常用培養(yǎng)基配制.docx

常用培養(yǎng)基LB培養(yǎng)基/升終1 X濃度胰蛋白胨10g1.0% (w/v)酵母抽提物5g0.5% (w/v)NaCl10g1.0% (w/v)H2O至1升調(diào)節(jié)pH值至7.0低鹽LB培養(yǎng)基/升終1 X濃度 胰蛋白胨10g1.0% (w/v)酵母抽提物5g0.5% (w/v)NaCl10g0.5% (w/v)H2O至1升調(diào)節(jié)pH值至7.0Terrific Broth 培養(yǎng)基/升終1 X濃度胰蛋白胨12g1.2% (w/v)酵母抽提物24g2.4% (w/v)甘油4g0.4% (w/v)加H2O至900 ml滅菌，冷卻至60C后加入100 ml過濾滅菌的10X TB磷酸鹽 (0.17 M KH2PO4, 0.72 M K2HPO4)SOB 培養(yǎng)基/升終1 X濃度胰蛋白胨20g2.0% (w/v)酵母抽提物5g0.5% (w/v)NaCl0.5g0.05% (w/v)250mMKCl10ml2.5mMH2O至900 ml調(diào)節(jié)pH值至7.0，加H2O至990 ml滅菌、冷卻至室溫。使用前加入10 ml滅菌的1 M MgCl2 溶液10mMSOC 培養(yǎng)基SOB 培養(yǎng)基(1升)加入20 ml 過濾滅菌的1 M葡萄糖M9 基本培養(yǎng)基/升終1 X濃度5X M9 salts200ml滅菌H2O至1升1MMgSO41ml1mM20% 葡萄糖10ml0.2 (w/v)1M CaCl20.1ml0.1mM5X M9 Salts/升終1 X濃度Na2HPO4x7H2O64g47.8mMKH2PO415g22mMNaCl2.5g8.6mMNH45g18.7mM添加劑/升終1 X濃度抗生素(如果需要)氨芐青霉素50g/ml氯霉素20g/ml卡那霉素30g/ml四環(huán)素12g/ml半乳糖苷(如果需要)X-Gal20g/mlIPTG0.1mM培養(yǎng)基含有瓊脂或瓊脂糖 瓊脂(平板)15g1.5%(w/v)瓊脂(軟性瓊脂)7g0.7%(w/v)瓊脂糖(平板)15g1.5%(w/v)瓊脂糖(軟性瓊脂糖)7g0.7%(w/v)參考文獻(xiàn) 1. Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks, L.C., CRC Press, N.Y., 1997. 2. Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001. 常用儲(chǔ)存液10 M 醋酸銨醋酸銨385.4gH2O至500ml1 M CaCl2CaCl2x6H2O219.1gH2O至1升100X Denhardt 溶液終濃度Ficoll 40010g0.02%(w/v)聚乙烯吡咯烷酮10g0.02%(w/v)牛血清白蛋白10g0.02%(w/v)H2O至500 ml過濾滅菌后分裝(25 ml)，-20C 保存0.5 M EDTA (乙二胺四乙酸) (pH 8.0)Na2EDTAx2H2O186.1 gH2O至700 ml10 M NaOH (50 ml)調(diào)節(jié)pH值至8.0H2O至1升10mg/ml 溴化乙錠溴化乙錠0.2gH2O至 20 ml充分混勻后4C黑暗保存警告: 溴化乙錠是一種突變劑。使用溴化乙錠溶液時(shí)需帶手套；稱量其粉末時(shí)需帶面具。1 M KClKCl74.6gH2O至1升1 M MgCl2MgCl2x6H2O20.3gH2O至100 ml1 M MgSO4MgSO4x7H2O24.6gH2O至100 ml5 M NaClNaCl292.2gH2O至1升10 M NaOHNaOH400.0gH2O至1升1 M Tris-HCl 三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽Tri base121.1gH2O至800 ml用于濃縮的HCl調(diào)節(jié)至所需的pH值混合后加H2O至1升3 M 醋酸鈉 (pH 5.2 或 7.0) (2)醋酸鈉 x 3H2O401.1gH2O至800 ml用醋酸調(diào)節(jié)pH值至7.0或用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值5.2H2O至1升參考文獻(xiàn) 1. Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks, L.C., CRC Press, N.Y., 1997. 2. Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001. 常用緩沖液10X 磷酸鹽緩沖液(儲(chǔ)存液) (PBS)/升終1 X濃度NaCl80.0g137mMKCl2.0g2.7mMNa2HPO414.4g100mMKH2PO42.7g2mMH2O至800 mlHCl至pH 7.4H2O至1升20X SSC/升終1 X濃度NaCl175.3g150mMNa3citrate x H2O88.2g15mMH2O至800 ml1M HCl調(diào)節(jié)pH值至7.0H2O至1升20X SSPE/升終1 X濃度NaCl175.3g150mMNaH2PO4xH2O27.6g10mMNa2EDTA7.4g10mMH2O至800 ml10 M NaOH調(diào)節(jié)pH值至7.4H2O至1升5X Tris-甘氨酸, Native電泳緩沖液/升終1 X濃度Tri 堿15.1g25mM甘氨酸72.0g192mMH2O至1升稀釋溶液的pH至8.35X Tris-甘氨酸-SDS電泳緩沖液/升終1 X濃度Tri 堿15.1g25mM甘氨酸72.0g192mMSDS5.0g0.1%(w/v)H2O至1升稀釋溶液的pH至8.35X Tris-三(羥甲基)甲基甘氨酸-SDS電泳緩沖液/升終1 X濃度Tri 堿121.1g0.1MTricine179.2g0.1MSDS10.0g0.1%(w/v)H2O至1升稀釋溶液的pH至8.350X TAE (Tris-醋酸-EDTA)電泳緩沖液/升終1 X濃度Tri 堿242.0g40mM冰醋酸57.1ml20mM0.5M EDTA (pH 8.0)100ml2%mMH2O至1升稀釋溶液的pH大約為8.510X TBE (Tris-硼酸-EDTA)電泳緩沖液/升終1 X濃度Tri 堿108.0g90mM硼酸55.0 g90mM0.5M EDTA (pH 8.0)40ml2%mMH2O至1升10X TPE (Tris-磷酸-EDTA)電泳緩沖液/升終1 X濃度Tri 堿108.0g90mM磷酸(85%)15.5ml23mM0.5M EDTA (pH 8.0)40ml2%mMH2O至1升TE (Tris-EDTA) 緩沖液pH 7.4, 7.6或8.0/升終1 X濃度1 M Tri, pH 7.4, 7.6, 8.010.0ml10mM0.5 M EDTA (pH 8.0)2.0ml1mMH2O至1升參考文獻(xiàn) 1. Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks, L.C., CRC Press, N.Y., 1997. 2. Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001. 常用縮寫A腺嘌呤或腺苷；丙氨酸單字母代碼A260260 nm吸光值A(chǔ)CESN-(2-乙酰氨基)-2-氨基乙磺酸Ad-2腺病毒-2ADAN-(2-乙酰氨基)-2-亞氨基二乙酸ADP腺苷5-二磷酸AMP腺苷單磷酸AMV 禽成髓細(xì)胞瘤病毒AP堿性磷酸酶APS 過硫酸銨aRNA 反義RNAATP腺苷5-三磷酸BCIP5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸BESN,N-雙(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸BGG 牛血清球蛋白BICINEN,N-雙(2-羥乙基)甘氨酸Bio-dNTP生物素-脫氧核苷三磷酸BMEbeta-巰基乙醇；2-巰基乙醇bp堿基對(duì)Bq貝可BSA牛血清白蛋白B/W藍(lán)/白克隆C胞嘧啶或胞苷；半胱氨酸單字母代碼CA酪蛋白氨基酸CAPS N-環(huán)已胺-3-丙磺酸cDNA互補(bǔ)脫氧核糖核酸CEU 粘性末端連接單位Ci居里CIAP小牛腸堿性磷酸酶CMP c胞苷單磷酸cpm次/分鐘CTP胞苷5-三磷酸Da道爾頓dAMP脫氧腺苷單磷酸dATP脫氧腺苷三磷酸dCTP脫氧胞苷三磷酸ddATP雙脫氧腺苷三磷酸ddCTP雙脫氧胞苷三磷酸ddGTP雙脫氧鳥苷三磷酸ddNTP雙脫氧核苷三磷酸ddTTP 