhì)粒 噬菌體的衍生物、動植物病毒,合作任務(wù)二:新思考,1、限制酶的來源、作用部位、識別序列的特點、切割末端的特點 2、DNA連接酶的分類、特點 3、DNA連接酶與DNA聚合酶的區(qū)別 4、基因載體具備的條件及作用 5、繪制大腸桿菌質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)模式圖,1、限制酶的來源、常見種類、作用部位、識別序列的特點、切割末端的種類,來源:從原核生物中分離純化出來 常見種類:EcoRI限制酶 SmaI限制酶 作用部位:磷酸二酯鍵 識別序列的特點:由6個(4、5或8個)核苷酸組成,反向?qū)ΨQ重復排列 切割末端:黏性末端或平末端,2、DNA連接酶的分類、特點,分類:E.coliDAN連接酶 T4DNA連接酶 特點: E.coliDAN連接酶只能連接黏性末 端, T4DNA連接酶既能連接黏性末 端又能連接平末端,3、DNA連接酶與DNA聚合酶的區(qū)別,DNA連接酶連接DNA片段,不需要模板 DNA聚合酶需要模板,連接單個核苷酸,4、基因載體具備的條件及作用,1、有一個或多個限制酶切點,以便目的基因可以插入到載體上 2、在受體細胞中可以進行自我復制,或者整合到受體染色體DNA上進行復制,以便目的基因復制表達 3、有標記基因,以便重組DNA的鑒定和選擇 4、必須是安全的,不會對受體細

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