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第五部分 問答題1分子生物學(xué)的定義2分子生物學(xué)的基本原理3分子生物學(xué)研究的三大主要領(lǐng)域4分子生物學(xué)發(fā)展的三大支撐學(xué)科5核酸種類和分布6核苷酸的生物學(xué)功能7DNA 的一級結(jié)構(gòu)8DNA堿基組成的Chargaff規(guī)則9DNA的雙螺旋模型特點(diǎn)10DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定因素11DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)的意義12RNA的類別和生物學(xué)功能13生物基因組的通用組織形式 14病毒在解決基因組包裝時的兩種方案15核小體的結(jié)構(gòu)組成16組成型異染色質(zhì)的普遍特征17染色體作為遺傳物質(zhì)的特征18染色體存在所需的三個基本構(gòu)件19染色體的成分組成20原核生物基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)21真核生物基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)22基因組復(fù)制與細(xì)胞分裂的關(guān)系是什么,如何保證這一關(guān)系的存在22放射性自顯影法確定復(fù)制叉移動方向的基本原理23線性DNA復(fù)制時末端問題的提出依據(jù)24線性DNA復(fù)制時末端問題的解決方案25比較大腸桿菌DNA聚合酶 I、II、 III 的性質(zhì)26DNA突變的具體表現(xiàn)27突變產(chǎn)生的原因28DNA損傷修復(fù)的類型29中心法則的主要內(nèi)容30啟動子的作用特點(diǎn)31增強(qiáng)子的作用特點(diǎn) 32如何用實(shí)驗(yàn)確定啟動子邊界序列及關(guān)鍵序列元件中的保守序列33原核生物啟動子的兩個關(guān)鍵序列元件及其對轉(zhuǎn)錄的影響34RNA聚合酶與啟動子區(qū)如何識別35真核生物RNA聚合酶啟動子的關(guān)鍵序列元件及功能36大腸桿菌內(nèi)源性終止子的基本結(jié)構(gòu)特征37因子終止轉(zhuǎn)錄的機(jī)理38抗終止的兩種作用方式39原核生物與真核生物mRNA的特征比較40RNA酶促合成的基本特征41tRNA和rRNA被加工的實(shí)驗(yàn)證據(jù)42前體tRNA的加工43真核生物mRNA的加工、修飾44生物體內(nèi)主要內(nèi)含子的種類及其分布45對GU-AG型內(nèi)含子剪接所需的三個序列元件46真核生物mRNA穩(wěn)定性因素47遺傳密碼的破譯簡史48遺傳密碼的性質(zhì)49核糖體發(fā)揮生物學(xué)功能的5個基本部位50細(xì)菌中蛋白質(zhì)合成中的三種起始因子及功能51簡述肽鏈合成中肽鏈的延伸與核糖體A位、P位及E位的關(guān)系52原核生物和真核生物蛋白質(zhì)合成起始異同點(diǎn)分析53新生蛋白質(zhì)的加工內(nèi)容54信號肽的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)55信號肽與蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的關(guān)系56前導(dǎo)肽的一般特性57分子伴侶的生物學(xué)功能58蛋白質(zhì)有序降解的機(jī)理 59基因表達(dá)調(diào)控中DNA結(jié)構(gòu)的規(guī)律性變化60增強(qiáng)子的作用機(jī)制61轉(zhuǎn)錄因子的類型62反式作用因子中DNA識別或結(jié)合域具有的幾個典型結(jié)構(gòu)特征63試比較基因表達(dá)調(diào)控中誘導(dǎo)和阻遏的異同點(diǎn)64試比較正調(diào)控和負(fù)調(diào)控的異同點(diǎn)65試比較順式作用元件和反式作用因子的異同點(diǎn)66DNA甲基化抑制基因轉(zhuǎn)錄的機(jī)理67闡述原核生物的轉(zhuǎn)錄終止 68復(fù)制 DNA的聚合酶(DNA依賴的 DNA聚合酶)也有校正功能,解釋為什么RNA聚合酶沒有這種功能69討論原核生物基因表達(dá)的聚合作用反應(yīng)定向的重要性假如核糖體從3端到5端讀它的模板 mRNA的話,那么將會發(fā)生什么情況70概括細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄過程71. 概括典型原核生物啟動子的結(jié)構(gòu)和功能,并解釋什么是保守序列72轉(zhuǎn)錄如何在基因或基因組末端終止73 如何區(qū)分由啟動子起始轉(zhuǎn)錄的RNA片段與5端被加工過的RNA片段;74比較 Ecoli rRNA和 tRNA的轉(zhuǎn)錄和加工75區(qū)別可誘導(dǎo)和可阻遏的基因調(diào)控76衰減作用如何調(diào)控E. coli中色氨酸操縱子的表達(dá)77比較并指出細(xì)菌和真核生物RNA 翻譯機(jī)理的異同78什么是搖擺假說79指出E.coli和真核生物翻譯起始的不同80 Cohen于1973年構(gòu)建了三個重組體, pSC102, pSC105, pSC109請說明這三個重組體是如何獲得的?