雙脫氧胸苷三磷酸DE-81Whatman二乙基胺基乙基纖維素紙DEPC焦碳酸二乙酯DIG地高辛dITP 脫氧肌苷三磷酸dGTP脫氧鳥苷三磷酸DMSO二甲亞砜DNA脫氧核糖核酸DNase脫氧核糖核酸酶dNMP 脫氧核糖核苷單磷酸dNTP脫氧核糖核苷三磷酸dpm分解量/分鐘ds雙鏈DTT二硫蘇糖醇dTTP脫氧胸苷三磷酸dUTP脫氧尿苷三磷酸EDTA乙二胺四乙酸EGTA 乙二醇-雙-(2-氨基乙基)四乙酸ELISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)EMBL歐洲分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室EMSA 凝膠電泳遷移分析 ENDO內(nèi)切脫氧核糖核酸酶分析endo 內(nèi)切核酸酶exo外切核酸酶EXO5和3- 外切脫氧核糖核酸酶分析FOA (5-FOA)5-氟乳清酸G鳥嘌呤或鳥苷；甘氨酸的單字母代碼GalD-半乳糖GMP 鳥苷單磷酸GMPD 糖基酶介導(dǎo)的多態(tài)性檢測(cè)GUSbeta-D-葡萄糖醛酸酶GTP 鳥苷5-三磷酸GQ遺傳質(zhì)量合格HC高濃度HEPESN-(2-羥乙基)哌嗪-N-2-乙磺酸HRP辣根過氧化物酶HPLC高效液相色譜IEF等電聚焦IPTG異丙基-beta-D-硫代半乳糖苷kb千堿基kDa千道爾頓LAMP 環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增LBLuria Bertani培養(yǎng)基LC低濃度LE 低電滲LM 低熔點(diǎn)LO標(biāo)記的核苷酸MCS多克隆位點(diǎn)MES2-碼啉乙磺酸MDA 多重置換擴(kuò)增M-MuLV小鼠肉瘤病毒MOPS3-嗎啉丙磺酸mRNA信使核糖核酸MW分子量NAD煙酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，還原型NADP煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸NADPH煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸，還原型NBT硝基藍(lán)四氮唑NDP 核苷二磷酸NMP 核糖核苷單磷酸NR不推薦NP-40Nonidet P-40(去污劑)nt核苷酸NTC 無模板對(duì)照NTP核苷三磷酸oligo(A)寡聚腺苷酸oligo(dT)寡聚脫氧胸苷酸OMP乳清苷(一磷)酸Pi無機(jī)磷酸PAAG 聚丙烯酰胺凝膠PAGE聚丙烯酰胺凝膠電泳PBS磷酸鹽緩沖液PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PEI聚乙烯亞胺PEG聚乙二醇PIPES哌嗪-1,4-二乙磺酸PNK多聚核苷激酶pNPP對(duì)硝基苯磷酸poly(A)多聚腺苷酸poly(A)+多聚腺苷酸(mRNA)poly(dA-dT)多聚(脫氧腺苷酸 脫氧胸苷酸)poly(dT)多聚脫氧胸苷酸PPi 無機(jī)焦磷酸鹽PVDF 聚偏二氟乙烯QCA質(zhì)量控制分析qPCR 定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)RACE 快速擴(kuò)增cDNA末端RCA 滾環(huán)復(fù)制RDA 隨機(jī)置換擴(kuò)增RE限制酶RNA核糖核酸RNase核糖核酸酶R-M限制-修飾rRNA核糖體核糖核酸RT逆轉(zhuǎn)錄RT-PCR 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)SAMS-腺苷蛋氨酸SAP 蝦堿性磷酸酶SDA 鏈置換擴(kuò)增 SDS十二烷基磺酸鈉siRNA 小分子干擾核糖核酸SNP 單核苷酸多態(tài)性 ss單鏈SSC氯化鈉/檸檬酸鈉(緩沖液)SSCP 單鏈構(gòu)象多態(tài)性SSPE氯化鈉/磷酸鈉/EDTA(緩沖液)STR 短串聯(lián)重復(fù)T胸腺嘧啶或胸苷；蘇氨酸單字母代碼TAETris/醋酸/EDTA(緩沖液)TBETris/硼酸/EDTA(緩沖液)TdT末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶TETris/EDTA(緩沖液)TEMEDN,N,N,N-四甲基二乙