各說明了什么81基因克隆是如何使含有單個基因的 DNA片段得到純化的82如果你發(fā)現(xiàn)了一種新蛋白質(zhì),你將如何進(jìn)行下一步研究?請按先后順序列出基本方案83應(yīng)用生物技術(shù)創(chuàng)建作物新的種質(zhì)有哪些途徑和方法84分子標(biāo)記輔助選擇在作物育種中有那些重要作用?如何實(shí)施85說明真核生物前體 RNA加工的類別及機(jī)理86說明原核生物與真核生物轉(zhuǎn)錄元件(cis and trans)的特點(diǎn)87簡述人類基因組研究近年來的進(jìn)展88. 說明生物芯片技術(shù)的基本概念和可能的用途89. 如何確定細(xì)菌的某一個遺傳表型是由染色體控制還是由質(zhì)??刂频?0. 簡述 DNA重組的幾種不同方式及分子機(jī)理91. 比較說明原核生物與真核生物在基因表達(dá)水平上的異同95至少列舉三例 (除 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)外)說明核酸分子結(jié)構(gòu)的研究成果對分子生物學(xué)理論發(fā)展的重要貢獻(xiàn)93說明生物體保證自身穩(wěn)定遺傳的機(jī)制94說明蛋白質(zhì)與 DNA之間序列非線性相關(guān)的因素95在核苷酸測序的操作中,利用哪幾個途徑分別獲得一個片段兩條單鏈的序列?各自的理論依據(jù)是什么?試言簡意賅地加以論述96到目前為止,在高等生物中根據(jù)性狀表現(xiàn)分離未知產(chǎn)物基因采用哪些途徑?請說明各種途徑的基本原理并各舉一例97請以基因組研究的新進(jìn)展為例,討論分子生物學(xué)發(fā)展與生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)化的關(guān)系98試述作物遺傳資源的重要性,何謂作物遺傳資源的創(chuàng)新99利用分子標(biāo)記進(jìn)行基因定位的遺傳群體有幾種?各有什么優(yōu)、缺點(diǎn)100就你所熟悉的某一作物,簡述作物雜種優(yōu)勢研究與利用的現(xiàn)狀101你對“基因工程育種”有何評價(jià)102何謂斷裂基因( split gene)?何謂重疊基因( overlapping gene)?它們在生物進(jìn)化與適應(yīng)上有何意義103何謂分子標(biāo)記,分子標(biāo)記的種類有哪些?可以開展哪些領(lǐng)域的研究104自花授粉作物與異花授粉作物的育種方法有何異同?數(shù)量性狀如何進(jìn)行改良105在提取由 ColEI所衍生的質(zhì)粒(如pBR322)時,常在培養(yǎng)攜帶質(zhì)粒的大腸桿菌搖瓶中加入一定濃度的氯霉素或壯觀霉素以擴(kuò)增質(zhì)粒DNA質(zhì)粒DNA擴(kuò)增的理論依據(jù)是什么?這種質(zhì)粒DNA擴(kuò)增的方法為何并不具有普遍性106RNA聚合II的啟動子和細(xì)菌啟動子與轉(zhuǎn)錄因子作用的典型差異107轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座特點(diǎn)108插入序列的結(jié)構(gòu)特征 109復(fù)合轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)特征110復(fù)合轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座特點(diǎn)111轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座方式112轉(zhuǎn)座引起的遺傳學(xué)效應(yīng)113分離核酸原則114分離提取核酸的主要步驟115PCR技術(shù)原理116引物設(shè)計(jì)的原則117PCR擴(kuò)增時無擴(kuò)增產(chǎn)物的現(xiàn)象及原因118PCR擴(kuò)增時非特異性擴(kuò)增的現(xiàn)象及原因119PCR擴(kuò)增時拖尾的現(xiàn)象及原因120核酸凝膠電泳的基本原理121DNA瓊脂糖凝膠電泳時的遷移速率決定因素122凝膠載樣緩沖液的作用123核酸分子雜交技術(shù)的原理124合成寡核苷酸探針注意原則125理想的標(biāo)記物應(yīng)具備的條件126探針標(biāo)記的常用方法127細(xì)菌質(zhì)粒的一般生物學(xué)特性128克隆載體必備條件129什么是細(xì)菌的限制修飾系統(tǒng)(restriction-modificaton system, R-M system)130細(xì)菌的限制修飾系統(tǒng)有什么意義 131說明限制性內(nèi)切核酸酶的命名原則要點(diǎn)132類限制酶具有哪些特點(diǎn)?在基因工程中有什么作用133類限制酶有哪些特點(diǎn)134何謂限制性內(nèi)切核酸酶的切割頻率135什么是限制性內(nèi)切核酸酶的星號活性?受哪些因素影響136雙酶消化法(double digests)繪制限制性內(nèi)切核酸酶酶譜的原理137什么是 DNA多態(tài)性(DNA polymorphism)138為什么大多數(shù)內(nèi)切酶被稱為“限制”酶139據(jù)Science雜志報(bào)道:一種重要的遺傳疾病可由導(dǎo)致 DNA中堿基替換的誘變劑在體外進(jìn)行人工誘導(dǎo)設(shè)計(jì)一種快速用以鑒定疾病基因型的檢測方法140簡述 DNA和RNA連接酶的催化反應(yīng)機(jī)制141. 影響 DNA連接酶催化連接反應(yīng)的因素有哪些142什么是Klenow酶?有哪些活性?在基因工程中有什么作用143. 如何利用 T4 DNA聚合酶制備3隱含末端或雙鏈平末端144. 如何利用 T4 DNA聚合酶進(jìn)行雙鏈 DNA的3末端標(biāo)記145如何利用 T4 DNA聚合酶制備平末端146什么是質(zhì)粒的相容性?什么是不相容群?機(jī)制是什么147什么是質(zhì)粒的帶動轉(zhuǎn)移148說明變性定位法和限制性內(nèi)切核酸酶定位法研究質(zhì)粒復(fù)制起點(diǎn)的原理149Co1El衍生質(zhì)??截悢?shù)調(diào)節(jié)機(jī)理的機(jī)理是什么150R1質(zhì)??截悢?shù)受到怎樣的調(diào)節(jié)控制151質(zhì)粒如何維持在細(xì)胞中的穩(wěn)定152. 引起質(zhì)粒不相容性的主要原因是什么153由于基因工程是人為改變遺傳信息的操作,因此必須注意被操作基因的安全,進(jìn)行 嚴(yán)格的監(jiān)控,質(zhì)粒載體的安全性是十分重要的請問質(zhì)粒載體的安全條件包括哪幾個方面154 請指出質(zhì)粒 pSC101的一些生物學(xué)特性(包括結(jié)構(gòu)和遺傳)及在基因工程中的作用155. 自然界中具備理想條件的質(zhì)粒載體為數(shù)不多,即使是 Co1E1和 pSC101這兩個自然質(zhì)粒也不盡人意,通常需要進(jìn)行改造,請問質(zhì)粒改造包括哪些基本內(nèi)容156. 質(zhì)粒改造的發(fā)展過程如何157. 在質(zhì)粒中如何增減酶切點(diǎn)158有人用限制性內(nèi)切核酸酶EcoR I分別切割松弛型質(zhì)粒 Co1E1和嚴(yán)緊型質(zhì)粒 pSC101(各有一個切點(diǎn)),然后重組連接形成一個雜種質(zhì)粒 pSC134,請推測這種質(zhì)粒有什么特性和用途159什么是 M13的IG序列區(qū)?有何特點(diǎn)和功能160將野生型的 M13改造成基因工程載體,首先是進(jìn)行酶切位點(diǎn)的改造,請問 M13中的EcoR 最初是如何引入的161表達(dá)載體的必備條件162pBR322質(zhì)粒載體的優(yōu)點(diǎn)163pUC18的四個序列元件164M13噬菌體作為載體的優(yōu)點(diǎn)165柯斯質(zhì)粒作為載體的特點(diǎn)166、簡述烈性噬菌體的生活周期167噬菌粒載體的優(yōu)點(diǎn)168基因克隆的一般程序169 M13系列載體具有哪些優(yōu)缺點(diǎn)170粘粒載體具有哪些特點(diǎn)與不足171輔助噬菌體 DNA和相應(yīng)的噬菌粒是如何協(xié)同工作的172. 克隆的 DNA在質(zhì)量上有什么要求173為什么從細(xì)胞中分離 DNA時往往會斷裂174為什么苯酚要重蒸飽和后才能用于 DNA的分離175為什么氧化變色的酚不能直接用于DNA的分離,應(yīng)如何處置176. 在DNA分離過程中,酚通常與氯仿聯(lián)合使用,即使不聯(lián)合使用也要在苯酚抽提后用氯仿再抽提一次,為什么177. 說明溴化乙錠氯化鉤密度梯度離心(ethidium bromide-caesium chloride gradient centrifugation)純化DNA的原理178. 采用什么措施保證 DNA化學(xué)合成的定時性和專一性179何謂簡并引物(degenerate primer)180簡并引物設(shè)計(jì)的一般原則是什么181雙脫氧法(dideoxynucleotide method)測序的基本原理是什么182在古生物學(xué)中,尚不知道恐龍是否是溫血爬行動物,而不像今天的變溫爬行動物,假如你得到一些恐龍的 DNA,你如何通過 PCR和基因克隆來檢測恐龍是否是溫血爬行動物183如果知道某一基因的功能及其相應(yīng)的蛋白質(zhì)的氨基酸序列組成,可以通過何種方法克隆該基因184何謂定位克隆185何謂染色體步移186在染色體步移中,用哪些方法獲得克隆的末端?187何謂表型克隆188什么是基因文庫189什么是基因組文庫190cDNA文庫同基因組文庫有何差別191粘性末端連接法是最常用的連接方法,具有許多優(yōu)點(diǎn)

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